1、會計學1常用生物化學檢驗常用生物化學檢驗(jinyn)技術技術第一頁，共62頁。2概念：利用物質具有吸收、發射或散射光譜譜系的特點，對物質進行概念：利用物質具有吸收、發射或散射光譜譜系的特點，對物質進行(jnxng)定性或定量的分析方法定性或定量的分析方法第1頁/共61頁第二頁，共62頁。3u發射光譜發射光譜u 火焰光度法、原子發射光譜法、熒光光譜法火焰光度法、原子發射光譜法、熒光光譜法u吸收吸收(xshu)光譜光譜u 紫外、可見光、紅外光及原子吸收紫外、可見光、紅外光及原子吸收(xshu)分光光度法分光光度法u散光光譜散光光譜u 比濁法比濁法光譜分析光譜分析(un p fn x)技術技術第2

2、頁/共61頁第三頁，共62頁。4第3頁/共61頁第四頁，共62頁。5第4頁/共61頁第五頁，共62頁。6第5頁/共61頁第六頁，共62頁。第6頁/共61頁第七頁，共62頁。8分光光度分光光度(gungd)技術的基本原理技術的基本原理透光度透光度(gungd)與吸光度與吸光度(gungd)T=I/IOT%=T100%A=-lgT=-lg I/IO =lgIO/I第7頁/共61頁第八頁，共62頁。9Lambert-Beer定律定律(dngl)A=KLC適用用于可見光、紫外光、紅外光和適用用于可見光、紫外光、紅外光和均勻均勻(jnyn)非散射的液體非散射的液體（摩爾吸光系數）：（摩爾吸光系數）：當液

3、層厚度當液層厚度(hud)(hud)為為1cm1cm，物質濃度為，物質濃度為1mol/L1mol/L時時波長下的吸光度值波長下的吸光度值第8頁/共61頁第九頁，共62頁。10第9頁/共61頁第十頁，共62頁。11第10頁/共61頁第十一頁，共62頁。12第11頁/共61頁第十二頁，共62頁。13第12頁/共61頁第十三頁，共62頁。14第13頁/共61頁第十四頁，共62頁。15第14頁/共61頁第十五頁，共62頁。16第15頁/共61頁第十六頁，共62頁。17第16頁/共61頁第十七頁，共62頁。18第17頁/共61頁第十八頁，共62頁。19第18頁/共61頁第十九頁，共62頁。20第19頁/

4、共61頁第二十頁，共62頁。21第20頁/共61頁第二十一頁，共62頁。22 溶液中帶電粒子在直流電場中向電性相反電極溶液中帶電粒子在直流電場中向電性相反電極(dinj)(dinj)移動的現象稱為電泳。移動的現象稱為電泳。 電電 泳泳第21頁/共61頁第二十二頁，共62頁。23 利用帶電粒子在電場作用利用帶電粒子在電場作用(zuyng)下定向移動的特性，對下定向移動的特性，對混合物組分進行分離、純化和測定混合物組分進行分離、純化和測定的技術稱為電泳技術。的技術稱為電泳技術。電泳技術電泳技術第22頁/共61頁第二十三頁，共62頁。24 COO- H C NH3+ R COO- H C NH2 R

5、 COOH H C NH3+ RH+H+OH-OH-pH = pIpHpI原理原理(yunl)第23頁/共61頁第二十四頁，共62頁。人血清蛋白的等電點和電泳遷移率人血清蛋白的等電點和電泳遷移率 蛋白質蛋白質 等電點等電點 電泳遷移率電泳遷移率cm2.s-1.v-1 白蛋白白蛋白 4.84 5.910-5 球蛋白球蛋白 5.06 5.110-5 球蛋白球蛋白 5.06 4.110-5 球蛋白球蛋白 5.12 2.810-5 球蛋白球蛋白 6.857.30 1.010-5 第24頁/共61頁第二十五頁，共62頁。26第25頁/共61頁第二十六頁，共62頁。27vcmsvcmsv第26頁/共61頁

6、第二十七頁，共62頁。28根據根據(gnj)Stoke(gnj)Stoke定律定律第27頁/共61頁第二十八頁，共62頁。291 1、根據被分離的樣品多少分為、根據被分離的樣品多少分為(fn wi)(fn wi) 分析電泳分析電泳 制備電泳制備電泳2 2、根據電泳時電壓的高低分為、根據電泳時電壓的高低分為(fn wi)(fn wi) 高壓電泳高壓電泳 （50 V/cm50 V/cm以上）以上） 常壓電泳常壓電泳 （50 V/cm50 V/cm以下）以下） 電泳電泳(din yn)的分類的分類第28頁/共61頁第二十九頁，共62頁。303 3、根據電泳媒介的不同分為、根據電泳媒介的不同分為 自由

