第一章 總論（6學時） 溶劑提取法 提取 水蒸氣蒸餾法（適用于具有揮發性的、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞、且難溶或不溶于水的成分） 升華法 溶劑法 離子交換樹脂法 沉淀法分離純化 結晶法 色譜法 超臨界流體萃取 超濾法、透析法、分餾法天然藥物化學成分按其生物合成途徑劃分：一級代謝物（糖類、蛋白質等）這類物質是每種藥物都含有，是維持生物體正常生存的必需物質二級代謝物（生物堿、黃酮、皂甙等）這些物質不是每種藥物都有，是生物體通過各自特殊代謝途徑產生，反映科、屬、種的特性物質2.溶劑提取法與水蒸氣蒸餾法的原理、操作及其特點溶劑提取法根據被提取成分的性質和溶劑性質石油醚或汽油（可提取油脂、蠟、葉綠素、揮發油、游離甾體及三萜化合物）三氯甲烷或乙酸乙酯（可提取游離生物堿、有機酸及黃酮、香豆素的苷元等中等極性化合物）丙酮或乙醇、甲醇（可提出苷類、生物堿鹽以及鞣質等極性化合物水（可提出氨基酸、糖類、無機鹽等水溶性成分）浸漬法滲漉法煎煮法提取方法回流提取法連續回流提取法超臨界流體萃取法超聲波提取法微波提取法溶劑極性由弱到強的順序如下：石油醚(低沸點高沸點) 二硫化碳 四氯化碳 苯 二氯甲烷 乙醚 氯仿 醋酸乙酯 正丁醇 丙酮 乙醇 甲醇 水 乙酸選擇溶劑的要點：能有效的提取成分；相似相溶，沸點適中易回收；低毒安全。水蒸氣蒸餾法的原理：這類成分有揮發性，在100時有一定蒸汽壓，當水沸騰時，該類成分一并隨水蒸汽帶出，再用有機溶劑萃取，既可分離出。3. 層析方法（硅膠、聚酰胺、葡聚糖凝膠、離子交換樹脂、大孔樹脂法及分配層析）和兩相溶劑萃取法的原理及方法。吸附劑分離原理吸附規律應用硅膠吸附原理弱酸性、極性吸附劑化合物極性越大、吸附能力強（難洗脫）溶劑極性越小，吸附力越強廣泛（酸、堿及 中性成分均可）氧化鋁吸附原理堿性、極性吸附劑吸附規律同上堿性、中性成分（酸性成分與鋁絡合）活性炭吸附原理非極性吸附劑吸附規律與與硅膠、氧化鋁相反從稀水溶液中富集微量物質；脫色（脂溶性色素）聚酰胺氫鍵吸附（1）形成氫鍵的基團數目越多，則吸附力越強； （2）易形成分子內氫鍵，其在聚酰胺上的吸附力即減弱；（3）分子中芳香化程度高，吸附力增強。（4）各種溶劑對聚酰胺的洗脫能力：水甲醇丙酮氫氧化鈉液甲酰胺二甲基甲酰胺B，當通過弱堿性離子樹脂柱時，哪個先洗脫？B適用于分離酸性、堿性及兩性基團的分子葡聚糖凝膠分子篩原理生成的凝膠顆粒網孔大小取決于所用交聯劑的數量及反應條件。只適合在水中應用，且不同規格適合分離不同分子量的物質溶劑分配法分配系數差系統分離法（先極性小的溶劑）：石油醚Et2OEtOAcEtOH水。正相正相分配柱色譜：固定相的極性流動相，極性小的先流出，適合極性大的物質。基本結構單位：C2單位(醋酸單位)：如脂肪酸、酚類、苯醌等聚酮類化合物;C5單位(異戊烯單位)：如萜類、甾類等;C6單位：如香豆素、木脂素等苯丙素類化合物;氨基酸單位：如生物堿類化合物;復合單位：由上述單位復合構途徑生成物醋酸-丙二酸途徑（AA-MA）脂肪酸類、酚類、蒽酮類等甲戊二羥酸途徑（ MVA ）萜類等桂皮酸及莽草酸途徑苯丙素類、香豆素類、木質素類、木脂體、黃酮類 等氨基酸途徑生物堿類復合途徑第二章 糖和苷（6學時）掌握：1.掌握苷鍵的定義和苷的結構特征、苷的分類苷類又稱配糖體(glycosides)，是由糖或糖的衍生物等與另一非糖物質通過其端基碳原子聯接而成的化合物。Fischer式：（C1與C5的相對構型）C1-OH與原C5或C4-OH，順式為，反式為。Haworth式：C1-OH與C5（或C4），同側為，異側為。葡萄糖Glc glucose 低聚糖：根據是否含有游離的醛基或酮基可分為還原糖和非還原糖。具有游離醛基或酮基的糖稱為還原糖。半乳糖Gal galactose 甘露糖Man mannose 鼠李糖Rha rhamnose 木 糖Xyl xylose 果 糖Fru fructose 阿拉伯糖Ara arabinose 苷元(配基)：非糖的物質，常見的有黃酮，蒽醌，三萜等苷類 苷鍵：將二者連接起來的化學鍵，可通過O,N,S等原子或直接通過C-C鍵相連。 糖(或其衍生物，如氨基糖，糖醛酸等)苷類化合物的分類：根據生物體內的存在形式：分為原生苷、次級苷。根據連接單糖基的個數：單糖苷、二糖苷、三糖苷。