1、 微生物標本的采集微生物標本的采集 醫院重點部門的醫護人員手、空氣、物表的醫院重點部門的醫護人員手、空氣、物表的微生物學監測應在清潔或消毒以后，醫療操作前微生物學監測應在清潔或消毒以后，醫療操作前進行。如遇有醫院感染流行或疑似環境污染時，進行。如遇有醫院感染流行或疑似環境污染時，則需要立即進行監測，通過環境微生物檢測，可則需要立即進行監測，通過環境微生物檢測，可以及時發現傳染源及傳播途徑。測定物品污染程以及時發現傳染源及傳播途徑。測定物品污染程度或考核消毒措施的效果，都以樣品所含微生物度或考核消毒措施的效果，都以樣品所含微生物的數量來計算。因此樣品采集要有代表性。送檢的數量來計算。因此樣品采集

2、要有代表性。送檢時間一般不超過時間一般不超過2小時。小時。環境類別環境類別范圍范圍標準標準空氣空氣（cfu/ m3）物體表面物體表面（cfu/ cm2）醫務人員手醫務人員手（cfu/ cm2）I類類 層流潔凈手術室、層流潔凈層流潔凈手術室、層流潔凈病房病房1055II類類 普通手術室、產房、新生兒室普通手術室、產房、新生兒室（母嬰同室病房）、早產兒室、（母嬰同室病房）、早產兒室、普通保護性隔離室、供應室無普通保護性隔離室、供應室無菌區、燒傷病房、重癥監護病菌區、燒傷病房、重癥監護病房房20055III類類 兒科病房、婦產科檢查室、注兒科病房、婦產科檢查室、注射室、換藥室、治療室、射室、換藥室、

3、治療室、供應供應室清潔區室清潔區、急診室、化驗室、急診室、化驗室、各類普通病房和房間各類普通病房和房間500105IV類類 傳染病房傳染病房1515 無菌吸管（無菌吸管（0.5ml、5ml、 10ml）、）、 L棒、棉拭棒、棉拭子子 、規格板、規格板 、普通瓊脂平板、普通瓊脂平板、 10ml生理鹽水等生理鹽水等 1、手衛生監測：、手衛生監測： 采樣時間：一般情況下每季度監測一次。當采樣時間：一般情況下每季度監測一次。當發生醫院感染流行、高度懷疑或確定與醫務人員發生醫院感染流行、高度懷疑或確定與醫務人員手的污染有關時，應及時進行監測。常規監測在手的污染有關時，應及時進行監測。常規監測在洗手后從事

4、治療操作前，特殊監測隨時采樣。洗手后從事治療操作前，特殊監測隨時采樣。 采樣方法：棉拭子涂布法和直接壓印法，采樣方法：棉拭子涂布法和直接壓印法，棉拭子涂布法棉拭子涂布法 被檢人五指并攏，用浸濕滅菌生理鹽水的棉被檢人五指并攏，用浸濕滅菌生理鹽水的棉拭子在醫護人員手指曲面從指根到指端往返涂擦拭子在醫護人員手指曲面從指根到指端往返涂擦2次，并隨之轉動采樣棉拭子，采完后剪去操作次，并隨之轉動采樣棉拭子，采完后剪去操作者手接觸部分，將棉拭子投入者手接觸部分，將棉拭子投入10ml滅菌生理鹽滅菌生理鹽水試管內立即送檢。水試管內立即送檢。棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法棉拭子涂布法

5、棉拭子涂布法棉拭子涂布法 檢驗方法：檢驗方法：1 1、將每個采樣管敲打、將每個采樣管敲打80次或次或1分鐘，分鐘，2 2、用滅菌吸管取、用滅菌吸管取0.2mlml于營養瓊脂平板中，再用無菌于營養瓊脂平板中，再用無菌L L棒涂棒涂布整個平板表面，置布整個平板表面，置36 1溫箱培養溫箱培養24小時觀察結果計小時觀察結果計算菌落數算菌落數 計算方法：計算方法：菌落數菌落數/C= 平均菌落數平均菌落數稀釋倍數稀釋倍數 采樣面積采樣面積0.2手消毒效果要求：手消毒效果要求：u衛生手消毒，監測的細菌菌落總數應衛生手消毒，監測的細菌菌落總數應10cfu/cu外科手消毒，監測的細菌菌落總數應外科手消毒，監測

