課下綜合檢測一、單項選擇題1下列有關細菌培養的敘述，正確的是()A在瓊脂固體培養基上長出的單個菌落含有多種細菌B在培養基中加入青霉素可抑制真菌而促進細菌生長C向液體培養基中通入氧氣能促進破傷風桿菌的生長D在半固體培養基中接種細菌培養后可以觀察其運動 解析：選D單個菌落中含有一種細菌，培養基中加入青霉素能抑制細菌生長；破傷風桿菌是厭氧型生物。2(2013無錫一中期中)大腸桿菌的代謝產物(有機酸)能與伊紅和美藍結合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。下表為伊紅美藍培養基的配方，下列說法錯誤的是()蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊紅美藍瓊脂蒸餾水pH調至7.210 g10 g5 g2 g0.4 g0.065 g10 g1 000 mLA.從物理性質看，伊紅美藍培養基是固體培養基B從配制方法上看，伊紅美藍培養基應先調節pH后滅菌C從用途來看，伊紅美藍培養基是鑒別培養基D從營養來看，伊紅美藍培養基缺少生長因子解析：選D蛋白胨中含碳源、氮源和生長因子。3下列對菌落的表述不正確的是()A每個菌落都是由多種細菌大量繁殖而成B各種霉菌在面包上生長形成的不同顏色的斑塊即為菌落C噬菌體能使固體培養基上的細菌裂解，菌落變得透明D細菌和真菌在培養基上形成的菌落形態不同解析：選A一個菌落是由單個微生物大量繁殖而成；不同微生物在特定培養基上生長形成的菌落具有穩定的特征，可以成為對該類微生物進行分類、鑒定的重要依據。4(2014廣州模擬)消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體基本無害。下列適用于消毒處理的是()皮膚飲用水牛奶注射器培養皿接種環培養基果汁醬油手術刀ABC D以上全部解析：選A消毒指用比較溫和的方法殺死物體表面或內部的部分微生物。題中的皮膚、飲用水、牛奶、果汁、醬油適用于消毒的方法處理，而注射器、培養皿、接種環、培養基、手術刀等必須進行滅菌處理。5有關稀釋涂布平板法的敘述錯誤的是()A首先將菌液進行一系列的梯度稀釋B然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面C結果都可在培養基表面形成單個的菌落D涂布時需在酒精燈火焰旁進行解析：選C稀釋涂布平板法，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落，因此稀釋涂布平板法中的菌液不是都可在培養基表面形成單個的菌落。6(2013泰州期末)關于微生物的實驗室培養技術，下列表述正確的是()A溶化時將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入燒杯B常見的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線和噴灑化學試劑等C配制固體培養基時加入瓊脂，其目的是為微生物生長提供碳源D用移液管稀釋菌液時，吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻解析：選D牛肉膏容易吸潮，將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。灼燒屬于滅菌方法，常見的消毒方式有煮沸、噴灑化學藥劑、酒精擦拭雙手等；配制固體培養基時加入瓊脂，只起凝固作用。7(2014揚州中學考前適應性考試)下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為1、2、3、4、5五個區域依次進行。下列敘述正確的是()A在五個區域中劃線前后都要對接種環和培養基進行滅菌B劃線操作時打開皿蓋，劃完立即蓋上C接種時不能劃破培養基，否則難以達到分離單菌落的目的D第1區和第5區的劃線最終要相連接起來，以便比較前后的菌落數解析：選C劃線前后要對接種環滅菌，培養基在倒平板前已經滅菌，劃線操作時在無菌火焰旁進行；劃線操作時培養皿蓋不能完全打開；第1區和第5區的劃線最終不能相互連接。二、多項選擇題8(2014常州高三質檢)苯酚是工業生產排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列相關敘述正確的是()A圖中培養目的菌株的選擇培養基中應加入苯酚作為碳源B如果要測定中活細菌數量，常采用稀釋涂布平板法C若圖中為對照實驗，則其中應以苯酚作為唯一碳源D使用平板劃線法可以在上獲得單菌落解析：選ABD若為對照實驗，則中培養基應含除苯酚外的其他碳源，中以苯酚作為唯一碳源。9下列關于微生物培養和利用的敘述，正確的是()A利用稀釋涂布平板法可對微生物進行計數B接種時連續劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落C在無氮培養基中加入酚紅指示劑可用來鑒定尿素分解菌D利用剛果紅培養基上是否形成透明圈來篩選纖維素分解菌解析：選ABD含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養基可用來鑒定尿素分解菌。三、非選擇題10(2014如皋中學段考)回答微生物培養的有關問題。(1)在大腸桿菌培養過程中，除考慮營養條件外，還要考慮溫度、_和_等條件。