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文檔簡介

1、生化檢驗技術基礎與進展一、比色分析波長的選擇可見綠色帶黃深黃桔紅深紅深紫青紫紫藍藍色帶綠綠色帶藍深綠ultra-violet紫外200400深紫深紅桔紅深黃綠色帶黃暗綠綠色帶藍藍色帶綠紫藍青紫被測溶液顏色顏色750800610750595610560580580595500560490500480490435480400435波長(nm)比色法舉例蛋白質中的肽鍵+cu 2+ 堿性條件 紫紅色絡合物引起在波長540二、分光光度計 雙波長分光光度計三、酶法分析酶催化特點高度的特異性高催化效率作用條件溫和酶的活性部位底物結合部位催化部位酶的輔助因子金屬離子輔基和輔酶nad ，nadp酶的分類1. 氧

2、化還原酶2. 轉移酶3. 水解酶4. 裂合酶5. 異構酶6. 合成酶酶的系統命名應將酶的一種或兩種底物以及催化反應的性質明確標明。乳酸脫氫酶 l-乳酸：nad+氧化還原酶肌酸激酶 atp：肌酸磷酸轉移酶酶的活性單位一國際單位為在一分鐘內催化轉變1個微摩爾的反應物的酶量.iuu u/l1katal為每秒鐘轉化1mole底物的酶量1國際單位=16.67nkatal1katal=6107國際單位酶活性測定影響酶活性測定：底物、激活劑、抑制劑、緩沖液、ph、溫度、酶濃度。在最適條件下以求達到最大的反應速度。但由于底物的溶解度低，或售價太高，或需連鎖的酶反應，則必須對測定條件作修正。酶活性測定的最適條件

3、酶促反應的兩個階段 反應級數 0級 1級 p 酶反應進程和酶濃度曲線 酶量e 40 1.e越大，線性反 產 應期越短 物 2.e相同，s越小， p 20 線性反應期越短 10 5 0 5 10 15 20 時間(min)酶反應時間曲線 時間(min) 5(t0) 反應時間越短， 10(t1) 線性范圍越大 15(t2) 20(t3) 0 10 20 30 40 酶量e米氏方程e + sese + pkkkk+1+2-2-1v=vskm+sv v2s km米氏曲線svvmaxkmvmax 2kmkm酶活性測定的基本知識連續監測法的測定時間 吸 光 度 a3 a2 a1 t1 t2 t3 t4 時間定時法與連續法比較（一）工具酶及酶偶聯反應ab 酶1 cdc（或d）e 酶2 fgf（或g）h 酶3 ij酶1：待測酶酶2：輔助酶酶3：指示酶e、h：輔助底物 （二）常用監測物質的特性max ：340nmmax：405nm（三）酶法分析的類型例：測定血清中肝素（2）偶聯反應的基本動力學 s ex p1 ei p2 a 延遲期 恒態期 非恒態期 1.5 1.0 （四）酶活性濃度的計算 a常數k值的意義和設置常數k值的檢驗單試劑、雙試劑、液體試劑自動生化分析儀主要參數四、免疫濁度分析法抗原-抗體沉淀反應的特征五、方法學評價

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