1、第四章第四章 食品分析檢驗的一般方法食品分析檢驗的一般方法第一節第一節 食品感官檢驗法食品感官檢驗法第二節第二節 食品物理檢驗法食品物理檢驗法第三節第三節 食品化學分析法食品化學分析法 第四節第四節 食品的儀器分析法食品的儀器分析法第五節第五節 食品的微生物檢驗法食品的微生物檢驗法第六節第六節 其他檢驗技術其他檢驗技術 第七節第七節 分析方法的選擇分析方法的選擇第一節第一節 食品感官檢驗法食品感官檢驗法一、感官檢驗的意義一、感官檢驗的意義 食品的感官檢驗是通過人的感覺食品的感官檢驗是通過人的感覺味覺、嗅覺、味覺、嗅覺、視覺、觸覺，以語言、文字、符號作為分析數據視覺、觸覺，以語言、文字、符號作為

2、分析數據對食品的色澤、風味、氣味、組織狀態、硬度等對食品的色澤、風味、氣味、組織狀態、硬度等外部特征進行評價的方法。外部特征進行評價的方法。或者說是根據食品的外部特征或者說是根據食品的外部特征(如顏色、氣味如顏色、氣味等等)直接作用于人體感覺器官所引起的反映而直接作用于人體感覺器官所引起的反映而對食品進行檢驗的方法，感官檢驗是與儀器對食品進行檢驗的方法，感官檢驗是與儀器分析并行的重要檢測手段分析并行的重要檢測手段。 感官檢驗在食品生產中的原材料和成品質量控感官檢驗在食品生產中的原材料和成品質量控制、食品的貯藏和保鮮、新產品開發、市場調制、食品的貯藏和保鮮、新產品開發、市場調查等方面具有重要的意

3、義和作用。查等方面具有重要的意義和作用。 二、感官檢驗的種類二、感官檢驗的種類 通過被檢驗物作用于視覺器官所引起的反應通過被檢驗物作用于視覺器官所引起的反應對食品進行評價的方法稱為視覺檢驗。對食品進行評價的方法稱為視覺檢驗。 在感官檢驗中，視覺檢驗占有重要位置，幾在感官檢驗中，視覺檢驗占有重要位置，幾乎所有產品的檢驗都離不開視覺檢驗。視覺乎所有產品的檢驗都離不開視覺檢驗。視覺檢驗即用肉眼觀察食品的形態特征。檢驗即用肉眼觀察食品的形態特征。 （一）視覺檢驗（一）視覺檢驗（二）嗅覺檢（二）嗅覺檢驗驗 嗅覺是辨別各種氣味的感覺，人的嗅覺非常嗅覺是辨別各種氣味的感覺，人的嗅覺非常靈敏，有時用一般方法和

4、儀器不能檢測出來靈敏，有時用一般方法和儀器不能檢測出來的輕微變化，用嗅覺檢驗可以發現的輕微變化，用嗅覺檢驗可以發現。 嗅覺器官長時間受氣味濃的物質刺激會疲勞，嗅覺器官長時間受氣味濃的物質刺激會疲勞，靈敏度降低，因此，檢驗時應由淡氣味到濃靈敏度降低，因此，檢驗時應由淡氣味到濃氣味的順序進行，檢驗一段時間后，應休息氣味的順序進行，檢驗一段時間后，應休息一會。一會。（三）味覺檢驗（三）味覺檢驗 味覺是由舌面和口腔內味覺細胞味覺是由舌面和口腔內味覺細胞(味蕾味蕾)產生的，產生的，基本味覺有基本味覺有酸、甜、苦、咸酸、甜、苦、咸四種。四種。 味覺校驗的最佳溫度為味覺校驗的最佳溫度為2040。 檢驗時取少

5、量被檢食品放人口中，細心品嘗，檢驗時取少量被檢食品放人口中，細心品嘗，然后吐出然后吐出(不要咽下不要咽下)，用溫水漱口。，用溫水漱口。 若連續檢驗幾種樣品，應先檢驗味淡的，后若連續檢驗幾種樣品，應先檢驗味淡的，后檢驗味濃的食品，且每品嘗一種樣品后，都檢驗味濃的食品，且每品嘗一種樣品后，都要用溫水漱門，以減少相互影響。要用溫水漱門，以減少相互影響。 （四）觸覺檢驗（四）觸覺檢驗 觸覺檢驗主要是借助手、皮膚等器官的觸覺神觸覺檢驗主要是借助手、皮膚等器官的觸覺神經來檢驗某些食品的彈性、韌性、緊密程度、稠經來檢驗某些食品的彈性、韌性、緊密程度、稠度等，以鑒別其質量。度等，以鑒別其質量。總結總結：感觀檢

6、查有其局限性和主觀性，感官認為：感觀檢查有其局限性和主觀性，感官認為良好的食品，不一定符合營養和衛生要求，某些良好的食品，不一定符合營養和衛生要求，某些有害成分也不一定影響食品的感官印象。進行感有害成分也不一定影響食品的感官印象。進行感官檢驗時，通常先進行官檢驗時，通常先進行視覺檢驗視覺檢驗，再進行，再進行嗅覺檢嗅覺檢驗驗，然后進行，然后進行味覺檢驗味覺檢驗及及觸覺檢驗觸覺檢驗。物理檢驗法：根據食品的相對密度、折射物理檢驗法：根據食品的相對密度、折射率、旋光度等物理常數與食品的組成成分率、旋光度等物理常數與食品的組成成分之間的關系進行檢測的方法。之間的關系進行檢測的方法。（一）測定相對密度的原

7、理和意義（一）測定相對密度的原理和意義密度：是指物質在一定溫度下單位體積的質量，密度：是指物質在一定溫度下單位體積的質量，以以表示，單位為表示，單位為g/cm3。相對密度：某一溫度下物質的質量與同體積某相對密度：某一溫度下物質的質量與同體積某一溫度下水的質量之比，以一溫度下水的質量之比，以d表示。表示。2112)()(ttttd溫度下水的密度溫度下物質的密度g/cm3 相對密度是物質重要的物理常數。各種液態食相對密度是物質重要的物理常數。各種液態食品都具有一定的相對密度，當其組成成分及濃度品都具有一定的相對密度，當其組成成分及濃度發生改變時，其相對密度往往也隨之改變。通過發生改變時，其相對密度

