1、芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂

2、蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇

3、荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁

4、膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅

5、蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿

6、芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆

7、葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁

8、莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅

9、膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿

10、蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅

11、芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈

12、蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅

13、莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿

14、膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃

15、莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇

16、芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂

17、蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆

18、節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀

19、薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇

20、莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁

21、羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆

22、蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀

23、節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄

24、薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿

25、莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆

26、膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀

27、蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈肂蒀蚈蝕芇莆蚇螃肀節(jié)蚆裊芆膈蚅肇肈薇蚄螇羈蒃蚄衿膇荿蚃羂罿芅螞蟻膅膁螁螄羈蒀螀袆膃莆蝿羈羆節(jié)螈螈膁羋螈袀肄薆螇羃芀蒂螆肅肅莈螅螅羋芄莂袇肁膀蒁罿芆葿蒀蠆聿蒞葿袁芅莁蒈羃膇芇蕆肆羀薅蒆螅膆蒁蒆袈罿莇蒅羀膄芃薄蝕羇腿薃螂膂蒈薂羄羅蒄薁肇芁莀薀螆肅芆薀衿艿膂蕿羈 發(fā)酵課后題參考答案第一章 一.發(fā)酵工程技術(shù)的發(fā)展大致可分為那幾個(gè)階段？每個(gè)階段的技術(shù)特點(diǎn)是什么？答：發(fā)酵工程技術(shù)大致可分為六個(gè)發(fā)展階段分別為： 1.自然發(fā)酵階段，在這一階段人們對(duì)微生物的性質(zhì)尚未認(rèn)知，

28、只是利用自然接種方法進(jìn)行發(fā)酵制品的生產(chǎn)。此階段的技術(shù)特點(diǎn)是多數(shù)產(chǎn)品屬嫌氣發(fā)酵，且非純種培養(yǎng)，憑經(jīng)驗(yàn)傳授技術(shù)和產(chǎn)品的質(zhì)量不穩(wěn)定的特點(diǎn)。2.轉(zhuǎn)折階段，這一階段又可分為三個(gè)階段。第一個(gè)階段以純種培養(yǎng)和無(wú)菌操作技術(shù)為轉(zhuǎn)折點(diǎn)，這一階段的技術(shù)特點(diǎn)發(fā)酵過(guò)程避免了雜菌污染，發(fā)酵效率逐步提高，生產(chǎn)規(guī)模逐漸擴(kuò)大，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定提高。第二個(gè)轉(zhuǎn)折點(diǎn)是深層液體通氣攪拌純種培養(yǎng)的采用，這一階段的技術(shù)特點(diǎn)是深層液體通氣攪拌純種培養(yǎng)技術(shù)解決了大量培養(yǎng)基和生產(chǎn)設(shè)備的滅菌以及大量無(wú)菌扛起的制備問(wèn)題，且在提取精制中采用離心萃取機(jī)，冷凍干燥器等新型高效化工設(shè)備，是生產(chǎn)規(guī)模，產(chǎn)品質(zhì)量和收效穩(wěn)步提高。第三個(gè)轉(zhuǎn)折點(diǎn)是利用代謝調(diào)控進(jìn)行微生物菌

29、種選育和發(fā)酵條件的控制，技術(shù)特點(diǎn)是采用遺傳育種方法進(jìn)行微生物人工右邊，選育出某種營(yíng)養(yǎng)缺陷株或者抗代謝類似物菌株，在控制營(yíng)養(yǎng)條件的情況下發(fā)酵生產(chǎn)大量積累所預(yù)期的氨基酸。3.發(fā)酵放大技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展階段，技術(shù)特點(diǎn)是發(fā)酵罐的容積發(fā)展到前所未有的規(guī)模，發(fā)酵時(shí)氧耗大，對(duì)發(fā)酵設(shè)備提出了新的要求，并逐步運(yùn)用計(jì)算機(jī)以及自動(dòng)化控制技術(shù)進(jìn)行滅菌和發(fā)酵過(guò)程的ph，溶解氧等發(fā)酵參數(shù)的控制，使發(fā)酵生產(chǎn)向連續(xù)化，自動(dòng)化前進(jìn)了一大步。4.以基因工程為中心的時(shí)代。技術(shù)特點(diǎn)是定向的改變生物性狀與功能，創(chuàng)造新物種的目的，賦予微生物細(xì)胞具有生產(chǎn)較高等生物細(xì)胞所產(chǎn)生的和化合物的能里。擴(kuò)大了微生物的范圍，大大豐富了發(fā)酵產(chǎn)業(yè)的內(nèi)容，使發(fā)