6、的細菌菌落總數應5cfu/c 直接壓印法：采樣時被檢人直接壓印法：采樣時被檢人5指并攏，將平皿上培養指并攏，將平皿上培養基表面直接壓貼在手掌根部至指尖曲面基表面直接壓貼在手掌根部至指尖曲面1020秒后送檢。秒后送檢。 將所采樣本直接置將所采樣本直接置36 1溫箱培養溫箱培養24小時，根據小時，根據平皿面積計算細菌總數。平皿面積計算細菌總數。 可根據自身條件選用沉降法（空氣暴露法）或空氣采可根據自身條件選用沉降法（空氣暴露法）或空氣采樣器法。樣器法。 采樣時間：采樣時選在消毒處理后，操作前進行采樣，采樣時間：采樣時選在消毒處理后，操作前進行采樣，采樣前應關好門窗，在無人走動的情況下，靜止采樣前應

7、關好門窗，在無人走動的情況下，靜止10分鐘進分鐘進行采樣。行采樣。沉降法沉降法：A：布點方法：布點方法：室內面積室內面積30m2設四角及中央設四角及中央5點，點，4角的布點位置距墻壁角的布點位置距墻壁1m處，離地面垂直高度為處，離地面垂直高度為80-150cm。室內面積室內面積30m2設內、中、外對角線設內、中、外對角線3點，內、外點的布點位點，內、外點的布點位置距墻壁置距墻壁1m處，離地面垂直高度為處，離地面垂直高度為80-150cm。B：采樣方法：將普通營養瓊脂平板或血平板（直徑：采樣方法：將普通營養瓊脂平板或血平板（直徑9cm）放）放在室內各采樣點處，采樣高度距地面在室內各采樣點處，采樣

8、高度距地面1.5m，內外及四角距墻，內外及四角距墻1m，采樣時，將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露，采樣時，將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5分鐘，蓋分鐘，蓋好并將平皿置于好并將平皿置于37 溫箱培養，溫箱培養，24小時觀察結果，并計算小時觀察結果，并計算5個個平板的平均菌落數。潔凈手術室則暴露平板的平均菌落數。潔凈手術室則暴露30分鐘。分鐘。計算公式：菌落數計算公式：菌落數/m3 50000N ATA平板面積（平板面積（C）T平板暴露于空氣的時間（平板暴露于空氣的時間（min）N平均菌落數平均菌落數3 3、物體表面的采樣、物體表面的采樣（1 1）棉拭子采樣法）棉拭子采樣法 對于平面物體，用對于

9、平面物體，用5cm5cm5cm5cm大小的標準滅菌規格版，放大小的標準滅菌規格版，放在被檢物體表面，用用浸濕滅菌生理鹽水的棉拭子在規格版在被檢物體表面，用用浸濕滅菌生理鹽水的棉拭子在規格版內橫豎往返均勻涂抹各內橫豎往返均勻涂抹各5 5次，并隨之轉動棉拭子，連續采樣次，并隨之轉動棉拭子，連續采樣1 14 4個規格板面積。用無菌剪刀剪去手接觸部分，將棉拭子裝個規格板面積。用無菌剪刀剪去手接觸部分，將棉拭子裝入放有入放有10ml10ml滅菌生理鹽水試管中。滅菌生理鹽水試管中。 對于門把手，金屬，玻璃等曲面小型物體則采用棉拭子對于門把手，金屬，玻璃等曲面小型物體則采用棉拭子直接在物體表面按一定順序涂抹

10、采樣，敷料，衛生紙等一次直接在物體表面按一定順序涂抹采樣，敷料，衛生紙等一次性物品采樣時，用無菌法取樣品性物品采樣時，用無菌法取樣品5g5g，放入裝有，放入裝有10ml10ml滅菌生理滅菌生理鹽水試管中。鹽水試管中。4 4、透析液微生物監測、透析液微生物監測5 5、使用中消毒劑監測、使用中消毒劑監測常用消毒劑中和劑及其濃度表 消毒劑消毒劑中和劑及其濃度中和劑及其濃度甲醛甲醛亞硫酸鈉（亞硫酸鈉（0.1%0.5%）氨水氨水雙甲酮（雙甲酮（0.1%1.0%）+嗎啉（嗎啉（0.6%1.0%）戊二醛戊二醛甘氨酸（甘氨酸（1.0%）；賴氨酸）；賴氨酸亞硫酸鈉（亞硫酸鈉（0.1%0.5%）雙甲酮（雙甲酮（0

