1、1.微生物包括哪些類群?非細胞型生物：病毒、亞病毒細胞型生物：原核微生物：古細菌、真細菌（包括粘細菌和藍細菌）、放線菌、立克次氏體、支原體和衣原體；真核微生物：絲狀真菌、酵母菌、大型真菌（蕈菌）、顯微藻類和原生動物2.柯赫對微生物學的貢獻有哪些？闡明柯赫原則的主要內容.貢獻：對微生物學基本操作技術方面的貢獻 a）細菌純培養方法的建立 土豆切面 營養明膠 營養瓊脂（平皿） b）設計了各種培養基，實現了在實驗室內對各種微生物的培養 c）流動蒸汽滅菌 d）染色觀察和顯微攝影對病原細菌研究的貢獻： a）具體證實了炭疽桿菌是炭疽病的病原菌 b）發現了肺結核病的病原菌（1905年獲諾貝爾獎）柯赫原則： 在

2、每一相同病例中都出現這種微生物要從寄主分離出這樣的微生物并在培養基中培養出來用這種微生物的純培養接種健康而敏感的寄主，同樣的疾病會重復發生從試驗發病的寄主中能再度分離培養出這種微生物來3.原核微生物和真核微生物在細胞結構和功能方面有那些區別？比較項目真核生物原核生物細胞大小較大（通常直徑>2m）較小（通常直徑<2m）若有壁，其主要成分纖維素、幾丁質等多數為肽聚糖細胞膜中甾醇有無（僅支原體例外）細胞膜含呼吸或光合組分無有細胞器有無鞭毛結構如有，則粗而復雜（9+2型）如有，則細而簡單細胞質線粒體有無溶酶體有無葉綠體光合自養生物中有無真液泡有些有無高爾基體有無微管系統有無流動性有無核糖體

3、80S（指細胞質核糖體）70S間體無部分有貯藏物淀粉、糖原等PHB等細胞核核膜有無DNA含量低（約5%）高（約10%）組蛋白有無核仁有無染色體數一般>1一般為1有絲分裂有無減數分裂有無生理特征氧化磷酸化部位線粒體細胞膜光合作用部位葉綠體細胞膜生物固氮能力無有些有專性厭氧生活罕見常見化能合成作用無有些有鞭毛運動方式揮鞭式旋轉馬達式遺傳重組方式有性生殖、準性生殖等轉化、轉導、接合等繁殖方式有性、無性等多種一般為無性（二等分裂）4.細菌細胞壁的結構與化學組成是怎樣的？什么叫肽聚糖？G+菌與G-菌的細胞壁結構和化學組成有何差異？細胞壁的結構與化學組成：肽聚糖、磷壁酸、類脂質、蛋白質肽聚糖：是由雙

4、糖單位，四肽尾還有肽橋聚合而成得多層網狀大分子結構。革蘭氏陽性菌：肽聚糖（90%）、磷壁酸（0%）革蘭氏陰性菌：肽聚糖（510%）、脂多糖、磷脂、蛋白質5.用細菌的細胞壁結構和化學組成解釋革蘭氏染色的機制. 革藍氏染色機制：通過結晶紫液初染和碘液媒染后，在細菌的細胞膜內可形成不溶于水的結晶紫液和碘液的復合物，G+細菌由于其細胞壁較厚，肽聚糖網層次多和交聯致密，因此遇脫色劑乙醇處理時，因失水而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇的處理不會溶出縫隙，因此能把結晶紫與碘的復合物牢牢留在壁內，使其保持紫色。反之，G-細菌的細胞壁薄，外膜層類脂含量高，肽聚糖層薄，交聯度差，遇脫色劑乙醇后，以類脂為主的外

5、膜迅速溶解，這時薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此細胞褪成無色。再經番紅、沙黃等紅色染料復染，就使G-細菌呈現紅色，而G+細菌則保留紫色。6.細菌細胞有哪些基本構造和特殊構造？細菌的繁殖方式.基本構造：細胞壁，細胞膜，細胞質和內含物，核區特殊構造：糖被，鞭毛，菌毛，性毛，芽孢和其他休眠構造，伴孢晶體繁殖方式：裂殖，芽殖7.什么叫糖被、芽孢、伴胞晶體和菌毛？細菌的細胞核特點.糖被：位于某些細菌細胞壁外的一層厚度不定的透明膠狀物質。芽孢：某些細菌在其生長發育的后期，在細胞內形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量低、抗逆性強的休眠體，稱為芽孢，又稱內生孢子。伴胞晶體：又稱內毒素。少數

6、芽孢桿菌產生的糖蛋白昆蟲毒素。例如蘇云金芽孢桿菌，在形成芽孢的同時，會在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規則形的堿溶性蛋白質晶體，稱為伴孢晶體。菌毛：又稱纖毛、傘毛、線毛或須毛，是一種長在細菌體表的纖細、中空、短直且數量較多的蛋白質類附屬物，具有使菌體附著于物體表面上的功能。細胞核特點：核質體或核區、原核實際是一巨大的、連續的、環狀的雙鏈DNA其長度可達0.253.0mm，比細菌本身長1000倍它分散于細胞質中，沒有真正的核膜、核仁它在細胞內是高度折疊纏繞，核區一般呈球狀、棒狀、啞鈴狀生長迅速時可在一個細胞內找到幾個（24個）（一般12個）8.細菌鞭毛的結構是怎樣的？G+菌與G-菌在鞭毛構成上有何

