1、第 18 頁 共 18 頁植物組織培養復習思考題1 植物組織培養（廣義）的含義是什么？如何根據不同的依據對它進行分類？2 植物組織培養的生理依據有哪些？ 3 植物組織培養的應用情況如何？4 如何設計一個理想的組培實驗室？5 組培中有哪些儀器設備、玻璃器皿和器械用具？6 怎樣做好器皿的清洗與培養器皿的選擇工作？7 培養基的種類有哪些？什么叫大量元素與微量元素？8 培養基的成分有哪些？9 配制培養基前需做好哪些準備工作？10 常用培養基的配方及其特點是什么？11 什么叫外植體？外植體的選擇原則怎樣？12 常用消毒劑的使用和效果情況如何？13 什么叫污染？組培中污染的原因和預防措施有哪些？ 如何區別

2、真菌與細菌污染？14 適宜外植體培養的條件是什么？15 請圖示外植體的成苗途徑16 什么叫褐變？褐變的原因及其預防措施有哪些？17 什么叫玻璃化現象？防止玻璃化的措施有哪些？18 什么叫試管苗？試管苗的生態環境及其特點是什么？19 試管苗馴化的目的、原則和方法是什么？20 試管苗的移栽方法有哪幾種？21 提高試管苗移栽成活率有哪些途徑？22 年增殖率的估算公式及含義是什么？ y=axn y：年增殖率， a：每瓶苗數， x：每次增殖倍數， n：每年增殖次數23 什么叫愈傷組織？ 影響愈傷組織誘導的重要因素是什么？ 24 什么叫胚狀體？25 什么叫莖段培養？25莖尖培養脫毒的原理是什么？ 26為什

3、么說莖尖培養是目前生產上最常用的脫毒措施？ 27除莖尖培養外，還有哪些脫毒途徑？28鑒定脫毒苗有哪幾種方法？29花粉植株的誘導途徑有哪幾種？30從花藥培養分化產生植株有哪兩種方式？ 31試述花培的意義？ 水稻花培技術32什么叫胚培養？胚培養的類型和意義有哪些？33離體胚培養的發育途徑有哪幾條？34單細胞的分離方法有哪些？機械法與酶解法 35什么叫植物細胞懸浮培養？ 36懸浮培養的條件和培養方法怎樣？ 37單細胞培養技術有哪幾種？ 38什么叫原生質體、原生質體培養、原生質體的分離與純化、原生質體融合？ 39細胞融合的方法與程序怎樣？40什么叫種質、種質保存、離體保存、低溫保存與超低溫保存？41什

4、么是經營思想？什么是經營方針？42何謂營銷策略和產品開發策略？43怎樣計算試管繁殖的增殖率？44制定全年的生產計劃。45成本核算包括哪些內容？46核算一種植物年產50萬株的成本和利潤。47減低成本、提高經濟效益的措施有哪些？ 部分解釋題與問答題的參考答案一、部分解釋題的參考答案 1胚胎培養指把原胚或成熟胚、胚乳、胚珠或子房分離出來，在人工合成的培養基上培養，使其成為正常的植株。 2器官培養指分離莖尖、莖段、根尖、根、葉片、葉原基、子葉、花瓣、花藥或花粉、果實等作為外植體，在人工合成的培養基上培養，使其發育成完整的植株。 3細胞培養包括單細胞、多細胞或懸浮細胞和細胞的遺傳轉化體的培養等。 4原生

5、質體培養包括原生質體、原生質融合體和原生質體的遺傳轉化體的培養等。 5植物組織培養（廣義）是指通過無菌操作，把植物的外植體接種于人工配置的培養基上，在人工控制的條件下進行培養，使其成為完整植株的方法。 6外植體是指用于植物組織培養的接種材料，它包括植物體的各個器官、組織、細胞和原生質體等。 7初代培養（第一代培養）指將從植物體上分離下來外植體作第一次培養。 8液體培養指將外植體接種在不加凝固劑（多為瓊脂）的培養基中進行組織培養。 9褐變現象是指外植體在培養過程，自身組織從表面向培養基釋放出褐色物質，以致培養基逐漸變成褐色，外植體也隨之進一步變褐而死亡的現象。10試管苗（組培苗）是指通過植物組織

