1、會計學1第一頁，共22頁。三、比較三、比較(bjio)(bjio)（一）植物（一）植物(zhw)(zhw)組織培養與動物細胞培養組織培養與動物細胞培養1 1、過程、過程(guchng)(guchng)（1 1）植物組織培養）植物組織培養再分化再分化激素、需光激素、需光脫分化脫分化激素、不需光激素、不需光離體的植物離體的植物器官、組織器官、組織或細胞或細胞 愈傷愈傷組織組織根、芽根、芽胚狀體胚狀體植物體植物體回答：脫分化回答：脫分化? ?再分化？愈傷組織？光？激素？再分化？愈傷組織？光？激素？（2 2）動物細胞培養）動物細胞培養動物胚胎動物胚胎或幼齡動或幼齡動物的組織物的組織、器官、器官剪碎剪碎

2、胰蛋白酶胰蛋白酶細胞懸細胞懸浮液浮液1010代代細胞細胞40504050代代細胞細胞無限無限傳代傳代原代培養原代培養傳代培養傳代培養細胞株細胞株細胞系細胞系回答：原代培養、傳代培養？細胞株、回答：原代培養、傳代培養？細胞株、細胞系細胞系？第1頁/共21頁第二頁，共22頁。2 2、原理、原理(yunl)(yunl)（1 1）植物）植物(zhw)(zhw)組織培養組織培養（2 2）動物）動物(dngw)(dngw)細胞細胞培養培養細胞全能性細胞全能性細胞增殖細胞增殖3 3、培養基（性質、培養基（性質/ /特有成分）特有成分）（1 1）植物組織培養）植物組織培養（2 2）動物細胞培養）動物細胞培養固

3、體固體/ /蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素液體液體/ /葡萄糖、葡萄糖、4 4、取材、取材（1 1）植物組織培養）植物組織培養（2 2）動物細胞培養）動物細胞培養較幼嫩部位（無性生殖）較幼嫩部位（無性生殖）/ /花藥（有性生殖）花藥（有性生殖） 動物胚胎或幼齡動物的組織、器官動物胚胎或幼齡動物的組織、器官分裂增生能力強分裂增生能力強5 5、培養結果、培養結果（1 1）植物組織培養）植物組織培養（2 2）動物細胞培養）動物細胞培養植物體（試管苗）植物體（試管苗）/ /愈傷組織愈傷組織/ /胚狀體胚狀體細胞株細胞株/ /細胞系細胞系第2頁/共21頁第三頁，共22頁。6 6、應用、應用(yngyng)

4、(yngyng)（1 1）植物）植物(zhw)(zhw)組織培組織培養養（2 2）動物）動物(dngw)(dngw)細胞細胞培養培養快速繁殖、培育無病毒植株（根尖、莖尖部位的細胞）快速繁殖、培育無病毒植株（根尖、莖尖部位的細胞）利利用用愈傷組織愈傷組織生產藥物、食品添加劑、香料、色素、殺蟲劑等生產藥物、食品添加劑、香料、色素、殺蟲劑等制造制造人工種子人工種子，解決有些植物結子困難、發芽率低、繁，解決有些植物結子困難、發芽率低、繁殖困難等問題殖困難等問題 培養轉基因植物培養轉基因植物 此外還有單倍體育種過程中花藥離體培養過程此外還有單倍體育種過程中花藥離體培養過程7 7、相同點：、相同點：適宜的

5、外界條件（溫度、適宜的外界條件（溫度、pHpH、無菌等），營、無菌等），營養物質、激素、離體等養物質、激素、離體等第3頁/共21頁第四頁，共22頁。三、比較三、比較(bjio)(bjio)（二）植物體細胞雜交（二）植物體細胞雜交(zjio)(zjio)和動物細胞融合和動物細胞融合1 1、過程、過程(guchng)(guchng)（1 1）植物體細胞雜交）植物體細胞雜交（2 2）動物細胞融合）動物細胞融合原生質體融合原生質體融合植物組織培養植物組織培養雜雜種種細細胞胞 愈愈傷傷組組織織雜雜種種植植株株酶解酶解去壁去壁促促融融脫脫分分化化再再分分化化植物植物細胞細胞A A植物植物細胞細胞B B原生