8、往往也隨之改變。通過測定液態食品的相對密度，可以檢驗食品的純度、測定液態食品的相對密度，可以檢驗食品的純度、濃度及判斷食品的質量。濃度及判斷食品的質量。2020d204d （二）液態食品相對密度的測定方法（二）液態食品相對密度的測定方法 密度計是根據阿基米德原理制成，其種類很多，但密度計是根據阿基米德原理制成，其種類很多，但結構和形式基本相同，都是由玻璃外殼制成。它由結構和形式基本相同，都是由玻璃外殼制成。它由三部分組成，頭部星球形或圓錐形，內部灌有鉛珠、三部分組成，頭部星球形或圓錐形，內部灌有鉛珠、水銀或其它重金屬，使密度計能直立于溶液中，中水銀或其它重金屬，使密度計能直立于溶液中，中部是胖

9、肚空腔，內有空氣故能浮起。尾部是部是胖肚空腔，內有空氣故能浮起。尾部是細細長管，內附有刻度標記，刻度是利用各種不同密度長管，內附有刻度標記，刻度是利用各種不同密度的液體標度的。的液體標度的。 儀器：普通密度計、錘度計，乳稠汁，波美計等儀器：普通密度計、錘度計，乳稠汁，波美計等 1儀器儀器3.注意事項：注意事項： 不適用于極易揮發的樣品。不適用于極易揮發的樣品。 待測液中不得有氣泡。待測液中不得有氣泡。 讀數時以密度計與液體形成的彎月面下緣為準。讀數時以密度計與液體形成的彎月面下緣為準。2測定方法測定方法 將混合均勻的被測樣液沿筒壁徐徐注入適當容將混合均勻的被測樣液沿筒壁徐徐注入適當容積的清潔量

10、筒中，注意避免起泡沫。將密度計洗積的清潔量筒中，注意避免起泡沫。將密度計洗凈擦干，緩緩放人樣液中，待其靜止后，再輕輕凈擦干，緩緩放人樣液中，待其靜止后，再輕輕按下少許，然后待其自然上升，靜止并無氣泡冒按下少許，然后待其自然上升，靜止并無氣泡冒出后，從水平位置讀取與液平面相交處的刻度線。出后，從水平位置讀取與液平面相交處的刻度線。同時用溫度計測量樣液的溫度，如測得溫度不是同時用溫度計測量樣液的溫度，如測得溫度不是標準溫度，應對測得值加以校正。標準溫度，應對測得值加以校正。 牛奶密度計牛奶密度計 二、折光度法二、折光度法均一物質的折光度均一物質的折光度(refraction)，與比重、熔點、，與比

11、重、熔點、沸點一樣是其物理指標。測定樣品的折光度，就沸點一樣是其物理指標。測定樣品的折光度，就可以判斷其均一程度和純度。可以判斷其均一程度和純度。 (一一)測定折光度的原理測定折光度的原理光的反射定律為人射角等于反射角。光的折射定律為光的反射定律為人射角等于反射角。光的折射定律為無論入射角怎樣改變，入射角正弦與折射角正弦之比，無論入射角怎樣改變，入射角正弦與折射角正弦之比，恒等于光在兩種介質中的傳播速度之比。利用光的反恒等于光在兩種介質中的傳播速度之比。利用光的反射定律和折射定律，可通過測定液體中光線的折光度射定律和折射定律，可通過測定液體中光線的折光度來測定一些物質的含量。來測定一些物質的含

12、量。 1阿貝折光儀的使用阿貝折光儀的使用 (1)測定液體時，滴加測定液體時，滴加12滴樣品試液于下面棱鏡滴樣品試液于下面棱鏡上，迅速將兩塊棱鏡閉合。上，迅速將兩塊棱鏡閉合。(2)目鏡觀察，轉動棱晶旋鈕，使視野出現明暗兩目鏡觀察，轉動棱晶旋鈕，使視野出現明暗兩部分。部分。(3)旋轉色散補償器旋鈕，使視野中只有黑白兩色。旋轉色散補償器旋鈕，使視野中只有黑白兩色。 (4)旋轉棱晶旋鈕，使明暗分界線在十字線交叉點。旋轉棱晶旋鈕，使明暗分界線在十字線交叉點。 (5)從讀數鏡筒中讀取折射率或重量百分濃度。從讀數鏡筒中讀取折射率或重量百分濃度。(6)測定樣液溫度。測定樣液溫度。 (7)用水、乙醇或乙醚擦凈棱

13、晶表面及其他各機件。用水、乙醇或乙醚擦凈棱晶表面及其他各機件。 2計算計算 折射率折射率(n20)n+0.00038(t20) 式中：式中： n為樣品溫度在為樣品溫度在t時測得的折射率；時測得的折射率； t為測定折射率時的樣品溫度；為測定折射率時的樣品溫度； 0.00038為樣品溫度在為樣品溫度在1030范圍內每差范圍內每差1時時折射率的校正系數。折射率的校正系數。 3影響折射率測定的因素影響折射率測定的因素 光波長光波長 溫度溫度 4手持式折射儀簡介手持式折射儀簡介 三、旋光法三、旋光法 應用旋光儀測量旋光性物質的旋光度以確定其應用旋光儀測量旋光性物質的旋光度以確定其含量的分析方法含量的分析

14、方法 叫旋光法。叫旋光法。 (一一)旋光法的測定原理旋光法的測定原理 1光學活性物質、旋光度與比旋光度光學活性物質、旋光度與比旋光度光學活性物質光學活性物質：分子結構凡具有不對稱碳原子，：分子結構凡具有不對稱碳原子，能把偏振光的偏振面旋轉一定角度的物質。許多能把偏振光的偏振面旋轉一定角度的物質。許多食品成分都具有光學活性，如單糖、低聚糖、淀食品成分都具有光學活性，如單糖、低聚糖、淀粉以及大多數的氨基酸和羥酸等。粉以及大多數的氨基酸和羥酸等。 旋光度旋光度： 當偏振光通過光學活性物質的溶液時，當偏振光通過光學活性物質的溶液時，偏振面所旋轉的角度。偏振面所旋轉的角度。比旋光度比旋光度：對于它的溶液

15、，在一定溫度和一定光：對于它的溶液，在一定溫度和一定光源情況下，當溶液濃度為源情況下，當溶液濃度為lml中含光學活性物質中含光學活性物質1克，濃層厚度為克，濃層厚度為1分米，偏振面所旋轉的角度分米，偏振面所旋轉的角度 。 t d202變旋光作用變旋光作用具有光學活性的還原糖類具有光學活性的還原糖類(如葡萄糖，果糖，乳糖，如葡萄糖，果糖，乳糖，麥芽糖等麥芽糖等)，在溶解之后，其旋光度起初迅速變化，在溶解之后，其旋光度起初迅速變化，然后漸漸變得較緩慢，最后達到恒定值，這種現然后漸漸變得較緩慢，最后達到恒定值，這種現象稱為變旋光作用。象稱為變旋光作用。 (二二)旋光計的結構及原理旋光計的結構及原理