6、培養培育出來的苗。11常規移栽法是指將試管苗在生長素濃度高的培養基上誘導生根，當獲得大量的不定根后，打開培養瓶注入少量自來水，在半遮光下馴化3d5d，然后取出洗去培養基，移栽到無菌的混合土（如沙子：蛭石=1：1）中，保持一定的溫度和水分，當長出23片新葉時就可將其移栽到田間或盆缽的方法。 12直接移栽法是指直接將試管苗移栽到盆缽的方法。 13嫁接移栽法是指選取生長良好的同一植物的實生苗或幼苗作砧木，用試管苗作接穗進行嫁接的方法。 14愈傷組織是指植物各種器官的外植體在離體的條件下，經細胞脫分化等一系列過程改變了它們原有的特性而形成的一種能迅速增殖的無特定結構和功能的細胞團。 15胚狀體（體細胞

7、胚）是指將離體或活體條件下，體細胞經原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷胚期和子葉期等階段形成的胚。 16莖段培養是指帶有腋（側）芽或葉柄、長數厘米的莖節段進行離體培養。 17離體保存是指將組織和細胞培養中的外植體或試管苗貯存在使其抑制生長、緩慢生長或無生長的條件下，達到長期保存的方法。 18低溫保存是在低溫條件下培養材料，還可輔以改變培養基成分、控制培養溫度，以減緩材料的生長速度、延緩繼代時間，故又稱為最小生長法。 19超低溫保存（冷凍保存）是指將培養材料放在液氮（-196）的超低溫下使細胞代謝和生長處于基本停止的狀態，在適宜的條件下可迅速繁殖，再生出新的植株，并保持原來的遺傳特性。利用超低溫保

8、存除了可以對珍稀植物進行種質保存，還可保存花粉，延長花粉壽命，解決不同開花期和異地植物雜交上的困難。 20完全培養基是指在基本培養基的基礎上，根據試驗的不同需要，附加一些物質，如植物生長調節物質和其它復雜有機附加物等。 21人工種子通過人工種皮包被體細胞胚而形成的種子。22平板培養技術將含有游離細胞和細胞團的懸浮培養物過濾，除去組織塊和大的細胞團，保留游離細胞和小細胞團。將液體培養基加入0.6%1%的瓊脂，使其融化，冷卻到35時，將培養基與上述細胞懸浮培養液等量混合，迅速注入并使之鋪展在培養皿（約1mm厚）。用封口膜封嚴培養皿，置于25黑暗中培養。23看護培養技術是把單個細胞置于一塊活躍生長的

9、愈傷組織（也稱看護愈傷組織）上培養，在愈傷組織和培養的細胞之間，有一片濾紙相隔。24微室培養技術由懸浮培養物中取出1滴含單細胞的培養液，置于一張無菌載片上，在培養基的四周與之隔一定距離加上一圈石蠟油，然后在左右兩側各加一滴石蠟油并分別置一張蓋片，第3張蓋片架在前兩個蓋片之間，那1滴含有單細胞的培養液就被覆蓋于微室之中，最后把筑有微室的整張載片置于培養皿中進行培養。25營銷策略是指植物組織培養生產企業在經營方針指導下，為實現企業的經營目標而采取的各種對策，如市場營銷策略、產品開發策略等。26經營方針是企業經營思想與經營環境結合的產物，它規定企業一定時期的經營方向，是企業用于指導生產經營活動的指南

10、針，也是解決各種經營管理問題的依據，如在市場競爭中提出以什么取勝，在生產結構中以什么為優等都屬于經營方針的范疇。27經營思想是從事經營活動、解決經營問題的指導思想，它是隨著生產力發展而發展的。28市場需求預測是植物組織培養生產企業進行預測時，首先要做好區域種植結構、自然氣候、種植的植物種類及市場發展趨勢的預測。29市場占有率是指家企業的某種產品的銷售量或銷售額與市場上同類產品的全部銷售量或銷售額之間的比率。30. 產品營銷是指運用各種方式和方法，向消費者傳遞產品信息，激發購買欲望，促進其購買的活動過程。二、部分問答題的參考答案1試述植物組織培養的應用情況。（7分）（1）答：無性系快速繁殖。無性

