1、菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng) 植物的組織培養(yǎng)又叫植物的組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)，指植物的，指植物的組織組織、器官或細(xì)胞等（器官或細(xì)胞等（外植體外植體課本課本34頁旁欄頁旁欄）在）在離離體條件體條件下，通過下，通過無菌無菌操作，在操作，在人工控制條件人工控制條件下下（一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條（一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件）進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的件）進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株完整植株或生產(chǎn)具或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。 基礎(chǔ)知識(shí)基礎(chǔ)知識(shí)一、一、植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)1、概念、概念概念：概念：原因：原因：全能性大小：全能性大小：2、

2、植物組織培養(yǎng)原理、植物組織培養(yǎng)原理：植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性是指細(xì)胞的全能性是指已分化已分化的細(xì)胞具有的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的發(fā)育成完整個(gè)體的潛能潛能。生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有該物種生生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有該物種生長(zhǎng)、發(fā)育、遺傳變異的長(zhǎng)、發(fā)育、遺傳變異的全套遺傳物質(zhì)全套遺傳物質(zhì)受精卵受精卵 生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞植物細(xì)胞植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞分裂能力強(qiáng)分裂能力強(qiáng) 分裂能力弱分裂能力弱什么叫分化？（其實(shí)質(zhì)是什么來著什么叫分化？（其實(shí)質(zhì)是什么來著?）什么叫脫（去）分化、再分化？什么叫脫（去）分化、再分化？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？如何控

3、制細(xì)胞的脫分化與去分化？如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？ （閱讀（閱讀32-33頁第一段解決下列問題頁第一段解決下列問題）二、植物組織培養(yǎng)的基本過程二、植物組織培養(yǎng)的基本過程二、植物組織培養(yǎng)的基本過程二、植物組織培養(yǎng)的基本過程 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 概念：概念：實(shí)質(zhì)：實(shí)質(zhì)：特點(diǎn)：特點(diǎn)：細(xì)胞分化細(xì)胞分化個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)或功能上產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)或功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。基因的選擇性表達(dá)基因的選擇性表達(dá)普遍性普遍性持久性持久性穩(wěn)定性穩(wěn)定性不可逆性不可逆性

4、 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：1、植物材料（外植體）的選取、植物材料（外植體）的選取（1）不同植物的組織培養(yǎng)難易程度不同）不同植物的組織培養(yǎng)難易程度不同 什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？（2）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同 什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？容易進(jìn)行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜容易進(jìn)行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜幼齡、保存時(shí)間短的組織幼齡、保存時(shí)間短的組織菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料？菊花的

5、組織培養(yǎng)一般選用何種材料？未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝2、營(yíng)養(yǎng)成分（培養(yǎng)基）、營(yíng)養(yǎng)成分（培養(yǎng)基）（1）植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基？）植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基？ MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基大量元素大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機(jī)物有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖蔗糖等等 （2）MS培養(yǎng)基的主要成分？培養(yǎng)基的主要成分？培養(yǎng)基中的各種成分的作用是什么？培養(yǎng)基中的各種成分的作用是什么？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需要的各種無機(jī)大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需要的各

6、種無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源的同時(shí)維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、鹽；蔗糖提供碳源的同時(shí)維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細(xì)胞的特殊營(yíng)養(yǎng)維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細(xì)胞的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)需求物質(zhì)需求課本課本33頁旁欄思考：頁旁欄思考：微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營(yíng)養(yǎng)3、植物激素、植物激素（1）關(guān)鍵激素是什么？）關(guān)鍵激素是什么？（2）兩種激素的不同使用順序出現(xiàn)不同結(jié)果）兩種激素的不同使用順序出現(xiàn)不同結(jié)果（3）兩種激素的不同用量出現(xiàn)不同結(jié)果）兩種激素的不同用量出現(xiàn)不同結(jié)果4、pH、溫度、光照等、溫度、光照等 菊花組

