農林學類論文-山羊胚胎移植技術在農村牧區的推廣論文關鍵詞:敏蓋絨山羊、同期發情、超數排卵、胚胎移植論文摘要:從農村牧區養殖業的生產實際出發,系統論述了敏蓋內蒙古白絨山羊在生產性胚胎移植中的技術程序。主要包括:提前的準備工作：選擇適宜的供、受體羊，并加強飼養管理；胚胎移植條件的準備：在適宜的季節,用寧波激素廠促卵泡素（寧波三生激素廠）,以減量法進行供體超排；供、受體比例為1:812；用陰道栓配合促性腺激素,或用氯前列烯醇()進行受體同期發情處理；從供體輸卵管手術回收的胚胎,移植于受體羊輸卵管；完整的記錄體系。胚胎移植是現代生物工程高新技術，能充分發揮優良母畜的繁殖潛力，迅速擴大優良畜群和純種規模，加速雜交改良速度，縮短改良周期和育種進程，增加雙胎率，防止不育，盡快培育出我國優良絨山羊新品種。是一項投資少、見效快、利潤豐，具有事半功倍的良種擴繁和現代育種技術。1內蒙古鄂爾多斯伊金霍洛旗蘇布爾嘠鎮先后引入遼寧絨山羊品種與當地白絨山羊育種形成了敏蓋內蒙古白絨山羊品種進行養殖，收益較大，一些農牧民積極購買此絨山羊搞起了養殖,而且其他地區的人也常在這里購買此羊（如通遼的三高肉羊培育責任有限公司等）回去將把這些羊作為供體羊進行胚胎移植，使得此品種在市場上處于供不應求的狀態，為滿足需求和幫助農牧民脫貧致富，政府投大量資金進行胚胎移植來提高繁殖率，同時也加快了山羊胚胎移植技術在農村牧區的迅速發展與推廣。1關于開展農村牧區零散養殖胚胎移植的建議在廣大農村牧區每戶養殖數很少，而開展胚胎移植工作又需要進行集中處理，所以根據這一特點，提出以下建議，供參考：1.1分戶飼養與集體飼養相結合要在同期發情處理的第15天將所要接受移植的個體全部結合到一塊進行集中飼養，集中飼養時間為8-10天。1.2胚胎移植受體羊只的統計在胚胎移植前3個月進行村內移植受體羊統計，具體數量根據現有供體羊的數量進行確定，供受體參考比例為1：10。1.3胚胎移植處理時間確定鄂爾多斯地區一般在每年8月下旬至11月上旬進行同期發情處理較為合適。1.4受體羊的選擇及飼養管理1.4.1受體選擇：受體羊健康狀況良好,膘情適中，選擇繁殖機能正常，無傳染性疾病、無生殖器官疾病，年齡在26歲之間的經產的羔羊斷奶一月以上的母羊。2而且在移植前2個月進行定期驅蟲，以利于個體抓膘，提高同期發情及受胎率。1.4.2公母分群所要進行移植的羊只一定要進行公、母羊分群飼養，以防受體羊只提前懷孕而流產造成不必要的經濟損失。1.4.3飼養管理（短期優飼）要求被處理個體在移植前加強飼養管理，使個體達到中等膘情，但也不能過肥或過瘦。從同期發情放栓之日起要適當增加豆類飼料和蘿卜等多汁飼料的供應，進行短期優飼能提高同期發情及受胎率。1.5供體羊的選擇及飼養管理1.5.1供體選擇供體羊(敏蓋內蒙古白絨山羊)為經產2-5胎的母羊，身體健康狀況良好,生殖器官正常,正常繁殖史,繁殖力較高,遺傳性穩定，生產性能優良，羔羊斷奶1個月以上，未孕。21.5.2供體的飼養管理對供體羊進行常規傳染病和寄生蟲病的防治。飼養管理遵循一般繁殖羊群的原則。保持羊群體況適度,根據羊群營養狀況適時調整日糧標準,即增加蛋白質、能量飼料補充料,并注意礦物質和維生素的供應。81.5.3供體羊準備期的日糧配制A、優青草2公斤B、優質紫花苜蓿干草粉0.5-1公斤或鮮紫花苜蓿2-2.5公斤C、胡蘿卜0.4公斤D、干玉米秸、胡蘿卜秧等混合草粉0.5公斤E、精料0.5公斤，（精料配方：玉米面59斤，麩皮15斤，豆粕22斤，母羊專用預混料1斤，石粉或磷酸氫鈣1斤，食鹽1斤，微量元素添加劑1斤，合計100斤）52準備工作2.1物品準備32.1.1器材高壓滅菌鍋、20ml注射器、10ml注射器、5ml注射器、1ml注射器、胚胎移植手術架、手術刀片、醫用縫合線、體視顯微鏡、沖胚管、集卵皿、培養皿、消毒衛生紙、醫用噴壺、黑色記號筆、宮頸擴張器、移胚器、檢胚皿、剪毛剪、外科剪、手術刀、止血鉗、創巾鉗、持針鉗、手術鑷、縫合針、創巾、止血紗布、脫脂棉、盆等。2.1.2藥品沖胚液、胚胎培養液、冰袋、生理鹽水、新潔爾滅洗滌液、碘酊、酒精、青霉素、黃胺粉、FSH、孕馬血清、CIDR、陰道海綿栓、氯前列烯醇(PG)、黃體酮、麻醉劑（2靜松靈）、蘇醒靈等。2.2胚胎移植操室準備50m2的以上房間,分隔為2個房間，胚胎移植手術室和胚胎操作室。