根據苷元連接糖基的位置數：單糖鏈苷、二糖鏈苷。根據苷元化學結構的類型：黃酮苷、蒽醌苷、生物堿苷、三萜苷。根據苷鍵原子的不同：氧苷、硫苷、氮苷、碳苷。 氧苷苷元與糖基通過氧原子相連天麻苷醇苷醇羥基與糖端基脫水而成的苷比較常見，如皂苷、強心苷均屬此類。例：紅景天苷酚苷苷元的酚羥基與糖端基脫水而成的苷。較常見，如黃酮苷、蒽醌苷多屬此類。例：天麻苷氰苷主要是指-羥基腈的苷例：苦杏仁苷水解生成的苷元很不穩定，很快分解成醛或酮和氫氰酸。酯苷苷元的羧基與糖端基脫水而成的苷酯苷的特點：苷鍵既有縮醛的性質，又有酯的性質，易為稀酸和稀堿水解。例：山慈菇苷吲哚苷指吲哚醇和糖形成的苷粗制靛藍，民間用以外涂治療腮腺炎，有抗病毒作用硫苷是糖的端基OH與苷元上巰基縮合而成的苷如蘿卜中的蘿卜苷氮苷糖的端基碳與苷元上氮原子相連的苷稱氮苷是生物化學領域中的重要物質。如核苷類化合物碳苷是一類糖基和苷元直接相連的苷，在各類溶劑中溶解度均小，難于水解獲得苷元。組成碳苷的苷元多為酚性化合物，如黃酮、查耳酮、色酮、蒽醌和沒食子酸等。尤其以黃酮碳苷最為常見Klyne法將苷和苷元的分子旋光差與組成該苷的糖的一對甲苷的分子旋光度進行比較，數值上相接近的一個便是與之有相同苷鍵的一個。2.掌握苷的一般性狀、溶解度和旋光性溶解性味覺糖小分子極性大，水溶性好 聚合度增高 水溶性下降。單糖低聚糖甜味。多糖難溶于冷水，或溶于熱水成膠體溶液。多糖無甜味（聚合度增高 甜味減小）苷親水性（與連接糖的數目、位置有關）苷元親脂性苷類苦（人參皂苷）、甜（甜菊苷）等旋光性及其在構型測定中的應用多數苷類呈左旋。利用旋光性 測定苷鍵構型（即、苷鍵）3.掌握苷鍵的酸催化水解法和酶催化水解法苷鍵斷裂方法： 酸催化水解反應 乙酰解反應 堿催化水解和消除反應 酶催化水解反應 氧化開裂法（Smith降解法） 酸催化水解反應（苷鍵屬于縮醛結構，易為稀酸催化水解）在水中溶劑化質子化反應機制：苷鍵原子 斷鍵陽碳離子或半椅型的中間體 糖酸水解的規律：苷原子不同，酸水解難易順序： C S O N（C-苷最難水解，從堿度比較亦如此）呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解。（因五元呋喃環的頰性使各取代基處在重疊位置，形成水解中間體可使張力減小，故有利于水解）酮糖較醛糖易水解（酮糖多為呋喃結構，而且酮糖端基碳原子上有-CH2OH大基團取代，水解反應可使張力減小）吡喃糖苷中：吡喃環C5-R越大越難水解，水解速度為：五碳糖 甲基五碳糖 六碳糖 七碳糖 C5上有-COOH取代時，最難水解（因誘導使苷原子電子密度降低）氨基取代的糖較-OH糖難水解，-OH糖又較去氧糖難水解。 2,6-二去氧糖 2-去氧糖 3-去氧糖 羥基糖 2-氨基糖N-苷易接受質子，但當N處于酰胺或嘧啶位置時，N-苷也難于用礦酸水解。 (吸電子共軛效應，減小了N上的電子云密度)芳香屬苷較脂肪屬苷易水解。如：酚苷 萜苷、甾苷（因苷元部分有供電結構，而脂肪屬苷元無供電結構）苷元為小基團時：苷鍵橫鍵比豎鍵易水解( e a )（橫鍵易質子化） 苷元為大基團時：苷鍵豎鍵比橫鍵易水解( a e )（苷的不穩定性促使其易水解） 酶催化水解反應（可獲得原苷元）苦杏仁酶-六碳醛糖苷鍵纖維素酶-D-葡萄糖苷鍵麥芽糖酶-D-葡萄糖苷鍵轉化糖酶-果糖苷鍵蝸牛酶-苷鍵 氧化開裂法（Smith降解法）可得到原苷元（除酶解外，其它方法可能得到的是次級苷元）試劑：過碘酸(HIO4)、四氫硼鈉(NaBH4)、稀酸適用于苷元不穩定的苷和碳苷的裂解 乙酰解反應常用試劑醋酐 + 酸【H2SO4、HClO4、CF3COOH或Lewis酸（ZnCl2、BF3）等】反應條件一般是在室溫放置數天反應機理與酸催化水解相似，以CH3CO+(乙酰基，Ac）為進攻基團反應速率苷鍵鄰位有電負性強的基團（如環氧基）可使反應變慢。-苷鍵的葡萄糖雙糖的反應速率：（乙酰解易難程度） （16）（14）（13）（12）用途酰化可以保護苷元上的-OH，使苷元增加親脂性，可用于提純和鑒定。乙酰解法可以開裂一部分苷鍵而保留另一部分苷鍵。乙酰解反應易發生糖的端基異構化。 堿催化水解和消除反應反應機理用途堿催化水解（酯苷、酚苷、烯醇苷、-吸電子基取代的苷）C1-OH與C2-OH：反式易水解，其產物為1,6-葡萄糖酐；順式產物為正常的糖。