7、差異？鞭毛結構：基體、鉤形鞘和鞭毛絲。G+菌僅有S、M兩環，G-菌有S、M、L、P四個環。9.霉菌的營養菌絲和氣生菌絲有哪些特化形式？酵母菌和霉菌細胞壁結構和化學組成是怎樣的？其繁殖方式（有性、無性）有哪些？營養菌絲：假根，匍匐菌絲，吸器，附著胞，附著枝，菌核，菌索，菌環和菌網氣生菌絲（子實體）：無性：分生孢子頭、孢子囊，分生孢子器、分生孢子座、分生孢子盤；有性：擔子；子囊果：閉囊殼，子囊殼，子囊盤酵母菌：細胞壁厚約25nm，占細胞干重25%“三明治”結構：外層為甘露聚糖，中層為蛋白質，內層是葡聚糖。葡聚糖：3040%、甘露聚糖：3040%、蛋白質：10%左右、幾丁質：12%、無機鹽：13%霉

8、菌：細胞壁厚100250nm最外層：無定形的葡聚糖次外層：葡聚糖蛋白網層次內層：蛋白質層內層：幾丁質層主要的機械強度支撐纖維低等水生真菌含有較多的纖維素。繁殖：酵母菌：無性繁殖：芽殖各屬酵母菌都存在；裂殖：在裂殖酵母菌中存在；無性孢子：節孢子、擲孢子、厚垣孢子；有性繁殖：產子囊孢子霉菌：無性或有性孢子10.鏈霉菌的典型構造和繁殖方式如何？典型構造：基內菌絲、氣生菌絲、孢子絲繁殖方式：孢子繁殖，菌絲繁殖11.支原體、衣原體和立克次氏體的特征，比較其異同。藍細菌的特點有哪些？比較項目支原體衣原體立克次氏體細胞構造有有有直徑大于300nm不一定不一定是含核酸類型DNA和RNADNA和RNADNA和R

9、NA核糖體有有有細胞壁無有（不含肽聚糖）有（含肽聚糖）細胞膜有（含甾醇）有（無甾醇）有（無甾醇）在無生命的培養基上生長不能生長不能生長細胞二分裂繁殖有有有繁殖時個體完整性保持保持保持大分子合成能力有有有產ATP系統有無有氧化谷氨酰胺能力有無有對抑制細菌抗生素的反應敏感（對抑制細胞壁合成者例外）敏感（青霉素例外）敏感藍細菌特點：具有光合能力，進行產氧光合作用具有固氮作用革藍氏染色陰性主要以裂殖方式繁殖沒有鞭毛，但能進行滑行運動，并具有趨光性和趨化性細胞具有特化結構，如異形胞、靜孢子、鏈絲段等海水和湖水中的藍細菌可引起“赤潮”和“水華”12.何為假絲酵母？與霉菌菌絲體有何區別？ 假絲酵母是指能形成

10、假菌絲、不產生子囊孢子的酵母。假菌絲沒有橫隔。各細胞間僅以狹小的面積相連，呈藕節狀，在分隔處縊縮。霉菌的菌絲大多有橫隔，整個菌絲的直徑粗細一致，且分枝與主干的直徑一致。菌絲頂端常呈鈍圓形。相連細胞間的橫隔面積與細胞直徑一致,呈竹節狀的細胞串。假菌絲與真菌絲明顯不同處在于其兩細胞間有一細腰，而不象真正菌絲橫隔處兩細胞寬度一致。13.比較細菌、放線菌、酵母菌和霉菌的菌落特征異同.微生物類別菌落特征單細胞微生物菌絲狀微生物細菌酵母菌放線菌霉菌主要特征菌落含水形態很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀形態小而凸起或大而平坦大而凸起小而緊密大而疏松或大而致密細胞相互關系單個分散或有一定排列方式單個分散或假絲

11、狀絲狀交織絲狀交織形態特征小而均勻，個別有芽孢大而分化細而均勻粗而分化參考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落與培養基結合程度不結合不結合牢固結合較牢固結合菌落顏色多樣單調，一般呈乳脂或礦燭色，少數紅色或黑色十分多樣十分多樣菌落正反面顏色的差別相同相同一般不同一般不同菌落邊緣一般看不到細胞可見球狀，卵圓狀或假絲狀細胞有時可見細絲狀細胞可見粗絲狀細胞細胞生長速度一般很快較快慢一般較快氣味一般有臭味多帶酒香味常有泥腥味往往有霉味14.病毒區別于其他微生物的主要特征.個體極其微小，能通過細菌濾器無細胞結構，主要成分為核酸（DNA或RNA）和蛋白質，專性活細胞內寄生，以感染態和非感染態兩種