11、.1%1.0%）+嗎啉（嗎啉（0.6%1.0%）過氧乙酸過氧乙酸硫代硫酸鈉（硫代硫酸鈉（0.1%0.5%）含氯消毒劑類含氯消毒劑類硫代硫酸鈉（硫代硫酸鈉（0.1%1.0%）季銨鹽類季銨鹽類吐溫吐溫80（0.5%3.0%）卵磷脂（卵磷脂（0.3%）硫代硫酸鈉（硫代硫酸鈉（0.1%0.5%）亞硫酸鈉（亞硫酸鈉（0.1%0.5%）碘（溴）制劑碘（溴）制劑亞硫酸鈉（亞硫酸鈉（0.1%0.5%）；卵磷脂（）；卵磷脂（0.1%0.3%）硫代硫酸鈉（硫代硫酸鈉（0.1%）；半胱氨脂（）；半胱氨脂（0.1%）酚類酚類吐溫吐溫80（1%10%）；卵磷脂（）；卵磷脂（0.1%0.3%）氯已定氯已定卵磷脂（卵磷脂（

12、1.0%2.0%）汞制劑汞制劑硫代硫酸鈉；亞硫酸鈉；半胱氨脂（硫代硫酸鈉；亞硫酸鈉；半胱氨脂（0.1%）醇類醇類吐溫吐溫80酸類酸類堿類堿類堿類堿類酸類酸類結果判斷結果判斷6 6、壓力蒸汽滅菌效果監測、壓力蒸汽滅菌效果監測效果判定陽性對照陽性對照陰性對照陰性對照試驗管試驗管結果結果黃黃紫紫紫紫滅菌認可滅菌認可黃黃紫紫黃黃滅菌失敗滅菌失敗7 7、內鏡消毒滅菌效果監測、內鏡消毒滅菌效果監測u采樣時間：消毒、滅菌后，使用前。采樣時間：消毒、滅菌后，使用前。u采樣方法：監測采樣部位為內鏡的內腔面。用無菌注采樣方法：監測采樣部位為內鏡的內腔面。用無菌注射器抽取射器抽取10ml10ml含相應中和劑的緩沖液

13、，從待檢內鏡活檢含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用無菌試管從活檢出口收集，及時送檢。口注入，用無菌試管從活檢出口收集，及時送檢。u檢測方法：將送檢液充分震蕩，取檢測方法：將送檢液充分震蕩，取0.5ml0.5ml，加入，加入2 2只直只直徑徑90mm90mm無菌平皿，每個平皿分別加入已經熔化的無菌平皿，每個平皿分別加入已經熔化的4545左右左右營養瓊脂營養瓊脂151518ml18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于3535培養培養4848小時后計數。小時后計數。u細菌菌落數細菌菌落數/ /件件2 2個平皿菌落數平均值個平皿菌落數平均值208 8、醫療用品的

14、監測、醫療用品的監測u包括一次性醫療用品和消毒滅菌處理后的醫療用品。包括一次性醫療用品和消毒滅菌處理后的醫療用品。u采樣時間：在消毒或滅菌處理后存放至有效期內采樣。采樣時間：在消毒或滅菌處理后存放至有效期內采樣。u采樣方法：操作人員在認真清潔消毒手后，在凈化臺內采樣方法：操作人員在認真清潔消毒手后，在凈化臺內用無菌的方法，將擬檢測的醫療用品：縫合針、針頭、手用無菌的方法，將擬檢測的醫療用品：縫合針、針頭、手術刀片等小件物品投入術刀片等小件物品投入5ml5ml滅菌的生理鹽水或營養肉湯內，滅菌的生理鹽水或營養肉湯內，對手術鉗、鑷子等大的醫療器械在無菌操作下用沾有無菌對手術鉗、鑷子等大的醫療器械在無

15、菌操作下用沾有無菌生理鹽水的棉拭子反復涂擦采樣，并將棉拭子投入生理鹽水的棉拭子反復涂擦采樣，并將棉拭子投入5ml5ml滅菌滅菌的生理鹽水溶液中。的生理鹽水溶液中。u檢測方法：將采樣管振打檢測方法：將采樣管振打8080次，用無菌吸管吸取次，用無菌吸管吸取1ml1ml待檢待檢樣品于滅菌平皿內，加入已融化的樣品于滅菌平皿內，加入已融化的4545左右的營養瓊脂左右的營養瓊脂151518ml18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置3737溫箱培養溫箱培養4848小時，觀察結果。若平皿上無菌生長為滅菌合格。小時，觀察結果。若平皿上無菌生長為滅菌合格。微生物讓人類步步為營，微生物

16、讓人類步步為營，我們應該追求：我們應該追求：“準確的病原學診斷準確的病原學診斷”“針對性病原學治療針對性病原學治療”正確的微生物標本采集和運送，正確的微生物標本采集和運送，是準確的病原學診斷的前提是準確的病原學診斷的前提基本原則基本原則1.1.及時采集微生物標本作病原學檢查及時采集微生物標本作病原學檢查2.2.在抗菌藥物使用前采集標本在抗菌藥物使用前采集標本3.3.采樣時嚴格執行無菌操作采樣時嚴格執行無菌操作4.4.采樣后立即送檢采樣后立即送檢5.5.棉拭子標本宜用運送培養基棉拭子標本宜用運送培養基7.7.標本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑標本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑. .8.8.送

17、檢標本應注明來源和檢驗目的送檢標本應注明來源和檢驗目的正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v 血液標本血液標本v 血液標本的細菌培養是診斷菌血癥或敗血癥的基本方法。血液標本的細菌培養是診斷菌血癥或敗血癥的基本方法。正常人的血液是無菌的，如從患者血液中檢出細菌，一般正常人的血液是無菌的，如從患者血液中檢出細菌，一般應視為病原菌（排除采集標本或其他操作過程污染），提應視為病原菌（排除采集標本或其他操作過程污染），提示有菌血癥或敗血癥。示有菌血癥或敗血癥。 1 1、采血時間及次數一般應在抗生素治療前，發熱初期、采血時間及次數一般應在抗生素治療前，發熱初期或高峰時抽血。傷寒患者應在發熱

18、一星期內抽血。化膿性或高峰時抽血。傷寒患者應在發熱一星期內抽血。化膿性腦膜炎應在發熱腦膜炎應在發熱1 12 2天內抽血，亞急性心內膜炎的患者除天內抽血，亞急性心內膜炎的患者除在發熱期采血外，要多次抽血（在發熱期采血外，要多次抽血（2424小時內小時內3 3次）和增次）和增加抽血量（可增至加抽血量（可增至1010毫升）。毫升）。 2 2、抽血部位及抽血量以無菌方法從患者肘靜脈、股動、抽血部位及抽血量以無菌方法從患者肘靜脈、股動脈采血。采血量以培養基的脈采血。采血量以培養基的1/101/10為宜，成人一次采血為宜，成人一次采血5 51010，嬰兒為，嬰兒為1 12 2，血液抽出后，立即以無菌手續，

19、血液抽出后，立即以無菌手續注入血培養瓶，充分混合后送檢。注入血培養瓶，充分混合后送檢。v采血培養前質量保證采血培養前質量保證: :v靜脈穿刺程序靜脈穿刺程序 v1.70%1.70%酒精擦拭靜脈穿刺點酒精擦拭靜脈穿刺點 3030秒鐘秒鐘v2.1%2.1% 2%2%碘酊碘酊3030秒或秒或10%10%碘伏消毒碘伏消毒6060秒秒, ,從穿刺點從穿刺點向外畫圈消毒向外畫圈消毒, ,直徑直徑3cm3cmv3.70%3.70%酒精脫碘酒精脫碘v培養瓶接種程序培養瓶接種程序 v1.70%1.70%酒精消毒血培養瓶橡皮塞酒精消毒血培養瓶橡皮塞, ,待待6060秒秒v2. 2. 用無菌紗布清除橡皮塞子表面剩余

20、的酒精，然用無菌紗布清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。后注入血液。v1.1.皮膚消毒尤為重要，因為其主要的病原菌為皮皮膚消毒尤為重要，因為其主要的病原菌為皮膚定植菌如凝固酶陰性的葡萄球菌膚定植菌如凝固酶陰性的葡萄球菌 2.在穿刺前或穿刺期間，防止靜脈滑動，用戴乳在穿刺前或穿刺期間，防止靜脈滑動，用戴乳膠手套固定靜脈，不可接觸靜脈穿刺點膠手套固定靜脈，不可接觸靜脈穿刺點v3.3.用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭（如果行用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭（如果行第二次穿刺，應換針頭）直接注入血培養瓶。第二次穿刺，應換針頭）直接注入血培養瓶。 v血培養瓶在采血接種后必須馬上送檢血培養瓶在采血接

21、種后必須馬上送檢v血培養瓶在采血接種后在室溫中不得超過數小時血培養瓶在采血接種后在室溫中不得超過數小時v血培養瓶不得在采血接種后放入冰箱或冷凍血培養瓶不得在采血接種后放入冰箱或冷凍正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v 骨髓標本骨髓標本v 正常人的骨髓是無菌的，若從患者骨髓中檢出細菌（排除正常人的骨髓是無菌的，若從患者骨髓中檢出細菌（排除污染）提示細菌性骨髓炎或菌血癥、敗血癥。污染）提示細菌性骨髓炎或菌血癥、敗血癥。v 標本采集標本采集v 1 1、標本采集部位和時間一般用骨髓穿刺針從髂骨采集、標本采集部位和時間一般用骨髓穿刺針從髂骨采集骨髓標本，最好在用藥前，發熱初期或高熱期采