例：4-羥基香豆素苷、水楊苷、海菲菜苷等利用水解產物可判斷苷鍵構型消除反應（苷鍵的-位有吸電子基團者，使-位氫活化，在堿液中與苷鍵起消除反應而開裂，例：蜀黍苷）多糖還原端的單糖逐個被剝落，對非還原端則無影響。3-O-代的糖可形成3-脫氧糖酸4-O-代的糖可形成3-脫氧-2-羥甲基糖酸二個以上取代的還原糖難生成糖酸 可從多糖剝落反應生成的糖酸中了解還原糖的取代方式。 糖的化學性質：原理作用Molisch反應糠醛形成反應紫環反應樣品 + 濃H2SO4 + -萘酚 棕色環【丙酮、甲酸、乳酸、草酸、沒食子酸、苯三酚、-萘酚和葡萄糖醛酸 以及各種醛糖衍生物均能發生molish反應。】1、鑒定單糖的存在。單糖、雙糖、多糖一般都發生molish反應，但氨基糖除外。2、Molisch反應為陰性可以確定無糖的存在，如果為陽性則僅為有糖存在的可能性。過碘酸反應（過碘酸與鄰二醇羥基形成五元環狀酯的中間體，然后再將醇羥基氧化成羰基）作用于鄰二醇、-氨基醇、-羥基醛（酮）、鄰二酮和某些活性次甲基等結構反應特點：反應定量進行（基本是1:1）；必須在水溶液中進行，或有水溶液；酸性或中性介質中速率：順式 反式在異邊而無扭轉余地的鄰二醇不反應推測糖中鄰二-OH多少；同一分子式的糖，推測是吡喃糖還是呋喃糖； 推測低聚糖和多聚糖的聚合度；推測1,3連接還是1,4連接（糖與糖連接的位置）羥基反應糖的-OH反應醚化、酯化和縮醛（酮）化及硼酸絡合反應反應活性：半縮醛羥基（C1-OH） 伯醇基（C6-OH） 仲醇 （伯醇因其處于末端的空間，對反應有利，因此活性高于仲醇）縮酮和縮醛化反應：酮或醛在脫水劑如礦酸、無水ZnCl2、無水CuSO4等存在下可與多元醇的二個有適當空間位置的羥基易形成環狀縮酮和縮醛。酮類易與順鄰-OH生成 五元環狀物醛類易與1,3-雙-OH生成 六元環狀物應用：保護-OH硼酸絡合反應：糖 + 硼酸 絡合物（酸性增加、可離子化）（H3BO3是接受電子對的Lewis酸）應用：絡合后，中性可變為酸性，因此可進行酸堿中和滴定；可進行離子交換法分離；可進行電泳鑒定；在混有硼砂緩沖液的硅膠薄層上層析。熟悉：1.熟悉苷類化合物的提取方法、苷類化合物的檢識方法提取方法主要為溶劑法水、稀醇（單糖、低聚糖、多糖）破壞或抑制植物體內酶的方法：迅速加熱干燥采集新鮮材料 冷凍保存 用沸水或醇提取先用碳酸鈣絆和后再用沸水提取2.熟悉苷鍵的堿催化水解法和氧化開裂法3.熟悉苷類化合物中常見糖的種類、結構、色譜鑒定法、苷類化合物中糖的種類和比例、糖第三章 苯丙素類 （3學時） 定義：一類含有一個或幾個C6-C3單位的天然成分。包括：苯丙烯、苯丙醇、苯丙酸及其縮酯、香豆素、木脂素、黃酮、木質素等。掌握：1.掌握香豆素基本母核的結構特征、類型、性狀和溶解性香豆素母核為苯駢-吡喃酮。環上常有取代基。 其中被藥典收載的有秦皮、白芷、獨活、前胡、菌陳、補骨脂等通常將香豆素分為四類：簡單香豆素類只有苯環上有取代基的香豆素取代基：羥基、烷氧基、苯基、異戊烯基等7-羥香豆素香豆素類成分的母體C3、C6、C8位電負性較高，易于烷基化（其中C3位烷基化屬于第四類）環合反應的形成體內過程由酶主宰反應體外實驗堿性條件（OH-）呋喃環；酸性條件（H+） 吡喃環呋喃香豆素類吡喃香豆素類這一類天然產物并不多見其他類指-吡喃酮環上有取代基的香豆素類。還包括二聚體和三聚體。C3、C4上常有取代基：苯基、羥基、異戊烯基等。 香豆素理化性質游離狀態成苷性狀結晶形固體，有一定熔點粉末狀大多具有香氣；具有升華性質大多無香味；不能升華分子量小的有揮發性（可隨水蒸汽蒸出）無揮發性UV下顯藍色熒光，堿液中熒光增強溶解性能溶于沸水，不溶或難溶冷水可溶MeOH、EtOH、CHCl3和乙醚等溶劑溶于H2O、OH-/H2O、MeOH、EtOH等難溶極性小的有機溶劑內酯的性質（重點）長時間放在堿液中 （溶于水）或紫外光照射（再酸化就不會合環）顯色反應異羥肟酸鐵反應（識別內酯）堿性條件下，香豆素內酯開環，并與鹽酸羥胺縮合成異羥肟酸，再在酸性條件下與三價鐵離子絡合成鹽而顯紅色。與酚類試劑的反應酚羥基FeCl3試劑顏色反應；若酚羥基的對位未被取代或6-位上無取代，其內酯環堿化開環后，可與Gibbs試劑、Emerson試劑反應。 （藍色） （紅色）2.掌握香豆素酸堿作用下開環、閉環原理3.掌握簡單香豆素的1H-NMR譜特征4.