12、狀態交替存在，又稱“分子生物”沒有酶或酶系統極不完全，不能獨立進行代謝活動，只能利用活寄主內現成的代謝系統合成自身的核酸和蛋白質成分以核酸和蛋白質的裝配來實現其大量繁殖每種病毒只含一種核酸，不是DNA，就是RNA對一般抗生素不敏感，但對干擾素敏感在離體條件下,能以無生命的生物大分子狀態長期存在，并可保持其感染活性有些病毒的核酸能整合到宿主基因組中，誘發潛伏性感染15.病毒粒子的衣殼粒有哪些對稱形式，其典型代表種是什么病毒？螺旋對稱：煙草花葉病毒二十面體對稱：腺病毒復合對稱：T4噬菌體16.以大腸桿菌T系列噬菌體為例，闡明病毒的復制（繁殖）過程。什么叫溫和噬菌體、一步生長曲線、前噬菌體？病毒的復

13、制（繁殖）過程：吸附尾絲與宿主特異結合，時間很短宿主表面有多個吸附位點，如300不同噬菌體吸附的位點不同，如脂多糖、脂蛋白、磷壁酸、鞭毛等吸附可以受外界條件的影響，如陽離子、輔助因子、pH、溫度等每一個敏感細胞所能吸附的相應噬菌體的數量稱為感染復數（m.o.i）m.o.i一般可達到250-360，超大m.o.i可引起自外裂解侵入T4噬菌體從吸附到侵入只需15秒吸附引起構象變化，將核酸注入宿主細胞內，而蛋白質外殼留在細胞外如果兩種以上侵入，只有一種得以增殖增殖T4噬菌體的dsDNA早期轉錄早期蛋白酶（RNA）次早期轉錄次早期蛋白酶（DNA）晚期轉錄晚期蛋白（結構蛋白等）成熟（裝配）各個部件自行裝

14、配T4噬菌體需要30種蛋白參與裂解（釋放）水解酶水解細胞膜、細胞壁裂解釋放子代噬菌體大腸桿菌T系列1525minT2位150個，T4為100個溫和噬菌體： 當噬菌體DNA進入細胞后，在宿主與病毒的相互作用下，病毒DNA整合到宿主的DNA上，同宿主DNA 同步復制，這種噬菌體為溫和性噬菌體。 一步生長曲線：定量描述烈性噬菌體生長規律的實驗曲線稱作一步生長曲線。它可以反映噬菌體的3個最重要的特征參數潛伏期、裂解期和裂解量。（少量病毒與敏感細胞接觸，病毒吸附后，高倍稀釋，繼續培養，定時取樣測定培養物中的病毒效價，以感染時間為橫坐標，病毒效價為縱坐標，繪制出病毒特征性的繁殖曲線，即一步生長曲線 ）前噬

15、菌體：整合的DNA 為前噬菌體，或原噬菌體17.病毒粒子的結構與化學組成，亞病毒包括哪幾種，各有何特點？化學組成：核酸和蛋白質，有包膜的病毒還有脂類和糖類結構：衣殼、核心、包膜、刺突亞病毒分類：類病毒：是裸露的、專性活細胞寄生的分子病原體，僅含一個單鏈、環狀、低相對分子質量的RNA分子。類病毒RNA相對分子質量雖小，但能獨立侵染寄主，侵入寄主后也能自我復制，不需要輔助病毒。類病毒目前只在植物中發現，是許多植物病害的病原體。擬病毒：是一類包裹在真病毒粒中的有缺陷的類病毒。 擬病毒的RNA分子單獨存在時不具感染性（不表現致病性），只有與輔助病毒共同存在時，才能完成復制和具有感染性。朊病毒：是一類比

16、病毒小，不含核酸，僅含有疏水的具侵染性并在宿主細胞內復制的小分子蛋白顆粒。朊病毒具有極強的抗逆性；是正常細胞蛋白的改造物；借食物進入消化道，再經淋巴系統進入大腦。18.病毒的群體特征.包含體：某些病毒感染宿主細胞后，在宿主細胞中出現的顯微鏡可見的小體。有的在細胞質（狂犬病毒）；有的在細胞核（皰疹病毒）；有的在細胞核、細胞質都有（麻疹病毒）。噬菌斑：少量烈性噬菌體與大量敏感細胞混合后，涂布在培養基平板上，一定溫度下培養1020h后，可見到嗜菌的透明小圓斑，為噬菌斑。空斑：以單層動物細胞受動物病毒侵染產生的透明斑為空斑。病斑：腫瘤病毒感染單層動物細胞，產生細胞劇增，稱為病斑。枯斑：植物葉片上的植物

17、病毒群體為枯斑。19.微生物的營養類型有哪幾種，比較異同（以氫供體、主要或唯一碳源和能量的劃分為依據）.營養類型能源氫供體主要或唯一碳源實例光能自養型光無機物（如H2、H2S、H2O）CO2藍細菌、藻類光能異養型光有機物（如乙酸、甲醇、異丙醇）CO2及簡單有機物紅螺菌化能自養型無機物無機物（如H2、H2S、Fe2+、亞硝酸鹽）CO2硫化細菌、硝化細菌化能異養型有機物有機物有機物多數細菌、全部真菌20.什么叫微生物的營養？微生物的營養要素有哪些種類？他們各有何功能？微生物的營養：微生物細胞直接同生活環境接觸并不停地從外界環境吸收適當的營養物質，在細胞內合成新的細胞物質和貯藏物質，并儲存能量，微生