30、酵工業(yè)發(fā)生了革命性的變化。二.簡(jiǎn)述工業(yè)發(fā)酵的應(yīng)用范圍？答：發(fā)酵工業(yè)的應(yīng)用范圍很廣，按其產(chǎn)品可以分為四大類：11.微生物菌體。工業(yè)生產(chǎn)的微生物菌體可分為兩種，一種是供制面包用的酵母，另一種是作為人類或者動(dòng)物使用的微生物細(xì)胞。2.酶制劑。微生物酶制劑可以用發(fā)酵技術(shù)來(lái)大量生產(chǎn)，而且提高微生物的生產(chǎn)能力很方便，具有動(dòng)物或植物無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn)。現(xiàn)今酶制劑廣泛用于醫(yī)藥，食品加工，活性飼料，纖維脫漿等許多行業(yè)。3.代謝產(chǎn)物。微生物利用外界的營(yíng)養(yǎng)無(wú)知，通過(guò)包括分解代謝和合成代謝在內(nèi)的兩種緊密相關(guān)的物質(zhì)代謝過(guò)程，生產(chǎn)許多重要的代謝產(chǎn)物，包括初級(jí)代謝產(chǎn)物和刺激代謝產(chǎn)物。4.生物轉(zhuǎn)化。生物轉(zhuǎn)化是指利用微生物細(xì)胞或者酶

31、對(duì)化合物的某一部位進(jìn)行催化修飾，使其變成結(jié)構(gòu)像是淡具有更大經(jīng)濟(jì)價(jià)值的化合物。生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)通常包括脫氫，氧化，酰化等作用。三.簡(jiǎn)述液體發(fā)酵生產(chǎn)的一般工藝流程。答：液體發(fā)酵的工藝流程可以劃分為一下六個(gè)基本工程：1.用作種子擴(kuò)大培養(yǎng)及發(fā)酵生產(chǎn)的各種培養(yǎng)基的配制。2.培養(yǎng)基，發(fā)酵罐及其附屬設(shè)備的滅菌。3.擴(kuò)大培養(yǎng)有活性的適量純種，以一定的比例將菌種介入發(fā)酵罐中。4.控制合適的發(fā)酵條件使微生物生長(zhǎng)并形成大量的代謝產(chǎn)物。5.將產(chǎn)物提取并精制，以得到合格的產(chǎn)品。6.回收或處理發(fā)酵過(guò)程中形成的三毀無(wú)知。四.結(jié)合科學(xué)發(fā)展和國(guó)家的需要，討論發(fā)酵工業(yè)的發(fā)展前景、答：發(fā)酵工程未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)主要有以下幾大方面:1.基因

32、工程的發(fā)展為發(fā)酵工程帶來(lái)了新的活力。主要是以基因工程為龍頭，對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵工業(yè)進(jìn)行改造，提高發(fā)酵單位，建立新型的發(fā)酵產(chǎn)業(yè)。2.新型發(fā)酵設(shè)備的研制為發(fā)酵工程提供先進(jìn)的工具。新型發(fā)酵設(shè)備主要是指發(fā)酵罐，也可以稱為生物反應(yīng)器。3.大型化，連續(xù)化，自動(dòng)化控制技術(shù)的應(yīng)用為發(fā)酵工程的發(fā)展提供了新空間。這些技術(shù)的應(yīng)用，大大提高了發(fā)酵的效率和質(zhì)量，降低了能耗和成本，開(kāi)拓了發(fā)酵原料的來(lái)源和用途，提高了設(shè)備的利用率。4.強(qiáng)調(diào)代謝機(jī)理與調(diào)控的研究，使微生物的發(fā)酵技能得到進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)。5.生態(tài)型發(fā)酵工業(yè)的興起開(kāi)拓了發(fā)酵的新領(lǐng)域。6.再生資源的利用給人們帶來(lái)了希望。對(duì)各種廢棄物的處理和轉(zhuǎn)化，變害為寶，實(shí)現(xiàn)無(wú)害化，資源化和產(chǎn)

33、業(yè)化具有重大的意義。五.簡(jiǎn)述發(fā)酵工程與生物技術(shù)和生物工程其它學(xué)科的區(qū)別和聯(lián)系。答：現(xiàn)代身無(wú)技術(shù)作為生命科學(xué)的核心備受重視，它可以解決可持續(xù)發(fā)展中的糧食，能源，資源，環(huán)境等各方面的問(wèn)題。通常身無(wú)技術(shù)可分為基因工程，細(xì)胞工程，發(fā)酵工程，酶工程，升華工程等五個(gè)方面，它們緊密相連，不可分割。發(fā)酵工程和生化工程通常合稱為中下游生物技術(shù)，是現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)成果產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵技術(shù)，發(fā)酵工程更具有連接生物技術(shù)上下游的紐帶作用，學(xué)科地位顯而易見(jiàn)。 第四章一.試述消毒和滅菌的區(qū)別。答：消毒是用物理或化學(xué)的方法殺死無(wú)聊和設(shè)備中所有生命無(wú)知的過(guò)程。滅菌是用無(wú)力或化學(xué)的方法殺死空氣，地表以及容器和器具表面的微生物。消毒和

