1、針刺對腹部術后大鼠胃腸動力及炎癥反應的影響 【摘要】 【目的】觀察針刺對腹部術后大鼠胃腸動力及炎癥反應的影響。【方法】選用sd大鼠，隨機分為空白組、假手術組(行開腹關腹操作)、模型組(行結腸吻合術)、針刺組，針刺組及假手術組術后均針刺雙側足三針(足三里、三陰交、太沖)，連續3 d。檢測各組大鼠排便情況、核掃描胃液相排空實驗及結腸組織病理變化。【結果】針刺組與假手術組均能顯著縮短腹部術后首次排便時間，增加排便粒數和質量，降低60 min胃殘留率(均p95%。2135型病理切片機由德國leika公司生產，ys2?h型光學顯微鏡由日本olympus公司生產。vertex v60型雙探頭可變角度單光子

2、發射型計算機斷層顯像儀(spect),配平行孔低能高分辨型準直器，由以色列varicam公司生產。 1?2動物及分組spf級健康sd大鼠40只,雌雄各半,體質量250300 g,由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供,合格證號：0055935。按完全隨機法分為4組,針刺組、模型組、假手術組、空白組。 1?3結腸吻合模型的復制4-7術前禁食禁水12 h,體積分數10%水合氯醛用過濾器過濾后再按3 mg/kg行腹腔注射麻醉。仰臥位固定,常規備皮、消毒、鋪無菌巾,于下腹部正中逐層入腹,切口長約2 cm,尋找到大鼠盲腸下2 cm處結腸,切斷后行原位縫合(一層縫合法),用連續縫合法縫合腹膜及肌層,再用間斷縫合

3、法縫合大鼠皮膚。手術當天禁食禁水,術后第1、2天流質飲食,第2天晚上起禁食,為指標檢測做胃腸準備,術后第4天處死大鼠檢測各項指標。假手術組將禁食48 h的sd大鼠開腹后,將胃、小腸和部分結腸移出腹腔外并用溫生理鹽水紗布覆蓋。30 min后將移出腹外的臟器回納腹腔,縫合腹部切口。術后當天恢復正常飲食,不控制食量;術后第2天晚上起禁食,為指標檢測做胃腸準備;術后第4天處死檢測各項指標。 1?4穴位定位與針刺方法取足三針(雙側后三里,相當“足三里”、雙側三陰交、雙側太沖)，定位參考實驗針灸學8。針刺組、假手術組大鼠術后清醒即予針刺,用直徑0?18 mm、長10 mm的美容針直刺入穴位,每5 min緩

4、慢提插捻轉23次,每天針刺1次,每次15 min。模型組、空白組每天同一時間放于固定器中15 min，療程3 d。 1?5排便觀察觀察并記錄大鼠術后首次排便時間。術后13 d每天收集大鼠的糞粒,烘干后用電子天平稱質量,記錄每天排便粒數、排便質量。 1?6核素掃描胃液相排空試驗術后第3天檢查前將所有大鼠禁食12 h,用安定4 mg/kg對大鼠行腹腔注射。將大鼠置入圓筒固定器,頭露于外,予液體試驗餐灌胃(液體試驗餐由99mtc?dtpa 和9 g/l生理鹽水混合配制,灌胃劑量為1?5 ml/只，試驗餐內含0?10?2 mci 99mtc?dtpa)。采用大鼠立位圓筒固定器，將大鼠放置于檢測床上,調

5、整低能通用型準直器的探頭視野中心于大鼠腹部,動態連續采集,能峰160 kev,窗寬20,矩陣256256,zoom(放大倍數)1?0,采集時間20 s/幀,術前30 min/次,術后50 min/次。采用計算機軟件(gastricemptying)處理后獲得胃排空時間曲線。通過曲線找出相對應的胃半排時間(get1/2)及60 min胃殘留率。 p胃殘留(%)=60 min胃內放射性k)/總放射性100%(k為從0時至60 min的放射性衰變校正系數)。 1?7病理切片的制作動物處死后,取盲腸下2 cm處結腸(相當吻合口處),長度為2 cm。將組織剖開去除內容物,用磷酸鹽緩沖液(pbs)漂洗,于