18、物從環境中吸收營養物質并加以利用的過程即稱為微生物的營養。營養要素的種類及其功能：碳源：用來構建菌體物質或代謝產物中的碳素骨架的營養物質。氮源：它是微生物細胞蛋白質和核酸的主要成分，微生物利用它在細胞內合成氨基酸和堿基，進而合成蛋白質、核酸等細胞成分，以及含氮的代謝產物。能源：為微生物的生命活動提供最初能量來源的營養物或輻射能。生長因子：微生物維持正常生命活動所不可缺少的、微量的特殊有機營養物，這些物質在微生物自身不能合成，必須在培養基中加入。缺少這些生長因子就會影響各種酶的活性，新陳代謝就不能正常進行。無機鹽：構成細胞的組成成分；作為酶的組成成分；維持酶的活性；調節細胞滲透壓，氫離子濃度和氧

19、化還原電位；作為某些自養菌的能源。水：直接參與一些反應；作為機體內一系列生理生化反應的介質；營養物質的吸收、代謝產物的排泄都需通過水；由于水的比熱高，又是良好的熱導體，所以它能有效地吸收代謝釋放的熱量，并將熱量迅速地散發出去，從而有效地控制細胞的溫度。21.培養基分為哪些類型？什么叫選擇性培養基和鑒別性培養基？分別解釋單純擴散、促進擴散、主動運輸和基團轉位的異同.培養基分類：按培養基的成分分：天然培養基，組合培養基，半組合培養基按培養基外觀的物理狀態分：液體培養基，固體培養基，半固體培養基，脫水培養基按培養基對微生物的功能分：選擇性培養基，鑒別性培養基選擇性培養基：就是根據某種或某一類微生物的

20、特殊營養需要或對某種化合物的敏感性不同而設計出來的一類培養基。利用這種培養基可以將某種或某類培養基從混雜的微生物群體中分離出來。鑒別性培養基：可以用于鑒別某種或某一類微生物的培養基。一般通過加入某些試劑，使得某種或某類微生物的菌落發生顏色變化，便于區別。單純擴散：特點：高濃度低濃度；運送速度慢；無特異載體運送動力：濃度差運送終點：內外濃度相等運送前后溶質分子：結構不變促進擴散：特點：高濃度低濃度；運送速度快；有特異載體運送動力：濃度差運送終點：內外濃度相等運送前后溶質分子：結構不變主動運輸：特點：低濃度高濃度；運送速度快；有特異載體運送動力：消耗能量ATP運送終點：內部濃度高得多運送前后溶質分

21、子：結構不變基團轉位（各種糖類、核苷酸等）：特點：低濃度高濃度；運送速度快；有特異載體 運送動力：消耗能量ATP 運送終點：內部濃度高得多 運送前后溶質分子：結構改變22.微生物的產能方式有哪些？什么叫初級代謝和次級代謝？產能方式：呼吸；無氧呼吸；發酵初級代謝：一類與生物生存有關的、涉及到產能代謝和耗能代謝的代謝類型，普遍存在于一切生物中。次級代謝：某些生物為了避免在初級代謝過程某種中間產物積累所造成的不利作用而產生的一類有利于生存的代謝類型。可以認為是某些生物在一定條件下通過突變獲得的一種適應生存的方式。23.發酵與呼吸的區別。什么叫反硝化作用和硝化作用？區別：電子載體不是將電子直接傳遞給底

22、物降解的中間產物，而是交給電子傳遞系統，逐步釋放出能量后再交給最終電子受體。反硝化作用：反硝化細菌在缺氧條件下，還原硝酸鹽，釋放出分子態氮（N2）或一氧化二氮（N2O）的過程。硝化作用：硝化細菌將氨氧化為硝酸的過程。24. 比較有氧呼吸和無氧呼吸，比較光合細菌和藍細菌的產能方式（即比較循環式光合磷酸化和非循環式光合磷酸化）.比較項目有氧呼吸無氧呼吸不同點反應條件需要O2、酶和適宜的溫度不需要O2，需要酶和適宜的溫度呼吸場所第一階段在細胞質基質中，第二、三階段在線粒體內全過程都在細胞質基質內分解產物CO2和H2OCO2、酒精或乳酸釋放能量較多，1 mol葡萄釋放能量2870 kJ，其中1161

23、kJ轉移至ATP中1 mol葡萄糖釋放能量19665 kJ(生成乳酸)或222 kJ(生成酒精)，其中均有6108 kJ轉移至ATP中相同點其實質都是：分解有機物，釋放能量，生成ATP供生命活動需要相互聯系第一階段(從葡萄糖到丙酮酸)完全相同，之后在不同條件下，在不同的場所沿不同的途徑，在不同的酶作用下形成不同的產物循環式光合磷酸化一種存在于厭氧光合細菌中的利用光能產生ATP的磷酸化反應，是在光驅動下通過電子的循環式傳遞而完成的磷酸化。（在光能的驅動下，電子從菌綠素分子上逐出后，通過類似呼吸鏈的循環回到菌綠素，在此過程中產生了ATP）非循環式光合磷酸化是綠色植物、藻類和藍細菌利用光能產生ATP