22、集，陽性骨髓標本，最好在用藥前，發熱初期或高熱期采集，陽性檢出率較高。檢出率較高。v 2 2、標本采集注意事項：嚴格無菌操作。標本采集后、標本采集注意事項：嚴格無菌操作。標本采集后立即注入血培養瓶，送檢。立即注入血培養瓶，送檢。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本 我國痰細菌培養現狀我國痰細菌培養現狀 標本送檢率低標本送檢率低v結果重復性差結果重復性差v報告速度慢報告速度慢v感染菌與污染菌不易區分感染菌與污染菌不易區分v藥敏結果與治療反應存在差距藥敏結果與治療反應存在差距咳痰標本咳痰標本正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v咳痰標本不合格，你退檢嗎？咳痰標本不合

23、格，你退檢嗎？v如果低倍視野下鱗狀上皮細胞大于如果低倍視野下鱗狀上皮細胞大于1010個，應不做個，應不做或僅在特殊要求時做培養。或僅在特殊要求時做培養。v如做培養，報告中注明如做培養，報告中注明“鏡檢結果表明標本口咽鏡檢結果表明標本口咽分泌物污染明顯分泌物污染明顯”。v復旦大學中山醫院的做法復旦大學中山醫院的做法 痰液外觀：膿性，粘膿，粘液，水樣痰液外觀：膿性，粘膿，粘液，水樣. 痰標本質量評價：合格，不理想（建議重送）痰標本質量評價：合格，不理想（建議重送） 臨床上約半數咳痰標本不合格！臨床上約半數咳痰標本不合格！正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v 痰標本痰標本v 痰標本

24、的細菌學檢查對于呼吸道感染的診斷有重要意義。痰標本的細菌學檢查對于呼吸道感染的診斷有重要意義。下呼吸道的痰液是無菌的，而經口腔咳出的痰帶有多種上下呼吸道的痰液是無菌的，而經口腔咳出的痰帶有多種上呼吸道的正常寄生菌（如草綠鏈）。若從患者痰標本中查呼吸道的正常寄生菌（如草綠鏈）。若從患者痰標本中查見致病菌或條件致病菌，提示有呼吸道細菌感染。見致病菌或條件致病菌，提示有呼吸道細菌感染。 標本采集標本采集v 1 1、痰標本的采集時間一般以晨痰為好。、痰標本的采集時間一般以晨痰為好。v 2 2、標本采集方法、標本采集方法v 自然咳痰法：在留取痰之前，用自然咳痰法：在留取痰之前，用溫開溫開水反復漱口，以減

25、水反復漱口，以減少常居菌的污染，應從氣管深部咳出痰，吐入痰杯內。少常居菌的污染，應從氣管深部咳出痰，吐入痰杯內。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v 導管痰：氣管導管痰：氣管插插管的病人用一次性吸痰管直接取標本，管的病人用一次性吸痰管直接取標本，用消毒后的手術剪剪取寸吸痰管用消毒后的手術剪剪取寸吸痰管1 12 2根于無菌試管內送根于無菌試管內送檢。檢。v 結核分枝桿菌標本收集法：留取即時痰、夜痰、晨痰各結核分枝桿菌標本收集法：留取即時痰、夜痰、晨痰各一次一天送檢以提高陽性檢出率。一次一天送檢以提高陽性檢出率。v 咽拭咽拭子子標本標本v 咽拭咽拭子子標本對于上呼吸道的細菌感染有

26、一定的診斷意義。標本對于上呼吸道的細菌感染有一定的診斷意義。正常咽拭有多種上呼吸道的正常菌群（如草綠鏈）。若從正常咽拭有多種上呼吸道的正常菌群（如草綠鏈）。若從患者咽拭標本中查見致病菌或條件致病菌提示上呼吸道有患者咽拭標本中查見致病菌或條件致病菌提示上呼吸道有細菌感染（如急、慢性扁桃體炎，咽炎，喉炎等）。細菌感染（如急、慢性扁桃體炎，咽炎，喉炎等）。v 標本采集標本采集v 用無菌棉拭子輕輕擦拭患者鼻咽部粘膜，留取標本，置無用無菌棉拭子輕輕擦拭患者鼻咽部粘膜，留取標本，置無菌試管內送檢。菌試管內送檢。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v 尿液標本尿液標本v 尿液的細菌學檢查（中

