2015全國一卷生物選修l：生物技術實踐(15分)已知微生物A可以產生油脂，微生物B可以產生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產。回答有關問題：（1）顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通常可用_染色。微生物A產生的油脂不易揮發，可選用_（填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提取。（2）為了從自然界中獲得能產生脂肪酶分微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以_為碳源的固體培養基進行培養。（3）若要測定培養液中微生物B的菌體數，可在顯微鏡下用_直接計數；若要測定其活菌數量，可選用_法進行計數。（4）為了確定微生物B產生的脂肪酶的最適溫度，某同學測得相同時間內，在35、40、45溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個溫度中，_條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞_設計后續實驗。【答案】（1）蘇丹III染液或者蘇丹IV染液 萃取法（2） 脂肪（3） 血細胞計數板 稀釋涂布平板（4） 45 402016全國一卷生物選修l：生物技術實踐(15分)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：配置培養基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）; 制作無菌平板； 設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作； 將各組平板置于37恒溫箱中培養一段時間，統計各組平板上菌落的平均數。回答下列問題:（1）該培養基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟，該培養基中的成分X通常是_。（2）步驟中，實驗組的操作是_。（3）若在某次調查中，某一實驗組平板上菌落平均數為36個/平板，而空白對照組的一個平板上出現了6個菌落，這種結果說明在此次調查中出現了_現象。若將30（即36-6）個/平板作為本組菌落數的平均值，該做法_（填“正確”或“不正確”）。【答案】（1）牛肉膏、蛋白胨 瓊脂（2）將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間（3）污染 不正確2009寧夏卷生物選修l：生物技術實踐(15分)（1）在大腸桿菌培養過程中，除考慮營養條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結構簡單、變異類型容易選擇、_、_等優點，因此常作為遺傳學研究的實驗材料。（2）在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和培養皿進行_（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進行清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變性，還能_。（3）若用稀釋涂布平板法計數大腸桿菌活菌的個數，要想使所得估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復外，還應保證待測樣品稀釋的_。（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的_。（5）培養大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養基是否被污染。對于固體培養基應采用的檢測方法是_。（6）若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養基及其培養物必須經過_處理后才能丟棄，以防止培養物的擴散。【答案】（1）溫度酸堿度易培養生活周期短（2）滅菌消毒損傷DNA的結構（3）比例合適（4）鑒定(或分類)（5）將未接種的培養基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養基上是否有菌落產生.（6）滅菌2013全國一卷生物選修l：生物技術實踐(15分)回答下列有關泡菜制作的問題(1)制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是_，為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是_。(2)泡菜制作過程中，乳酸發酵的過程即為乳酸菌進行_的過程。該過程發生在乳酸菌細胞的_中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_、_和_等。(4)從開始制作到泡菜品質昂佳這段時間內，泡菜液逐漸變酸。這段時聞內泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規律是_，原因是_。【答案】（1）殺滅雜菌增加乳酸菌的數量（2）無氧呼吸細胞質（3）溫度腌制時間食鹽用量（4）乳酸菌數量增加，雜菌數量減少乳酸菌比雜菌更為耐酸2013寧夏卷生物選修l：生物技術實踐(15分)臨床試用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題：（1）為了從樣本中獲取致病菌菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養基表面，經過選擇培養、鑒別等步驟獲得。（2）取該單菌落適當稀釋，用_法接種于固體培養基表面，在37培養箱中培養24h，使其均勻生長，布滿平板。（3）為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A，B，C，D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養一段時間后，含A的濾紙片周圍出現透明圈，說明該致病菌對抗生素A_；含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈，說明該致病菌對抗生素B_；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明_；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。（4）根據上述實驗結果，為達到抗菌目的，最好應選擇抗生素_。【答案】（1）劃線稀釋涂布（或涂布）（2）涂布（3）敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A弱耐藥菌（4）A2013山東卷生物選修l：生物技術實踐(15分)胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產生胡蘿卜素的微生物體中提取獲得，流程如下：（1）篩選產胡蘿卜素的酵母菌R時，可選用_或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時需要先灼燒接種環其目的是_。