24、的磷酸化反應。電子的傳遞途徑屬非循環式。（水通過光解作用產生的電子經過兩個電子傳遞系統接連傳遞，最終將電子傳遞給NADP+產生NADPH2，在傳遞過程中發生光合磷酸化發應）25.單細胞微生物的生長曲線分哪幾個時期？每個時期各有何特點？在微生物的培養過程中，如果要縮短其生長的延遲期，可以在菌種、培養基和其它方面采取哪些措施.延滯期：分裂遲緩、代謝活躍。對數期：A生長速率最大，代時最短。B細胞進行平衡生長C酶系活躍，代謝旺盛。穩定期：A生長速率常數等于零，細胞處于正生長與負生長相等的動態平衡中。B菌體產量達到最高點。衰亡期：該時期死亡的細菌以對數方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分細菌產生抗性也會

25、使細菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。在生產實踐中縮短遲緩期的常用手段：通過遺傳學方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短利用對數生長期的細胞作為種子盡量使接種前后所使用的培養基組成不要相差太大；適當擴大接種量26.什么叫分批培養和同步培養？如何獲得同步培養物？分批培養：將微生物置于一定容積的培養基中，經過培養生長，最后一次收獲。培養基一次加入，不予補充，不再更換。同步培養：使群體中的細胞處于比較一致的生長狀態，生長發育均處于同一階段上，即大多數細胞能同時進行生長或分裂的培養方法。酸纖維素濾膜法是最經典的獲得同步生長的方法：A.將菌液通過硝酸纖維素薄膜，由于細菌與濾膜帶有不同電荷，所以不同生長階段拓

26、細菌均能附著于膜上；B.翻轉薄膜，再用新鮮培養液濾過培養；C.附著于膜上的細菌進行分裂，分裂后的子細胞不與薄膜直接接觸，由于菌體本身的重量，加之它所附著的培養液的重量，便下落到收集器內；D.收集器在短時間內收集的細菌處于同一分裂階段，用這種細菌接種培養，便能得到同步培養物。機械法同步培養物是在不影響細菌代謝的情況下獲得的，因而菌體的生命活必然較為正常。但此法有其局限性，有些微生物即使在相同的發育階段，個體大小也不一致，甚至差別很大，這樣的微生物不宜采用這類方法。27.什么叫混合酸發酵、丁二醇發酵、乙醇發酵、乳酸發酵？混合酸發酵：埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌屬的一些菌通過EMP途徑將葡萄糖轉變成

27、琥珀酸、乳酸、甲酸、乙醇、乙酸、H2和CO2等多種代謝產物，由于代謝產物中含有多種有機酸，故將其稱為混合酸發酵。丁二醇發酵：腸桿菌、沙雷氏菌、和歐文氏菌屬中的一些細菌具有-乙酰乳酸合成酶系而進行丁二醇發酵。乙醇發酵：細菌利用葡萄糖及其他可發酵的糖產生乙醇。乳酸發酵：乳酸細菌能利用葡萄糖及其他相應的可發酵的糖產生乳酸。28. 現有兩支已混淆的菌種試管，已知其中一種為大腸桿菌，另一支為產氣腸桿菌。試用微生物生理生化反應將其區分開來。要求寫出試驗用培養基、實驗原理和簡要的實驗方案（即細菌鑒定中常用的甲基紅反應與伏-普反應原理）.甲基紅反應（M.R.試驗）：實驗原理：細菌糖代謝，會將糖分解后的丙酮酸分

28、解為乙酸，乳酸等，培養基變酸，加入甲基紅試劑，呈紅色。實驗步驟：取3支葡萄糖蛋白胨水培養基，分別標明發酵培養基名稱，所接種的菌名和組號，1支接種大腸桿菌，1支接種產氣桿菌，1支不接種，作為對照。37培養48h，加甲基紅指示劑數滴，觀察結果。呈現紅色者為陽性，呈現黃色者為陰性。實驗結果：大腸桿菌為陽性，產氣腸桿菌為陰性。伏-普反應（V.P.試驗）：實驗原理：細菌糖代謝，會將糖分解后的丙酮酸縮合，脫羧，后變成二乙酰，與蛋白胨中Arg的胍基作用，生成紅色化合物。實驗步驟： 取3支葡萄糖蛋白胨水培養基，分別標明發酵培養基名稱，所接種的菌名和組號，1支接種大腸桿菌，1支接種產氣桿菌，1支不接種

29、，作為對照。37培養48h后，加入40%KOH510滴，然后再加入等量的5%-萘酚溶液，用力振蕩，再放入37溫箱中保溫30min，以加快反應速度。觀察培養基的顏色變化。若培養物呈現紅色，為伏-普反應陽性。實驗結果：大腸桿菌為陰性，產氣腸桿菌為陽性。29.什么叫連續培養？控制連續培養的方法有哪幾種？恒濁連續培養和恒化連續培養的原理和應用各是怎樣的？連續培養：在微生物的整個培養期間，通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續生長下去的一種培養方法。方法：恒濁連續培養：當微生物在恒濁器中培養進入對數期時，不斷從外界加入新鮮培養基，而同時又流出培養物，用光電池信號控制濁度，以維持恒定的細胞