掌握木脂素的結構類型一類由苯丙素氧化聚合而成的天然產物。通常指其二聚物，少數為三聚物和四聚物。組成木脂素的單位有四種：桂皮醇桂皮酸丙烯基酚烯丙基酚二芐基丁烷類C8-C8，其他木脂素的生源前體。芳基萘類有芳基萘、芳基二氫萘、芳基四氫萘，例鬼臼毒素（抗腫瘤）聯苯環辛烯類 （生物活性最強）五味子素（保肝、抗氧化）二芐基丁內酯類四氫呋喃類雙四氫呋喃類熟悉：1.熟悉苯丙酸類成分的結構、性質、紫外光譜特征及生理活性苯丙酸類基本結構酚羥基取代的芳香環與丙烯酸；多具有C6-C3結構的苯丙酸類綠原酸是金銀花抗菌、利膽的有效成分。實例: 丹參治療冠心病的有效成分丹參素甲、乙和丙2.熟悉香豆素的提取分離方法3.熟悉木脂素的理化性質游離成苷形態多呈無色晶形，新木脂素不易結晶溶解性親脂性，難溶水，溶苯、氯仿等水溶性增大揮發性多數不揮發，少數有升華性質旋光性大多有光學活性，遇酸易異構化了解：1.了解香豆素類的生物活性毒性肝毒性，黃曲霉素；抗病毒作用canolide A 抗艾滋病毒，例：蛇床子素抑制乙肝表面抗原光敏作用可引起皮膚色素沉著；補骨脂內酯治白斑病2.了解苯丙酸類化合物的結構和鑒定3.了解木脂素的提取分離方法第四章 醌類化合物（3學時）識記 蒽醌的化學結構、化學性質與呈色反應及其提取分離方法。領會 蒽醌的鑒別及提取分離原理。掌握： 1.掌握苯醌、萘醌、蒽醌、菲醌類化合物的基本結構及分類苯醌類有鄰苯醌和對苯醌兩種，天然的多為對苯醌萘醌（有三種可能結構，但天然的萘醌僅有-萘醌）胡桃醌：抗癌、抗菌及中樞神經鎮靜作用紫草素及維生素K類化合物屬于萘醌菲醌丹參新醌甲中藥丹參根中所含多種化合物都是菲醌的衍生物，包括鄰菲醌和對菲醌。抗菌及擴張冠狀動；治療冠心病、心肌梗塞蒽醌衍生物（常見9,10-蒽醌）1,4,5,8位為位 2,3,6,7位為位 9,10位為meso位，又叫中位大黃素型羥基分布于兩側苯環上大黃、決明致瀉茜草素型羥基分布于一側苯環上茜草止血、活血、治風濕蒽酚和蒽酮衍生物：一般存在于新鮮植物中，因為該類成分可以緩緩被氧化成蒽醌類成分。大黃素型化合物的酸性大小：大黃酸大黃素蘆薈大黃素大黃素甲醚大黃酚 R1 H CH3 H CH3 CH3 R2 COOH OH CH2OH OCH3 H2.掌握蒽醌類化合物的顏色、升華性、溶解性及與結構的關系、酸性及酸性強弱與結構的關系、顯色反應及其應用性狀如果母核上無酚羥基取代，基本上無色隨著助色團的存在，有黃、橙、棕紅色以至紫紅色等苯(萘)醌多以游離態存在，蒽醌一般以苷形式存在升華性游離蒽醌具有升華性，常壓下加熱可升華而不分解一般升華溫度隨酸性的增強而升高溶解度苷元：通常可（易）溶于苯、乙醚、氯仿，在堿性有機溶劑如吡啶 、N-二甲基甲酰胺中溶解度也較大，可溶于丙酮、甲醇及乙醇，不溶或難溶于水蒽苷：極性較大，易溶于甲醇及乙醇，也能溶解于水，在熱水中更易溶解，但在冷水中溶解度較小，幾乎不溶于乙醚、苯、氯仿等溶劑蒽醌的碳苷：在水中的溶解度很小，難溶于親脂性有機溶劑而易溶于吡啶中酸性（醌類化合物因分子中酚羥基的數目及位置不同，酸性強弱有一定差別。）(1) 苯醌和萘醌的醌核上的羥基酸性類似于羧基；(2) 萘醌和蒽醌的苯環上的羥基酸性：-羥基 -羥基-羥基蒽醌的酸性較一般酚類要強能溶于Na2CO3溶液中，尤其是熱溶液中-羥基因與CO基形成氫鍵締合酸性很弱，弱于苯酚和碳酸第二步解離的酸性因此不能溶解于碳酸氫鈉和碳酸鈉溶液中。羥基數目增多，酸性也增強。羥基蒽醌的酸性隨羥基數目的增加而增加（-位或-位均是）因此，游離蒽醌的酸性強弱順序為：含COOH 含2個以上-羥基 含1個-羥基含2個以上-羥基 含1個-羥基可溶于Na2HCO3 可溶于Na2CO3 可溶于1%NaOH 可溶于5%NaOH顏色反應（取決于其氧化還原性質以及分子中的酚羥基的性質）Feigl反應（醌的通性）在堿性條件下經加熱能迅速與醛類及鄰二硝基苯反應紫色無色亞甲藍顯色試驗苯醌和萘醌（醌核上有活潑質子）而蒽醌無此反應藍色與活性次甲基試劑的反應苯醌和萘醌-醌環上有未被取代的位置而蒽醌無此反應藍綠色或藍紫色與堿的反應（Borntrger反應）含羥基的蒽醌與蒽酚衍生物 氧化但蒽酚、蒽酮、二蒽酮類化合物則需顏色加深，多呈橙、紅、紫紅及藍色與金屬離子的反應-酚羥基或鄰二酚羥基蒽醌與Pb2+、Mg2+等形成絡合物而顯色。 3.