11、系快速繁殖是指應用組織培養和細胞培養技術，快速繁殖珍稀瀕危植物，使物種得以保存；以及快速繁殖名優特新品種，使其在一定時間內繁衍為一定數量的植株。（2）花藥培養和花粉單倍體育種。離體花藥花藥培養的單倍體育種法，與常規方法相比，可以在短時間內得到植物的純系，從而加快育種進程。（3）藥用植物的工廠化生產。當前采用組織培養來加速藥用植物（如人參、紫草、貝母、甘草等）的繁殖生長已獲得成功，并投入工廠化生產。（4）培育無病毒苗以解決病毒危害問題。對于無藥可治的病毒病，可通過莖尖培養脫毒，這對解決馬鈴薯退化問題能發揮重要的作用，在其他很多植物中也可用以建立無毒原種。（5）種質的保存和基因庫的建立。目前種質的

12、保存和基因庫的建立在育種工作中是十分重要的。由于組織培養材料的體積小，利于在低溫（如低溫冰箱）或超低溫（如一196液態氮）中長期保存。（6）制造人工種子。通過用人工種皮包被體細胞胚制造人工種子，為某些稀有和珍貴物種的繁殖提供了一種高效的手段。（7）突變體的篩選培育。在細胞和組織培養進程中，基因型易發生變異，因此人們可采用射線對培養物照射讓其產生變異，從中選擇理想的突變體，育成新品種。如：用基因槍將目的基因嵌入要改良的品種中去，最后育成優良品種。2試述超凈工作臺的無菌操作技術。（10分）答：超凈工作臺的無菌操作技術主要有以下幾方面。（1）用水和肥皂洗凈雙手，穿上消毒過的專用實驗服、帽子與鞋子，進

13、入接種室。（1 分）（2）打開超凈工作臺和無菌操作室的紫外燈，照射20min。（1 分）（3）操作前10min使超凈工作臺處于工作狀態，讓過濾室空氣吹拂工作臺面和四周的臺壁。（0.5 分）（4）照射20min后，關閉紫外燈。（1 分）（5）用70%的酒精擦拭工作臺和雙手。（0.5 分）（6）用沾有70%酒精的紗布擦拭盛培養基的培養器皿，放進工作臺。（0.5 分）（7）把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95%的酒精中，再在火焰上消毒，放在器械架上。（1 分）（8）把培養材料放進70%的酒精中，約30s；再在0.1%的升汞（hgcl2）中浸泡10min，或在10%的漂白粉上清液中浸泡1015min，

14、浸泡時可進行攪動，使作物材料與滅菌劑有良好的接觸；然后用無菌水沖洗35次。（1.5 分）（9）用火焰燒瓶口，轉動瓶口使瓶口各部分都燒到，打開瓶口。（0.5 分）（10）取下接種器械，在火焰上消毒。（1 分）（11）把培養材料放入培養瓶，蓋上瓶口。操作期間應經常用70%的酒精擦拭工作臺和雙手；接種器械應反復在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。（1 分） （12）接種結束后，清理和關閉超凈工作臺。（0.5 分）3為什么在自然條件下，一些植物的營養器官和細胞難以再生呢？（34分）答：這主要是由于內源激素調整緩慢或不完全，外界條件不易控制等因素所致。在人工控制的條件下，通過對培養基的調整，特別是對激素

15、成分的調整，就有可能順利地再生。4離體保存的主要優點是什么？（3分）答：離體保存的主要有以下幾個優點：第一，解決一些無性繁殖作物種質資源的低溫、長期保存問題，可有效避免資源的丟失；（1分）第二，節省土地和勞動力，保存方法簡單，花費少且能在保存中脫毒；（1分）第三，在提供利用時，可快速繁殖，也有利于國際國內種質交換。（1分）5配制培養基前需做好哪些準備工作？（6分）答： （1）水和藥品的準備配制培養基用的水最好用純水，一般用蒸餾水即可，但精細的試驗須用重蒸餾水。化學藥品須用分析純或化學純，稱量要準確，每稱一種藥品都必須準確記載，以便事后查對。（2分）（2）器皿和用具的準備 種類：不同型號的燒杯、