27、段尿培養加計數）對于泌尿道感染尿液的細菌學檢查（中段尿培養加計數）對于泌尿道感染的診斷有重要價值。正常尿液是無菌的，而外尿道有正常的診斷有重要價值。正常尿液是無菌的，而外尿道有正常菌群寄生，標本的采集必須無菌操作。另外，細菌培養必菌群寄生，標本的采集必須無菌操作。另外，細菌培養必須結合菌落計數辨別是否為病原菌。菌落計數須結合菌落計數辨別是否為病原菌。菌落計數10105 5/ /提示感染。提示感染。v 1 1、中段尿標本采集法、中段尿標本采集法v 留取前必須用留取前必須用1 1：10001000粉溶液沖洗外陰部及尿道口，粉溶液沖洗外陰部及尿道口，或盆中坐浴或盆中坐浴15152020分鐘，再用清潔

28、毛巾擦干，打開瓶塞，分鐘，再用清潔毛巾擦干，打開瓶塞，棄去前半部分尿液，收集中段尿棄去前半部分尿液，收集中段尿3 35 5盛于無菌試管內盛于無菌試管內，立即加塞蓋好，送檢。，立即加塞蓋好，送檢。v 2 2、導尿病人，至少需要更換一個導尿袋，清洗導尿管，、導尿病人，至少需要更換一個導尿袋，清洗導尿管，消毒留取尿液的最前端導尿管后，無菌操作留取尿液。消毒留取尿液的最前端導尿管后，無菌操作留取尿液。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本集尿袋內的尿液不能用作培養集尿袋內的尿液不能用作培養導尿管末端的尿液也不能用于培養，因為很難避免沒導尿管末端的尿液也不能用于培養，因為很難避免沒有尿道菌

29、群污染。有尿道菌群污染。除非是流行病學調查，長期留置導管病人常規尿除非是流行病學調查，長期留置導管病人常規尿培養沒有臨床意義，大量病原菌常可在這類病人培養沒有臨床意義，大量病原菌常可在這類病人中檢出。中檢出。不能把導尿管與尿袋拔開后收集尿液。不能把導尿管與尿袋拔開后收集尿液。標記標記 申請單上注明尿液采自留置導尿管申請單上注明尿液采自留置導尿管。運送運送 3030分鐘內不能送往實驗室，將標本冷藏。分鐘內不能送往實驗室，將標本冷藏。實驗室沒有接收人員時將標本置于實驗室冰箱里，實驗室沒有接收人員時將標本置于實驗室冰箱里，但也不能超過但也不能超過2424小時。小時。采樣端口用酒精消毒；必要時，可先夾

30、住導尿管但采樣端口用酒精消毒；必要時，可先夾住導尿管但不能超過不能超過3030分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液；注入無菌杯或試管中。吸出尿液；注入無菌杯或試管中。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v糞便標本糞便標本v 正常情況下腸道中有多種細菌寄生，包括大量的厭氧菌和正常情況下腸道中有多種細菌寄生，包括大量的厭氧菌和大腸埃希氏菌、腸桿菌、變形桿菌、糞產堿桿菌等，引起大腸埃希氏菌、腸桿菌、變形桿菌、糞產堿桿菌等，引起感染性腹瀉的病原微生物有細菌性。真菌性。病毒感染性腹瀉的病原微生物有細菌性。真菌性。病毒性。性。v 1 1、自然排便采集

31、自然排便后，挑取其膿血、粘液部分、自然排便采集自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2 23 3克；液體標本取絮狀物克；液體標本取絮狀物2 23 3，盛于滅菌容器內，盛于滅菌容器內，送檢。送檢。v 2 2、直腸拭子如不易獲得糞便時，或排泄困難患者及嬰、直腸拭子如不易獲得糞便時，或排泄困難患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水濕潤后，插入肛門內后，插入肛門內4 45 5厘米（幼兒厘米（幼兒2 2厘米）輕輕轉動取厘米）輕輕轉動取出，送檢。出，送檢。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v膿液及創傷感染分泌物標本膿液及創傷感染

32、分泌物標本 膿液的細菌學檢查對于確定感染的種類、提供藥敏結果、膿液的細菌學檢查對于確定感染的種類、提供藥敏結果、指導臨床治療有重要的意義。化膿性感染由單種或多種細指導臨床治療有重要的意義。化膿性感染由單種或多種細菌引起。菌引起。 標本采集標本采集v 、開放性膿腫和膿性分泌物先以無菌鹽水沖洗潰瘍表、開放性膿腫和膿性分泌物先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用支滅菌棉拭取潰瘍深處的分泌物后送檢。面，用支滅菌棉拭取潰瘍深處的分泌物后送檢。v 、大面積燒傷的創面分泌物用滅菌棉拭、大面積燒傷的創面分泌物用滅菌棉拭子子取多部位創取多部位創面的膿液或分泌物，置滅菌試管內送檢。面的膿液或分泌物，置滅菌試管內送檢。v 3