掌握蒽醌類化合物的一般提取方法游離醌類的提取方法堿提取-酸沉淀法有機溶劑提取法:苯、氯仿等水蒸氣蒸餾法（適用于分子量小的苯醌及萘醌類化合物）其它方法：超臨界流體萃取法和超聲波提取法等總醌類提取法一般選用甲醇或乙醇為溶劑游離態和成苷的蒽醌類化合物濃縮后再依次用有機溶劑提取（多用索氏提取法），極性大小初步分離對于多羥基蒽醌或具有羧基的蒽醌（如大黃酸），在植物體內多以鹽的形式存在，難以被有機溶劑溶出，提取前應先酸化使之游離。瀉下作用番瀉苷類的瀉下作用是通過其代謝產物大黃酸蒽酮而起作用抗菌作用：抗細菌、霉菌其它作用：抗癌、抗病毒、抗真菌等第五章 黃酮類化合物（9學時）兩個具有酚羥基的苯環通過中央三碳相互連接而成黃酮（C3-位無OH）C2，C3飽和 二氫黃酮黃酮醇（C3-位有OH）二氫黃酮醇異黃酮（B環連在C3位）查耳酮（C環開環）黃烷類（C環還原）花色素類多以苷存在：O-苷和C-苷 ；旋光性：多為左旋糖的種類單糖：D-葡萄糖，D-半乳糖，D-木糖，L-鼠李糖，L-阿拉伯糖，D-葡萄糖醛酸雙糖：槐糖，龍膽二糖，蕓香糖（Rha16Glc），新橙皮糖（Rha12Glc）等三糖：龍膽三糖，槐三糖酰化糖：2-乙酰葡萄糖，咖啡酰基葡萄糖性狀多為結晶，少數為無定形粉末顏色（交叉共軛系統）黃酮（醇）及其苷類呈灰黃-黃色查耳酮：黃-橙色二氫黃酮（醇）：無色異黃酮：微黃色花色素及花色苷：紅色（pH8.5)溶解度游離苷元難溶于水，易溶于甲醇，乙醇，乙酸乙酯，乙醚等有機溶劑中苷溶于水、乙醇、甲醇中，難溶于苯、氯仿水溶度苷元7-O-葡萄糖苷黃酮(醇), 查耳酮二氫黃酮(醇)花色素 水 溶性平面型分子非平面型分子離子2.掌握黃酮類化合物的酸堿性，酸性強弱與結構之間的關系及在提取分離中的應用。酸性酚羥基，故具有酸性；可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺強弱順序：7,4 -OH 7-或4-OH 一般OH 5-OH堿性-吡喃環上的1-位氧原子，有未共用的電子對，表現微弱的堿性，可與強無機酸，如濃硫酸、鹽酸等生成氧鹽。3.掌握黃酮類化合物的顯色反應及與結構之間的關系和應用。還原反應HCl-Mg反應黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）及苷（+）橙紅-紫紅查耳酮、橙酮、兒茶素類（黃烷醇類）（）異黃酮（）（少數顯色）假陽性：花青素及部分橙酮、查耳酮僅加濃鹽酸呈色四氫硼鈉反應二氫黃酮（+）紫-紫紅色其他黃酮類（）絡合反應鋯鹽2%二氯氧化鋯(ZrOCl2)黃色 鋯-枸櫞酸反應：鑒別黃酮中3-OH或5-OH 樣品+ ZrOCl2(3或5-OH黃酮)黃色枸櫞酸黃色褪色(只有5-OH)黃色不褪(有3-OH)鋁鹽1%AlCl3或Al(NO3)3黃色, 并有熒光鉛鹽1%醋酸鉛及堿式醋酸鉛黃紅色沉淀氯化鍶（SrCl2）氨性甲醇溶液具有鄰二酚羥基綠色棕色黑色沉淀鎂鹽醋酸鎂甲醇溶液二氫黃酮(醇)顯天藍色熒光黃酮(醇)、異黃酮顯黃橙黃褐色硼酸顯色反應鑒別5-OH黃酮（在酸存在下）5-羥基黃酮，2-羥基查耳酮黃色、熒光（草酸）黃色（枸櫞酸）堿性試劑（NH3蒸氣可逆；Na2CO3水溶液不可逆）二氫黃酮遇堿開環查耳酮橙黃色鄰二酚羥基或3，4-二羥基黃色深紅色綠棕色沉淀4.掌握黃酮類化合物的一般提取方法（醇提取法、水提取法和堿溶酸沉淀法）、分離方法（溶劑萃取法、pH梯度法、聚酰胺柱色譜法、硅膠柱色譜法和凝膠過濾法）的原理以及它們與結構之間的關系提取與粗分苷元：用氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取苷及極性大的苷元用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加熱提取溶劑萃取法極性不同醇水水石油醚氯仿乙酸乙酯正丁醇堿提取酸沉淀法酚羥基與堿成鹽，溶于水；加酸后析出常用Ca(OH)2優點：含COOH雜質（如果膠、粘液質等）沉淀注意：堿性不宜過強，以免破壞黃酮母核；酸化時，酸性不宜過強，pH34即可，以免成鹽溶解炭粉吸附法活性炭吸附黃酮苷用于精制黃酮苷柱色譜法硅膠色譜按極性大小分離，主要分離極性小和中等極性的化合物，可用CC，PTLC聚酰胺色譜原理：氫鍵吸附洗脫順序規律： （先后）(1)苷元相同：三糖苷雙糖苷單糖苷苷元(2)母核上羥基增加，洗脫速度減慢(3)羥基數目相同：有締合羥基無締合羥基(4)不同類型：異黃酮二氫黃酮（醇）查耳酮黃酮黃酮醇 芳香核、共軛雙鍵多者吸附力強 葡聚糖凝膠游離黃酮吸附作用游離酚羥基數目黃酮苷分子篩分子量由大到小流出苷元的羥基數 越難洗脫苷的分子量、糖越易洗脫.