34、滅菌的區(qū)別一方面在于消毒僅僅殺死生物體或非生物體表面的微生物，而滅菌是殺死所有的生命體。另一方面在于消毒一般只能殺死營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，而不能殺死細(xì)菌芽胞和真菌孢子等，適合于發(fā)酵車(chē)間的環(huán)境和發(fā)酵設(shè)備，器具的無(wú)菌處理。二.染菌對(duì)發(fā)酵有什么危害，對(duì)產(chǎn)物有什么危害？試從污染雜菌的種類分析發(fā)酵污染的原因，染菌以后應(yīng)采取那些措施？答：染菌對(duì)發(fā)酵及發(fā)酵產(chǎn)物的危害如下：1.由于雜菌污染，使發(fā)酵培養(yǎng)基因雜菌的消耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降。2.雜菌合成了一些新的代謝產(chǎn)物，或雜菌污染后改變了培養(yǎng)基的理化性質(zhì)，使 發(fā)酵產(chǎn)物的提取和分離變得困難，再成產(chǎn)物收率或產(chǎn)品質(zhì)量的下降。3.雜菌代謝會(huì)改變?cè)磻?yīng)體系的ph，使發(fā)酵發(fā)生一場(chǎng)

35、的變化。4.雜菌分解產(chǎn)物，是生產(chǎn)失敗。5.細(xì)菌發(fā)生噬菌體污染，衛(wèi)生物細(xì)胞被破裂，導(dǎo)致整個(gè)發(fā)酵的失敗。三.如何避免菌種在移接過(guò)程中染菌？答：為了避免軍中在移接過(guò)程中的染菌，首先要嚴(yán)格無(wú)菌室制度，嚴(yán)格控制無(wú)菌室的潔凈程度，根據(jù)生產(chǎn)工藝的要求，建立合理的無(wú)菌室，并交替使用各種滅菌手段對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行滅菌。另外將種子的轉(zhuǎn)移，接種等操作放在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，嚴(yán)格按照無(wú)菌操作要求接種。四.簡(jiǎn)述染菌的檢驗(yàn)方法及染菌類型的判斷。答：生產(chǎn)上要求準(zhǔn)確，迅速的方法來(lái)檢查出污染雜菌的類型及其可能的染菌途徑，目前有一下幾種常用的方法。1.顯微鏡檢查法。通常用簡(jiǎn)單的染色法或革蘭氏染色法，將菌體染色后鏡檢。對(duì)于霉菌，酵母發(fā)酵，

36、先用低倍鏡觀察生產(chǎn)菌的特征，然后用高倍鏡觀察有無(wú)雜菌的存在。根據(jù)生產(chǎn)菌與雜菌的不同特征來(lái)判斷是否雜菌，必要時(shí)還可用芽胞染色或鞭毛染色。2.平板劃線培養(yǎng)檢查法。先將待檢樣品愛(ài)無(wú)菌平板上劃線，根據(jù)可能的染菌類型分別置于37或27攝氏度下培養(yǎng)，8個(gè)小時(shí)后可觀察到是否有雜菌污染。對(duì)于噬菌體檢查，可采用雙層平板培養(yǎng)法。3.肉湯培養(yǎng)檢查法。將待檢樣品介入無(wú)菌的肉湯培養(yǎng)基中，分別置于37或27攝氏度下進(jìn)行培養(yǎng)，隨時(shí)觀察微生物的生長(zhǎng)情況，并取樣鏡檢，判讀是否有雜菌污染及雜菌的類型。4.發(fā)酵過(guò)程的異常現(xiàn)象觀察法。發(fā)酵過(guò)程出現(xiàn)的異常現(xiàn)象如溶解氧，ph，尾氣中二氧化碳含量，發(fā)酵液的粘度等的異常變化，都可能產(chǎn)生染菌的

37、重要信息，也根據(jù)這些異常現(xiàn)象來(lái)分析發(fā)酵是否染菌。五.簡(jiǎn)述影響培養(yǎng)基滅菌效果和滅菌時(shí)間的因素有那些？答：影響培養(yǎng)基滅菌效果和滅菌時(shí)間的因素有很多，主要有以下幾種因素：污染雜菌的種類，數(shù)量，滅菌的溫度，壓力和時(shí)間，培養(yǎng)基的成分，ph，物理狀態(tài)，泡沫以及微生物德?tīng)枱嶙璧取?六.感染了噬菌體后應(yīng)采取哪些措施？答：在細(xì)菌或放線菌發(fā)酵過(guò)程中，由于噬菌體的感染力非常強(qiáng)，傳播蔓延迅速，發(fā)酵體系容易受噬菌體的污染。噬菌體易在空氣中傳播，因此環(huán)境污染是噬菌體染菌的主要根源。目前最有效的防止噬菌體感染的方法是以凈化環(huán)為中心的綜合防治法，主要有凈化生產(chǎn)環(huán)境，消滅污染源，提高空氣的凈化度，保證純種培養(yǎng)，輪換使用同類型的

