1、會計學1病毒的純化和檢測改病毒的純化和檢測改第一頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。第1頁/共24頁第二頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。物理均一性； 病毒滴度與蛋白含量的比例； 免疫反應單一而無非特異反應；結晶形成 第2頁/共24頁第三頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。病毒提純的主要原則：第3頁/共24頁第四頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。中性鹽沉淀法 聚乙二醇沉淀法 有機溶劑沉淀法 等電點沉淀法 離 心 法 差速離心法 密度梯度離心法 速率區帶離心法 等密度區帶法凝膠色譜法 電泳法第4頁/共24頁第五頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。因為病毒粒子對細菌細胞感染率不會超過100，所

2、以根據噬菌斑或空斑計算出的病毒粒子數總比噬菌體電鏡下觀察數低。第二節 病毒的檢測第5頁/共24頁第六頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。第6頁/共24頁第七頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。 2.雞胚培養 雞胚對多種病毒敏感。一般采用孵化914天的雞胚，根據病毒種類不同，將病毒標本接種于雞胚的不同部位，最常用的雞胚接種部位有：羊膜腔、尿囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。3.組織培養法 (tissueculture) 或細胞培養 (cellculture)法 是將離體活組織塊或分散的組織細胞加以培養的技術總稱，為病毒分離鑒定中的最常用的基本方法。第7頁/共24頁第八頁，編輯于星期日：十八點 二十三分

3、。第8頁/共24頁第九頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。1. 細胞的變化有些病毒在細胞內增殖時可引起特有的細胞病變，稱為細胞病變效應 (CPE)。常見的變化有細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等。有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等 作用于細胞膜，可使鄰近的細胞相互融合，形成多核巨細胞或稱融合細胞。 有些病毒 (如狂犬病病毒、麻疹病毒等) 可在培養細胞中形成胞漿或核內的包涵體。 病毒在培養細胞中增殖的指標2.紅細胞吸附 (hemadsorption,HAd)流感或副流感病毒等感染細胞后，由于細胞膜上出現了血凝素(haemagglutinin,HA)，具有吸附脊椎動物 (豚鼠、雞、猴等) 紅細胞

4、的能力，這一現象稱紅細胞吸附，常用來測定具有HA的粘病毒與副粘病毒的增殖。若有相應的抗血清，則能中和細胞膜上的HA，HAd不再發生，稱紅細胞吸附抑制試驗。第9頁/共24頁第十頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。3.干擾現象(interference) 某些病毒感染細胞時不出現CPE或其他易于測出的變化(如HAd)，但能干擾在其后感染的另一病毒的增殖。如風疹病毒感染Vero細胞時CPE不明顯，但它能干擾后感染的埃可病毒 (ECHOV) 的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE。 4.細胞代謝的改變 病毒感染細胞的結果可使培養液的pH值改變，說明細胞的代謝在病毒感染后發生了變化。這種培養環境的生化改變也

5、可作為判斷病毒增殖的指標。第10頁/共24頁第十一頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。第11頁/共24頁第十二頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。織細胞感染量織細胞感染量。第12頁/共24頁第十三頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。第13頁/共24頁第十四頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。1.免疫沉淀法使Ag-Ab形成不溶性的沉淀。第14頁/共24頁第十五頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。第15頁/共24頁第十六頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。補體結合試驗圖示受檢系統指示系統溶血反應補體結合試驗1、僅有抗原或抗體補體紅細胞溶血素陽性陰性2、抗原抗體反應紅細胞溶血素陰性陽性抗原抗體補體抗原/抗體第16頁/共24頁第十七頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。4.凝膠擴散法 Ag和Ab相遇形成沉降帶。第17頁/共24頁第十八頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。第18頁/共24頁第十九頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。競爭法第19頁/共24頁第二十頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。雙抗體夾心法第20頁/共24頁第二十一頁，編輯于星期日：十八點 二十三分。間接法第21頁/共24頁第