課下綜合檢測(cè)一、單項(xiàng)選擇題1下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是()A在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)D在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng) 解析：選D單個(gè)菌落中含有一種細(xì)菌，培養(yǎng)基中加入青霉素能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)；破傷風(fēng)桿菌是厭氧型生物。2(2013無(wú)錫一中期中)大腸桿菌的代謝產(chǎn)物(有機(jī)酸)能與伊紅和美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。下表為伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基的配方，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍(lán)瓊脂蒸餾水pH調(diào)至7.210 g10 g5 g2 g0.4 g0.065 g10 g1 000 mLA.從物理性質(zhì)看，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基B從配制方法上看，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)節(jié)pH后滅菌C從用途來(lái)看，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基D從營(yíng)養(yǎng)來(lái)看，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基缺少生長(zhǎng)因子解析：選D蛋白胨中含碳源、氮源和生長(zhǎng)因子。3下列對(duì)菌落的表述不正確的是()A每個(gè)菌落都是由多種細(xì)菌大量繁殖而成B各種霉菌在面包上生長(zhǎng)形成的不同顏色的斑塊即為菌落C噬菌體能使固體培養(yǎng)基上的細(xì)菌裂解，菌落變得透明D細(xì)菌和真菌在培養(yǎng)基上形成的菌落形態(tài)不同解析：選A一個(gè)菌落是由單個(gè)微生物大量繁殖而成；不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落具有穩(wěn)定的特征，可以成為對(duì)該類微生物進(jìn)行分類、鑒定的重要依據(jù)。4(2014廣州模擬)消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。下列適用于消毒處理的是()皮膚飲用水牛奶注射器培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油手術(shù)刀ABC D以上全部解析：選A消毒指用比較溫和的方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物。題中的皮膚、飲用水、牛奶、果汁、醬油適用于消毒的方法處理，而注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理。5有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述錯(cuò)誤的是()A首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落D涂布時(shí)需在酒精燈火焰旁進(jìn)行解析：選C稀釋涂布平板法，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只有一個(gè)菌落，因此稀釋涂布平板法中的菌液不是都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。6(2013泰州期末)關(guān)于微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)技術(shù)，下列表述正確的是()A溶化時(shí)將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入燒杯B常見的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線和噴灑化學(xué)試劑等C配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂，其目的是為微生物生長(zhǎng)提供碳源D用移液管稀釋菌液時(shí)，吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻解析：選D牛肉膏容易吸潮，將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。灼燒屬于滅菌方法，常見的消毒方式有煮沸、噴灑化學(xué)藥劑、酒精擦拭雙手等；配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂，只起凝固作用。7(2014揚(yáng)州中學(xué)考前適應(yīng)性考試)下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5五個(gè)區(qū)域依次進(jìn)行。下列敘述正確的是()A在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B劃線操作時(shí)打開皿蓋，劃完立即蓋上C接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要相連接起來(lái)，以便比較前后的菌落數(shù)解析：選C劃線前后要對(duì)接種環(huán)滅菌，培養(yǎng)基在倒平板前已經(jīng)滅菌，劃線操作時(shí)在無(wú)菌火焰旁進(jìn)行；劃線操作時(shí)培養(yǎng)皿蓋不能完全打開；第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終不能相互連接。二、多項(xiàng)選擇題8(2014常州高三質(zhì)檢)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述正確的是()A圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一碳源D使用平板劃線法可以在上獲得單菌落解析：選ABD若為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則中培養(yǎng)基應(yīng)含除苯酚外的其他碳源，中以苯酚作為唯一碳源。9下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，正確的是()A利用稀釋涂布平板法可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個(gè)菌落C在無(wú)氮培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可用來(lái)鑒定尿素分解菌D利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌解析：選ABD含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用來(lái)鑒定尿素分解菌。三、非選擇題10(2014如皋中學(xué)段考)回答微生物培養(yǎng)的有關(guān)問(wèn)題。(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、_和_等條件。(2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。(4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的_等特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定(或分類)。(5)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。