38、菌種，使用抗噬菌體的軍中，改進(jìn)設(shè)備裝置消滅死角，遵從操作規(guī)范等措施。若在培養(yǎng)前期染菌，重新滅菌然后重新接種：若培養(yǎng)中后期染菌，則要倒掉培養(yǎng)基，重新配制。七.為提高空氣過(guò)濾除菌效率可采取哪些有效措施？答：提高空氣過(guò)濾除菌效率生產(chǎn)上進(jìn)場(chǎng)采用以下一些措施：1.正確選擇采氣口，提高采氣口的位置或安裝前置粗過(guò)濾器，提高空壓機(jī)進(jìn)口空氣的潔凈度等。2.根據(jù)發(fā)酵工廠地理氣候條件，設(shè)計(jì)合理的空氣預(yù)處理流程，盡可能的減少過(guò)濾空氣的含油量和濕度，適當(dāng)?shù)奶岣呖諝獾臏囟龋档涂諝獾南喈?dāng)濕度，保持過(guò)濾的干燥狀態(tài)。此外，防止空氣過(guò)濾器的滲漏，勿使冷卻水進(jìn)入空氣處理系統(tǒng)。3.設(shè)計(jì)和安裝合理的空氣過(guò)濾器，防止過(guò)濾器失效，選擇除

39、菌效率高的過(guò)濾介質(zhì)。(蘇磊)第二章1 發(fā)酵工業(yè)用菌種應(yīng)具備哪些特點(diǎn)？能在廉價(jià)原料制成的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，且生成的目的產(chǎn)物產(chǎn)量高、易于回收；生長(zhǎng)較快，發(fā)酵周期短；培養(yǎng)條件易于控制；抗噬菌體及雜菌污染的能力強(qiáng)；菌種不易變異退化，以保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定；對(duì)放大設(shè)備的適應(yīng)性強(qiáng)；菌種不是病原菌，不產(chǎn)生任何的生物活性物質(zhì)和毒素。2.什么是選擇性培養(yǎng)基？它在菌種篩選中有何應(yīng)用價(jià)值？試舉例說(shuō)明選擇性培養(yǎng)基的篩選原理。選擇性培養(yǎng)基是用來(lái)將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基。根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的

40、微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng)，提高所需微生物的分離效率。一種類型選擇培養(yǎng)基是依據(jù)某些微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求設(shè)計(jì)的，也可以稱為富集培養(yǎng)基。例如，利用以纖維素或石蠟油作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；利用以蛋白質(zhì)作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基；缺乏氮源的選擇培養(yǎng)基等。另一種類型選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，這種化學(xué)物質(zhì)沒(méi)有營(yíng)養(yǎng)作用，對(duì)所需分離的微生物無(wú)害，但可以抑制或殺死其他微生物。例如，在培養(yǎng)基中加入數(shù)滴10酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)，從而從混雜的微生物群體中分離出放線菌；在培養(yǎng)基中加入亞硫酸鉍，可以抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和絕大多數(shù)革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng)，而革蘭氏陰性的傷寒沙門(mén)氏菌可以在這種培養(yǎng)基上

41、生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入染料亮綠或結(jié)晶紫，可以抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)，從而達(dá)到分離革蘭氏陰性細(xì)菌的目的。現(xiàn)代基因克隆技術(shù)中也常用選擇培養(yǎng)基，在篩選含有重組質(zhì)粒的基因工程菌株過(guò)程中，利用質(zhì)粒上具有的對(duì)某種（些）抗生素的抗性選擇標(biāo)記，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)抗生素，就能比較方便地淘汰非重組菌株，以減少篩選目標(biāo)菌株的工作量。3. 以氨基酸代謝為例，說(shuō)明為什么有些突變菌株對(duì)末端代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)類似物具有抗性？答：正常情況下，代謝末端產(chǎn)物氨基酸a是菌體蛋白的必需組成成分，它能反饋?zhàn)瓒艋蛞种坪铣伤挠嘘P(guān)酶。它的結(jié)構(gòu)類似物a在空間結(jié)構(gòu)上與之相似，也能象a一樣與原阻遏物或調(diào)節(jié)酶的調(diào)節(jié)亞基結(jié)合，從而發(fā)生阻遏或抑制作用。但

42、a不能正常參與蛋白質(zhì)的合成，或只能合成無(wú)活性的蛋白質(zhì)。當(dāng)結(jié)構(gòu)類似物a達(dá)到一定濃度后，一方面a能起反饋控制作用，阻止a的正常合成，另一方面a又無(wú)法代替a參與正常蛋白質(zhì)的合成，從而造成正常的細(xì)胞因缺乏a而饑餓死亡。但如果突變株解除了反饋控制，即末端產(chǎn)物氨基酸a無(wú)法與原阻遏物或調(diào)節(jié)亞基結(jié)合，那么a也就無(wú)法起反饋調(diào)節(jié)作用，a的毒害作用就表現(xiàn)不出來(lái)。我們說(shuō)該菌株對(duì)a有抗性而得以生存下來(lái)。根據(jù)以上原理，只要選取結(jié)構(gòu)類似物抗性突變株，就有可能得到解除了反饋調(diào)節(jié)的突變株。結(jié)構(gòu)類似物抗性菌株不一定都是解除反饋調(diào)節(jié)的菌株。4.防止菌種退化的方法有：減少傳代，創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件，用單細(xì)胞移植傳代及科學(xué)保藏等措施5簡(jiǎn)

