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文檔簡介
1、常用pH緩沖溶液的配制和pH值序號溶液名稱配制方法pH值1氯化鉀-鹽酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl與 25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均勻后,加水稀釋至100 ml1.72氨基乙酸-鹽酸在500 ml水中溶解氨基乙酸 150 g,加480 ml濃鹽酸,再加水稀釋至1L2.33一氯乙酸-氫氧化鈉在200 ml水中溶解2 g 一氯乙酸后,加 40 g NaOH ,溶解完全后再加水稀釋至1 L2.84鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與6.0 ml0.1 mol/L HCl 混合均勻,加水稀釋至 100 ml3.65鄰苯二甲酸氫鉀
2、-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與 17.5ml 0.1 mol/L NaOH 混合均勻,加水稀釋至 100 ml4.86六亞甲基四胺-鹽酸在200 ml水中溶解六亞甲基四胺40 g,加濃HCl 10 ml,再加水稀釋至 1L5.47磷酸二氫鉀-氫氧化鈉把 25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氫鉀與 23.6 ml 0.1mol/L NaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml6.88硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化鉀與4.0 ml 0.1mol/L NaOH 混合均勻,加水稀釋至100 ml8.09氯化鉉-氨水把0.1
3、 mol/L氯化鉉與 0.1 mol/L 氨水以2: 1比例混合均勻9.110硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化鉀與 43.9 ml 0.1mol/L NaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml10.011氨基乙酸-氯化鈉-氫氧化鈉把49.0 ml 0.1 mol/L氨基乙酸-氯化鈉與 51.0 ml0.1 mol/L NaOH 混合均勻11.612磷酸氫二鈉-氫氧化鈉才巴 50.0 ml 0.05 mol/L Na 2HPO與 26.9 ml 0.1 mol/LNaOH混合均勻,加水稀釋至100 ml12.013氯化鉀-氫氧化鈉把 25.0 ml 0.2 m
4、ol/L KCl 與 66.0 ml 0.2 mol/L NaO混合均勻,加水稀釋至100 mlH13.0、常用溶液的配制(一) 溶液配制注意事項1. 藥品要有較好的質(zhì)量試劑分為優(yōu)級純(保證試劑,Guaranteed reagent , G R.)、分析試劑(Antalytical reagent , A. R )化學(xué)純(Chemical pure , C. P.)和實驗試劑(Laboratory reagent , L. R.)等等。工業(yè)用的化學(xué)試劑,雜質(zhì)較多,只在個別情況下應(yīng)用,如配洗液 用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2. 藥品稱量要精確。3. 配制試劑用水應(yīng)用新鮮的去離子水或雙蒸儲水,比
5、電阻值在50萬歐姆以上,pH在5.57.0之間才可應(yīng)用,在組織培養(yǎng)等特殊用途時應(yīng)注意此項要求,配制一般化驗用溶液只要求用雙蒸e留水或去離子水。4 .配好后的溶液,應(yīng)立即除菌處理(如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì)),以防雜菌生長。(二) 0.067 (1/15 ) Mol/L 磷酸緩沖液1. 1/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液的配制:稱取磷酸二氫鉀(KHPO, A. R. ) 9.08g,用蒸儲 水溶解后,傾入1000ml容量瓶內(nèi),再稀釋至刻度(1000ml)。2. 1/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液的配制:稱取無水磷酸氫二鈉(Na2HPO, A.R. ) 9.47g (或者NaHPO 2H2O 11.
6、87g )用蒸儲水溶解后,放入1000ml容量瓶內(nèi),再加蒸儲水稀釋至刻度(1000ml)。3. 按附表的比例,配制成不同pH值的緩沖溶液。附表1磷酸鹽緩沖液配制法(單位:毫升)pH1/15Mol/L Na 2HPO1/15Mol/L KH 2POpH1/15Mol/L Na 2HPO1/15Mol/L KH 2PO5.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37
7、.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0(三) 0.15Mol/L PB 液 附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na 2HPO (ml)0.15Mol/L NaH 2PO (ml)6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0NaH
8、PQ 2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7g/L 。NaHPO 12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L 。NaHPQ fhO分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/L 。NaHPO - 2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L 。(四)0.2Mol/L PB緩沖液附表3 0.2mol/L PB 緩沖液配制法pH0.2 Mol/L Na 2HPO (ml)0.2Mol/L NaH 2PQ (ml)5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573