（2）培養酵母菌R時，培養基中的蔗糖和硝酸鹽可以分別為酵母菌R提供_和_。（3）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時，干燥過程應控制好溫度和_以防止胡蘿卜素分解；萃取過程中宜采用_方式加熱以防止溫度過高；萃取液濃縮前需進行過濾。其目的是_。（4）紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過程中需要用胡蘿卜素標準品作為_。【答案】（1）稀釋涂布平板法滅菌（防止雜菌污染）（2）碳源氮源（3）時間水浴濾去不溶物（4）(實驗)對照2009廣東卷生物選修l：生物技術實踐(10分)材料：飼料原料中的磷元素有相當一部分存在于植酸中，豬、禽等動物由于缺乏有關酶，無法有效利用植酸，造成磷源浪費，而且植酸隨糞便排除后易造成環境有機磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成為目前重要的飼料添加劑之一。（1）商品化植酸酶主要來自微生物。在產酶菌株篩選過程中，常在基本培養基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產生_，可根據其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進一步測定植酸酶活性。活性測定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時間_表示。（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：純酶透析純化粗提物（）透析離心發酵液 含酶的發酵液 菌體去除 透析液（）去除中的主要成分為_；中包含植酸酶等多種蛋白質。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據。（3）為建設基因工程菌，可用PCR等技術從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應包含多次循環，每次循環包括三步：_。反應過程中打開模板DNA雙鏈的方法是_。（4）植酸酶外，微生物還能應用在哪些酶的生產中？（至少寫兩種）【答案】（1）透明圈 植酸鈉的消耗量（減少量）或磷酸（肌醇）的生成量（2）小分子雜質 凝膠色譜法：根據蛋白質之間的分子大小、吸附性質等差異進行純化（或電泳法：根據蛋白質之間的電荷、分子大小等差異進行純化）（3）變性、復性和延伸（長） 加熱（或高溫處理）（4）蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶2013全國一卷生物選修l：生物技術實踐(15分)回答下列有關泡菜制作的問題:(1)制作泡菜時,所用鹽水需煮沸,其目的是_。為了縮短制作時間,有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的目的是_。(2)泡菜制作過程中,乳酸發酵的過程即為乳酸菌進行_的過程。該過程發生在乳酸菌細胞的_中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_、_和_等。(4)從開始制作到泡菜品質最佳這段時間內,泡菜液逐漸變酸,這段時間內泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規律是_,原因是_。【答案】（1）殺滅雜菌 增加乳酸菌數量 （2）無氧呼吸 細胞質 （3）溫度 腌制時間 食言用量 （4）乳酸菌數量增多，雜菌數量減少 乳酸菌比雜菌更為耐酸2011新課標全國卷生物選修l：生物技術實踐(15分)有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同學欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。回答問題：(1)在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養基上，從功能上講，該培養基屬于_培養基。(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即_和_。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下，在微生物培養過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術要求實驗操作應在酒精燈_附近。【答案】 (1)原油 選擇(2)平板劃線法 稀釋涂布平板法(3)強 (4)干熱滅菌法 高壓蒸汽滅菌法 火焰 2012全國新課標生物選修l：生物技術實踐(15分)為了探究6-BA和IAA對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,其研究小組在MS培養基中加入6-BA和IAA,配制成四種培養基(見下表),滅菌后分別接種數量相同、生長狀態一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養一段時間后,統計再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n),結果如下表。培養基編號濃度/mgL-1m/n/個6-BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問題(1)按照植物的需求量,培養基中無機鹽的元素可分為_和_兩類。上述培養基中,6-BA屬于_類生長調節劑。(2)在該實驗中,自變量是_,因變量是_,自變量的取值范圍是_。 (3)從實驗結果可知,誘導叢芽總數最少的培養基是_號培養基。(4)為了誘導該菊花試管苗生根,培養基中一般不加入_ (填“6-BA”或“IAA”)。【答案】（1）大量元素 微量元素 細胞分裂素 （2）1AA濃度 再生叢芽外植體的比率（m）和再生叢芽外植體的叢芽平均數（n） 00.5 mgL-1（3）1 （4）6-BA2013新課標全國卷生物選修l：生物技術實踐(15分)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用_法或_法將樣本接種于固體培養基表面,經過選擇培養、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋,用_法接種于固體培養基表面,在37培養箱中培養24 h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養一段時間后,含A的濾紙片周圍出現透明圈,說明該致病菌對抗生素A_;含B的濾紙片周圍沒有出現透明圈,說明該致病菌對抗生素B_ ;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明_;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據上述實驗結果,為達到抗菌目的,最好應選用抗生素_。【答案】（1）劃線 稀釋涂布（或涂布） （2）涂布 （3）敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性比對A弱 耐藥菌 （4）A2015新課標全國卷生物選修l：生物技術實踐(15分)回答與胡蘿卜素有關的問題：（1）胡夢卜含有的胡蘿卜素中，最主要的是_（填“-