7、電泳自由電泳 （溶液）（溶液） 區帶電泳區帶電泳 （支持介質（支持介質(jizh)(jizh)） 4 4、根據電泳系統是否均一分為、根據電泳系統是否均一分為 連續電泳連續電泳 不連續電泳不連續電泳第29頁/共61頁第三十頁，共62頁。31第30頁/共61頁第三十一頁，共62頁。32組成成分組成成分pH pH pHpH與與pIpI比較，比較，4.5-9.0,4.5-9.0,正極正極pH pH 負極負極(fj)(fj)離子強度離子強度離子強度越大，緩沖容量越大，離子強度越大，緩沖容量越大，pHmol/LpHmol/L3 3、緩沖液、緩沖液第31頁/共61頁第三十二頁，共62頁。335 5、蒸發、蒸

8、發(zhngf)(zhngf)作用作用6 6、樣品、樣品4 4、支持物、支持物吸附吸附(xf)(xf)作用作用電滲作用電滲作用第32頁/共61頁第三十三頁，共62頁。34 電電 泳泳 儀儀 由直流電源和電泳槽兩部分組成由直流電源和電泳槽兩部分組成。一、直流電源一、直流電源 一般一般(ybn)(ybn)由交流電經過整流由交流電經過整流獲得獲得 恒壓電源恒壓電源 恒流電源恒流電源 恒功電源恒功電源第33頁/共61頁第三十四頁，共62頁。35二、電泳槽二、電泳槽 蓋蓋 電極電極(dinj)(dinj)及電極及電極(dinj)(dinj)室室 支架支架第34頁/共61頁第三十五頁，共62頁。36第35

9、頁/共61頁第三十六頁，共62頁。37第36頁/共61頁第三十七頁，共62頁。38第37頁/共61頁第三十八頁，共62頁。39第38頁/共61頁第三十九頁，共62頁。40第39頁/共61頁第四十頁，共62頁。41第40頁/共61頁第四十一頁，共62頁。42n溴化乙啶溴化乙啶（核酸）（核酸）第41頁/共61頁第四十二頁，共62頁。43第42頁/共61頁第四十三頁，共62頁。44第43頁/共61頁第四十四頁，共62頁。45第44頁/共61頁第四十五頁，共62頁。46第45頁/共61頁第四十六頁，共62頁。第46頁/共61頁第四十七頁，共62頁。48第47頁/共61頁第四十八頁，共62頁。49第48

10、頁/共61頁第四十九頁，共62頁。50 不同的蛋白質具有不同的蛋白質具有(jyu)(jyu)不同的等電點，利用具有不同的等電點，利用具有(jyu)(jyu)線性線性pHpH梯度的電泳介質來分離等電點不同的蛋白質，這種電泳技術稱為等電聚焦電泳。梯度的電泳介質來分離等電點不同的蛋白質，這種電泳技術稱為等電聚焦電泳。第49頁/共61頁第五十頁，共62頁。51進行等電聚焦電泳進行等電聚焦電泳(din yn(din yn) )的條件的條件1.1.有一個有一個(y (y )在電泳條件下基本穩定的、在電泳條件下基本穩定的、 重復性良好的重復性良好的pHpH 分離的區帶。分離的區帶。第50頁/共61頁第五十一

11、頁，共62頁。52 雙向電泳是先把樣品從一個方向進行電泳分離，接著雙向電泳是先把樣品從一個方向進行電泳分離，接著(ji zhe)(ji zhe)再與其成再與其成9090方向進行第二次電泳分離。方向進行第二次電泳分離。 第一次電泳以其電荷性質為基礎；第二次電泳則按分子量不同進行分離。第一次電泳以其電荷性質為基礎；第二次電泳則按分子量不同進行分離。第51頁/共61頁第五十二頁，共62頁。53 轉移轉移(zhuny)(zhuny)電泳是將凝膠電泳的高分辯率與放射標記或酶標記等免疫化學方法的高靈敏度結合起來的電泳技術。電泳是將凝膠電泳的高分辯率與放射標記或酶標記等免疫化學方法的高靈敏度結合起來的電泳技

12、術。第52頁/共61頁第五十三頁，共62頁。54第53頁/共61頁第五十四頁，共62頁。55第54頁/共61頁第五十五頁，共62頁。56第55頁/共61頁第五十六頁，共62頁。57 核酸核酸(h sun)(h sun)轉移到硝酸纖維膜或重氮芐氨轉移到硝酸纖維膜或重氮芐氨 基甲基紙上。基甲基紙上。 3. 3.鑒定紙上的蛋白質或核酸鑒定紙上的蛋白質或核酸(h sun)(h sun) 其方法其方法(fngf)(fngf)步驟步驟第56頁/共61頁第五十七頁，共62頁。58第57頁/共61頁第五十八頁，共62頁。59紙層析紙層析(cn x)比移值（比移值（Rf）=溶質譜溶質譜帶中心移動帶中心移動(ydng)距離距離/流動流動相前沿移動相前沿移動(ydng)的距離的距離第58頁/共61頁第五十九頁，共62頁。60凝膠層析凝膠層析(cn x)第59頁/共61頁第六十頁，共62頁。61第60頁/共61頁第六十一頁，共62頁。NoImage內容(nirng)總結會計學。第1頁/共61頁。第5頁/共61