1、菊花的組織培養菊花的組織培養 植物的組織培養又叫植物的組織培養又叫離體培養離體培養，指植物的，指植物的組織組織、器官或細胞等（器官或細胞等（外植體外植體課本課本34頁旁欄頁旁欄）在）在離離體條件體條件下，通過下，通過無菌無菌操作，在操作，在人工控制條件人工控制條件下下（一定的營養物質、激素、溫度等其他外界條（一定的營養物質、激素、溫度等其他外界條件）進行培養以獲得再生的件）進行培養以獲得再生的完整植株完整植株或生產具或生產具有經濟價值的其他產品的技術。有經濟價值的其他產品的技術。 基礎知識基礎知識一、一、植物組織培養植物組織培養1、概念、概念概念：概念：原因：原因：全能性大小：全能性大小：2、

2、植物組織培養原理、植物組織培養原理：植物細胞的全能性植物細胞的全能性細胞的全能性是指細胞的全能性是指已分化已分化的細胞具有的細胞具有發育成完整個體的發育成完整個體的潛能潛能。生物體的每一個細胞都具有該物種生生物體的每一個細胞都具有該物種生長、發育、遺傳變異的長、發育、遺傳變異的全套遺傳物質全套遺傳物質受精卵受精卵 生殖細胞生殖細胞 體細胞體細胞植物細胞植物細胞 動物細胞動物細胞分裂能力強分裂能力強 分裂能力弱分裂能力弱什么叫分化？（其實質是什么來著什么叫分化？（其實質是什么來著?）什么叫脫（去）分化、再分化？什么叫脫（去）分化、再分化？愈傷組織的細胞有什么特點？愈傷組織的細胞有什么特點？如何控

3、制細胞的脫分化與去分化？如何控制細胞的脫分化與去分化？ （閱讀（閱讀32-33頁第一段解決下列問題頁第一段解決下列問題）二、植物組織培養的基本過程二、植物組織培養的基本過程二、植物組織培養的基本過程二、植物組織培養的基本過程 離體器官、 組織或細胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 概念：概念：實質：實質：特點：特點：細胞分化細胞分化個體發育中，由一個或一種細胞增殖個體發育中，由一個或一種細胞增殖產生的后代，在形態、結構或功能上產生的后代，在形態、結構或功能上發生穩定性差異的過程。發生穩定性差異的過程。基因的選擇性表達基因的選擇性表達普遍性普遍性持久性持久性穩定性穩定性不可逆性不可逆性

4、 離體器官、 組織或細胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 三、影響植物組織培養的因素：三、影響植物組織培養的因素：1、植物材料（外植體）的選取、植物材料（外植體）的選取（1）不同植物的組織培養難易程度不同）不同植物的組織培養難易程度不同 什么樣的植物容易進行組織培養？什么樣的植物容易進行組織培養？（2）同一種植物的不同組織培養難度不同）同一種植物的不同組織培養難度不同 什么樣的組織容易進行組織培養？什么樣的組織容易進行組織培養？容易進行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜容易進行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜幼齡、保存時間短的組織幼齡、保存時間短的組織菊花的組織培養一般選用何種材料？菊花的

5、組織培養一般選用何種材料？未開花植物的莖上部新萌生的側枝未開花植物的莖上部新萌生的側枝2、營養成分（培養基）、營養成分（培養基）（1）植物組織培養常用的培養基？）植物組織培養常用的培養基？ MS培養基培養基大量元素大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機物有機物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖蔗糖等等 （2）MS培養基的主要成分？培養基的主要成分？培養基中的各種成分的作用是什么？培養基中的各種成分的作用是什么？大量元素和微量元素提供植物細胞需要的各種無機大量元素和微量元素提供植物細胞需要的各

6、種無機鹽；蔗糖提供碳源的同時維持細胞滲透壓；甘氨酸、鹽；蔗糖提供碳源的同時維持細胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質主要是滿足離體植物細胞的特殊營養維生素等物質主要是滿足離體植物細胞的特殊營養物質需求物質需求課本課本33頁旁欄思考：頁旁欄思考：微生物培養基以有機營養為主，微生物培養基以有機營養為主，MS培養基則需提供大量無機營養培養基則需提供大量無機營養3、植物激素、植物激素（1）關鍵激素是什么？）關鍵激素是什么？（2）兩種激素的不同使用順序出現不同結果）兩種激素的不同使用順序出現不同結果（3）兩種激素的不同用量出現不同結果）兩種激素的不同用量出現不同結果4、pH、溫度、光照等、溫度、光照等 菊花組

7、織培養的菊花組織培養的PH？溫度？光照？溫度？光照？5、無菌環境、無菌環境菊菊花花的的組組織織培培養養再分化再分化材料性質、營養物質、材料性質、營養物質、調節物質、環境條件調節物質、環境條件基本原理基本原理:細胞的全能性細胞的全能性基本過程基本過程:脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織影響因素：影響因素：制備制備MS固固體培養基體培養基外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養養栽栽 培培四、實驗操作四、實驗操作 移移 栽栽流水流水沖洗沖洗無菌紙吸干無菌紙吸干70%酒精酒精無無菌水菌水沖洗沖洗無菌紙吸干無菌紙吸干0.1%氯化氯化汞汞無菌水無菌水沖洗至少三次之上沖洗至少三次之上（流水是為消毒嗎？能消毒的是