9、.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na 2HPO 2 H 2O溶液 35.61g/LNaHPO 12 H2O溶液含 71.64g/L0.2Mol/LNaH 2PO H 2O溶液含 27.60g/LNaHPO - 2 H2O溶液含 31.21g/L欲配0.1Mol/L PB緩沖液則在0.2Mol/L PB緩沖液的基礎(chǔ)上加 H2O稀釋1倍即可。欲配制PBS液時,則在溶液中加 0.85 %的NaCl溶液即可。(五)無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水( P
10、BS(0.15Mol/L PH 7.2)NaCl 8.0gKCl 0.2gNaHPO 1.15g(如為 N&HPO 12HO,貝U為 2.89g)KHPO 0.2g將上述試劑依次溶于1 000ml去離子水中,完全溶解后,115C高壓滅菌10min15min,存在4C冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細(xì)胞分散劑以及洗滌細(xì)胞培養(yǎng)物。(六)硼酸鹽緩沖液( Borate saline buffer )1. 硼酸(H 3BQ)0.2Mol/L 硼酸:硼酸 12.37g 加水至 1 000ml。2. 硼砂(NaBO)0.05Mol/L 硼砂:硼砂 19.07g 加水至 1 000ml。附表4不同pH
11、的0.2Mol/L硼酸緩沖液配制法pH0.05Mol/L 硼砂(ml)0.2Mol/L 硼酸(ml)pH0.05Mol/L 硼砂(ml)0.2Mol/L 硼酸(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0(七)巴比妥緩沖液1. pH8.2離子強(qiáng)度0.05Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥鈉47.6g蒸儲水3 000ml1.17N HCl 55.0ml(1.17 N HCl=193ml 濃 HCl 加 1 807ml 蒸儲水)將4.76g巴比妥鈉溶于 3 000ml蒸儲水。加 1.17 N HCl
12、 55ml 。用HCl調(diào)節(jié)pH到8.2,并加蒸儲水至 4 265ml。2. pH8.4 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥1.84g巴比妥鈉10.30g加蒸儲水至1 000.00ml3. pH8.6 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥1.66g巴比妥鈉12.76g加蒸儲水1 000.00ml(八)0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液見表附表5附表5 0.2Mol/L 醋酸鹽緩沖液配制法pH0.2Mol/L0.1Mol/LpH0.2Mol/L0.1Mol/L23 C37 CTris (ml)HCl ( ml)23 C37 CTris (ml)HCl (ml)9.108.952558.067.9025
13、27.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5(九)三羥甲基甲烷一鹽酸緩沖液( Tris HCl緩沖液)不同 pH, 0.05Mol/L25ml0.2Mol/L 三羥甲基氨基甲烷加 x ml0.1NHCl,加水稀釋至 100ml (見下表)附表6 Tris HCl緩沖液配制法pH0.2Mol/LTris
14、(ml)0.1NHCl(ml)pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)23 C37 C23 C37 C9.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.602510.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羥甲基
15、氨基甲烷(Tris )分子量=121.140.2Mol/L 三羥甲基氨基甲烷:Tris24.23g ,加水至1 000ml。0.1NHCl:取 HCl8.6ml ,加水至 1 000ml。(十)0.5Mol/L pH9.5 碳酸鹽緩沖液NaHCO3.70gNaCO 0.60g溶于600.00ml蒸儲水中即得。不用時塞緊瓶塞,以免吸收空氣中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。(一)甘油磷酸緩沖液1 .配制pH8.0磷酸緩沖液0.1Mol/L Na 2HPO 94.50ml0.1N NaH2PQ 5.50ml混合即可2. 9份甘油與1份pH8.0磷酸緩沖液混合,即為甘油磷酸緩沖液。用途:用于免疫熒光
16、試驗。(十二)Hank' s 液1. 貯存液NaCl 80.00gKCl 4.00gNaHPO 12 H2O 1.52gKHPQ 0.60g葡萄糖4.00g0.4 %酚紅液 50.00ml雙儲水加至100.00ml115C高壓滅菌15min,冰凍保存。2. 工作液貯存液1份雙儲水9份115C高壓滅菌15min。臨用時用滅菌的 5.6 % NaHCO夜調(diào)pH值至7.2左右(溶液呈橙紅色)(十三)荼(鈉)氏試劑(Nessler ' s reagent )配方1:氯化汞6.0g碘化鉀12.4g20% NaOH 30ml加蒸儲水至100ml配方2:碘化汞11.5g碘化鉀8g蒸儲水50m
17、l(完全溶解后)過濾,加20% NaOH 50ml。用途:檢測溶液中氨離子。(十四)阿氏(Alsever ' s)液葡萄糖2.05g檸檬酸鈉0.80g氯化鈉0.42g蒸儲水100ml溶解后,以10%寧檬酸調(diào)節(jié)pH至6.1,過濾,分裝,10磅10min滅菌,4C保存。(十五)青、鏈霉素混合液(簡稱S. P.液或雙抗液)青霉素(40萬UU 5支鏈霉素( 200萬g) 1支分別溶于100ml滅菌無離子水中或共同溶于200ml滅菌無離子水中,混合后分裝小瓶,置-10C-20C冰箱保存?zhèn)溆茫?萬單位g/ml )。臨用時,按1%勺量加入營養(yǎng)液或其他溶液中,最后濃度是青霉素100U/ml,鏈霉素100ug/ml。(十六)洗液(清潔液)配方1:重銘酸鉀150g蒸儲水300ml濃硫酸3 000ml將重銘酸鉀加入蒸儲水中,使之自然溶解或水浴溶解,亦可在大土甘蝸中加熱溶解,然后慢慢
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