習題：下列黃酮化合物，（1）用聚酰胺柱色譜，含水甲醇梯度洗脫（2）用硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，分別寫出洗脫順序。梯度pH萃取法（適合于分離酸性強弱不同的黃酮苷元）酸性大小7,4 -OH7-或4-OH一般OH5-OH溶于NaHCO3中溶于Na2CO3中溶于不同濃度的NaOH中根據分子中某些官能團進行分離醋酸鉛沉淀法具有鄰二酚羥基，可被醋酸鉛沉淀; 不具有鄰二酚羥基堿式醋酸鉛硼酸沉淀法鄰二酚羥基可與硼酸絡合，生成物溶于水習題：從某植物中分離出四種化合物，其結構如下：A R1=R2=H 3,7,4-OHB R1=H, R2=Rha 3,4-OH, 7-RhaC R1=Glc, R2=H 7,4-OH, 3-GlcD R1=Glc, R2=Rha 4-OH, 3-Glc, 7-Rha試比較四種化合物的酸性，極性大小比較它們的Rf值大小順序：1）硅膠TLC，展開劑CHCl3-MeOH（9:2）2）聚酰胺TLC，60%MeOH/H2O酸性 ACBD； 極性 DCBARf ：ABCDDBCA5.掌握黃酮類化合物色譜鑒定法（硅膠薄層色譜法、紙色譜法、聚酰胺薄層色譜法）的原理和應用硅膠TLC用于分離與鑒定弱極性黃酮類化合物聚酰胺TLC適用范圍廣，特別適用于分離含游離酚羥基的黃酮及其苷類雙向紙色譜法第一向展開劑：醇性溶劑，分配作用Rf：苷元單糖苷雙糖苷，一般 苷元0.7，苷0.5, 糖鏈越長，Rf越大；(2)苷元：黃酮(醇)，查耳酮 (Rf0.02) 26000種), 結構復雜, 生物活性多樣n=1 半萜 2 單萜（揮發油） 3 倍半萜（揮發油） 4 二萜（苦味素、植物醇）5 二倍半萜（海洋生物） 6 三萜（皂苷、樹脂） 8 四萜（植物胡蘿卜素）8 多聚萜（橡膠）藥物的重要來源：青蒿素蒿甲醚（倍半萜） 紫杉醇（二萜）經驗的異戊二烯法則 Wallach 1887年提出 異戊二烯法則生源的異戊二烯法則 Ruzicka 提出 前體物是 活性的異戊二烯 后由Lynen和Folkers得到證實經 甲戊二羥酸途徑衍生萜類化合物的生物合成途徑2.掌握卓酚酮類的理化性質、環烯醚萜苷的結構特點、分類和主要性質單萜2個異戊二烯單位、含10個C的化合物類群，揮發油的主要組分。分子量小，脂溶性其含氧衍生物多具有較強的生物活性和香氣，是醫藥、化妝品和食品工業的重要原料分類：鏈狀型和環狀型(單環、雙環、三環等)成苷時，不具揮發性，不能隨水蒸氣蒸餾香葉醇l-薄荷醇d-龍腦樟腦卓酚酮類：變形單萜，其碳架不符合異戊二烯規則，具有抗菌活性，但同時多有毒性1、酸性2、酚羥基易甲基化，不易酰化3、羰基不能和一般羰基試劑反應4、能與多種金屬離子絡合顯顏色用于鑒別環烯醚萜【為蟻臭二醛的縮醛衍生物，含有環戊烷結構單元】兩種基本骨架理化性質取代環戊烷環烯醚萜環戊烷開裂的裂環環烯醚萜苷大多為白色結晶或粉末，多具旋光性，味苦；苷易溶水和甲醇，可溶乙醇、丙酮和正丁醇；苷難溶于氯仿、苯等親酯性有機溶劑；其苷易水解，苷元為半縮醛結構，易聚合，難得結晶苷元苷元遇酸、堿、羰基化合物和氨基酸能變色，與皮膚接觸會變藍（玄參-玄參苷；地黃-梓醇）苷元在冰醋酸溶液中，加少量銅離子，加熱顯藍色生物合成途徑A、環烯醚萜苷類 （10個碳）B、4去甲環烯醚萜苷（9個碳）梔子苷京尼平苷（瀉下、利膽）梓醇（地黃中降血糖主要成分）C、裂環環烯醚萜苷：苦味苷龍膽苦苷，當藥苷，當藥苦苷，繡球內酯苦苷等倍半萜 通式： (C5H8)3 分布：揮發油高沸點部分。海洋低等動物（海藻、軟體動物等）、昆蟲中也有發現存在形式：揮發油，醇、酮、內酯或苷，生物堿。含氧衍生物多具有香氣和生物活性骨架繁雜，超過200余種無環倍半萜（金合歡烯、橙花叔醇）單環倍半萜雙環倍半萜（綿酚）青蒿素倍半萜過氧化物，抗惡性瘧疾改善青蒿素在水及油中的難溶性化學修飾雙氫青蒿素衍生化油溶性的蒿甲醚及水溶性的青蒿琥珀酸單酯用于臨床三環倍半萜（環桉醇）薁衍生物【特殊的倍半萜，五元環+七元環駢合的非苯環芳烴化合物】Sabety反應 可與溴-氯仿溶液產生藍色或綠色沸點高，揮發油分餾時可見美麗的藍、紫、綠色現象時，示有薁類存在分子結構中具有高度的共軛體系。