16、1普通旋光計普通旋光計 2自動旋光計簡介自動旋光計簡介圓盤旋光儀圓盤旋光儀自動旋光儀自動旋光儀第三節第三節 食品化學分析法食品化學分析法 一、重量分析法一、重量分析法 重量分析是將被測組分用一定的方法，從試樣重量分析是將被測組分用一定的方法，從試樣中分離出來，然后根據被測組分的重量或試樣中分離出來，然后根據被測組分的重量或試樣中其它組分的重量計算被測組分在試樣中的含中其它組分的重量計算被測組分在試樣中的含量。量。 根據分離方法的不同，重量分析法又可分根據分離方法的不同，重量分析法又可分汽化汽化法法，萃取法萃取法和和沉淀法沉淀法等。等。 汽化法是汽化法是最簡單最簡單重量分析法重量分析法 （一）汽

17、化法（一）汽化法 1操作方法操作方法(1)樣品干燥樣品干燥 (2)計算計算 =(m2-m1)/m100式中：式中： 水分含量（質量分數，水分含量（質量分數，%） m1恒重前稱量瓶相樣品質量（恒重前稱量瓶相樣品質量（g） m2恒重后稱量瓶相樣品質量（恒重后稱量瓶相樣品質量（g） m樣品質量（樣品質量（g）2說明說明 不適用于膠體、高脂肪、高糖食品以及含有較多在高溫中易氧化和不適用于膠體、高脂肪、高糖食品以及含有較多在高溫中易氧化和易揮發物質的食品。易揮發物質的食品。（二）萃取法（二）萃取法 1原理原理 苯取法是利用被測組分在有機溶劑中的可溶性，苯取法是利用被測組分在有機溶劑中的可溶性，將之與試樣

18、其它組分分離，然后將有機溶劑揮發將之與試樣其它組分分離，然后將有機溶劑揮發除去，再稱殘渣重量，計算出被測組分的含量。除去，再稱殘渣重量，計算出被測組分的含量。 2儀器儀器 索氏提取器索氏提取器 3操作方法操作方法 （1）樣品處理）樣品處理固體樣品固體樣品 精密稱取精密稱取2.005.00g樣品，必要時拌以樣品，必要時拌以海沙，全部移入濾紙筒內。海沙，全部移入濾紙筒內。液體或半固體樣品液體或半固體樣品 稱取稱取5.0010.00g樣品，置于蒸樣品，置于蒸發皿中，加入海沙約發皿中，加入海沙約20g,于沸水浴上蒸干后，再于于沸水浴上蒸干后，再于1005干燥，研細，全部轉入濾紙筒內。干燥，研細，全部轉

19、入濾紙筒內。（2）抽提）抽提將濾紙放入抽提筒內，連續已干燥至恒重的抽提瓶，由將濾紙放入抽提筒內，連續已干燥至恒重的抽提瓶，由冷凝器上端加入乙醚或石油醚至接受瓶內容積的冷凝器上端加入乙醚或石油醚至接受瓶內容積的2/3處，處，于于5070水浴上加熱，使乙醚或石油醚不斷回流抽提，水浴上加熱，使乙醚或石油醚不斷回流抽提，一般抽提一般抽提612h。4計算計算 w=(m1-m0)/m2100式中：式中： w樣品中脂肪的含量，樣品中脂肪的含量，% m0抽提瓶的質量，抽提瓶的質量，g m1抽提瓶和脂肪的質量，抽提瓶和脂肪的質量，g m2樣品的質量（按測定水分前的質量計），樣品的質量（按測定水分前的質量計），g

20、5說明說明 本法主要是測定食品中游離脂肪的含量。本法主要是測定食品中游離脂肪的含量。 取下抽提瓶，回收乙醚或石油醚，待抽提瓶內乙醚剩取下抽提瓶，回收乙醚或石油醚，待抽提瓶內乙醚剩下下 12ml時在水浴上蒸干，再于時在水浴上蒸干，再于100土土5干燥干燥2h，置于，置于干燥器內冷卻干燥器內冷卻0.5h稱重，并重復操作至恒重。稱重，并重復操作至恒重。（3）稱重）稱重（三）沉淀法（三）沉淀法 沉淀法是利用沉淀反應將被測組分從試樣中沉淀出來，沉淀法是利用沉淀反應將被測組分從試樣中沉淀出來，然后將沉淀烘干或灼燒，最后根據沉淀的重量計算被測然后將沉淀烘干或灼燒，最后根據沉淀的重量計算被測組分的含量。組分的

21、含量。二二 滴定分析法滴定分析法 通常將一種已知準確濃度的試劑溶液即標準溶液滴加通常將一種已知準確濃度的試劑溶液即標準溶液滴加到被測物質溶液中，直到標準溶液與被測組分按反應式到被測物質溶液中，直到標準溶液與被測組分按反應式化學計量關系恰好反應完全為止，根據標準溶液的用量化學計量關系恰好反應完全為止，根據標準溶液的用量和濃度，計算出被測組分含量的一類方法稱為滴定分析和濃度，計算出被測組分含量的一類方法稱為滴定分析法。法。 (一一)滴定分析的分類滴定分析的分類滴定分析根據所用的化學反應不同，可分為酸堿滴定法、滴定分析根據所用的化學反應不同，可分為酸堿滴定法、氧化還原滴定法、沉淀滴定法和絡合物滴定法

22、。氧化還原滴定法、沉淀滴定法和絡合物滴定法。 1酸堿滴定法酸堿滴定法 h+ohh2o 2氧化還原滴定法氧化還原滴定法分析中應用最多的是碘量法。碘量法又分為直接法和間接法兩類分析中應用最多的是碘量法。碘量法又分為直接法和間接法兩類 。直接法是利用碘的氧化作用直接滴定。直接法是利用碘的氧化作用直接滴定。間接法是利用碘離子的還原性與具有氧化性的被測物質作用后生間接法是利用碘離子的還原性與具有氧化性的被測物質作用后生成游離碘，再用硫代硫酸鈉作標準液滴定析出的碘，進而測出被成游離碘，再用硫代硫酸鈉作標準液滴定析出的碘，進而測出被測物質的含量。測物質的含量。 3沉淀滴定法沉淀滴定法 4絡合滴定法絡合滴定法