6、體積分數10%的福爾馬林中固定，修塊,梯度酒精脫水，包埋,修理蠟塊,切片,烤片。用二甲苯和下行梯度酒精脫蠟,水洗;用蘇木素復染510 min,水洗;接著用體積分數1%鹽酸酒精分化,溫水洗10 min，再用伊紅1 min，最后用上行梯度酒精脫水,二甲苯透明。封片(中性樹膠),閱片,照相。 1?8統計學方法采用spss 16?0軟件進行數據的統計分析。 2結果 2?1排便觀察 2?1?1各組術后首次排便時間比較 由表1可知,針刺組術后首次排便時間與模型組比較差異有顯著性意義(p0?05),說明針刺對不同腹腔手術均有作用。 2?1?2各組術后大鼠排便粒數與質量變化比較 由表2、表3可知,術后第13天

7、排便粒數和質量模型組、針刺組、假手術組與空白組比較差異均有顯著性意義(p0?05),說明針刺對不同術式的胃腸運動功能均有調整作用,針刺普遍適用于腹部術后胃腸運動功能紊亂的調整。表1各組術后首次排便時間比較 組別nt首次排便/d針刺組10 2?000?47模型組10 2?500?53假手術組101?600?52統計方法：假手術組與模型組及針刺組比較采用t檢驗，針刺組與模型組比較采用獨立樣本t檢驗;p0?05,與假手術組比較;p0?05,與模型組比較表2各組術后排便粒數比較(s) 組別n術后第1天術后第2天術后第3天針刺組100?702?21 6?105?34 11?308?04模型組100?10

8、0?32 2?100?08 5?004?74假手術組101?802?496?000?25 11?107?81空白組1036?0012?8933?107?5532?0013?95統計方法：符合方差齊性和正態分布的資料用t檢驗,否則用秩和檢驗;p0?01,與空白組比較;p0?05,與假手術組比較;p0?05,與模型組比較表3各組術后排便質量比較(s) 組別n術后第1天術后第2天術后第3天針刺組100?050?17 0?210?17 0?600?35模型組100?010?03 0?070?12 0?290?29假手術組100?080?090?250?120?620?38空白組104?712?247?

9、553?316?802?49統計方法：符合方差齊性和正態分布的資料用t檢驗,否則用秩和檢驗;p0?01,與空白組比較;p0?05,與模型組比較;p0?05,p0?01,與假手術組比較 2?2各組核素掃描胃液相排空試驗結果由表4可知,模型組與空白組的60 min胃殘留率比較差異有顯著性意義(p0?05),說明造模成功。針刺組與模型組比較差異有顯著性意義(p0?01),說明針刺能促進胃排空速度。針刺組與空白組比較差異無顯著性意義,說明術后3 d在針刺作用下胃排空功能基本恢復正常。針刺組與假手術組比較胃排空無顯著性差異,可能存在2種情況：假手術對術后胃排空影響不大,其胃排空與空白組相仿,針灸治療對胃

10、排空正常者無促進作用;假手術對術后胃排空有一定影響,但針刺治療促使其胃排空功能得到恢復,故其與針刺組無明顯差異。結合對癥狀的觀察,假手術組大鼠出現術后食欲下降,排便減少等癥狀,提示針刺對不同術式造成的胃腸運動功能紊亂均有治療作用,且治療作用相仿,均能使之恢復正常。假手術組與空白組比較,胃排空率差異無顯著性意義,也說明了針刺治療的作用。表4各組60 min胃殘留率比較(s) 組別np胃排空/%針刺組1051?9015?33模型組1076?309?73假手術組1060?4320?48空白組1062?2118?17統計方法：t檢驗;p0?05,與空白組比較;p0?01,與模型組比較;p0?05,與假