33、 3、封閉性膿腫消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器、封閉性膿腫消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內抽取，將膿液注入無菌試管內, ,然后切開膿腫、引流，取然后切開膿腫、引流，取部分膿腫壁送檢。部分膿腫壁送檢。 正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v腦脊液標本腦脊液標本v 腦脊液的細菌學檢查對于細菌性腦膜炎的診斷有重要的臨腦脊液的細菌學檢查對于細菌性腦膜炎的診斷有重要的臨床價值，檢出細菌提示細菌性（急性化膿性、結核性等）床價值，檢出細菌提示細菌性（急性化膿性、結核性等）腦膜炎。腦膜炎。v 標本采集標本采集v 由臨床醫師以無菌操作作腰椎穿刺，抽取腦脊液由臨床醫

34、師以無菌操作作腰椎穿刺，抽取腦脊液2 23 3，盛于無菌容器中送檢。腦膜炎奈瑟菌離體后能產生自溶，盛于無菌容器中送檢。腦膜炎奈瑟菌離體后能產生自溶素，迅速自溶，肺鏈及流感嗜血桿菌也易死亡。因此，腦素，迅速自溶，肺鏈及流感嗜血桿菌也易死亡。因此，腦脊液無論涂片或培養，必須于采集后立即送檢，不宜將其脊液無論涂片或培養，必須于采集后立即送檢，不宜將其置于冰箱保存，否則影響檢出率。置于冰箱保存，否則影響檢出率。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v穿刺液標本穿刺液標本v 各個部位穿刺液（胸水、腹水、心包液、關節液及鞘膜液各個部位穿刺液（胸水、腹水、心包液、關節液及鞘膜液等）的細菌學檢查

35、對于確定該部位是否有細菌感染具有診等）的細菌學檢查對于確定該部位是否有細菌感染具有診斷價值。正常穿刺液是無菌的，若從患者穿刺液中查見致斷價值。正常穿刺液是無菌的，若從患者穿刺液中查見致病菌或條件致病菌提示該部位有細菌感染。病菌或條件致病菌提示該部位有細菌感染。v 標本采集標本采集v 采用無菌方法用注射器抽取體內可疑部位的液體（胸水、采用無菌方法用注射器抽取體內可疑部位的液體（胸水、腹水、心包液、關節液及鞘膜積液等），注入無菌試管內腹水、心包液、關節液及鞘膜積液等），注入無菌試管內立即送檢。立即送檢。正確正確留取細菌培養的臨床標本留取細菌培養的臨床標本v泌尿、生殖道標本泌尿、生殖道標本v 生殖道

36、標本細菌學檢查對于診斷性病和其他生殖系統感染生殖道標本細菌學檢查對于診斷性病和其他生殖系統感染具有重要價值。正常的內生殖器是無菌的，而外生殖器有具有重要價值。正常的內生殖器是無菌的，而外生殖器有多種細菌寄生。支原體培養加藥敏和衣原體檢測對非淋菌多種細菌寄生。支原體培養加藥敏和衣原體檢測對非淋菌性尿道炎的診治有一定意義。性尿道炎的診治有一定意義。v 標本采集標本采集（尿道分泌物、陰道分泌物、男性前列腺）等（尿道分泌物、陰道分泌物、男性前列腺）等由專科醫生采取由專科醫生采取。注意事項：。注意事項： 生殖器是開放性器官，標本采集過程中，應嚴格遵循無菌生殖器是開放性器官，標本采集過程中，應嚴格遵循無菌

37、操作以減少雜菌污染。操作以減少雜菌污染。v 陰道內有大量正常菌群存在，采取宮頸標本應避免觸及陰陰道內有大量正常菌群存在，采取宮頸標本應避免觸及陰道壁。疑有宮腔感染，遇產婦行剖宮產，待胎兒娩出后取道壁。疑有宮腔感染，遇產婦行剖宮產，待胎兒娩出后取宮腔分泌物，并同時取采集嬰兒耳拭子一同送檢。宮腔分泌物，并同時取采集嬰兒耳拭子一同送檢。 沙眼衣原體在宿主細胞內繁殖，取材時拭子應在病變部位沙眼衣原體在宿主細胞內繁殖，取材時拭子應在病變部位停留十幾秒鐘，并采集盡可能多的上皮細胞。停留十幾秒鐘，并采集盡可能多的上皮細胞。臨床微生物標本采集和運送中的常見問題臨床微生物標本采集和運送中的常見問題v采集時機不符