多具有抑菌、抗腫瘤、殺蟲等生物活性二萜【由4個異戊二烯單位構成、含20個C的化合物類群】分布：植物界廣泛，植物分泌的乳汁、樹脂等均以二萜類衍生物為主，松柏科最多，菌類代謝產物，海洋生物；生物活性強鏈狀二萜（植物醇） 四環二萜（甜葉菊）雙環二萜（穿心蓮內酯、銀杏內酯）穿心蓮內酯：抗菌消炎活性成分，臨床治療急性菌痢、胃腸炎、咽喉炎等，穿心蓮內酯磺酸鈉（水溶性注射劑）銀杏內酯：治療心腦血管疾病單環二萜（維生素A）三環二萜（雷公藤甲素、紫杉醇抗癌）二倍半萜（由5個異戊二烯單位構成、含25個C）萜類化合物的理化性質性狀形態單萜和倍半萜 ：油狀液體，可揮發，或為低熔點固體。單萜的沸點比倍半萜低，兩者隨分子量和雙鍵的增加、功能鍵的增多，揮發性降低，熔點和沸點相應增高分餾二萜和二倍半萜：結晶性固體味苦味，或極苦，又稱苦味素；但甜菊苷例外旋光性具有光學活性溶解性親脂性強，萜類的苷有一定的親水性。 具內酯結構萜可用堿溶酸沉法分離純化。萜類對高熱、光、和酸堿敏感。加成反應雙鍵加成反應（了解）羰基加成反應A 與亞硫酸氫鈉加成含羰基的萜類化合物+亞硫酸氫鈉結晶性加成物，+酸 / 堿分解原來的反應產物反應時間過長或溫度過高雙鍵加成，不可逆B 與硝基苯肼加成C與吉拉德試劑加成分離含有羰基的萜類化合物常采用吉拉德試劑，使親脂性的羰基親水性的加成物分離吉拉德試劑是一類帶有季銨基團的酰肼，常用的為Girard reagent T和Girard reagent P氧化反應（氧化劑：O3，CrO3，KMnO4，SeO2等）脫氫反應分子重排反應（WagnerMeerwein重排，-蒎烯合成樟腦）揮發油：又稱精油，一類具有芳香氣味的油狀液體的總稱。l 性狀：常溫能揮發，可隨水蒸氣蒸餾。l 分布：種子植物，尤其是芳香植物。菊科(菊)、蕓香科(花椒、橙)、傘形科(茴香)l 存在：油滴狀，或與樹脂、粘液質共存，少數成苷。l 生物活性：祛痰、止咳、平喘、驅風、健胃、解 熱、鎮痛、抗菌消炎作用。薄荷油、茉莉花油、樟腦、冰片、丁香酚；成分十分復雜，幾十 上百個組份分類1)萜類化合物：單萜(低沸點)、倍半萜(高沸點)及其含氧衍生物，如薄荷油、樟腦等；2)芳香族化合物：萜源性化合物以及苯丙素類(C6-C3)，如桂皮醛、茴香醚、丁香酚等；3)脂肪族化合物：如正癸烷和小分子醇、醛及酸類化合物（如正壬醇）；4)其它類化合物：揮發油樣物質，如大蒜油等，液態小分子生物堿：川芎嗪(生物堿類)性狀顏色：無色或微黃氣味：香氣或特異氣味形態：常溫透明液體揮發性： 可揮發，不留痕跡（與脂肪油的本質區別）溶解度：不溶于水，易溶于有機溶劑 物理常數: 沸點在70300，隨水蒸氣蒸餾，比水輕，具光學活性和強折光性穩定性: 易氧化，應存于棕色瓶，陰涼低溫保存。提取（一）水蒸汽蒸餾藥材 + H2O 餾出液 鹽析 萃取 分液 揮發油（二）溶劑法1、2、吸收：油脂(高級脂肪烴)3、二氧化碳超臨界流體萃取法；(三) 冷壓法：含量高，但雜質多分離(一) 冷凍法 低溫可結晶 含量高 析腦(薄荷)(二) 分餾法：減壓(三) 化學方法(四) 色譜分離法（AgNO3柱色譜）羰基化合物：NaHSO3，羰基試劑醇類：成脂，皂化，乙醚提揮發油母液（除去酚、酸） 水洗至中性 +無水硫酸鈉干燥 亞硫酸氫鈉飽和液振搖，分出水層或加成物結晶 酸或堿水解加成物 乙醚萃取醛或酮揮發油 +吉拉德試劑T或P回流1h水溶性縮合物 +乙醚除去不具有羰基的組分 +酸羰基化合物揮發油 +鄰苯二甲酸酐成酯 溶于碳酸鈉洗去未作用的揮發油（乙醚） +堿液皂化 +乙醚（萃取所生成的酯）蒸去乙醚 皂化原有的醚類成分成分鑒定物理常數（相對密度、比旋度、折光率、凝固點）化學常數（酸值、酯值、皂化值）色譜法的應用：薄層色譜、氣相色譜法、GC/MS聯用法官能團的測定（酚類、羰基化合物、內酯類化合物）不飽和化合物和薁類衍生物：揮發油的三氯甲烷溶液+溴的三氯甲烷溶液紅色褪去含有不飽和化合物；繼續滴加溴的三氯甲烷溶液藍色、紫色或綠色含有薁類化合物4.掌握揮發油化學常數的含義及應用酸值：代表揮發油中游離羧酸和酚類成分的含量，以中和1g揮發油中含有游離的羧酸和酚類所需要氫氧化鉀毫克數來表示。