23、 利用沉淀反應的滴定法。例如釀造用水中氯化物含利用沉淀反應的滴定法。例如釀造用水中氯化物含量的測定：量的測定：ag+ + cl -agci利用形成絡合物反應來進行滴定的方法利用形成絡合物反應來進行滴定的方法 。目前應用。目前應用最廣的是用乙二胺四乙酸二鈉鹽最廣的是用乙二胺四乙酸二鈉鹽(簡稱簡稱edta)為滴定為滴定劑。例如用它來測定水中總硬度（即水中鈣、鎂的劑。例如用它來測定水中總硬度（即水中鈣、鎂的總量），其反應為：總量），其反應為： ca 2+ + mg 2+ + h2y2- ca(mg)y2- + 2h+（二）滴定的操作方法（二）滴定的操作方法1.滴定管的使用方法滴定管的使用方法（1）酸

24、式滴定管）酸式滴定管 左手從中間向右伸出，拇指在管前，食指和中指在左手從中間向右伸出，拇指在管前，食指和中指在管后，手指拿住活塞柄。食指和中指由下向上各頂管后，手指拿住活塞柄。食指和中指由下向上各頂住活塞柄的一端，拇指在上面指揮活塞柄的轉動方住活塞柄的一端，拇指在上面指揮活塞柄的轉動方向，當拇指稍稍移向任何一端按下時，活塞就向那向，當拇指稍稍移向任何一端按下時，活塞就向那一端轉動。在轉動時，中指及食指不要伸直，應該一端轉動。在轉動時，中指及食指不要伸直，應該微微彎曲，向里扣住，此時無名指和小指向手心彎微微彎曲，向里扣住，此時無名指和小指向手心彎曲，手指背面頂住滴定管下端管口，向外推。曲，手指背

25、面頂住滴定管下端管口，向外推。 酸式滴定管一般架在滴定管架的右邊酸式滴定管一般架在滴定管架的右邊 （2）堿式滴定管的使用方法）堿式滴定管的使用方法 堿式滴定管一般架在滴定管架的左邊堿式滴定管一般架在滴定管架的左邊 左手拇指在前，食指在后，拿住橡皮管中有玻璃左手拇指在前，食指在后，拿住橡皮管中有玻璃球所在部位稍上一點的地方。無名指、中指和小球所在部位稍上一點的地方。無名指、中指和小指夾住出口管，使出口管垂直而不擺動，拇指和指夾住出口管，使出口管垂直而不擺動，拇指和食指擠壓玻璃珠的右上角，使在玻璃珠旁邊形成食指擠壓玻璃珠的右上角，使在玻璃珠旁邊形成空隙。但不要用力過猛，使玻璃珠向下移，以致空隙。但

26、不要用力過猛，使玻璃珠向下移，以致堵塞出口管。特別注意不要按玻璃珠以下的地方，堵塞出口管。特別注意不要按玻璃珠以下的地方，以免放開時吸進氣泡。以免放開時吸進氣泡。 2滴定的操作方法滴定的操作方法 最好是在錐形瓶或碘量瓶中進行，必要時也可以在燒杯中進行最好是在錐形瓶或碘量瓶中進行，必要時也可以在燒杯中進行 。 在錐形瓶中滴定時，左手按操作法控制滴定管活塞在錐形瓶中滴定時，左手按操作法控制滴定管活塞(在滴定全過在滴定全過程中，左手一直不能離開活塞程中，左手一直不能離開活塞)，右手前三指拿住錐形瓶瓶須，右手前三指拿住錐形瓶瓶須，讓滴定管下端伸人瓶口約讓滴定管下端伸人瓶口約1厘米。邊滴邊搖，以同一方向

27、作圓周厘米。邊滴邊搖，以同一方向作圓周運動運動(勿使瓶口碰滴定管、滴定速度每分鐘約勿使瓶口碰滴定管、滴定速度每分鐘約10min為宜為宜)。 接近化學計量點時，指示劑發生局部變色，轉動接近化學計量點時，指示劑發生局部變色，轉動12次后，顏色次后，顏色完全消逝，此時就不再邊滴邊搖，而改為滴一滴，搖一搖，等到完全消逝，此時就不再邊滴邊搖，而改為滴一滴，搖一搖，等到必須搖必須搖23次后才能消逝時，表示離化學計量點已近，此時用洗次后才能消逝時，表示離化學計量點已近，此時用洗瓶沖洗錐形瓶內壁，以便把轉動時留在壁上的溶液洗下瓶沖洗錐形瓶內壁，以便把轉動時留在壁上的溶液洗下(這時溶這時溶液應呈液應呈未到未到化

28、學計量點的顏色化學計量點的顏色)。 左手微微轉動活塞，使流出左手微微轉動活塞，使流出半滴半滴標準溶液落人溶液中，搖搖錐形標準溶液落人溶液中，搖搖錐形瓶。如此反復，直到剛剛出現終點的瓶。如此反復，直到剛剛出現終點的顏色不再消逝顏色不再消逝時為止。絡合時為止。絡合滴定到達了化學計量點的顏色后，應放置滴定到達了化學計量點的顏色后，應放置15秒不褪色時為止。秒不褪色時為止。3滴定管的讀數方法滴定管的讀數方法兩種情況的讀數方法：兩種情況的讀數方法： 無色或淺色溶液應讀彎月面下緣的最低點，視線應與彎月面下無色或淺色溶液應讀彎月面下緣的最低點，視線應與彎月面下緣的最低點在同一水平上。緣的最低點在同一水平上。

29、 對于有色溶液，如高錳酸鉀，應讀彎月面的上緣，視線應與液對于有色溶液，如高錳酸鉀，應讀彎月面的上緣，視線應與液面的最高點相切。面的最高點相切。 在同在同次滴定中，初讀和終瀆應該用同一種方法讀數次滴定中，初讀和終瀆應該用同一種方法讀數 第四節第四節 食品的儀器分析法食品的儀器分析法 儀器分析是以測量物質的某些物理或物理化學性質的參數來確定儀器分析是以測量物質的某些物理或物理化學性質的參數來確定其化學組成、含量或結構的分析方法。其化學組成、含量或結構的分析方法。 電化學分析法是建立在溶液電化學性質基礎上的一類分析方法，電化學分析法是建立在溶液電化學性質基礎上的一類分析方法，包括電位分析法，庫侖分析