8、什么？（流水是為消毒嗎？能消毒的是什么？無菌水沖洗是為了干啥？）無菌水沖洗是為了干啥？）（哪（哪6步？）步？）1、配制各種母液、配制各種母液（大量元素、微量元素（大量元素、微量元素各濃縮多少倍？用量較小的有機物呢？）各濃縮多少倍？用量較小的有機物呢？）2、配制培養基、配制培養基（菊花組培是否添加植物激（菊花組培是否添加植物激素？）素？）3、滅菌、滅菌（哪種滅菌方法？）（哪種滅菌方法？）注意接種時的各種無菌操作。注意接種時的各種無菌操作。將菊花莖段插入培養基時特別應注意什么？將菊花莖段插入培養基時特別應注意什么？最好在哪兒培養？溫度？光照？定期消毒？最好在哪兒培養？溫度？光照？定期消毒？直接移栽

9、到土壤中嗎？直接移栽到土壤中嗎？1、培養基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）灼燒）4、無菌箱中的培養；、無菌箱中的培養；5、移栽到消過毒的環境中生存一段時間、移栽到消過毒的環境中生存一段時間在整個操作過程中，是如何來實現在整個操作過程中，是如何來實現無菌無菌環境的？環境的？35頁旁欄思考：頁旁欄思考：至少做一組以上的重復。對照實驗用一個不接至少做一組以上的重復。對照實驗用一個不接種的空白培養基與接種的培養基一同培養，用種的空白培養基與接種的培養基一

10、同培養，用以說明培養基制作合格，沒有被雜菌污染。以說明培養基制作合格，沒有被雜菌污染。結果分析與評價結果分析與評價（一）對接種操作中污染情況的分析（一）對接種操作中污染情況的分析（二）是否完成了對植物組織的脫分化和再分化（二）是否完成了對植物組織的脫分化和再分化（三）是否進行了統計、對照與記錄（三）是否進行了統計、對照與記錄（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格課題延伸（略）練習練習1.答：植物組織培養所利用的植物材料體積小、答：植物組織培養所利用的植物材料體積小、抗性差，對培養條件的要求較高。用于植物抗性差，對培養條件的要求較高。用于植物組織培養的培養基同樣適合于某些微生物的組

11、織培養的培養基同樣適合于某些微生物的生長，如一些細菌、真菌等的生長。而培養生長，如一些細菌、真菌等的生長。而培養物一旦受到微生物的污染，就會導致實驗前物一旦受到微生物的污染，就會導致實驗前功盡棄，因此要進行嚴格的無菌操作。功盡棄，因此要進行嚴格的無菌操作。2.答：外植體的生理狀態是成功進行組織培養答：外植體的生理狀態是成功進行組織培養的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導脫分化和再分化。好，容易誘導脫分化和再分化。菊菊花花的的組組織織培培養養再分化再分化材料性質、營養物質、材料性質、營養物質、調節物質、環境條件調節物質、環境條件外植體的消毒外植

12、體的消毒接種接種基本原理基本原理:細胞的全能性細胞的全能性基本過程基本過程:脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織影響因素：影響因素：操作流程：操作流程：配制配制MS固體培固體培養基養基培養培養移栽移栽栽培栽培1.下列關于愈傷組織的說法中不正確的是下列關于愈傷組織的說法中不正確的是( )A.愈傷組織的細胞能夠進行細胞分裂愈傷組織的細胞能夠進行細胞分裂B.用葉培養形成的愈傷組織細胞能夠進行光合作用用葉培養形成的愈傷組織細胞能夠進行光合作用C.培養愈傷組織的培養基中應含有有機養料培養愈傷組織的培養基中應含有有機養料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物人們可以從愈傷組織中提取所需物質B2.植物組織培養過程中的

13、脫分化是指植物組織培養過程中的脫分化是指 A.植物體的分生組織通過細胞分裂產生新細胞植物體的分生組織通過細胞分裂產生新細胞B.未成熟的種子經過處理培育出幼苗的過程未成熟的種子經過處理培育出幼苗的過程C.植物的器官、組織或細胞，通過離體培養產生愈植物的器官、組織或細胞，通過離體培養產生愈傷組織的過程傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程取植物的枝芽培育成一株新植物的過程C3 胡蘿卜的韌皮部細胞通過組織培養，能發育成新的植株。下列有關的敘述中，不正確的是 （ ）A說明高度分化的植物細胞具有全能性 B植物細胞的全能性得以表達要離開母體C新植株的形成是細胞分裂和分化的結果 D高度分化的動物

14、細胞也具有全能D4 甘薯種植多年后易積累病毒而導致品種退化。甘薯種植多年后易積累病毒而導致品種退化。目前生產上采用莖尖分生組織離體培養的方法快目前生產上采用莖尖分生組織離體培養的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質和產量速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質和產量水平。這種通過分生組織離體培養獲得種苗的過水平。這種通過分生組織離體培養獲得種苗的過程不涉及細胞的程不涉及細胞的 A.有絲分裂有絲分裂B.分化分化 C.減數分裂減數分裂D.全能性全能性C 5、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的 A.消毒滅菌