38、合規范采集時機不符合規范 v和醫生開醫囑的時間、方法密切相關和醫生開醫囑的時間、方法密切相關v 常常是采微生物實驗標本的醫囑剛開出來，責常常是采微生物實驗標本的醫囑剛開出來，責任護士就去采樣，不管患者當天是否已用過抗生任護士就去采樣，不管患者當天是否已用過抗生素。有時是上午的一種甚至兩種抗生素剛注射后素。有時是上午的一種甚至兩種抗生素剛注射后，體內血藥濃度正是最高時，護士卻去采集了尿，體內血藥濃度正是最高時，護士卻去采集了尿培養，甚至是血培養標本。還有的科室在對氣管培養，甚至是血培養標本。還有的科室在對氣管插管或切開的患者采樣時，氣管內剛使用含有抗插管或切開的患者采樣時，氣管內剛使用含有抗生素

39、的痰液稀釋劑后，緊接著吸痰，留取痰培養生素的痰液稀釋劑后，緊接著吸痰，留取痰培養標本，導致連續多次痰培養結果標本，導致連續多次痰培養結果“無菌生長無菌生長”。臨床微生物標本采集和運送中的常見問臨床微生物標本采集和運送中的常見問題題v 采樣方法不符合規范采樣方法不符合規范患者準備不到位：表現為取中段尿作尿培養患者準備不到位：表現為取中段尿作尿培養時，采樣前女患者不先用肥皂水或高錳酸鉀溶液時，采樣前女患者不先用肥皂水或高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口；男性未翻轉包皮沖洗，不沖洗外陰部及尿道口；男性未翻轉包皮沖洗，不用用 0.1 % 0.1 %新潔爾滅消毒尿道口，且不用滅菌紗布新潔爾滅消毒尿道口，且不

40、用滅菌紗布擦干。咳痰留取痰培養者，未用擦干。咳痰留取痰培養者，未用溫開溫開水反復漱口水反復漱口，以去除口內大部分雜菌；未深咳，以唾液當痰，以去除口內大部分雜菌；未深咳，以唾液當痰液。液。臨床微生物標本采集和運送中的常見問題臨床微生物標本采集和運送中的常見問題v采樣方法不符合規范采樣方法不符合規范v 醫護人員操作不到位：表現為醫護人員操作不到位：表現為v 1、靜脈導管管端培養時，導管拔出血管前，周圍皮膚未靜脈導管管端培養時，導管拔出血管前，周圍皮膚未經經 75 %酒精消毒酒精消毒，正確培養方法是剪一段，正確培養方法是剪一段導管管端導管管端直直接投入無菌試管內送檢。接投入無菌試管內送檢。v 2、采

41、集采集手術切手術切口前，口前，沒有用沒有用無菌生理鹽水擦洗傷口，造無菌生理鹽水擦洗傷口，造成皮膚雜菌污染，導致培養結果假陽性成皮膚雜菌污染，導致培養結果假陽性。采樣的無菌棉拭采樣的無菌棉拭子未經無菌生理鹽水濕潤，導致標本干燥，無法檢測。子未經無菌生理鹽水濕潤，導致標本干燥，無法檢測。v 3、采血培養標本時皮膚消毒時間偏短，穿刺針入培養瓶采血培養標本時皮膚消毒時間偏短，穿刺針入培養瓶前未過火焰；針頭入無菌試管管口前及管塞打開、塞上前前未過火焰；針頭入無菌試管管口前及管塞打開、塞上前未經火焰燒灼。未經火焰燒灼。臨床微生物標本采集和運送中的常見問題臨床微生物標本采集和運送中的常見問題v標本運送不及時

42、標本運送不及時標本采集后，由護工運送至實驗室。必須確標本采集后，由護工運送至實驗室。必須確保標本中的原始菌在采集、運送過程中不死亡也保標本中的原始菌在采集、運送過程中不死亡也不繁殖。但由于護工要兼顧多個科室的工作，不不繁殖。但由于護工要兼顧多個科室的工作，不是每次都能隨叫隨到，故有時只能任標本擱置多是每次都能隨叫隨到，故有時只能任標本擱置多時后再將其送往實驗室，也有的采樣者不了解此時后再將其送往實驗室，也有的采樣者不了解此類標本須及時送檢，而未及時送類標本須及時送檢，而未及時送，致使少數痰液致使少數痰液和傷口拭子標本送到實驗室時已干燥，而其他尿和傷口拭子標本送到實驗室時已干燥，而其他尿培養、腦脊液培養一類標本因送檢不及時而影響培養、腦脊液培養一類標本因送檢不及時而影響檢測結果，檢測結果，而而化驗單上化驗單上未未注明采樣時間，故實驗注明采樣時間，故實驗室沒法推測這類標本運送是否及時。室沒法推測這類標本運送是否及時。臨床微生物標本采集和運送中的常見問