43、述自然界分離微生物的一般步驟自然界分離微生物主要是從土壤中采集 具體步驟如下：1. 含微生物的樣品的采集采樣時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題:n土壤微生物的分布n采土深度n土壤植被情況n采樣季節(jié)n土壤的酸堿度對(duì)于分離篩選新菌種，還存在另兩個(gè)選擇標(biāo)準(zhǔn)：n土壤來(lái)源廣泛n在已適應(yīng)相當(dāng)苛刻環(huán)境壓力的微生物類群中尋找新菌種2) 樣品的預(yù)處理目的：提高分離效率方法：n物理方法：熱處理；膜過(guò)濾法；離心法n化學(xué)方法n誘餌法3)分離方法的選擇 根據(jù)目的菌有無(wú)選擇性特征來(lái)選擇分離方法:選擇性分離 n菌種的營(yíng)養(yǎng)特征獨(dú)特 n生長(zhǎng)特征獨(dú)特 n無(wú)選擇性特征: 根據(jù)產(chǎn)物的特征進(jìn)行隨機(jī)分離 選擇性分離的關(guān)鍵：生長(zhǎng)培養(yǎng)條件的選擇與控制，從而實(shí)現(xiàn)

44、定向富集篩選。 6.菌種選育分子改造的目的是什么，具體方法有哪些？來(lái)源于自然界中的微生物菌種，在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成了一整套緊密的代謝機(jī)制，微生物細(xì)胞內(nèi)具有反饋抑制阻遏代謝等代謝調(diào)控系統(tǒng)，不會(huì)過(guò)量生產(chǎn)超過(guò)其自身生長(zhǎng).代謝需要的酶或代謝產(chǎn)物。所以，從自然界分離得到的野生菌株，不論在產(chǎn)量或質(zhì)量上，都很難適合工業(yè)話生產(chǎn)的要求，因此需要進(jìn)行菌種改良。改良目的主要有以下四點(diǎn)：1）。提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量。2）。提高目標(biāo)產(chǎn)物的純度，減少副產(chǎn)物。3 ).改良菌種性狀，改善發(fā)酵過(guò)程，4 ）改變生物合成途徑，以獲得高產(chǎn)的新產(chǎn)品。改良方法：1 ）代謝水平調(diào)節(jié)：是只對(duì)生物的初級(jí)和次級(jí)代謝的酶合成和酶活性的調(diào)節(jié)。2 ）常規(guī)

45、育種，包括誘變和篩選。3 ）細(xì)胞工程育種。雜交育種和原生質(zhì)體融和育種。4 ）基因工程育種。 5 ）蛋白質(zhì)工程育種 6 ）代謝工程育種7. 自然選育 在生產(chǎn)過(guò)程中，不經(jīng)過(guò)人工處理，利用菌種的自發(fā)突變，從而選育出優(yōu)良菌種的過(guò)程，叫做自然選育自然選育的主要作用是對(duì)菌種純化以獲得遺傳背景較為均一的細(xì)胞群體。一般菌種經(jīng)過(guò)多次傳代或長(zhǎng)期保藏后，由于自然突變或異核體和多倍體的分離，使有些細(xì)胞的遺傳性狀發(fā)生改變，造成菌種不純，嚴(yán)重者生產(chǎn)能力下降，稱為菌種退化。因此在工業(yè)生產(chǎn)和發(fā)酵研究中要經(jīng)常進(jìn)行菌種純化。微生物的自然突變率很低，因此通過(guò)自然選育來(lái)獲得優(yōu)良菌株的效果遠(yuǎn)不如誘變育種。8.如何實(shí)現(xiàn)使微生物合成比自身

46、需求多得多的產(chǎn)物？試舉例說(shuō)明。育種工作者的任務(wù)是設(shè)法在不損及微生物的基本活動(dòng)的前提下，采用物理、化學(xué)或生物學(xué)以及各種工程學(xué)方法，改變微生物的遺傳結(jié)構(gòu)，打破其原有的代謝控制機(jī)制，使之成為“浪費(fèi)型”菌種。同時(shí)，按照人們的需要和設(shè)計(jì)安排，進(jìn)行目的產(chǎn)物的過(guò)量生產(chǎn)，最終實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的目的。分為以下育種方法：常規(guī)育種，細(xì)胞工程育種，基于代謝調(diào)節(jié)的育種技術(shù)，基因工程育種，蛋白質(zhì)工程育種，代謝工程育種，組成生物合成育種，反向生物工程育種。常規(guī)育種包括誘變和篩選，其理論基礎(chǔ)是基因突變，新的誘變技術(shù)如：低能離子束誘變，激光輻射誘變和微波電磁輻射誘變，原生質(zhì)體誘變等。細(xì)胞工程包括雜交育種和原生質(zhì)體融合育種。代謝工程育