(2)在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和培養皿進行_；操作者的雙手需要進行清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變性，還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計數大腸桿菌活菌的個數，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的_。(4)通常，對獲得的純菌種還可以依據菌落的_等特征對細菌進行初步的鑒定(或分類)。(5)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養基及其培養物必須經過_處理后才能丟棄，以防止培養物的擴散。解析：(1)培養微生物需要一定的營養和適宜的溫度、pH和滲透壓。(2)消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。對培養基和培養皿進行滅菌；操作者的雙手 需要進行清洗和消毒。(3)稀釋度數比例合適才能將聚集在一塊的微生物分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個菌落，便于統計原菌種數目。(4)菌落具有物種特異性，根據菌落的顏色、形狀、大小判斷進行細菌鑒定。(5)使用過的培養基及其培養物需要經過滅菌處理才能丟棄，以防培養物的擴散造成污染。答案：(1)酸堿度滲透壓(2)滅菌消毒損傷DNA的結構(3)比例合適(4)形狀、大小、顏色(5)滅菌11(2014鹽城二模)國家飲用水標準規定，每升飲用水中大腸桿菌不超過3個。某小組欲通過實驗來檢測自來水中大腸桿菌的含量，已知大腸桿菌在伊紅美藍培養基培養，大腸桿菌菌落呈深紫色。請根據下列有關實驗步驟回答問題：(1)配制培養基：配制伊紅美藍培養基時，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍等原料外，還需要水、無機鹽和_。在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是_。攪拌加熱至完全溶解后調節_，分裝到錐形瓶。(2)倒平板：配制好的培養基用_法滅菌后，待培養基冷卻到50左右倒平板。平板冷凝后應將平板_放置，以防止皿蓋上的水珠落入培養基。(3)接種：在下圖的系列稀釋操作中(101、102、103表示稀釋倍數)，依次將1 mL液體移入下一個盛有_mL蒸餾水的試管中。過程a所用的接種方法為_。(4)觀察與計數：通過一段時間的培養，觀察統計培養皿表面深紫色菌落的數目，結果如圖所示，則自來水樣本中大腸桿菌超標_萬倍。解析：(1)微生物生長需要碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽，另外配制固體培養基需要添加瓊脂。蛋白胨中含有氮，能為大腸桿菌生長提供氮源，培養基在分裝前要調節好pH。(2)常用高壓蒸汽滅菌法對培養基進行滅菌，滅菌后待其冷卻至一定的溫度進行倒平板，平板冷凝后應倒置，以防止皿蓋上的水珠落入培養基影響微生物的生長。(3)因為稀釋倍數依次是10倍、100倍、1 000倍，故將上一試管的1 mL液體移入下一個盛有9 mL蒸餾水的試管中即可。(4)為保證結果準確，一般選擇菌落數在30300的平板進行計數，圖示中只有30符合要求，其稀釋度倍數為102，所用稀釋液體積為0.1 mL，計算菌落總數為：300.11023104個/mL,1L水中就高達3107個，是國家規定的標準的1107倍。答案：(1)瓊脂蛋白胨pH (2)高壓蒸汽滅菌 倒過來(倒置) (3)9 (稀釋)涂布(抹)平板法 (4)1 00012(2013徐州、宿遷三模)要獲得遺傳特性單一的枯草桿菌菌種，一般必須對原有的菌種進行擴大培養、并利用純化技術得到單菌落的菌種。請回答以下問題：(1)獲得純凈枯草桿菌的關鍵是_，為此，必須對培養皿、接種用具和培養基進行嚴格滅菌。在接種或倒平板操作時，除了在超凈臺上進行操作并對實驗者的衣著、手和實驗空間進行嚴格清潔和消毒外，還必須_，以防止空氣中的雜菌污染。(2)右圖是純化枯草桿菌的方法，該純化分離方法的名稱是_。(3)枯草桿菌可以產生淀粉酶，以下是利用誘變育種方法培育獲得產生較多淀粉酶菌株的主要實驗步驟。(原理：菌株生長過程中可釋放淀粉酶分解培養基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈。)第一步：將枯草桿菌接種到液體培養基上進行擴大培養。第二步：將枯草桿菌分成A、B兩組，_。第三步：制備多個含淀粉的固體培養基。第四步：將A、B組分別稀釋后，分別在含淀粉的固體培養基上利用_法分離，適宜條件下培養得到單菌落。第五步：觀察A、B組各菌落周圍的_。實驗結果預期：據誘發突變率低的特點，預期_；據誘發突變不定向性的特點，預期_。解析：(1)獲得純凈枯草桿菌的關鍵是防止雜菌的污染。在接種或倒平板操作時，除了在超凈工作臺上進行操作并對實驗者的衣著、手和實驗空間進行嚴格清潔和消毒外，還必須在酒精燈火焰旁操作，以防止空氣中的雜菌污染。(2)圖中純化分離枯草桿菌的方法為平板劃線法。(3)根據實驗目的“利用誘變育種方法培育獲得產生較多淀粉酶菌株”，可推測第二步中將枯草桿菌分成A、B兩組后，應設置對照處理，即A組用誘變劑處理，B組不處理(作對照)。第四步純化、分離枯草桿菌時可利用稀釋涂布法分離計數。第五步根據實驗原理的提示，觀察A、B組各菌落周圍的透明圈大小。實驗結果預測：據誘發突變率