1、常用的病毒學診斷方法包括：常用的病毒學診斷方法包括：病毒的分離鑒定病毒的分離鑒定病毒的血清學檢查病毒的血清學檢查病毒蛋白和核酸的檢測病毒蛋白和核酸的檢測第一節 病毒感染的診斷二、病毒的分離與鑒定二、病毒的分離與鑒定(一) 病毒的分離1.動物接種動物接種 是最原始的病毒培養方法，根據病毒種是最原始的病毒培養方法，根據病毒種類不同，選擇敏感動物及適宜接種部位，類不同，選擇敏感動物及適宜接種部位，如嗜如嗜 神經性病毒（狂犬病毒）可接種神經性病毒（狂犬病毒）可接種于小鼠腦內，痘病毒可接種于家兔角膜于小鼠腦內，痘病毒可接種于家兔角膜或皮內。或皮內。2.雞胚培養雞胚培養 雞胚對多種病毒敏感。一般采用孵化雞

2、胚對多種病毒敏感。一般采用孵化914天的雞胚，根據病毒種類不同，天的雞胚，根據病毒種類不同，將病毒標本將病毒標本 接種于雞胚的不同部位，接種于雞胚的不同部位，最常用的雞胚接種部位有：羊膜腔、尿最常用的雞胚接種部位有：羊膜腔、尿囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。囊腔、絨毛尿囊膜和卵黃囊等。3.組織培養法組織培養法 (tissueculture) 或細胞或細胞培養培養 (cellculture)法法 是將離體活組織塊或分散的組織細胞加是將離體活組織塊或分散的組織細胞加以培養的技術總稱，為病毒分離鑒定中以培養的技術總稱，為病毒分離鑒定中的最常用的基本方法。的最常用的基本方法。1. 細胞的變化細胞的變化 有

3、些病毒在細胞內增殖時可引起特有的細胞病變，稱為細胞病變效應 (cpe)。常見的變化有細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等。 有些病毒如麻疹病毒、cmv、rsv等 作用于細胞膜，可使鄰近的細胞相互融合，形成多核巨細胞或稱融合細胞。 有些病毒 (如狂犬病病毒、麻疹病毒等) 可在培養細胞中形成胞漿或核內的包涵體。 病毒在培養細胞中增殖的指標病毒在培養細胞中增殖的指標病毒培養時出現的cpe1.中和試驗中和試驗(neutralizing test,nt test) 是病毒在活體內或細胞培養中被特異性抗體中和而失去感染性的一種試驗。 中和抗體(netralizing antibodies,ntab)是作用于

4、病毒表面抗原 (衣殼或包膜) 的抗體，同種不同型病毒間一般無交叉，特異性高，而且抗體在體內維持時間長。中和抗體陽性不一定表示正在感染中，也可能因以前有過隱性感染所致。因此，中和試驗適用于人群免疫情況的調查，在臨床診斷上較少使用。2.補體結合試驗補體結合試驗 (complement fixation test,cf test) 用已知病毒可溶性(cf)抗原來檢測病人血清中相應(cf)抗體。cf抗原是病毒的內部抗原，同種異型間常有交叉，故特異性較中和試驗低。但cf抗體出現較早，消失較快，故cf陽性可作為近期感染的指標。減毒活疫苗與死疫苗優缺點比較特點減毒活疫苗死疫苗制備方法通過非正常培養減毒株通過

5、化學物理方法使感染失活免疫接種一般為一次性多次免疫疫苗的穩定性相對不穩定相對穩定免疫的類型體液免疫和細胞免疫體液免疫毒力回升有可能不可能安全性對免疫缺陷者有危險安全性好生產和成本生產較復雜、成本高生產簡單、成本低一、抗病化學制劑一、抗病化學制劑（一）核苷類藥物 核苷類藥物的作用機制有主要是抑制病毒基因復制模擬核苷成分摻入病毒基因組：合成的異常嘧啶取代病毒dna前體的胸腺嘧啶，病毒在復制過程中，這種異常的嘧啶分子摻入子代dna中使子代病毒結構基因的合成和表達無法進行，從而抑制病毒的復制，或復制出的病毒為缺陷病毒。 競爭病毒復制酶1.無環鳥苷 (acyclovir,acv，阿昔洛韋)和丙氧鳥苷（g

6、anciclovir gcv，庚昔洛韋）為鳥嘌呤或脫氧鳥嘌呤核苷類似物。 該藥細胞毒性很小，是目前最有效的抗皰疹病毒藥物之一。廣泛用于皰疹病毒感染引起的單純皰疹、生殖器皰疹及帶狀皰疹。2.疊氮胸苷 (azidothymidine,azt) 胸腺嘧啶核苷類似物，通過阻斷前病毒dna的合成而抑制hiv的復制，azt對病毒逆轉錄酶的抑制比對細胞dna多聚酶敏感100倍以上。可以有效地降低aids的發病率與病死率。耐藥株的出現系由基因突變導致逆轉錄酶具有耐藥性。因有抑制骨髓作用和形成病毒的耐藥而面臨被淘汰。3.病毒唑 對多種rna和dna病毒的復制都有抑制作用，但主要用于rna病毒感染的治療，對細胞的

7、核酸也有抑制作用。目前臨床主要用于流感病毒和呼吸道合胞病毒的治療。1賽科納瓦(saquinavir) 1995年批準的第1個蛋白酶抑制劑。 2英迪納瓦（indinavir）、瑞托納瓦（ritonavir）是1996年批準的新一代蛋白酶抑制劑，用于hiv。 （五）其他抗病毒藥物（五）其他抗病毒藥物1.金剛烷胺和甲基金剛烷胺 金剛烷胺為合成胺類，甲基金剛烷胺是其衍生物，兩者有相同的抗病毒譜和副作用，能阻止脫殼，主要用于治療甲型流感。2.甲酸磷霉素 無機焦磷酸鹽的有機類似物，抑制多種皰疹病毒，包括cmv、hsv、vzv、ebv、hhv6，可能還對hbv和逆轉錄病毒有作用。選擇性抑制病毒dna多聚酶和逆轉錄酶，而對宿主細胞無影響。 二、干擾素和干擾素誘生劑的應用二、干擾素和干擾素誘生劑的應用1. 干擾素(ifn) 具有廣譜抗病毒作用，毒性小，使用同種ifn無抗原性，主要用于甲、乙、丙型肝炎，hsv，乳頭瘤病毒和鼻病毒等感染的治療。反復應用也會引起耐藥性。2. ifn誘生劑 如： poly i c、甘草甜素、蕓芝多糖 。 三、中草藥防治病毒感染三