6、原生質體質體A A原生原生質體質體B BABAB形成細形成細胞壁胞壁細胞細胞A A細胞細胞B B促促融融AAAA、BBBB、ABAB篩選篩選ABAB第4頁/共21頁第五頁，共22頁。2 2、融合、融合(rngh)(rngh)方法方法（1 1）植物體細胞）植物體細胞(xbo)(xbo)雜交雜交（2 2）動物）動物(dngw)(dngw)細胞細胞融合融合融合前操作：融合前操作：誘導融合：誘導融合：酶解法去除細胞壁（纖維素酶、果膠酶）酶解法去除細胞壁（纖維素酶、果膠酶）物理方法：離心、振動、電刺激物理方法：離心、振動、電刺激化學方法：誘導劑化學方法：誘導劑PEGPEG融合前操作：融合前操作：誘導融合

7、：誘導融合：胰蛋白酶處理獲得單個細胞胰蛋白酶處理獲得單個細胞物理方法：離心、振動、電刺激物理方法：離心、振動、電刺激化學方法：化學方法：誘導劑誘導劑PEGPEG生物方法：滅活病毒做生物方法：滅活病毒做誘導劑誘導劑第5頁/共21頁第六頁，共22頁。3 3、原理、原理(yunl)(yunl)（1 1）植物體細胞）植物體細胞(xbo)(xbo)雜交雜交（2 2）動物）動物(dngw)(dngw)細胞細胞融合融合細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、細胞全能性細胞全能性細胞膜的流動性細胞膜的流動性4 4、結果、結果（1 1）植物體細胞雜交）植物體細胞雜交（2 2）動物細胞融合）動物細胞融合經原生質體融合獲得

8、雜種細胞，組培后獲得經原生質體融合獲得雜種細胞，組培后獲得雜種植株雜種植株獲得雜種細胞獲得雜種細胞5 5、應用、應用（1 1）植物體細胞雜交）植物體細胞雜交（2 2）動物細胞融合）動物細胞融合育種（克服遠緣雜交不親和的障礙育種（克服遠緣雜交不親和的障礙, ,擴大了可用于雜交的擴大了可用于雜交的親本組合范圍）親本組合范圍）制備單克隆抗體制備單克隆抗體第6頁/共21頁第七頁，共22頁。2 2、特點、特點(tdin)(tdin)： 強，強， 高。高。特異性特異性靈敏度靈敏度四、單克隆抗體四、單克隆抗體(kngt)(kngt)3 3、制備、制備(zhbi)(zhbi)過程過程1 1、概念：、概念：單個

9、單個B B淋巴細胞通過無性繁殖產生化學性質單淋巴細胞通過無性繁殖產生化學性質單一，特異性強的抗體。一，特異性強的抗體。（理解：這種（理解：這種單一類型單一類型的的只針對某一特定抗原只針對某一特定抗原決定簇決定簇的的抗體分子）抗體分子）抗原抗原小鼠小鼠骨髓瘤細骨髓瘤細胞胞B B淋巴淋巴細胞細胞融合融合篩篩選選雜交瘤雜交瘤細胞細胞培養培養篩選篩選產生特產生特定抗體定抗體的細胞的細胞群群擴大擴大培養培養體外體外培養培養體內體內培養培養提提取取單克單克隆抗隆抗體體培養液培養液中提取中提取腹水中提取腹水中提取（1 1）基礎研究（）基礎研究（2 2）診斷、治療、預防疾病。例如：單抗診）診斷、治療、預防疾病

10、。例如：單抗診斷盒、斷盒、“生物導彈生物導彈”治療癌癥治療癌癥4 4、應用、應用第7頁/共21頁第八頁，共22頁。五、胚胎五、胚胎(piti)(piti)移植、核移植、胚胎移植、核移植、胚胎(piti)(piti)分分割移植割移植體外受精體外受精(t wi (t wi shu jn)shu jn)早期早期(zoq)(zoq)胚胚胎胎培養培養移植移植新個體新個體發育發育1 1、試管牛和試管嬰兒、試管牛和試管嬰兒（1 1）簡要過程）簡要過程（2 2）生殖方式）生殖方式有性生殖有性生殖（3 3）應用的技術手段）應用的技術手段動物細胞培養、胚胎移植動物細胞培養、胚胎移植（4 4）意義：）意義：試管牛：

