高二生物 SW-16-XX01-005專題二 課題1 微生物的實驗室培養導學案（二）編寫人：張勇 審核人：肖鴻 編寫時間： 2016-02-26班級： 組別： 姓名： 等級：_【學習目標】掌握無菌技術的操作過程及分析與評價；【學法指導】1、認真閱讀學習目標，牢牢把握學習要求。導學案完成后一定要再回頭看學習目標，檢測自已是否能達成學習目標。導學案的落實在課堂,而不是在課后,在預習課和展示課中都要進行知識的落實。2、預習時注意分析圖提拱的信息，一定要結合課本中的圖來記,做到心中有圖。3、將預習中遇到的疑難點問題標識出來以備課堂小組計論、突破。【知識探究】：實驗操作 - 大腸桿菌的純化培養：本實驗所用的培養基是 ，本實驗可分成 和 兩個階段進行。一、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基 1制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的操作步驟是 、 、 、 、 。思考5在制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的稱量操作中，動作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？思考6牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供什么等營養物質？2 倒平板：待培養基冷卻至 左右時在酒精燈火焰附近操作進行。其過程是：在火焰旁右手拿 ，左手 ；使錐形瓶的瓶口 ；左手將培養皿 ，右手 ，立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后，將平板 。思考7錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是什么？思考8倒平板的目的是什么？思考9若皿蓋和皿底之間粘有培養基，則該平板能否培養微生物？為什么？思考10配制斜面培養基作用是什么？試管為什么要加塞棉塞？ 二、純化大腸桿菌 微生物接種：最常用的是 法和 法。另外還有穿刺接種和斜面接種等。1平板劃線法是 的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。其操作步驟是：將 在酒精燈火焰上灼燒直至 。在酒精燈火焰旁冷卻接種環，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口通過火焰達到 的目的。將冷卻的接種環伸入到 。將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。將皿蓋打開一條縫隙，把接種環 ，蓋上皿蓋，不要劃破培養基。灼燒接種環，冷卻后從 劃線。重復上述過程，完成三、四、五區域內劃線。注意不要將 相連。將平板 培養。思考11取菌種前灼燒接種環的目的是什么？ 為什么除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環？ 取菌種和劃線前都要求接種環冷卻后進行，其目的是？最后灼燒接種環的目的是？ 。在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是？ 。2稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將_進行培養。當稀釋倍數足夠高時，即可獲得單個細菌形成的標準菌落。3.系列稀釋操作：取盛有 mL水的無菌試管6支 ，編號101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取 mL菌液注入編號為101試管中，并吹打3次使之混勻。從101倍稀釋液中吸取 mL菌液注入到編號為102 倍稀釋液試管內吹打均勻，獲得102倍液。依此類推。思考12系列稀釋操作的注意事項是什么？思考13涂布平板操作的步驟是什么？結果分析與評價1培養未接種培養基的作用是什么？，若有菌落形成，說明什么？2在瓊脂固體培養基上，大腸桿菌菌落顏色？形態？3培養12h和24h后的菌落大小？