30、法，伏安法和電導分析法等。包括電位分析法，庫侖分析法，伏安法和電導分析法等。 光譜分析法是建立在物質使電磁輻射的能量發生改變基礎上的一光譜分析法是建立在物質使電磁輻射的能量發生改變基礎上的一類分析方法。包括原子發射光譜法，原子吸收光譜法，紫外類分析方法。包括原子發射光譜法，原子吸收光譜法，紫外可可見吸收光譜法，紅外吸收光譜法和熒光光譜法等。見吸收光譜法，紅外吸收光譜法和熒光光譜法等。 色譜法是利用混合物中各組分在兩相中有不同的分配比例來達到色譜法是利用混合物中各組分在兩相中有不同的分配比例來達到分離的目的。分離的目的。 常見的儀器分析分為三類：常見的儀器分析分為三類：光潛分析法光潛分析法、電化

31、學分析法電化學分析法和和色譜法色譜法。一、紫外一、紫外可見光光度分析方法可見光光度分析方法（一）特點（一）特點 1具有較高的靈敏度具有較高的靈敏度 2有一定的準確度有一定的準確度 3操作簡便、快速、選擇性好、儀器設備簡單操作簡便、快速、選擇性好、儀器設備簡單 4應用廣泛應用廣泛 （二）基本原理（二）基本原理 1物質對光的選擇性吸收物質對光的選擇性吸收 2光的吸收定律光的吸收定律 朗伯朗伯比耳定比耳定律律 （三）紫外（三）紫外可見分光光度計可見分光光度計 1儀器的構成儀器的構成 分光光度計一般由光源、單色器、比色池、檢測器和分光光度計一般由光源、單色器、比色池、檢測器和指示器五部分組成。指示器五

32、部分組成。 2常見分光光度計常見分光光度計 722型分光光度計型分光光度計 tu1900型紫外型紫外可見分光光度計可見分光光度計3應用分光光度法應注意的問題應用分光光度法應注意的問題(1)比耳定律是一個只適用于稀溶液的定律，當濃度大到一定比耳定律是一個只適用于稀溶液的定律，當濃度大到一定程度時，溶液中溶質的電離或聚合會發生一定程度的變化，程度時，溶液中溶質的電離或聚合會發生一定程度的變化，從而導致對比耳定律的偏離。從而導致對比耳定律的偏離。 (2)溶液的溶液的ph (3)顯色劑量顯色劑量 (4)時間時間 (5)溫度溫度 (6)加試劑的次序加試劑的次序 (7)穩定性穩定性 (8)掩蔽掩蔽 （四）

33、定性與定量（四）定性與定量1.定性方法定性方法 利用紫外及可見分光光度法對化合物進行定性分析時，利用紫外及可見分光光度法對化合物進行定性分析時，需將待測試樣和標準品用相同的溶劑配成濃度相近的溶需將待測試樣和標準品用相同的溶劑配成濃度相近的溶液，將一系列不同波長的單色光，照射到含待測組分的液，將一系列不同波長的單色光，照射到含待測組分的溶液，可測得相應的溶液，可測得相應的系列吸光度。系列吸光度。 2.定量方法定量方法 (1)標準曲線法標準曲線法 (2)直接比較法直接比較法 722型分光光度計型分光光度計紫外紫外可見分光光度計可見分光光度計二、原子吸收分光光度法二、原子吸收分光光度法原子吸收光譜法

34、原子吸收光譜法(atomic absorption spectrometry，aas)又稱為原子吸收分光光度法。它是基于物質所產生的原又稱為原子吸收分光光度法。它是基于物質所產生的原子蒸氣對特定譜線子蒸氣對特定譜線(通常是待測元素的特征譜線通常是待測元素的特征譜線)的吸收的吸收作用來進行定量分析的一種方法。作用來進行定量分析的一種方法。 原子吸收光譜法原子吸收光譜法 具有獨特的優點：具有獨特的優點： 1選擇性強選擇性強 2靈敏度高靈敏度高 3. 準確度高，操作方便準確度高，操作方便 4精密度高精密度高 5應用范圍廣應用范圍廣 (一一)原子吸收分光光度法的基本原理原子吸收分光光度法的基本原理 1

35、.理論基礎理論基礎 當原子受外界能量激發，其最外層電子可能躍遷到不同能級，當原子受外界能量激發，其最外層電子可能躍遷到不同能級，因此可能有不同的激發態。電子從基態躍遷到能量最低的激發態因此可能有不同的激發態。電子從基態躍遷到能量最低的激發態(第一激發態第一激發態)時，要吸收一定波長的光，它再躍遷回基態時，則時，要吸收一定波長的光，它再躍遷回基態時，則發射出同樣波長的光、對應的譜線為共振發刺錢簡稱共振線。發射出同樣波長的光、對應的譜線為共振發刺錢簡稱共振線。 電子從基態躍遷到第一激發態所產生的吸收譜線稱為共振吸收線，電子從基態躍遷到第一激發態所產生的吸收譜線稱為共振吸收線，也稱共振線。由于每種原

36、子的結構和外層電子排布不同，對不同也稱共振線。由于每種原子的結構和外層電子排布不同，對不同元素的原子只能激發到它特定的激發態，所以每種原子所能吸收元素的原子只能激發到它特定的激發態，所以每種原子所能吸收的光量子的能量不同，即被吸收的光的波長不同。的光量子的能量不同，即被吸收的光的波長不同。 所以，每種元素氣相狀態原子的吸收光譜具有一系列特定波長的所以，每種元素氣相狀態原子的吸收光譜具有一系列特定波長的吸收譜線。在原子吸收分光光度法中，就是利用基態原子對從光吸收譜線。在原子吸收分光光度法中，就是利用基態原子對從光源輻射出的待測原子的特征共振線的吸收程度來進行分析的。源輻射出的待測原子的特征共振線

37、的吸收程度來進行分析的。 2原子化過程原子化過程 (1)火焰原子化的基本過程火焰原子化的基本過程還原作用還原作用 熱解作用熱解作用噴霧 mx（霧滴）（霧滴） 混合 脫水 mx（霧滴分離）（霧滴分離） 大霧滴 mx（廢液排除）（廢液排除） mx（固體微粒）（固體微粒） 小霧進入火焰 干燥 mx 熔融蒸發 m，x（原子氣）（原子氣） m x mo m(oh ) mo(moh)（分子氣）（分子氣） 熱解 還原(2)無火焰原子化的機理無火焰原子化的機理（二）原子吸收分光光度計（二）原子吸收分光光度計原子吸收分光光度計由光源、原子化系統、單色器、檢測器和讀出原子吸收分光光度計由光源、原子化系統、單色器、