16、容量瓶、移液管、滴管、玻璃棒、三角瓶、試管、培養瓶、培養基分裝器等。洗滌：三角瓶、試管、培養瓶先用清水清洗，然后用堿洗（即泡入熱的洗衣粉水液中，洗刷玻璃器皿的內外壁），再用清水反復沖洗干凈，直至沖水后瓶壁不掛水珠，最后用蒸餾水淋一遍，晾干或烘干備用。移液管、容量瓶等由于口小，不便堿洗，需用酸洗，較臟的其它玻璃器皿液要用酸洗，酸洗可用40g工業用重鉻酸鉀經少量水溶化，然后緩緩加入粗制濃硫酸至1000ml，制成鉻酸硫酸混合液，來清洗。酸洗的洗法是把器皿放入酸液中1天，然后放在流水中沖洗干凈，再用蒸餾水洗一遍，放入烘箱中烘干備用。（2分）（3）母液的配制和保存 經常使用的培養基，可先將各種藥品配成濃

17、縮一定倍數的母液，放入冰箱內保存，用時再按比例稀釋。母液要根據藥劑的化學性質分別配制。一般配成大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素、氨基酸等母液，其中維生素、氨基酸類可以分別配制，也可以混在一起。配制成的母液，放入冰箱內保存。（2分）6試管苗馴化的目的、原則和方法是什么？（7分）答： （1）試管苗馴化的目的：在于提高試管苗對外界環境條件的適應性，提高其光合作用的能力，促使試管苗健壯，最終達到提高試管苗的移栽成活率。（2分）（2）試管苗馴化的原則：應從溫度、濕度、光照及有無菌態等環境要素進行，馴化開始數天內，應和培養時的環境條件相似；馴化后期，則要與預計的栽培條件相似，從而達到逐步適應的目的。（2分

18、）（3）試管苗馴化的方法：馴化一般在試管苗移栽前進行，首先進行移栽前的馴化鍛煉即練苗，其具體方法是將長有完整試管苗的試管或三角瓶由培養室轉移到半遮蔭的自然光下進行鍛煉，在自然光下恢復植物體內葉綠體的光合作用能力和健壯度，并打開瓶蓋注入少量自來水使幼苗逐漸降低溫度，轉向有菌，這樣幼苗周圍的環境就會逐步與自然環境相似。馴化一般進行12周。（3分）7試述培養基的滅菌全程技術（以手提式高壓滅菌器為例）。（8分）答：采用手提式高壓滅菌器對培養基進行滅菌的全過程為：(1) 裝水 先在高壓滅菌鍋內裝入一定量的水（需淹沒電熱絲）。（2分）(2) 滅菌 把注入培養基的培養器皿（或說培養瓶），包扎好的玻璃器皿（或

19、培養皿），以及裝有蒸餾水的三角瓶，放入高壓滅菌鍋。當壓力升至0.5 kg/cm2（即49.0kpa）時，用鑷子打開排氣閥排出鍋內的冷空氣，然后關閉排氣閥。當壓力達1.1kg/cm2（即108kpa），鍋內的溫度為121時，保持1520min。最后切斷電源（或熱源），讓滅菌器自然冷卻。（5.5分）(3) 儲藏 冷卻后，把培養基從滅菌器中取出，放置于溫度低于30，沒有強光照射的專用柜中。（0.5分）8試述超凈工作臺的無菌操作技術。（10分，每一小點1分）答：（1）用水和肥皂洗凈雙手，穿上消毒過的專用實驗服、帽子與鞋子，進入接種室。（2）用沾有70%的酒精的紗布擦拭雙手和工作臺。（3）用沾有70%的

20、酒精的紗布擦拭裝有培養基的培養器皿，并放進工作臺。（4）把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95%的酒精瓶中，并放進工作臺。（5）操作前20min打開超凈工作臺和紫外燈。20min后，關閉紫外燈。 （6）把培養材料放進70%的酒精中浸530s；再在0.1%的升汞（氯化汞hgcl2）中浸泡510min，或在10%的漂白粉上清液中浸泡1015min，浸泡時可進行攪動，使作物材料與滅菌劑有良好的接觸；然后用無菌水沖洗35次。（7）用火焰燒瓶口，轉動瓶口使各部分都燒到，打開瓶口，再在火焰上消毒。（8）取下接種器械，在火焰上充分燃燒消毒。 （9）把培養材料迅速植入培養瓶，蓋好瓶口（每人接種510瓶）。操作期

