Agilent 1260/6120液質(zhì)聯(lián)用-單四級(jí)桿質(zhì)譜操作規(guī)程文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 1 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期一、 目的建立Agilent LCMS的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，使分析人員的操作具有規(guī)范性和確保檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠性。二、 應(yīng)用范圍所有參與Agilent LCMS操作的分析人員和操作人員。三、 使用標(biāo)準(zhǔn) Agilent LCMS 化學(xué)工作站標(biāo)準(zhǔn)操作培訓(xùn) 中文版四、 責(zé)任人分析部負(fù)責(zé)制作規(guī)程； 分析部主管審核； 研發(fā)部總監(jiān)批準(zhǔn)；研發(fā)部分析人員和操作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行五、 概述：A、 工作原理LCMS的工作原理是用高壓輸液泵，將具有不同特性的單一溶液或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相，用泵壓入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進(jìn)樣閥注入供試品，由流動(dòng)相帶入色譜柱內(nèi)，在色譜柱內(nèi)各成分被分離后，依次進(jìn)入檢測器，進(jìn)入離子源后，試樣被離子化，然后聚焦于質(zhì)譜的質(zhì)量分析器中，根據(jù)質(zhì)荷比不同而被分離檢測，獲得各種色譜和質(zhì)譜數(shù)據(jù)。色譜信號(hào)由色譜工作站進(jìn)行記錄處理。B、 儀器的主要組成部分Agilent 1260 6120液質(zhì)聯(lián)用色譜儀主要由G1311B四元泵、G1329B自動(dòng)控溫自動(dòng)進(jìn)樣器、G1316A柱溫箱、G4212B二極管陣列檢測器、6120單四極桿質(zhì)譜檢測器和Open LAB色譜工作站等部件組成。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 2 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期六、 操作規(guī)程：6.1. 開機(jī)6.1.1 打開載氣鋼瓶控制閥，設(shè)置分壓閥壓力為0.56-0.69Mpa。6.1.2 準(zhǔn)備LC流動(dòng)相，泵柱塞沖洗溶劑，檢查管線連接狀態(tài)，確認(rèn)粗真空泵和噴霧室的廢氣排到實(shí)驗(yàn)室外部。6.1.3 打開計(jì)算機(jī)，并依次打開LC各模塊電源及質(zhì)譜電源，等待各模塊自檢完成(各模塊右上角指示燈為黃色或者無色，質(zhì)譜有“嘟”一聲聲音) 。6.1.4雙擊桌面圖標(biāo)，進(jìn)入化學(xué)工作站 。顏色說明：顏色位置無色黃色綠色紅色藍(lán)色灰色模塊右上角狀態(tài)燈未開電源或者模塊準(zhǔn)備就緒模塊未準(zhǔn)備就緒正在進(jìn)樣分析模塊出錯(cuò)；所有模塊紅色，儀器有漏液工作站圖形顏色模塊未準(zhǔn)備就緒模塊準(zhǔn)備就緒出錯(cuò)或者不能聯(lián)機(jī)正在進(jìn)樣分析此模塊沒啟用文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 3 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.2. 調(diào)諧開始抽真空之后至少要等4個(gè)小時(shí)或更長時(shí)間才能進(jìn)行調(diào)諧或操作LC/MSD。建議每周進(jìn)行一次檢驗(yàn)調(diào)諧，當(dāng)檢驗(yàn)調(diào)諧失敗時(shí)，應(yīng)該進(jìn)行一次自動(dòng)調(diào)諧。調(diào)諧應(yīng)該不需要超過每月一次或最多每星期一次。一般情況下調(diào)諧一次可以穩(wěn)定三個(gè)月。6.2.1 單擊MSD調(diào)諧,進(jìn)入儀器調(diào)諧。6.2.2 選擇調(diào)諧文件，一般選擇ATUNES.TUN文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 4 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.2.3 自動(dòng)調(diào)諧雙極性調(diào)諧會(huì)先做正模式調(diào)諧，再做負(fù)模式調(diào)諧，第一次調(diào)諧必須是雙極性調(diào)諧。自動(dòng)調(diào)諧一般在檢驗(yàn)調(diào)諧失敗后做，也可以每個(gè)月或在做完儀器維護(hù)后執(zhí)行。6.2.4 檢驗(yàn)調(diào)諧檢驗(yàn)調(diào)諧可以每天進(jìn)行（不關(guān)機(jī)情況下，每周1次就可以），檢查峰寬，質(zhì)量軸和調(diào)諧離子豐度是否達(dá)標(biāo)。如果失敗工作站會(huì)提示對(duì)失敗的項(xiàng)目重新校正。如果校正仍然失敗則需要做自動(dòng)調(diào)諧。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 5 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.2.5 保存調(diào)諧文件，指定文件名和路徑，將調(diào)諧文件保存到atunes.tun中。6.2.6 最后點(diǎn)擊方法和運(yùn)行控制，返回到儀器控制界面。6.3. 樣品測定6.3.1 方法建立從編輯整個(gè)方法開始，如圖所示。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 6 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期從方法菜單中選擇“編輯完整方法”項(xiàng)，選擇要編輯的項(xiàng)目，點(diǎn)擊“確定”。編輯關(guān)于該方法的注釋，然后點(diǎn)擊“確定”。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 7 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期系統(tǒng)默認(rèn)選擇自動(dòng)進(jìn)樣。6.3.2 編輯LC采集參數(shù)文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 8 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.3.3 編輯MSD采集參數(shù)其中Fragmentor的值是碰撞解離誘導(dǎo)的電壓值。對(duì)于大分子需要更大的fragmentor值才能使離子進(jìn)入skimmer。這個(gè)參數(shù)對(duì)于檢測到的離子豐度影響很大，需要優(yōu)化。選擇scan模式需要設(shè)定掃描的分子量范圍，選擇sim摸式則需要設(shè)定被檢測的離子的質(zhì)核比（小數(shù)點(diǎn)后一位的分子量）。6.3.4 報(bào)告的設(shè)定簡短報(bào)告包含了信號(hào)詳細(xì)信息對(duì)話框中設(shè)置的所有積分信號(hào)的定量文本結(jié)果。 LCMS定性報(bào)告中，顯示各個(gè)積分的色譜峰的質(zhì)譜圖，可以自動(dòng)扣背景，并對(duì)色譜峰中主要離子自動(dòng)提取EIC。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 9 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.3.5 方法的保存文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 10 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.4. 數(shù)據(jù)分析6.4.1. 點(diǎn)擊圖標(biāo)，打開分析軟件，使用導(dǎo)航欄可以查看數(shù)據(jù)所在的位置。6.4.2. 使用下拉菜單可以選擇想查看的通道。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 11 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.4.3. 光譜工具欄介紹6.4.4.顯示質(zhì)譜圖打開色譜圖，選擇光譜工具，從光譜工具欄里先提取離子色譜，然后平均一組選定的光譜，就可以看到質(zhì)譜圖。文件名稱Agilent液質(zhì)聯(lián)用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編碼 SOP-R&D-14A-012-01共 12 頁 ，第 12 頁起 草 人：審 核 人：批 準(zhǔn) 人：生效日期起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：起草部門分發(fā)部門修 訂 號(hào) 批準(zhǔn)日期 執(zhí)行日期6.5. 關(guān)機(jī)6.5.1 進(jìn)入