38、檢測器和讀出裝置等部分組成。裝置等部分組成。 (三三)定量分析定量分析 1條件的選擇條件的選擇 (1)分析線分析線 ：選用共振線作分析線：選用共振線作分析線(2)狹縫寬度：試具體情況而選用較寬或是較窄的狹縫狹縫寬度：試具體情況而選用較寬或是較窄的狹縫 (3)空心陰極燈的工作電流空心陰極燈的工作電流 ：在保證有足夠強且穩定的光強輸：在保證有足夠強且穩定的光強輸出條件下，盡量使用較低的工作電流。出條件下，盡量使用較低的工作電流。 2定量分析方法定量分析方法(1)標準曲線法標準曲線法(2)標準加入法標準加入法 (3)內標法內標法 ：內標法系在標準溶液和試樣溶液中分別加入一定量的試樣中不內標法系在標準

39、溶液和試樣溶液中分別加入一定量的試樣中不存在的內標元素，同時測定這兩種溶液中待測元素和內標元素的吸光度，繪存在的內標元素，同時測定這兩種溶液中待測元素和內標元素的吸光度，繪制制aa 0c標準曲線。標準曲線。 a、a 0分別為標準溶液中待測元素和內標元素的吸光度，分別為標準溶液中待測元素和內標元素的吸光度，c為標準溶液中待測元素的濃度。為標準溶液中待測元素的濃度。 三、分子發光分析法三、分子發光分析法 (一一)分子發光的原理分子發光的原理 1分子的激發過程分子的激發過程分子具有一系列嚴格分立的能級，處于基態的分子吸收了特征分子具有一系列嚴格分立的能級，處于基態的分子吸收了特征頻率的能量后，可以從

40、低能級躍遷到較高能級。這個過程稱為頻率的能量后，可以從低能級躍遷到較高能級。這個過程稱為激發。分子的電子能級躍遷通常是由其基態最高占有軌道上一激發。分子的電子能級躍遷通常是由其基態最高占有軌道上一個電子躍遷到激發態的最低空軌道上。根據電子躍遷時吸收光個電子躍遷到激發態的最低空軌道上。根據電子躍遷時吸收光子能量和電子自旋狀態的不同，可產生各種電子激發態。子能量和電子自旋狀態的不同，可產生各種電子激發態。 2受激分子的弛豫方式受激分子的弛豫方式 可分為：可分為： (1)無無(非非)輻射弛豫輻射弛豫 (2)光發射弛豫光發射弛豫熒光和磷光熒光和磷光 受激分子可通過幾種不同去活化的途徑而回到基態，這種去

41、活化受激分子可通過幾種不同去活化的途徑而回到基態，這種去活化過程稱為弛豫。過程稱為弛豫。 3激發光譜和熒光光譜激發光譜和熒光光譜(發射光譜發射光譜) 任何能發出熒光的物質都具有兩種特征光譜，即任何能發出熒光的物質都具有兩種特征光譜，即激發光譜激發光譜和和熒光光熒光光譜譜。 (1)激發光譜激發光譜 用不同波長的單色光激發熒光物質使之發光，然后測定每一波長用不同波長的單色光激發熒光物質使之發光，然后測定每一波長的激發光所產生的熒光強度，并以激發光波長的激發光所產生的熒光強度，并以激發光波長 為橫坐標，熒光強為橫坐標，熒光強度度i為縱坐標作圖，便可得到熒光物質的激發光譜。為縱坐標作圖，便可得到熒光物

42、質的激發光譜。 (2)熒光光譜熒光光譜 固定激發光波長和強度，而讓物質所發射的熒光通過單色器色散，固定激發光波長和強度，而讓物質所發射的熒光通過單色器色散，以測定不同波長時熒光強度，以熒光或波長以測定不同波長時熒光強度，以熒光或波長 為橫坐標，熒光或強為橫坐標，熒光或強度度i為縱坐標作圖，使得到熒光光譜，又稱熒光發射光譜。為縱坐標作圖，使得到熒光光譜，又稱熒光發射光譜。 熒光光潛和激發光譜呈現大致的熒光光潛和激發光譜呈現大致的鏡像對稱鏡像對稱關系。關系。 (二二)熒光分光光度計熒光分光光度計1熒光分光光度計的組成熒光分光光度計的組成4個主要部件：個主要部件： 激發光源激發光源 單色器單色器 樣

43、品池樣品池 檢測器檢測器2熒光分光光度計主要功能熒光分光光度計主要功能 (1)測定功能測定功能 (2)數據處理功能數據處理功能 (3)文件功能文件功能 (4)顯示和記錄功能顯示和記錄功能(三三)定性與定量定性與定量 1定性方法定性方法2定量方法定量方法(1)標準曲線法標準曲線法 ： 以已知量的標準物質按樣品相同方法處以已知量的標準物質按樣品相同方法處理后，配成一系列不同濃度的標準溶液。常以其中濃度最理后，配成一系列不同濃度的標準溶液。常以其中濃度最大的一個溶液調節大的一個溶液調節f值使其在儀器適宜的讀數范圍內。以值使其在儀器適宜的讀數范圍內。以此為標準，測定空白溶液與其它濃度標準溶液的熒光強度

44、，此為標準，測定空白溶液與其它濃度標準溶液的熒光強度，以熒光強度對標準溶液的濃度繪制標準曲線。以熒光強度對標準溶液的濃度繪制標準曲線。 (2)直接比較法：取已知量的純熒光物質，配成標準溶液，直接比較法：取已知量的純熒光物質，配成標準溶液，使其濃度在線性范圍內，測定其熒光強度使其濃度在線性范圍內，測定其熒光強度fs。然后在同樣。然后在同樣條件下測定樣品溶液的熒光強度條件下測定樣品溶液的熒光強度fx和空白溶液的和空白溶液的f0，并要，并要求求 c x盡量接近盡量接近cs。由標準溶液的濃度和這兩個溶液的熒。由標準溶液的濃度和這兩個溶液的熒光強度比，求得樣品中熒光物質的含量光強度比，求得樣品中熒光物質