酯值：代表揮發油中酯類成分含量，以水解1g揮發油所需氫氧化鉀毫克數來表示。皂化值：以皂化1g揮發油所需氫氧化鉀毫克數來表示。皂化值=酸值+酯值第七章 三萜及其苷類（6學時）1.掌握羊毛脂烷型、達瑪烷型、齊墩果烷型、烏蘇烷型、羽扇豆型的結構特征和典型實例. (C5H8)630C游離：四環三萜；五環三萜成苷：三萜皂苷n 由30個碳原子組成的萜類化合物，符合“異戊二烯定則”n 大多與糖結合成苷，大多溶于水，水溶液振搖會產生持久的泡沫，因此稱為三萜皂苷。n 因為許多三萜皂苷具有羧基，因此又稱為“酸性皂苷”。n 廣泛存在于自然界，雙子葉植物中分布最多。皂苷是由皂苷元（三萜皂苷元和甾體皂苷元）和糖部分兩部分組成。糖部分：葡萄糖，半乳糖，鼠李糖，阿拉伯糖，葡萄糖醛酸，半乳糖醛酸等。根據糖鏈的多少分為：單糖鏈皂苷：由一串寡糖組成的苷。雙糖鏈苷：由二串寡糖組成的苷。三糖鏈苷：由三串寡糖組成的苷。這些糖常以低聚糖（29個）形式與苷結合，少數是單糖與苷元結合。皂苷分子中大多數在C-3位有-OH取代，而該-OH大多數與糖結合成苷與酶共存：含有皂苷的植物幾乎都含有酶，能使皂苷水解成為次級苷，特別是一些酯皂苷，酸、堿都可使其水解，轉變成次級苷，因此提取時要注意，首先要破壞酶，酸、堿要慎用。四環三萜羊毛脂烷型（人參、酸棗仁）A/B，B/C，C/D反式，C-10、13有-CH3C-14有-CH3 C-17有鏈C-20為R構型達瑪烷型（海綿、靈芝）20（S）-原人參二醇溶血20（S）-原人參三醇對抗溶血人參總皂苷不溶血C-8，10有 -CH3 C-13有-H C-17有鏈C-20為R或S構型區別是：羊毛甾烷型13-位上有-CH3；達瑪烷型13-位上為-H、8位上為-CH3甘遂烷型A/B，B/C，C/D反式C-13有 CH3 C-14有 CH3C-17 鏈C-20為S構型與羊毛脂烷相反環阿噸烷型（黃芪）與羊毛脂烷相似，只是19位甲基與9位脫H成三元環。五環三萜齊墩果烷型（-香樹脂烷型）A/B，B/C，C/D反式，D/E順式C- 8、10、17有 -CH3 C-14有-CH3齊墩果酸、甘草酸、柴胡、甘草酸（甘草甜素）、甘草次酸（18-H促腎上腺皮質激素）烏蘇烷型（烏蘇酸（熊果酸）與齊墩果烷型不同點是E環上兩個甲基位置不同，即C-20位上的一個甲基轉移到19-位上。2.掌握三萜類化合物的溶解性、顯色反應、化學反應（氧化、還原反應）及皂苷的特性.游離成苷性狀有晶形多為無定形粉末，有辛辣味，具吸濕性溶解性溶于親脂性溶劑，不溶于水水溶性增加。含水丁醇、戊醇對皂苷溶解度較好，是提取時常用的溶劑顏色反應醋酐-濃硫酸（LB反應）：黃-紅-紫-蘭-褪色五氯化銻反應：蘭色、灰蘭色氯仿-濃硫酸反應：氯仿層：紅、蘭；濃硫酸層：綠色熒光三氯乙酸反應(Rosen-Heimer)：紅色-紫色冰乙酸-乙酰氯反應：淡紅、紫紅表面活性：皂苷能降低水溶液表面張力。振搖產生持久泡沫，加熱不消失皂苷的表面活性取決于其分子中的親水部分與親脂部分的比例有關，這兩部分若達到平衡 ，就能表現出表面活性，否則分子內部失去平衡，就不能表現出表面活性，所以，有不少皂苷沒有或微有產生泡沫的性質。溶血性（原因：多數皂苷能與膽固醇結合生成不溶性的分子復合物。）紅細胞壁上的膽固醇+皂苷不溶于水的復合物沉淀破壞血紅細胞的正常滲透（細胞內滲透壓增加）發生崩解（溶血現象）（原人參三醇及齊墩果酸有溶血作用，但原人參二醇抗溶血，人參總皂苷沒有溶血現象，）溶血指數：一定條件下能使血液中紅細胞完全溶解的最低濃度。皂苷類藥物不能用于靜脈注射，肌肉注射也容易引起組織壞死，故一般也不用作注射劑。口服則無溶血作用.沉淀反應皂苷水溶液可以和一些金屬鹽類如Pb+ ,Cu+,Ba+等作用產生沉淀，常用鉛鹽，中性和堿性醋酸鉛。這一性質，可用于皂苷的初步分離。 酸性皂苷（三萜皂苷）+中性醋酸鉛沉淀 中性皂苷（甾體皂苷）+堿性醋酸鉛沉淀4.掌握三萜及其皂苷的提取分離及鑒定方法。三萜化合物的提取與分離1、甲乙醇直接提取。2、系統溶劑分離：乙醇提取后，依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯提取。3、制成衍生物：甲基化或乙酰化，制成相應的衍生物，（降低極性）再進行分離4、水解后，氯仿提。水解時應注意： （1）劇烈條件酸水解，皂苷元往往發生變化。 （2）緩和條件水解，往往得到次級苷。三萜皂苷的提取