30、密度。恒化連續培養：微生物在恒化器中培養，通過控制恒化器中微生物生長所必需營養物的濃度，以保證微生物持續生長。應用：連續發酵法生產酒精，半連續發酵法生產丙酮、丁醇等。30.試解釋抑制、防腐、化療、死亡、消毒、滅菌這幾個概念.抑制：生長停止，但不死亡防腐：防止或抑制霉腐微生物在食品等物質上的生長化療：殺死或抑制宿主體內的病原微生物死亡：生長能力不可逆喪失消毒：殺死或滅活病原微生物（營養體細胞）滅菌：殺死包括芽孢在內的所有微生物31.以磺胺類藥物為例闡明抗代謝物的作用機理.磺胺類藥物廣泛用于臨床，是由于它們與微生物生長所必需的代謝物對氨基苯甲酸(PABA)間的競爭性抑制作用，細菌生長所必需的對氨基

31、苯甲酸可以自行合成，也可從外界環境中獲得。若自行合成時，正常情況下，對氨基苯甲酸則和二氫喋啶在二氫碟酸合成酶的作用下，合成二氫碟酸，進一步合成二氫葉酸。二氫葉酸再通過二氫葉酸還原酶的作用，生成四氫葉酸。然而磺胺的結構與對氨基苯酸極其相似，在一定條件下，它們競爭性地與二氫碟酸合成酶結合，阻止或取代了對氨基甲酸摻入到葉酸分子中去，從而阻斷了細菌細胞重要組分葉酸的合成。而葉酸是一種輔酶，在氨基酸、維生素的合成中起生要作用，缺乏此酶，細菌細胞活力受到明顯破壞。磺胺抑制細菌的生長是因為許多細菌需要自己合成葉酸而生長。由于人和動物可利用現成的葉酸生活，因此不受磺胺的干擾。葉酸，亦稱蝶酰谷氨酸。32.什么叫

32、石炭酸系數？指在一定時間內被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規定處理時間為10分鐘，而供試菌定為傷寒沙門氏菌。33.常用的消毒、防腐劑及其應用.消毒劑：可殺死微生物，通常用于非生物材料的滅菌或消毒。防腐劑：能殺死微生物或抑制其生長，但對人及動物的體表組織無毒性或毒性低，可作為外用抗微生物藥物。類型名稱及使用方法作用原理應用范圍醇類70%75%乙醇脫水、蛋白質變性皮膚、器皿醛類0.5%10%甲醛蛋白質變性房間、物品消毒（不適合食品廠）2%戊二醛（pH=8）酚類3%5%石炭酸破壞細胞膜、蛋白質變性地面、器具2%來蘇兒皮膚3%5%來蘇兒地面、器具氧化劑0.

33、1%高錳酸鉀氧化蛋白質活性基團，酶失活皮膚、水果、蔬菜3%過氧化氫皮膚、物品表面0.2%0.5%過氧乙酸水果、蔬菜、塑料等重 金 屬 鹽 類0.05%0.1%升汞蛋白質變性、酶失活非金屬器皿2%紅汞變性、沉淀蛋白皮膚、粘膜、傷口0.1%1%硝酸銀蛋白質變性、酶失活皮膚、新生兒眼睛0.1%0.5%硫酸銅防治植物病害表面活性劑0.05%0.1%新潔爾滅蛋白變性、破壞細胞膜皮膚、粘膜、器械0.05%0.1% 杜滅芬皮膚、金屬、棉織品、塑料鹵素及其化合物0.20.5mg/L氯氣破壞細胞膜、蛋白質飲水、游泳池水10%20%漂白粉地面0.5%1%漂白粉水、空氣等2.5%碘酒皮膚染料2%4%龍膽紫與蛋白質的

34、羧基結合皮膚、傷口酸類0.1%苯甲酸食品防腐0.1%山梨酸食品防腐34.青霉素、兩性霉素、制霉菌素、鏈霉素、放線菌素D的作用位點.青霉素：抑制肽尾和肽橋間的轉肽作用兩性霉素：與真菌細胞膜中的固醇類結合制霉菌素：與真菌細胞膜中的固醇類結合鏈霉素：作用于核糖體30S亞基放線菌素D：作用于DNA中的鳥嘌呤35.青霉素的作用機理.作用機理：抑制細胞壁重要組分肽聚糖的合成。青霉素的b-內酰胺換結構與D-Ala的末端結構相似，能占據D-Ala的位置與轉肽酶結合，并將酶滅活，使肽鏈間無法連接，抑制了細胞壁的合成，用于處理革蘭氏陽性菌。36.試述pH對微生物影響機理及溫度對微生物的影響（機理）.pH對微生物影