45、的含量 。 四、氣相色譜法四、氣相色譜法 色譜法是一種分離分析方法，它是利用各物質在兩相中色譜法是一種分離分析方法，它是利用各物質在兩相中具有不同的分配系數，當兩相作相對運動時，這些物質具有不同的分配系數，當兩相作相對運動時，這些物質在兩相中進行多次反復的分配來達到分離的目的。在兩相中進行多次反復的分配來達到分離的目的。 (一一)色譜分析法的原理色譜分析法的原理 1色譜法基本概念色譜法基本概念色譜法色譜法固定相固定相流動相流動相填充色譜柱填充色譜柱 2色譜法分類色譜法分類 (1)按兩相狀態分類按兩相狀態分類 氣相色譜法氣相色譜法液相色譜法液相色譜法超臨界流體色譜法超臨界流體色譜法氣氣-固色譜法

46、固色譜法 氣氣-液色譜法液色譜法 液液-固色譜法固色譜法液液-液色譜法液色譜法 (2)按分離原理分類按分離原理分類 分配色譜分配色譜吸附色譜吸附色譜離子交換色譜離子交換色譜鍵合相色譜鍵合相色譜 (3)按固定相的形式分類按固定相的形式分類 柱色譜柱色譜填充柱色譜填充柱色譜平板色潛平板色潛3色譜參數色譜參數 (1)基本術語基本術語 色譜流出曲線色譜流出曲線基線基線色譜峰色譜峰 (1)基本術語基本術語 (2)定性參數定性參數 死時間死時間保留時間保留時間調整保留時間調整保留時間 (3)柱效參數柱效參數 半峰寬半峰寬峰寬峰寬標準偏差標準偏差 (4)平衡參數平衡參數 分配系數分配系數分配比分配比保留值保

47、留值 (5)分離參數分離參數分離度分離度有效峰數有效峰數分離值分離值 (二二)色譜法的基本步驟色譜法的基本步驟 1準備色譜柱準備色譜柱：根據式樣分析目的選擇好固定相，按：根據式樣分析目的選擇好固定相，按操作形式的要求將固定相制備成色譜床（填裝成色譜操作形式的要求將固定相制備成色譜床（填裝成色譜柱）；柱）； 2進樣進樣：將處理好的樣品以一：將處理好的樣品以一定的方式加到固定相定的方式加到固定相的一端；的一端； 3洗脫洗脫：將流動相以一定的速度，運載著加在固定相：將流動相以一定的速度，運載著加在固定相上的樣品，在兩相的相對運動中使樣品的各組分彼此分上的樣品，在兩相的相對運動中使樣品的各組分彼此分離

48、。離。 4分析分析：收集從色譜床上分離的各組分，進行分析測：收集從色譜床上分離的各組分，進行分析測定（定性、定量）。定（定性、定量）。(三三)氣相色譜儀氣相色譜儀氣路系統氣路系統(載氣載氣)進樣系統進樣系統分離系統分離系統檢測系統檢測系統(檢測器檢測器)色譜柱：是氣相色譜儀的色譜柱：是氣相色譜儀的心臟心臟部分部分溫度控制系統溫度控制系統檢測器類型檢測器類型 檢測器的性能要求檢測器的性能要求火焰離子化檢測器火焰離子化檢測器熱導檢測器熱導檢測器電子捕獲檢測器電子捕獲檢測器 火焰光度檢測器火焰光度檢測器靈敏度高靈敏度高 檢測限低檢測限低線性范圍寬線性范圍寬 (四四)定性與定量定性與定量 1. 定性定

49、性 氣相色譜法定性分析的依據是色譜數據的峰位置參數即保留氣相色譜法定性分析的依據是色譜數據的峰位置參數即保留時間時間(tr)，通過比較標準物，通過比較標準物(t r (s) )與樣品組分與樣品組分(t r (x) )的一致性，的一致性，確定色譜峰是何組分。或相對保留值確定色譜峰是何組分。或相對保留值 (r i，s)，選擇某種物質作參，選擇某種物質作參照物照物(s)，分別，分別+卜算標準物的相對保留值及樣品組分相對保留卜算標準物的相對保留值及樣品組分相對保留值，并比較一致性，從而確定色譜峰是何組分；值，并比較一致性，從而確定色譜峰是何組分；在樣品中加純品后看峰高的增加；在樣品中加純品后看峰高的增

50、加；在沒有標準純物質時，可以使用文獻報道的保留時間或相對在沒有標準純物質時，可以使用文獻報道的保留時間或相對保留時間。保留時間。 2. 定量定量 利用峰面積或峰高與組分含量成正比的關系，用外標法利用峰面積或峰高與組分含量成正比的關系，用外標法(標準曲標準曲線法線法)或內標法進行定量。或內標法進行定量。 五、高效液相色譜法五、高效液相色譜法高效液相色譜法高效液相色譜法(hplc)是以液體為流動相，該法引入是以液體為流動相，該法引入了氣相色譜的理論與實驗方法，流動相改為高壓輸送，了氣相色譜的理論與實驗方法，流動相改為高壓輸送，采用高效固定相及在線檢測等手段，采用高效固定相及在線檢測等手段， (一一

51、)hplc具有的突出特點具有的突出特點高壓高壓高速高速高效高效高靈敏度高靈敏度 (二二)hplc的分類的分類 液固吸附色譜液固吸附色譜液液分配色液液分配色離子交換色譜離子交換色譜尺寸排阻色譜尺寸排阻色譜(又稱凝膠過濾法又稱凝膠過濾法) (三三)固定相和流動相固定相和流動相 1固定相固定相按承受的高壓能力可分為按承受的高壓能力可分為剛性固體剛性固體硬膠硬膠按孔隙深度可分為按孔隙深度可分為 表面多孔型表面多孔型全多孔微粒型全多孔微粒型 2流動相流動相高效液相色譜中，流動相對分離起著極其重要的作用，在固定高效液相色譜中，流動相對分離起著極其重要的作用，在固定相選定之后，流動相的選擇是相選定之后，流動

52、相的選擇是最關鍵最關鍵的。的。在正相分配層析中，先選在正相分配層析中，先選中等極性中等極性的溶劑為流動相，若組分的溶劑為流動相，若組分的保留時間太短，表示溶劑的極性太大，則改用的保留時間太短，表示溶劑的極性太大，則改用極性較弱極性較弱的的溶劑，其組分保留時間太長，則再選極性在上述兩溶劑之間溶劑，其組分保留時間太長，則再選極性在上述兩溶劑之間的溶劑，如此多次實驗，選出最適宜的溶劑。的溶劑，如此多次實驗，選出最適宜的溶劑。 (四四)高效液相色譜儀高效液相色譜儀高壓泵高壓泵梯度洗脫裝置梯度洗脫裝置進樣裝量進樣裝量色譜柱系列色譜柱系列恒溫器恒溫器檢測器檢測器隔膜注射進樣器隔膜注射進樣器高壓進樣閥高壓進