47、種是通過(guò)特定突變型的選育，達(dá)到改變代謝通路、降低支路代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)或切斷支路代謝途徑及提高細(xì)胞膜的透性，使代謝流向目的產(chǎn)物積累的方向進(jìn)行。基因工程能創(chuàng)造新的物種，能賦予微生物新的機(jī)能，使微生物生產(chǎn)出自身本來(lái)不能合成的新物質(zhì)，或者增強(qiáng)它原有的合成能力。蛋白質(zhì)工程主要是尋找新的物種，再?gòu)闹蟹蛛x篩選新的蛋白，或通過(guò)對(duì)天然功能蛋白進(jìn)行改造。9. 設(shè)計(jì)一個(gè)從自然界中篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌的實(shí)驗(yàn)方案，說(shuō)出主要步驟及基本原理。答：欲從自然界中篩選高溫淀粉酶產(chǎn)生菌，最好在溫度較高的南方，或溫泉，火山爆發(fā)及北方堆肥中采集樣品。將采集來(lái)的樣品經(jīng)過(guò)預(yù)處理（如高溫加熱），減少雜菌量，然后進(jìn)行富集培養(yǎng)，富集培養(yǎng)以淀粉為唯

48、一碳源，這樣形成的優(yōu)勢(shì)菌種即為以為能產(chǎn)生淀粉酶的一類菌株，然后采用平板篩選，通過(guò)初篩與復(fù)篩，最終獲得性能優(yōu)越的高溫淀粉酶產(chǎn)生菌。10. 如果纖維素酶的合成受反饋?zhàn)瓒糇饔玫恼{(diào)控，如何根據(jù)這一調(diào)控機(jī)制設(shè)計(jì)纖維素酶高產(chǎn)菌的選育方案？答：將菌種經(jīng)過(guò)紫外線照射或其他方式誘變后接種在纖維素基質(zhì)培養(yǎng)基上，在篩選纖維素酶活高產(chǎn)菌時(shí)可通過(guò)剛果紅染色透明圈法篩選、進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)物酶活性11.菌種保藏主要利用哪些原理，試舉例說(shuō)明。菌種保藏的基本原理主要是根據(jù)微生物的生理、生化特點(diǎn)，人工地創(chuàng)造條件，使微生物的代謝處于不活潑、生長(zhǎng)繁殖受抑制的休眠狀態(tài)。斜面低溫保藏法的原理是低溫；礦油封藏法（液體石蠟保藏法）的原理是低溫、缺

49、氧、缺營(yíng)養(yǎng)；冷凍真空干燥法的原理是低溫、干燥、缺氧；液氮超低溫保藏法的原理是在超低溫（低于-130）狀態(tài)下，所有的代謝活動(dòng)暫時(shí)停止而生命延續(xù)，并且不會(huì)發(fā)生變異。第四章 發(fā)酵工業(yè)的無(wú)菌技術(shù)1、 答：滅菌指用物理或化學(xué)方法殺死物料或設(shè)備中所有生命物質(zhì)的過(guò)程；消毒指用物理或化學(xué)方法殺死空氣、地表以及容器和器具表面的微生物；消毒和滅菌的區(qū)別在于：消毒僅僅是殺滅生物體或非生物體表面的微生物，而滅菌是殺滅所有的生命體。2、 答：染菌對(duì)發(fā)酵的危害：a、消耗營(yíng)養(yǎng)；b、雜菌合成新產(chǎn)物，改變發(fā)酵液的某些物化性質(zhì)，造成產(chǎn)物分離困難；c、改變ph；d、分解產(chǎn)物；e、噬菌體破壞極大，使微生物細(xì)胞裂解，導(dǎo)致整個(gè)發(fā)酵失敗。

50、若污染耐熱芽孢桿菌，則染菌原因通常為滅菌不徹底；若污染球菌、無(wú)芽孢桿菌，則種子帶菌、無(wú)菌空氣帶菌、設(shè)備滲漏和操作失誤都有可能；若污染淺綠色菌落的雜菌，則與水有關(guān)，通常為冷卻盤(pán)管滲漏的原因。染菌以后采取的措施：種子擴(kuò)大時(shí)期染菌，滅菌后棄去；發(fā)酵前期染菌，應(yīng)迅速重新滅菌，補(bǔ)充必要的營(yíng)養(yǎng)成分，重新接種；發(fā)酵中期染菌，挽救困難，應(yīng)早發(fā)現(xiàn)，快處理，處理方法應(yīng)根據(jù)各種發(fā)酵的特點(diǎn)和具體情況來(lái)決定；發(fā)酵后期污染，若染菌量不多，可繼續(xù)發(fā)酵，若污染嚴(yán)重，則提前放罐。3、 答：a、嚴(yán)格無(wú)菌室管理制度，嚴(yán)格控制無(wú)菌室的潔凈程度；b、交替使用各種滅菌手段對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行經(jīng)常性的潔凈處理；c、將種子的轉(zhuǎn)移、接種等操作放在潔凈