21、間應經常用70%的酒精擦拭工作臺和雙手；接種器械應反復在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。（10）接種結束后，清理和關閉超凈工作臺。9試述水稻花藥培養技術（8分）答： （1）取材與處理采集幼穗 選擇穎花為淺綠色，花藥長至穎殼的五分之二左右，花粉處于單核中、晚期之間的健壯植株；剪取包含幼穗的上半部分植株，剪去葉片，留下部分葉鞘包裹幼穗。（1.5分）低溫預處理 用70%的酒精進行材料表面消毒，然后用保濕紙裹上材料，再包上鋁箔，放置于810的低溫下處理714d。（1分） （2）接種與培養消毒 取出由鋁箔包裹的材料，表面用70%的酒精消毒。然后放在超凈工作臺中，剝去葉鞘，取下幼穗。把幼穗浸在70%的酒

22、精中消毒10s左右。（1.5分）接種 消毒后，用剪刀剪下帶穎花的幼穗枝梗，再剪下穎花；剪去穎殼的上半部，然后用鑷子夾住穎花，在培養瓶口敲打，使花藥從穎殼剪口處直接進入培養瓶。每瓶接100枚花藥（每人接種410瓶）。（2分）培養 花藥接種后，置于黑暗中培養，保持27的溫度。（1分） （3）觀察 1周后觀察污染情況，34周后觀察愈傷組織的誘導情況。（1分）10植物組織培養中褐變的預防措施有哪些？（7分）答：（1）選擇適宜的外植體 外植體應選擇分生能力較強的材料。如采用實生苗莖尖、枝條頂芽、幼胚等材料培養褐變程度比較輕。（2分）（2）采用適宜的培養基和光溫條件 培養基的無機鹽成分、蔗糖濃度、激素水平

23、、溫度適宜及在黑暗條件下培養，或在取外植體之前對母株進行遮光處理20d40d，可以顯著減輕材料的褐變。（2分）（3）在培養基中加活性炭、抗氧化劑和其他抑制劑 在培養基中加入0.1%0.5%的活性炭對吸附酚類氧化物的效果很明顯。（2分）（4）縮短轉瓶周期 這是組培中控制褐變常用且有效的方法。（1分）11試述水仙鱗莖培養技術（從預處理開始到接種后的培養為止）（6分）答：（1）低溫預處理：在4100c下處理49周。（0.5分）（2）洗去表面污物并剝去外部老葉。（0.5分）（3）滅菌：70%酒精30s 無菌水沖洗3次 0.1%升汞510min（或 2%次氯酸鈉10min或10%漂白粉溶液30min）

24、無菌水沖洗5次。（3分）（4）外植體：帶基部鱗片（0.5cm）的鱗莖盤。（1分）（5）接種：將帶基部鱗片（0.5cm）的鱗莖盤1切成4，于無菌條件下分別接種到ms+ba2.0+naa0.1的培養基上，放在250c20c的培養室中培養。（1分）12通過對生姜組培苗移栽試驗的實踐、觀察與結果分析，你認為提高生姜組培苗移栽成活率的措施有哪些？（8分）答：我認為提高生姜組培苗移栽成活率主要有以下這些措施：（1）選用壯苗。（1.5 分）（2）移栽前進行煉苗。（1.5 分）（3）移栽前徹底洗凈試管苗根部的培養基。（1.5 分）（4）用生根粉稀釋后蘸根。（1 分）（5）移栽到盛有適宜基質（以蛭石：草炭土=1