11、優良種牛的繁殖；試管嬰兒：不孕不育試管牛：優良種牛的繁殖；試管嬰兒：不孕不育2 2、克隆羊、克隆羊（1 1）簡要過程）簡要過程（2 2）生殖方式）生殖方式（3 3）應用的技術手段）應用的技術手段無性生殖無性生殖核移植、動物細胞核移植、動物細胞培養、胚胎移植培養、胚胎移植3 3、胚胎分割移植、胚胎分割移植無性生殖無性生殖第8頁/共21頁第九頁，共22頁。植物體細胞雜交植物體細胞雜交單克隆抗體制備單克隆抗體制備原理原理細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、細胞增殖細胞增殖融合前融合前處理處理酶解法去除細胞壁酶解法去除細胞壁（纖維素酶、果膠（纖維素酶

12、、果膠酶）酶）注射特定抗原，免注射特定抗原，免疫處理正常小鼠疫處理正常小鼠促融方促融方法法物理法：離心、振物理法：離心、振動、電刺激動、電刺激化學法：聚乙二醇化學法：聚乙二醇物化法：同植物細物化法：同植物細胞生物法：滅活的胞生物法：滅活的病毒病毒植物體細胞雜交植物體細胞雜交(zjio)和單克隆抗體制和單克隆抗體制備備第9頁/共21頁第十頁，共22頁。過過程程第第一一步步原生質體原生質體的制備的制備(酶酶解法解法)正常小正常小鼠免疫鼠免疫處理處理第第二二步步原生質體原生質體的融合的融合（物、化（物、化法）法）動物細動物細胞融合胞融合（物、（物、化、生化、生法）法）第第三三步步雜種細胞雜種細胞的篩

13、選和的篩選和培養培養雜交瘤雜交瘤細胞的細胞的篩選與篩選與培養培養第第四四步步雜種植株雜種植株的誘導與的誘導與鑒定鑒定單克隆單克隆抗體的抗體的提純提純第10頁/共21頁第十一頁，共22頁。意意義義和和用用途途（1）克服遠緣雜交不親和）克服遠緣雜交不親和的障礙，大大擴展雜交親的障礙，大大擴展雜交親本的組合范圍本的組合范圍（2）克服有性雜交的母系）克服有性雜交的母系遺傳現象、獲得細胞質基遺傳現象、獲得細胞質基因的雜合子、研究細胞質因的雜合子、研究細胞質遺傳遺傳（1 1）制備單克隆抗體）制備單克隆抗體（2 2）診斷、治療、預）診斷、治療、預防疾病。例如：單抗防疾病。例如：單抗診斷盒、診斷盒、“生物導彈

14、生物導彈”治療癌癥治療癌癥第11頁/共21頁第十二頁，共22頁。誤區警示誤區警示1.1.植物細胞植物細胞A A、B B的體細胞是二倍體，體細胞中的染的體細胞是二倍體，體細胞中的染色體數是色體數是2N2N，則雜種，則雜種(zzhng)(zzhng)細胞細胞C C就是就是4N4N，稱為，稱為異源四倍體。異源四倍體。2.2.利用植物體細胞雜交的方法培育作物新品種的過利用植物體細胞雜交的方法培育作物新品種的過程中，其遺傳物質的傳遞不遵循孟德爾的遺傳規律，程中，其遺傳物質的傳遞不遵循孟德爾的遺傳規律，因為生物在進行有性生殖時才遵循孟德爾的遺傳規因為生物在進行有性生殖時才遵循孟德爾的遺傳規律，植物體細胞雜

15、交的過程不屬于有性生殖。律，植物體細胞雜交的過程不屬于有性生殖。第12頁/共21頁第十三頁，共22頁。3.3.動物細胞融合后獲得的雜種細胞，目前還沒有辦法動物細胞融合后獲得的雜種細胞，目前還沒有辦法(bnf)(bnf)讓其發育成一個個體，它不同于讓其發育成一個個體，它不同于“克隆克隆”，也不同于植物體細胞雜交。也不同于植物體細胞雜交。4.4.兩者在融合過程中都會發生多種融合方式，如兩者在融合過程中都會發生多種融合方式，如AAAA、BBBB、ABAB，因此要進行篩選。，因此要進行篩選。5.5.兩者都要用到細胞融合和細胞培養兩個技術手段。兩者都要用到細胞融合和細胞培養兩個技術手段。6.6.動物細胞