51、工作臺(tái)上進(jìn)行，嚴(yán)格按照無(wú)菌操作要求接種。4、 答：染菌檢驗(yàn)方法與判斷：a、顯微鏡檢查；b、平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法，噬菌體檢查可采用雙面平板法：噬菌斑；c、肉湯培養(yǎng)檢查法；d、發(fā)酵過(guò)程的異常現(xiàn)象觀察。5、 因素有：a、培養(yǎng)基成分；b、培養(yǎng)基ph；c、培養(yǎng)基的物理狀態(tài)；d、泡沫；e、培養(yǎng)基中的微生物量。6、 答：如果污染了噬菌體，通常采用甲醛、雙氧水或高錳酸鉀等滅菌劑處理。（不是很有把握）7、 答：可采用措施有：a、提高空氣吸氣口的位置；b、在空氣吸入口處設(shè)置粗過(guò)濾器，以濾去空氣中顆粒較大的塵埃。8、 解：t = 2.303 / k *lg(105*30*106/0.001)=3.24 mi

52、n 由于連消塔不能保證先進(jìn)先出，所以培養(yǎng)液至少需維持8min。故維持體積為：v= 6 / 60 *8 *0.9=0.89 m3 (0.9為充滿系數(shù))9、 解：由 得： 查表得26，所以至少應(yīng)冷卻至 26。（曹雄文）第三章 史達(dá) 生物技術(shù)0502班1、什么是培養(yǎng)基？簡(jiǎn)述發(fā)酵培養(yǎng)基的特點(diǎn)和要求。培養(yǎng)基是指用于維持微生物生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)物形成的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。發(fā)酵培養(yǎng)基的特點(diǎn)和要求：?jiǎn)挝慌囵B(yǎng)基既能夠產(chǎn)生最大量的目的產(chǎn)物；能夠使目的產(chǎn)物的合成速率最大；能夠使副產(chǎn)物合成的量盡可能少；所采用的培養(yǎng)基應(yīng)該質(zhì)量穩(wěn)定、價(jià)格低廉、易于長(zhǎng)期獲得；所采用的培養(yǎng)基盡量不影響工業(yè)好氣發(fā)酵中的通氣攪拌性能以及發(fā)酵產(chǎn)物的后處理等。2、

53、什么是生長(zhǎng)因子？從廣義上講，凡是微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量的有機(jī)物質(zhì)，如氨基酸、嘧啶、嘌呤、維生素等均為生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子不是對(duì)于所有微生物都必須的，它只是對(duì)于某些自己不能合成這些成分的微生物才是必不可少的營(yíng)養(yǎng)物。3、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的一般步驟和應(yīng)注意的問(wèn)題。培養(yǎng)基設(shè)計(jì)和優(yōu)化過(guò)程一般步驟：根據(jù)以前的經(jīng)驗(yàn)以及在培養(yǎng)基成分確定前必須考慮的一些問(wèn)題，初步確定可能的培養(yǎng)基組分；通過(guò)單因子優(yōu)化試驗(yàn)確定最為適宜的各個(gè)培養(yǎng)基組分及其最適濃度；最后通過(guò)多因子實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步優(yōu)化培養(yǎng)基的各種成分及其最適濃度。應(yīng)注意的問(wèn)題：必須根據(jù)具體情況抓住主要環(huán)節(jié)，使其既能滿足微生物的生長(zhǎng)要求，又能獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的產(chǎn)品，同時(shí)也要符合增

54、產(chǎn)節(jié)約、因地制宜的原則。4、工業(yè)發(fā)酵常用的碳源有哪些？常用的糖類有哪些，各自有何特點(diǎn)？工業(yè)發(fā)酵中，常用的碳源有糖類、油脂、有機(jī)酸和低碳酸等。其中，糖類是發(fā)酵培養(yǎng)基中應(yīng)用最廣泛的碳源，主要有葡萄糖、糖蜜和淀粉。葡萄糖是最容易利用的碳源之一，幾乎所有的微生物都能利用葡萄糖。葡萄糖是加速微生物生長(zhǎng)的一種速效碳源，但過(guò)多的葡萄糖會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的合成(加速呼吸、降低溶解氧、積累中間產(chǎn)物、降低ph、影響酶的活性)。糖蜜是制糖生產(chǎn)時(shí)的結(jié)晶母液，是制糖工業(yè)的副產(chǎn)物。其中含有豐富的糖、氮類化合物、無(wú)機(jī)鹽和維生素等，是價(jià)廉物美的碳源。淀粉等多糖作為碳源，可克服葡萄糖效應(yīng)對(duì)次生代謝產(chǎn)物合成的影響，價(jià)格也比