53、樣閥 自動進樣器自動進樣器紫外吸收檢測器紫外吸收檢測器 示差折光檢測器示差折光檢測器熒光檢測器熒光檢測器 電化學檢測器電化學檢測器 (五五)定性與定量定性與定量 六、電化學分析法六、電化學分析法電化學分析是儀器分析的重要組成部分。是最早應用電化學分析是儀器分析的重要組成部分。是最早應用的儀器分析法。溶液的電化學性質是指構成的電池的的儀器分析法。溶液的電化學性質是指構成的電池的電學性質電學性質(如電極電位、電流、電量和電導等如電極電位、電流、電量和電導等)和化學性和化學性質質(溶液的化學組成、濃度等溶液的化學組成、濃度等) 按測量電學參數的類型分按測量電學參數的類型分 電導分析法電導分析法電位分

54、析法電位分析法庫侖分析法庫侖分析法伏安法伏安法 (一一)電位分析法電位分析法 1原理原理原電池原電池能斯特能斯特(nernst)方程方程 2電極的分類電極的分類按反應機理分按反應機理分金屬基電極金屬基電極膜電極膜電極按電極功能分按電極功能分 指示電極與工作電極指示電極與工作電極參比電極與輔助電極參比電極與輔助電極 3直接電位法直接電位法參比電極參比電極指示電極指示電極 ph玻璃電極玻璃電極復合復合ph玻璃電極玻璃電極4其他離子濃度的測定其他離子濃度的測定電位法測定其他陰、陽離子的關鍵是為被測離子選擇一電位法測定其他陰、陽離子的關鍵是為被測離子選擇一支合適的指示電極。其中應用最多、最重要的指示電

55、極支合適的指示電極。其中應用最多、最重要的指示電極是一類被稱為離子選擇電極的膜電極是一類被稱為離子選擇電極的膜電極 。 5電位法的應用電位法的應用 (1)溶液溶液ph值的測量值的測量 (2)儀器：儀器：phs3tc型、型、phs2st型、型、phs3cw微機型等微機型等 (二二)電導分析法電導分析法以測量電解質溶液電導為基礎的分析方法稱為電導分析以測量電解質溶液電導為基礎的分析方法稱為電導分析法，它又分為直接電導法和電導滴定法。法，它又分為直接電導法和電導滴定法。 直接電導法：直接電導法：電導滴定法：電導滴定法：通過測量溶液電導值而直接求未知組分含量的方法通過測量溶液電導值而直接求未知組分含量

56、的方法利用在滴定過程中滴定劑與被測物質溶液發生化利用在滴定過程中滴定劑與被測物質溶液發生化學反應而引起溶液電導變化，以確定化學計量點學反應而引起溶液電導變化，以確定化學計量點的滴定方法的滴定方法 1基本原理基本原理電導和電導率電導和電導率摩爾電導率摩爾電導率 無限稀溶液的摩爾電導率無限稀溶液的摩爾電導率 2電導的測量電導的測量電導池電導池 電導率儀電導率儀(四四)伏安法伏安法 伏安法是以測量電解過程中得到的電流伏安法是以測量電解過程中得到的電流電壓曲線為基電壓曲線為基礎的電化學分析法。礎的電化學分析法。 (五五)其他電化學分析方法其他電化學分析方法溶出伏安法溶出伏安法 電位溶出分析法電位溶出分

57、析法第五節第五節 食品的微生物檢驗法食品的微生物檢驗法一、食品微生物檢驗的意義一、食品微生物檢驗的意義 食品微生物檢驗是衡量食品衛生質量的重要指標之一，也是判食品微生物檢驗是衡量食品衛生質量的重要指標之一，也是判定被檢食品能否食用的科學依據之一定被檢食品能否食用的科學依據之一 。 通過食品微生物檢驗，可以判斷食品加工環境及食品衛生情況，通過食品微生物檢驗，可以判斷食品加工環境及食品衛生情況，能夠對食品被細菌污染的程度作出正確的評價，為各項衛生管能夠對食品被細菌污染的程度作出正確的評價，為各項衛生管理工作提供科學依據，提供傳染病和人類、動物的食物中毒的理工作提供科學依據，提供傳染病和人類、動物的

58、食物中毒的防治措施。防治措施。 食品微生物檢驗是以貫徹食品微生物檢驗是以貫徹“預防為主預防為主”的衛生方針，可以有效的衛生方針，可以有效地防止或者減少食物中毒和人畜共患病的發生，保障人民的身地防止或者減少食物中毒和人畜共患病的發生，保障人民的身體健康體健康 對提高產品質量，避免經濟損失，保證出口等方面具有政治上對提高產品質量，避免經濟損失，保證出口等方面具有政治上和經濟上的重大意義。和經濟上的重大意義。二、食品微生物檢驗的范圍二、食品微生物檢驗的范圍 生產環境的檢驗生產環境的檢驗原輔料檢驗原輔料檢驗食品加工、儲藏、銷售諸環節食品加工、儲藏、銷售諸環節食品的檢驗食品的檢驗三、食品微生物檢驗的指標

59、三、食品微生物檢驗的指標 菌落總數菌落總數大腸菌群大腸菌群致病菌致病菌霉菌及其毒索霉菌及其毒索其他指標其他指標四、食品微生物檢驗的一般程序四、食品微生物檢驗的一般程序(一一)檢驗前準備檢驗前準備1準備好所需的各種儀器準備好所需的各種儀器2各種玻璃儀器均需刷洗干凈，包裝，各種玻璃儀器均需刷洗干凈，包裝，濕法濕法 (121，20min)或或干法干法(160170 ，2h)滅菌，冷卻后送無菌滅菌，冷卻后送無菌室備用。室備用。3準備好實驗所需的各種試劑、藥品，做好普通瓊準備好實驗所需的各種試劑、藥品，做好普通瓊脂培養基或其他選擇性培養基，根據需要分裝試管或脂培養基或其他選擇性培養基，根據需要分裝試管或滅菌后傾注平板或保存在滅菌后傾注平板或保存在46的水浴中或保存在的水浴中或保存在4的冰箱中備用。的冰箱中備用。4無菌室滅菌無菌室滅菌5檢驗人員的工作衣、帽、鞋、口罩等滅菌后備用。檢驗人員的工作衣、帽、鞋、口罩等滅菌后備用。 (二二)樣品的采集與處理樣品的采集