11、手術組比較 2?3各組結腸組織病理檢查結果圖1(彩圖見第555頁)結果顯示：空白組和假手術組結腸組織正常,結構清晰,未見潰瘍和炎癥水腫。模型組和針刺組均可見手術線頭和異物反應,存在黏膜潰瘍和肌層、黏膜下層及漿膜層炎癥水腫。模型組結腸潰瘍和炎癥水腫最重,可見大量急慢性炎癥細胞(中性粒細胞、淋巴細胞)浸潤,細胞密集,腸黏膜可見多處潰瘍口,腸漿膜脂肪空泡化,部分組織出血壞死;可見炎性肉芽組織,內含雜亂的表現不一的小血管。針刺組潰瘍和炎癥水腫程度較模型組輕,炎癥細胞和潰瘍較模型組少,未見出血壞死。說明針刺能促進潰瘍的愈合,減輕炎癥水腫。 3討論 中醫認為,胃腸運動功能與脾胃氣機的升降轉輸密切相關。腹部

12、手術擾亂了體內正常的氣機運行,且損耗胃腸氣血,故形成肝氣失于疏泄,脾胃失于運化的局面。臟氣疏泄運化失司,腑氣壅塞不暢而發病。 靳三針療法是靳瑞教授根據多年臨床經驗及教學實驗研究創立的一個學術體系。其中的“足三針”組穴是靳三針里使用頻率最高的組穴之一,由足三里、三陰交、太沖組成。足三里為足陽明胃經之合穴,三陰交為足太陰脾經腧穴,兩穴合用,脾胃表里相應,臟腑經氣陰升陽降,主調后天之本,一身氣機升降的樞紐。太沖是肝經原穴,肝膽表里相通,為少陽樞機,主疏泄肝經郁滯之氣以調暢氣機。三陰交又為足太陰、足少陰、足厥陰三經的交會穴,與太沖合用,借肝氣之升發以助脾土升清,使土得木而達。三穴合用,共有抑木扶土之意

13、,共奏疏肝健脾之功。 胃腸動力研究中最早使用的直接指標是胃腸推進率，采用體外放射性同位素示蹤使活體定量測量胃腸排空成為可能，而且沒有刺激性和創傷,故使用核掃描胃腸排空實驗檢測胃腸動力研究所得的結果被認為是評價消化道傳輸的“金標準”9。本研究對術后第3天的大鼠進行了核素掃描胃排空實驗，結果表明,針刺具有促進腹部術后胃排空功能恢復的作用,模型組大鼠的60 min胃殘留率與正常大鼠比較差異有顯著性意義，而針刺組大鼠的胃排空已恢復至正常大鼠水平，表明針刺能促進術后胃腸動力的恢復。 術后胃腸動力的恢復快慢往往與手術創傷程度密切相關。手術對胃腸組織創傷大,潰瘍炎癥程度重,恢復往往較慢。本實驗結腸組織病理切

14、片結果顯示,假手術組結腸組織基本沒有潰瘍和炎癥水腫,模型組存在較重的潰瘍和炎癥水腫,針刺組潰瘍和炎癥水腫較輕,說明不同術式對結腸組織創傷程度不同,而針刺能促進潰瘍的愈合,減輕炎癥水腫以修復創傷。結合排便觀察,我們可以看到,潰瘍炎癥較輕的假手術組和針刺組排便恢復較快,而潰瘍炎癥較重的模型組排便恢復較慢。故由此推斷,針刺促進潰瘍愈合,減輕炎癥水腫的作用可能是其調整腹部術后胃腸運動功能的機制之一。 【參考文獻】 1武雪宇.針灸辨證治療術后胃腸功能紊亂j.中華實用中西醫雜志,2007,20(13)：1117. 2司呈泉,宿廣峰,許振國.針刺足三里對腹部手術后胃腸功能的影響j.中國中西醫結合外科雜志,2007,13(6)：547. 3尹兆光,韓德昌,孫立芬.針刺足三里、內庭穴對腹部手術后脾虛證患者胃排空的影響j.河北中醫,2008,3o(8)：843. 4沈平,章學林,高炬，等.大承氣湯對大鼠結腸手術后腸蠕動恢復的療效初探j.江蘇中醫藥,2004,25(5)：53. 5劉少杰,楊小紅,劉建偉.外用芒硝促進大鼠腹部手術后胃腸運動的實驗研究j.廣東醫學