25、：1為好）的紙缽中。（1 分）（6）澆足水，蓋上尼龍膜和遮陽網等。（1.5 分）13植物組織培養的生理依據是什么？（10分）答：植物組織培養的生理依據主要有以下三方面：植物細胞的全能性、植物細胞的再生性及植物激素對植物生長的調控機理。現分述如下：（1）植物細胞的全能性是指植物的每個細胞都具有該植物的全部遺傳信息和發育成完整植株的能力。（2分）（2）植物細胞的再生性是指在植物中很多是靠種子生長來產生完整的植株，但也有不少可通過根、莖、葉等器官再生而成為完整的植株的特性。（2分）（3）植物激素對植物生長的調控機理（即植物生長調節物質在細胞分化中的作用）：（6分） 植物生長調節物質對愈傷組織誘導、器

26、官分化及植株再生具有重要的作用，是培養基中的關鍵物質。植物生長調節物質主要有生長素和激動素。生長素 生長素對發根有作用，對愈傷組織的產生和再分化有誘導作用，還能促進細胞的分裂、分化和新陳代謝。它作為組織培養中外源激素的重要來源，對外植體的生長是十分重要的。常用的生長素有吲哚乙酸（iaa）、吲哚丁酸（iba）、萘乙酸（naa）、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-d)等。iaa的活力較低，可能是最弱的激素，對器官形成的副作用小。高溫高壓時易被細胞中的iaa分解酶降解，遇光也易分解。naa在組織培養中的起動能力要比iaa高3.7倍，且由于它可人工大量生產，在高溫高壓下也比較穩定，不易被破壞、分解，所以在

27、組織培養中使用十分廣泛。2,4-d在組織培養中的起動能力要比iaa高10倍，特別在促進愈傷組織的形成上活力最高，但它強烈抑制芽的形成，影響器官的發育。 細胞分裂素 細胞分裂素不僅能促進細胞分裂，誘導細胞擴大，解除頂端優勢，促進側芽生長，而且還有減少葉綠素的分解，延緩葉片衰老的作用。但是，細胞分裂素對根的生長一般起抑制作用。常用的有玉米素（zt）、6-芐基腺嘌呤（ba）、激動素（kt）。 注意：通常當生長素 / 細胞分裂素的比例高時有利于生根；生長素 / 細胞分裂素的比例低時則有利于產生芽；若兩者濃度相當時，既不利于生根，也不利于生芽，愈傷組織的產生則占優勢。關于激素控制器官形成的這一模式，在許

28、多植物組織培養中得到了驗證。但在一些情況下，不是生長素 / 細胞分裂素的比值決定器官的發生，而是絕對濃度。此外，赤霉素（ga）、脫落酸（aba）等也在組織培養中不同程度地發揮作用。因此，究竟采用哪些生長調節物質，采用什么樣的細胞分裂素與生長素比例，要根據培養的目的、植物的種類和細胞分裂素與生長素的種類而定。14常用培養基的配方有哪些？各其的特點如何？（7分）答：（1）組織培養中常用的培養基配方主要有ms、white、n6、b5、heller、nitsh、miller、sh等。（1分） （2）這幾種常用培養基配方的特點分述如下：（6分） ms培養基是1962年murashige和skoog為培養

29、煙草材料而設計的。它的特點是無機鹽的濃度高，具有高含量的氮、鉀，尤其硝酸鹽的用量很大，同時還含有一定數量的銨鹽，這使得它營養豐富，不需要添加更多的有機附加物，就能滿足植物組織對礦質營養的要求，有加速愈傷組織和培養物生長的作用，當培養物久不轉移時仍可維持其生存。故這是目前應用最廣泛的一種培養基。 white培養基又稱（wh）培養基，是1943年white設計的，1963年作了改良。其特點是無機鹽濃度較低。它的使用也很廣泛，無論是生根培養還是胚胎培養或一般組織培養都有很好的效果。 n6培養基是1974年由我國的朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養而設計的。其特點是kno3和（nh4）2so4含量高且

30、不含鉬。目前在國內已廣泛應用于小麥、水稻及其他植物的花粉和花藥培養和組織培養。 b5培養基是1968年由gamborg等設計的。它的主要特點是含有較低的銨鹽，較高的硝酸鹽和鹽酸硫胺素。銨鹽可能對不少培養物的生長有抑制作用，對有些植物如雙子葉植物特別是木本植物，卻更適合生長。 sh培養基是1972年由schenk和hidebrandt設計的。它的主要特點是與b5相似，不用（nh4）2so4，改用nh4h2po4，是礦質鹽濃度較高的培養基。在不少單子葉和雙子葉植物上使用效果很好。 miller培養基與ms培養基比較，無機元素用量減少1/31/2，微量元素種類減少，無肌醇。15預防玻璃化苗發生有哪些