解析：(1)培養(yǎng)微生物需要一定的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度、pH和滲透壓。(2)消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；操作者的雙手 需要進(jìn)行清洗和消毒。(3)稀釋度數(shù)比例合適才能將聚集在一塊的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落，便于統(tǒng)計(jì)原菌種數(shù)目。(4)菌落具有物種特異性，根據(jù)菌落的顏色、形狀、大小判斷進(jìn)行細(xì)菌鑒定。(5)使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物需要經(jīng)過(guò)滅菌處理才能丟棄，以防培養(yǎng)物的擴(kuò)散造成污染。答案：(1)酸堿度滲透壓(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)形狀、大小、顏色(5)滅菌11(2014鹽城二模)國(guó)家飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，每升飲用水中大腸桿菌不超過(guò)3個(gè)。某小組欲通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中大腸桿菌的含量，已知大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基培養(yǎng)，大腸桿菌菌落呈深紫色。請(qǐng)根據(jù)下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟回答問(wèn)題：(1)配制培養(yǎng)基：配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍(lán)等原料外，還需要水、無(wú)機(jī)鹽和_。在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是_。攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)_，分裝到錐形瓶。(2)倒平板：配制好的培養(yǎng)基用_法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50左右倒平板。平板冷凝后應(yīng)將平板_放置，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基。(3)接種：在下圖的系列稀釋操作中(101、102、103表示稀釋倍數(shù))，依次將1 mL液體移入下一個(gè)盛有_mL蒸餾水的試管中。過(guò)程a所用的接種方法為_。(4)觀察與計(jì)數(shù)：通過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)，觀察統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)皿表面深紫色菌落的數(shù)目，結(jié)果如圖所示，則自來(lái)水樣本中大腸桿菌超標(biāo)_萬(wàn)倍。解析：(1)微生物生長(zhǎng)需要碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、水和無(wú)機(jī)鹽，另外配制固體培養(yǎng)基需要添加瓊脂。蛋白胨中含有氮，能為大腸桿菌生長(zhǎng)提供氮源，培養(yǎng)基在分裝前要調(diào)節(jié)好pH。(2)常用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌后待其冷卻至一定的溫度進(jìn)行倒平板，平板冷凝后應(yīng)倒置，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基影響微生物的生長(zhǎng)。(3)因?yàn)橄♂尡稊?shù)依次是10倍、100倍、1 000倍，故將上一試管的1 mL液體移入下一個(gè)盛有9 mL蒸餾水的試管中即可。(4)為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，圖示中只有30符合要求，其稀釋度倍數(shù)為102，所用稀釋液體積為0.1 mL，計(jì)算菌落總數(shù)為：300.11023104個(gè)/mL,1L水中就高達(dá)3107個(gè)，是國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)的1107倍。答案：(1)瓊脂蛋白胨pH (2)高壓蒸汽滅菌 倒過(guò)來(lái)(倒置) (3)9 (稀釋)涂布(抹)平板法 (4)1 00012(2013徐州、宿遷三模)要獲得遺傳特性單一的枯草桿菌菌種，一般必須對(duì)原有的菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)、并利用純化技術(shù)得到單菌落的菌種。請(qǐng)回答以下問(wèn)題：(1)獲得純凈枯草桿菌的關(guān)鍵是_，為此，必須對(duì)培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌。在接種或倒平板操作時(shí)，除了在超凈臺(tái)上進(jìn)行操作并對(duì)實(shí)驗(yàn)者的衣著、手和實(shí)驗(yàn)空間進(jìn)行嚴(yán)格清潔和消毒外，還必須_，以防止空氣中的雜菌污染。(2)右圖是純化枯草桿菌的方法，該純化分離方法的名稱是_。(3)枯草桿菌可以產(chǎn)生淀粉酶，以下是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶菌株的主要實(shí)驗(yàn)步驟。(原理：菌株生長(zhǎng)過(guò)程中可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈。)第一步：將枯草桿菌接種到液體培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。第二步：將枯草桿菌分成A、B兩組，_。第三步：制備多個(gè)含淀粉的固體培養(yǎng)基。第四步：將A、B組分別稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用_法分離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落。第五步：觀察A、B組各菌落周圍的_。實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)期：據(jù)誘發(fā)突變率低的特點(diǎn)，預(yù)期_；據(jù)誘發(fā)突變不定向性的特點(diǎn)，預(yù)期_。解析：(1)獲得純凈枯草桿菌的關(guān)鍵是防止雜菌的污染。在接種或倒平板操作時(shí)，除了在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行操作并對(duì)實(shí)驗(yàn)者的衣著、手和實(shí)驗(yàn)空間進(jìn)行嚴(yán)格清潔和消毒外，還必須在酒精燈火焰旁操作，以防止空氣中的雜菌污染。(2)圖中純化分離枯草桿菌的方法為平板劃線法。(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹袄谜T變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶菌株”，可推測(cè)第二步中將枯草桿菌分成A、B兩組后，應(yīng)設(shè)置對(duì)照處理，即A組用誘變劑處理，B組不處理(作對(duì)照)。第四步純化、分離枯草桿菌時(shí)可利用稀釋涂布法分離計(jì)數(shù)。第五步根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理的提示，觀察A、B組各菌落周圍的透明圈大小。實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)測(cè)：據(jù)誘發(fā)突變率