55、較低廉。5、常用的無(wú)機(jī)氮源和有機(jī)氮源有哪些？簡(jiǎn)述各類氮源在發(fā)酵培養(yǎng)基中的作用。常用的有機(jī)氮源有黃豆餅粉、花生餅粉、棉子餅粉、玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、魚(yú)粉和酒糟等；常用的無(wú)機(jī)氮源有銨鹽、硝酸鹽和氨水等。氮源主要用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)和合成含氮代謝物。有機(jī)氮源含有豐富的蛋白質(zhì)、多肽和游離氨基酸外往往還含有少量的糖類、脂肪、無(wú)機(jī)鹽、維生素及某些生長(zhǎng)因子，故其營(yíng)養(yǎng)豐富；有機(jī)氮源除了作為菌體生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)外，大多數(shù)發(fā)酵工業(yè)利用有機(jī)氮源來(lái)獲得所需的氨基酸；此外，某些有機(jī)氮源還是產(chǎn)物的前體。無(wú)機(jī)氮源也稱為速效氮源，微生物對(duì)他們的吸收利用一般較快；此外，其作為生理酸、堿性物質(zhì)，可以穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過(guò)程

56、的ph。6、什么是理論轉(zhuǎn)化率和實(shí)際轉(zhuǎn)化率？理論轉(zhuǎn)化率：理論狀態(tài)下根據(jù)微生物的代謝途徑進(jìn)行物料衡算，得出原材料的轉(zhuǎn)化率大小。實(shí)際轉(zhuǎn)化率：發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中所得原材料的轉(zhuǎn)化率大小。由于實(shí)際發(fā)酵過(guò)程中，一般有副產(chǎn)物形成、原材料利用不完全等因素存在，實(shí)際轉(zhuǎn)化率往往要小于理論轉(zhuǎn)化率。7、舉例說(shuō)明培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的方法和步驟？首先，做好調(diào)查研究工作，了解菌種的來(lái)源、生長(zhǎng)規(guī)律、生理生化特征和一般的營(yíng)養(yǎng)要求。其次，對(duì)生產(chǎn)菌種的培養(yǎng)條件，生物合成的代謝途徑，代謝產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)、分子結(jié)構(gòu)，一般提煉方法和產(chǎn)品質(zhì)量要求也需要有所了解，以便在選擇培養(yǎng)基時(shí)心中有數(shù)。最好先以一種較好的化學(xué)合成培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，先做一些搖床試驗(yàn)，然后進(jìn)一步做

57、小型發(fā)酵罐培養(yǎng)，摸索菌種對(duì)各種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如碳源和氮源的利用情況和生產(chǎn)代謝產(chǎn)物的能力。注意培養(yǎng)過(guò)程中的ph變化，觀察適合于菌種生長(zhǎng)繁殖和適合于代謝產(chǎn)物形成的兩種不同的ph，不斷調(diào)整配比來(lái)適應(yīng)上述情況和要求。有了初步結(jié)果后，先確定培養(yǎng)基配比，再確定各種重要的金屬和非金屬離子對(duì)發(fā)酵的影響，即對(duì)各種無(wú)機(jī)元素的營(yíng)養(yǎng)要求，試驗(yàn)其最佳范圍和最佳用量。在合成培養(yǎng)基上得出一定結(jié)果后，在做復(fù)合培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)；最后通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定各種發(fā)酵條件和培養(yǎng)基的關(guān)系。8、簡(jiǎn)述培養(yǎng)基優(yōu)化在發(fā)酵優(yōu)化控制中的作用。一個(gè)好的發(fā)酵培養(yǎng)基是一個(gè)發(fā)酵產(chǎn)品能否成功實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化和商業(yè)化的關(guān)鍵一環(huán)。第五章 韓玉玲 生物技術(shù)0502班1簡(jiǎn)述種子擴(kuò)大培養(yǎng)的目的與要求及一般步驟。目的：為每次工業(yè)規(guī)模的發(fā)酵生產(chǎn)提供相當(dāng)數(shù)量的代謝旺盛的種子。要求： 菌種細(xì)胞的生活力強(qiáng)，轉(zhuǎn)種之發(fā)酵罐后能迅速生長(zhǎng)，延遲期短菌種生理壯大穩(wěn)定，如菌絲形態(tài)、菌絲生長(zhǎng)速率和種子培養(yǎng)液的特性等符合要求。菌種濃度及總量能滿足大容量發(fā)酵罐接種量的要求。無(wú)雜菌污染，保證純種發(fā)酵。菌種適應(yīng)性強(qiáng)，能保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。一般步驟;：將沙土管或冷凍干燥管中的種子接種到斜面培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng)。將生長(zhǎng)良好的斜面孢子或菌絲轉(zhuǎn)種到扁瓶固體培養(yǎng)基或搖瓶液體培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，完成實(shí)驗(yàn)室種子制備。將擴(kuò)大的孢子或菌絲體接種到一級(jí)種子罐，制備生產(chǎn)用種子。如有需要，可將一級(jí)種子再轉(zhuǎn)種到二級(jí)種子罐進(jìn)行擴(kuò)