35、響機理：pH變化引起細胞膜電荷的變化，從而影響微生物對營養物質的吸收，影響代謝過程中酶的活性，改變生長環境中營養物質的可給性及有害物質的毒性。溫度對微生物的影響：影響酶活性，溫度變化影響酶促反應速率，最終影響細胞合成。 影響細胞膜的流動性，溫度高，流動性大，有利于物質的運輸，溫度低，流動性降低，不利于物質運輸，因此，溫度變化影響營養物質的吸收與代謝產物的分泌。 影響物質的溶解度，對生長有影響。37.什么叫間歇滅菌法、巴氏消毒法、高壓蒸汽滅菌法（常規加壓滅菌法）？分別適用哪些物品的滅菌？間歇滅菌法：將待滅菌培養基在80100下蒸煮1560分鐘以殺死其中所有微生物的營養細胞，然后置室溫或37下保溫

36、過夜，使殘留的芽孢萌發，第二天在以同樣方法蒸煮和保溫過夜，如此連續重復3天即可。使用于不耐熱培養基的滅菌。巴氏消毒法：一種低溫滅菌法，一般在6085下處理15秒至30分鐘。用于牛奶、啤酒、果酒和醬油等不能進行高溫滅菌的液體的一種消毒方法，主要目的是殺死其中無芽孢的病原菌，而又不影響其風味。高壓蒸汽滅菌法（常規加壓滅菌法）：將待滅菌物件放置于盛有適量水的加壓蒸汽滅菌鍋內，把鍋內的水加熱煮沸，并把其中原有的空氣徹底驅盡后將鍋密閉。在繼續加熱使鍋內的蒸汽壓逐漸上升，從而達到高于100的溫度。一般應在121（壓力為1千克/厘米²或15磅/英寸²）下維持1520分鐘，也可采用較低的溫

37、度（115，即0.7千克/厘米²或10磅/英寸²）下維持35分鐘。適用于普通培養基、生理鹽水、手術器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌。38.根據微生物與氧的關系，可將微生物分為哪幾種類群？試比較之.好氧菌：專性好氧菌：好氧呼吸產能兼性厭氧菌：以呼吸為主，兼營發酵產能和厭氧呼吸產能微好氧菌：只能在較低的氧分壓下正常生長厭氧菌：耐氧菌：只能以發酵產能，但分子氧無毒害（專性）厭氧菌：只能在無氧條件下生長，氧劇毒39.光波殺菌力最強的波長范圍是？什么叫光復活作用？紫外線的殺菌機理.紫外線：波長在210313nm范圍都有效，最常用的波長是253.7nm左右。以波長260nm的紫

38、外線殺菌力最強。光復活作用：經紫外線照射后的微生物立即暴露于可見光下時，可明顯降低其死亡率的現象，稱為光復活作用。光解酶在黑暗中戰役的識別嘧啶二聚體并與之結合，形成酶-復合物，當給予光照時，酶利用光能將二聚體拆開，恢復原狀，使損傷得到修復。紫外線的殺菌機理：其殺菌作用主要由于紫外線引起核酸形成胸腺嘧啶二聚體，從而干擾了核酸的復制，另外，U.V可使空氣中分子氧變為臭氧，臭氧不穩定，易分解放出新生態氧O有殺菌作用。40.什么叫飾變？飾變與基因突變的區別。飾變：不涉及遺傳物質結構改變而只發生在轉錄、翻譯水平的表型改變。表型的差異只與環境等因素有關。特點：暫時性、不可遺傳性、表現為全部個體的行為。基因

39、突變中遺傳物質改變，導致表型改變。特點：可遺傳的、群體中只極少數個體發生。41.證明核酸是遺傳因子的三個經典實驗.經典轉化實驗；噬菌體感染實驗；植物病毒重建實驗42.什么叫點突變和染色體畸變？什么叫轉換、顛換和移碼突變？基因突變分哪些種類？點突變：一對堿基上的突變。染色體畸變：指一段染色體數目的增減或結構的改變。轉換：即DNA鏈中的一個嘌呤被另一個嘌呤或是一個嘧啶被另外一個嘧啶所置換。顛換：即一個嘌呤被另一個嘧啶或是一個嘧被另一個嘌呤索置換。移碼突變：指誘變劑會使DNA序列中的一個或少數幾個核苷酸發生增添（插入）或缺失，從而使該處后面的全部遺傳密碼的閱讀框架發生改變，并進一步引起轉錄和翻譯錯誤

40、的一類突變。分類：堿基置換；移碼突變；缺失突變；插入突變43.基因突變的特點有哪些？試述證明突變的自發性和不對應性的三個經典實驗，他們分別證明了基因突變的什么特點？特點：不對應性：突變的性狀與突變原因之間無直接的對應關系。自發性：突變可以在沒有人為誘變因素處理下自發地產生。稀有性：突變率低且穩定。獨立性：各種突變獨立發生，不會互相影響。可誘發性：誘變劑可提高突變率。穩定性：變異性狀穩定可遺傳。可逆性：從原始的野生型基因到變異株的突變稱為正向突變，從突變株回到野生型的過程則稱為回復突變。三個經典實驗：變量實驗（又稱波動實驗或彷徨實驗）：大腸桿菌的T1噬菌體（烈性噬菌體）懸液，分兩個大試管，其一分