31、措施？（7分，每小點1分）答：預防玻璃化苗發生的措施有：（1） 適當控制培養基中無機營養成分 大多數植物在ms培養基上生長良好，玻璃化苗的比例較低，主要是由于ms培養基的硝態氮、鈣、鋅、錳的含量較高的緣故。適當增加培養基中鈣、鋅、錳、鉀、鐵、銅、鎂的含量，降低氮和氯元素比例，特別是降低銨態氮濃度，提高硝態氮濃度，可減少玻璃化苗的比例。（2） 適當提高培養基中蔗糖和瓊脂的濃度 適當提高培養基中蔗糖的含量，可降低培養基中的滲透勢，減少外植體從培養基中可獲得的水分；而適當提高培養基中瓊脂的含量，可降低培養基的襯質勢，造成細胞吸水阻遏，也可降低玻璃化，如將瓊脂濃度提高到1.1%時，洋薊的玻璃化苗完全消

32、失。（3） 適當降低細胞分裂素和赤霉素的濃度 細胞分裂素和赤霉素可以促進芽的分化，但是為了防止玻璃化現象，應適當減少其用量，或增加生長素的比例。在繼代培養時，要逐步減少細胞分裂素的含量。（4） 增加自然光照，控制光照時間 在試驗中發現，玻璃苗放在自然光下幾天后莖、葉變紅，玻璃化逐漸消失。這是因為自然光中的紫外線能促進試管苗成熟，加快木質化。光照時間不宜太長，大多數植物以8h 12h為宜；光照強度在1000lx1800lx之間，就此可以滿足植物生長的要求。（5） 控制好溫度 培養溫度要適宜植物的正常生長發育。如果培養室的溫度過低，應采取增溫措施。熱擊處理，可防治玻璃化的發生。如用400c熱擊處理

33、瑞香愈傷組織培養物可完全消除其再生苗的玻璃化，同時還能提高愈傷組織芽的分化頻率。（6） 改善培養器皿的氣體交換狀況 如使用棉塞、濾紙片或通氣好的封口膜封口。（7） 在培養基中添加其它物質 在培養基中加入間苯三酚或根皮苷或其它添加物，可有效地減輕或防治試管苗玻璃化，如添加馬鈴薯法可降低油菜的玻璃苗的產生頻率，而用0.5mg/l多效唑或10mg/l的矮壯素可減少重瓣絲石竹試管苗玻璃化的發生；而添加1.5 g/l2.5g/l的聚乙稀醇也成為防治蘋果砧木玻璃化的措施。在培養基中加入0.3%的活性炭還可降低玻璃苗的產生頻率，對防止產生玻璃化有良好作用。16試述馴化的目的、原則與方法（與填空題重復）（6分

34、，每小點2分）答：（1）馴化的目的在于提高試管苗對外界環境條件的適應性，提高其光合作用的能力，促使試管苗健壯，最終達到提高試管苗的移栽成活率。 （2）馴化的原則：應從溫度、濕度、光照及有無菌態等環境要素進行，馴化開始數天內，應和培養時的環境條件相似；馴化后期，則要與預計的栽培條件相似，從而達到逐步適應的目的。（3）馴化的方法：馴化一般在試管苗移栽前進行，首先進行移栽前的馴化鍛煉即練苗，其具體方法是將長有完整試管苗的試管或三角瓶由培養室轉移到半遮蔭的自然光下進行鍛煉，在自然光下恢復植物體內葉綠體的光合作用能力和健壯度，并打開瓶蓋注入少量自來水使幼苗逐漸降低溫度，轉向有菌，這樣幼苗周圍的環境就會逐步與自然環境相似。17在植物組培中降低成本、提高效益的措施有哪些？（7分，每小點1分）答：在植物組培中降低成本、提高效益的措施有以下幾種：（1）提高操作的熟練程度及