16、培養中用選擇性培養基先后選擇出雜交瘤動物細胞培養中用選擇性培養基先后選擇出雜交瘤細胞和能產生抗體的細胞群。細胞和能產生抗體的細胞群。第13頁/共21頁第十四頁，共22頁。（20082008年南京模擬）用高度分化的植物細胞、組年南京模擬）用高度分化的植物細胞、組織織(zzh)(zzh)和器官進行組織和器官進行組織(zzh)(zzh)培養可以形成培養可以形成愈傷組織愈傷組織(zzh)(zzh)，下列敘述錯誤的是，下列敘述錯誤的是 A. A.該愈傷組織該愈傷組織(zzh)(zzh)是細胞經過脫分化和分裂是細胞經過脫分化和分裂形成的形成的 B. B.該愈傷組織該愈傷組織(zzh)(zzh)的細胞沒有全

17、能性的細胞沒有全能性 C. C.該愈傷組織該愈傷組織(zzh)(zzh)是由排列疏松的薄壁細胞是由排列疏松的薄壁細胞組成的組成的 D. D.該愈傷組織該愈傷組織(zzh)(zzh)可以形成具有生根發芽能可以形成具有生根發芽能力的胚狀結構力的胚狀結構B B第14頁/共21頁第十五頁，共22頁。以下不能說明細胞全能性的實驗是以下不能說明細胞全能性的實驗是A.A.胡蘿卜韌皮部細胞培育出植株胡蘿卜韌皮部細胞培育出植株B.B.紫色糯性玉米種子培育出植株紫色糯性玉米種子培育出植株 C.C.轉入抗蟲基因的棉花轉入抗蟲基因的棉花(min hua)(min hua)細胞培細胞培育出植株育出植株D.D.番茄與馬鈴

18、薯體細胞雜交后培育出植株番茄與馬鈴薯體細胞雜交后培育出植株B第15頁/共21頁第十六頁，共22頁。5.5.關于植物體細胞雜交技術，錯誤的說法是關于植物體細胞雜交技術，錯誤的說法是 A.A.可以突破自然生殖隔離的限制而得到種間雜種植可以突破自然生殖隔離的限制而得到種間雜種植株株B.B.使用使用(shyng)(shyng)聚乙二醇可以誘導兩種愈傷組織聚乙二醇可以誘導兩種愈傷組織細胞直接融合細胞直接融合C.C.此項技術往往需要使用此項技術往往需要使用(shyng)(shyng)纖維素酶和果纖維素酶和果膠酶處理待融合細胞膠酶處理待融合細胞D.D.植物組織培養是實現體細胞雜交的最基礎的工作植物組織培養是

19、實現體細胞雜交的最基礎的工作手段手段B B第16頁/共21頁第十七頁，共22頁。6.6.用動物細胞工程技術獲取單克隆抗體，下列實用動物細胞工程技術獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是驗步驟中錯誤的是 A.A.將抗原注入將抗原注入(zh r)(zh r)小鼠體內，獲得能產生抗小鼠體內，獲得能產生抗體的體的B B淋巴細胞淋巴細胞B.B.用纖維素酶處理用纖維素酶處理B B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞C.C.用聚乙二醇作誘導劑，促使能產生抗體的用聚乙二醇作誘導劑，促使能產生抗體的B B淋巴淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合D.D.篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產生

20、所需抗體篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產生所需抗體的細胞群，培養后提取單克隆抗體的細胞群，培養后提取單克隆抗體B B第17頁/共21頁第十八頁，共22頁。以下四種細胞工程技術中培育出的新個體，只含有一以下四種細胞工程技術中培育出的新個體，只含有一個親本個親本(qn bn)(qn bn)遺傳性狀的是遺傳性狀的是 A.A.植物組織培養植物組織培養 B.B.細胞融合細胞融合C.C.動物胚胎移植動物胚胎移植 D.D.細胞核移植細胞核移植A A第18頁/共21頁第十九頁，共22頁。蘇丹紅是一種高致癌物質，某些養殖戶利用蘇丹蘇丹紅是一種高致癌物質，某些養殖戶利用蘇丹紅紅IV號拌飼料飼喂鴨子，以獲得號拌飼料飼喂鴨子，以獲得“紅心鴨蛋紅心鴨蛋”，這種鴨蛋會傷害食用者身體健康。某科學小組嘗這種鴨蛋會傷害食用者身體健康。某科學小組嘗試利用動物細胞培養技術來檢測蘇丹試利用動物細胞培養技術來檢測蘇丹IV號的毒性號的毒性，下列有關敘述正確的是，下列有關敘述正確的是 A取剛出生不久的動物組織作為實驗材料，直接取剛出生不久的動物組織作