41、50個培養，其二分一個整體培養；觀察統計抗噬菌體的抗性菌株數量。證明了基因突變的不對應性。涂布實驗：兩培養基保溫5小時后，一個直接噴T1，培養過夜，一個重新涂布后噴T1，培養過夜，觀察。證明了基因突變的自發性。影印實驗：所謂影印培養法，實質上是使在一系列培養皿的相同位置上能出現相同菌落的一種接種培養方法。影印培養實驗工具其基本過程是：把長有許多菌落(可多達數百個)的母種培養皿倒置于包有滅菌絲絨布的木圓柱(直徑略小于培養皿)上，然后可把這一“印章”上的細菌一一接種到不同的選擇性培養基平板上，待培養后，對各皿相同位置上的菌落作對比后，就可選出適當的突變型。據報道，用這種方法，可把母平板上1020%

42、的細菌轉移到絨布上，并可利用它接種8個子培養皿。因此，通過影印培養法，可以從在非選擇性條件下生長的細菌群體中，分離出各種類型的突變種。證明了基因突變的不對應性。44.如何篩選營養缺陷型微生物？什么叫原養型、營養缺陷型、完全培養基、補充培養基和基本培養基？營養缺陷型的篩選：誘變劑處理淘汰野生型：抗生素法、菌絲過濾法檢出缺陷型：夾層培養法、限量補充培養法、逐個檢出法、影印平板法鑒定缺陷型：生長譜法、組合營養物法、組合補充培養基法原養型：指營養缺陷型突變菌株回復突變或重組后產生的菌株，與野生型的表型相同。營養缺陷型：誘變處理野生型菌株后，由于喪失某酶合成能力的突變，只有在加有該酶的培養基中才能生長的

43、菌株。完全培養基（CM）：滿足一切營養缺陷型菌株生長的天然或半合成培養基。補充培養基(SM)：在基本培養基中有針對性地加入一或幾種營養成分以滿足相應營養缺陷型菌株生長的合成培養基。基本培養基(MM)：凡是能滿足野生型菌株營養要求的最低成分的合成培養基。45.什么叫Ames試驗？原理：用遺傳學方法培植一種不能自行制造組氨酸的鼠傷寒沙門氏菌的變異體，這種菌株在無組氨酸的培養基中不能生長。如果將這種菌株與化學致癌物一起培養，則可使其DNA（脫氧核糖核酸）再次突變，恢復到能制造組氨酸的原型（野生型），即在無組氨酸的培養基中也能生長。利用這一特征性變化來測試化學物質有無致突變作用，并根據生長的菌落數目還

44、可以判定其致癌性的強弱。化學藥劑對細菌的誘變率與其對動物的致癌性成正比。46.原核微生物的基因重組方式有哪幾種？原核生物的基因重組有轉化、轉導、接合和原生質體融合等方式47.什么叫轉化？轉化子、感受態、轉染？轉化：受體菌直接吸收來自供體菌的游離DNA片段，并把它整合到自己的基因組中，而獲得部分新的遺傳性狀的基因轉移過程，稱為轉化。轉化子：轉化后的受體菌稱為轉化子。感受態：受體細胞能從環境吸取外源DNA片段并實現其轉化的一種生理狀態。轉染：把噬菌體或其它病毒的DNA（或RNA）抽提出來，讓它去感染感受態的宿主細胞，并進而產生正常的噬菌體或病毒的后代，這種現象稱為轉染。48.什么叫轉導、普遍性轉導

45、、完全普遍轉導、流產轉導、局限轉導、溶源轉變？比較完全普遍轉導與流產轉導的異同.轉導：以溫和噬菌體為媒介，將供體細胞的DNA片段攜帶到受體細胞中，通過交換與整合，從而使后者獲得前者部分遺傳性狀的現象，稱為轉導。普遍性轉導：通過完全缺陷噬菌體對供體菌任何DNA小片段的“誤包”而實現其遺傳性狀傳遞至受體菌的轉導現象，稱為普遍性轉導。完全普遍轉導：在普遍轉導過程中，如果導入的外源DNA片段與受體細胞核染色體組上的同源區段配對，并可通過雙交換而整合到受體菌染色體組上，使后者成為一個遺傳性狀穩定的轉導子，就稱為完全普遍轉導。流產轉導：經普遍轉導而獲得了供體菌DNA片段的受體菌，如果外源DNA在其內既不進

46、行交換、整合和復制，也不迅速消失，而僅進行轉錄、轉譯和性狀表達的現象，稱為流產轉導。局限轉導：指通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數特定基因攜帶到受體菌中，并與后者的基因組整合、重組，形成局限轉導子的現象。溶源轉變：當正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發生溶源化時，因噬菌體基因整合到宿主的核基因組上，而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現象，稱溶源轉變。比較異同：完全普遍轉導：供體菌野生型（鼠傷寒沙門氏菌 ）；受體菌各種營養缺陷型；完全缺陷型噬菌體P22，感染復數<1， 由于一個受體細胞只感染了一個完全缺陷噬菌體，故受體細胞不會發生往常的溶源化，也不顯示其免疫性，更不會裂解和產生正常的噬菌體；而由于導入的外源DNA片段可與受體細胞核染色體組上的