7、織培養(yǎng)的菊花組織培養(yǎng)的PH？溫度？光照？溫度？光照？5、無菌環(huán)境、無菌環(huán)境菊菊花花的的組組織織培培養(yǎng)養(yǎng)再分化再分化材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件基本原理基本原理:細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性基本過程基本過程:脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織影響因素：影響因素：制備制備MS固固體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養(yǎng)養(yǎng)栽栽 培培四、實(shí)驗(yàn)操作四、實(shí)驗(yàn)操作 移移 栽栽流水流水沖洗沖洗無菌紙吸干無菌紙吸干70%酒精酒精無無菌水菌水沖洗沖洗無菌紙吸干無菌紙吸干0.1%氯化氯化汞汞無菌水無菌水沖洗至少三次之上沖洗至少三次之上（流水是為消毒嗎？能消毒的是

8、什么？（流水是為消毒嗎？能消毒的是什么？無菌水沖洗是為了干啥？）無菌水沖洗是為了干啥？）（哪（哪6步？）步？）1、配制各種母液、配制各種母液（大量元素、微量元素（大量元素、微量元素各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）2、配制培養(yǎng)基、配制培養(yǎng)基（菊花組培是否添加植物激（菊花組培是否添加植物激素？）素？）3、滅菌、滅菌（哪種滅菌方法？）（哪種滅菌方法？）注意接種時(shí)的各種無菌操作。注意接種時(shí)的各種無菌操作。將菊花莖段插入培養(yǎng)基時(shí)特別應(yīng)注意什么？將菊花莖段插入培養(yǎng)基時(shí)特別應(yīng)注意什么？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？直接移栽

9、到土壤中嗎？直接移栽到土壤中嗎？1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間在整個(gè)操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)在整個(gè)操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌無菌環(huán)境的？環(huán)境的？35頁旁欄思考：頁旁欄思考：至少做一組以上的重復(fù)。對(duì)照實(shí)驗(yàn)用一個(gè)不接至少做一組以上的重復(fù)。對(duì)照實(shí)驗(yàn)用一個(gè)不接種的空白培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基一同培養(yǎng)，用種的空白培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基一

10、同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。結(jié)果分析與評(píng)價(jià)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格課題延伸（略）練習(xí)練習(xí)1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物抗性差，對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的組

11、織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。2.答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。菊菊花花的的組組織織培培養(yǎng)養(yǎng)再分化再分化材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件外植體的消毒外植

12、體的消毒接種接種基本原理基本原理:細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性基本過程基本過程:脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織影響因素：影響因素：操作流程：操作流程：配制配制MS固體培固體培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)培養(yǎng)移栽移栽栽培栽培1.下列關(guān)于愈傷組織的說法中不正確的是下列關(guān)于愈傷組織的說法中不正確的是( )A.愈傷組織的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂愈傷組織的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂B.用葉培養(yǎng)形成的愈傷組織細(xì)胞能夠進(jìn)行光合作用用葉培養(yǎng)形成的愈傷組織細(xì)胞能夠進(jìn)行光合作用C.培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)養(yǎng)料培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)養(yǎng)料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物人們可以從愈傷組織中提取所需物質(zhì)B2.植物組織培養(yǎng)過程中的

13、脫分化是指植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是指 A.植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B.未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程C.植物的器官、組織或細(xì)胞，通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈植物的器官、組織或細(xì)胞，通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程取植物的枝芽培育成一株新植物的過程C3 胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過組織培養(yǎng)，能發(fā)育成新的植株。下列有關(guān)的敘述中，不正確的是 （ ）A說明高度分化的植物細(xì)胞具有全能性 B植物細(xì)胞的全能性得以表達(dá)要離開母體C新植株的形成是細(xì)胞分裂和分化的結(jié)果 D高度分化的動(dòng)物

14、細(xì)胞也具有全能D4 甘薯種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。甘薯種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質(zhì)和產(chǎn)量速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質(zhì)和產(chǎn)量水平。這種通過分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過水平。這種通過分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過程不涉及細(xì)胞的程不涉及細(xì)胞的 A.有絲分裂有絲分裂B.分化分化 C.減數(shù)分裂減數(shù)分裂D.全能性全能性C 5、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的 A.消毒滅菌