并設置工作臺及藥械臺等。室溫保持在22-25,并用新潔爾滅進行室內消毒。43.供、受體羊的同期發情及供體的超排具體方案如下：日期供體山羊受體山羊0天早8時，放置海綿栓5天早8時，放置陰道海綿栓9天早8時，取出海綿栓、放入一新的海綿栓15天晚6時，肌注PMSG200iu晚6時，肌注PMSG200iu16天晚6時，肌注FSH28-30iu17天早8時，肌注FSH28-30iu晚6時，肌注FSH23-25iu18天早8時，肌注FSH23-25iu晚6時，a、肌注FSH18-20iub、肌注PG0.5ml晚6時、肌注PG0.5ml19天早8時，a、撤出海綿栓（青霉素沖陰道）b、肌注FSH18-20iu晚6時，a、開始試情b、發情后立即靜注LH130-140IUc、發情后立即進行輸精早8時，撤出陰道海綿栓晚6時，開始試情20天進行手術輸精(發情12小時)早8時試情22天輸卵管沖胚（建議在下午開始較好）輸卵管移植4胚胎回收及胚胎檢查4.1供體羊術前準備胚胎回收手術前1天停止飼喂草料而只給少量飲水，否則由于腹壓過大，會造成手術的困難和供體生殖器官的損傷。飼喂干草的母羊，停飼的時間不能少于24小時，飼喂青草或在草地上放牧的羊，停飼時間可減少至18個小時。在術前一天術部進行剪毛和剃毛，常有許多剃斷的毛粘于皮膚，很難消除干凈，手術中易帶入創口造成污染，可采用干剪毛濕剃毛，剪毛完畢后用肥皂涂于要剃毛的部位，再用剃毛刀剃毛，然后用干毛刷將斷毛刷除干凈。第二天進行沖胚手術。4.2供體羊沖胚：供體羊的沖胚手術在授精后68-72小時進行。（采用輸卵管沖胚法可獲2-8細胞期的胚胎及少量的16細胞期胚胎。用于鮮胚移植。）6首先，對供體羊全身麻醉，術部消毒后,采取前低后高半仰姿勢將其保定在手術臺上。在腹底部偏右側距乳房基部3-4cm處做一長4-5cm的縱向切口，逐層切開,切開腹膜后,將中指和食指伸入腹腔在骨盆腔前沿膀胱之下觸摸子宮角,把子宮角牽引到切口之外,再把卵巢引出,檢查黃體發育情況,如果黃體發育正常，即沖胚。沖胚時，在輸卵管傘部前端插入一個帶有膠管的回收圓針，并用手卡住，準備收集沖出的胚胎；再向輸卵管的壺腹部處,插入裝有沖胚液的進液針頭,緩慢推入沖胚液，將胚胎沖入器皿中,沖胚液用量30-50ml。一側沖洗結束時,除去器械,檢查針孔,確認無出血現象,將輸卵管送回腹腔內,然后按同一操作辦法進行另一側沖胚。兩側沖洗完畢后,將子宮送回腹腔并向腹腔內注入2530生理鹽水,最后逐層進行縫合。4.3胚胎檢查：4.3.1檢卵將收集的沖卵液于37溫箱內靜置10-15分鐘。胚胎沉底后，移去上層液。取底部少量液體移至平皿內，靜置后，在視體顯微鏡下先在低倍(10-20倍)下檢查胚胎數量，然后在較大倍數(50-100倍)下觀察胚胎質量。4.3.2吸胚用移植器先吸一段1cm長的保存液，再吸一段0.5cm的空氣，然后吸取胚胎。含胚胎的液柱不超過1.5cm。吸胚是為了移取、清洗、處理胚胎，要求目標準確，速度快，帶液量少，無丟失。吸胚可用1毫升的注射器裝上特別的吸頭進行，也可使用自制的吸卵管。4.3.3胚胎質量鑒定正常發育的胚胎，其中細胞(卵裂球)外形整齊，大小一致，分布均勻，外膜完整。無卵裂現象(未受精)和異常卵(外膜破裂、卵裂球破裂等)都不能用于移植。處于二分體到四分體的胚胎4.3.4胚胎保存：用吸卵管吸取發育成熟的胚胎,放入PBS培養液中保存,在24-26下,保存時間不超過4-5小時。5受體羊胚胎移植(術前準備同供體)首先，對受體羊注射麻醉劑，實行全身麻醉，術部消毒,采取前低后高半仰姿勢將受體羊保定在手術臺上,在腹底部偏右側距乳房基部3-4cm處做一個長4-5cm的縱向切口,逐層切開,切開腹膜后,引出子宮、輸卵管以及卵巢，檢查黃體，無黃體或黃體過小的受體羊不能做胚胎移植；若有孕妊黃體,且生殖系統無炎癥,即作為受體羊。將受體羊黃體一側的輸卵管傘部拔開，用裝入胚胎的注射器從此處插入3-4，將胚胎注入輸卵管內。移植結束后,把子宮角送入腹腔,在創口灑上抗菌素，防止感染，按手術要求縫合好腹壁創口。6術后護理6.1供體術后護理及配種繁殖胚胎回收手術后注意傷口護理,注意觀察，有問題及時處理。對季節性繁殖的品種,為了不影響其自然繁殖及次年羔羊管理,當年只進行一次超排,并在下次發情時配種,自然繁殖。76.2受體術后護理與妊娠、分娩完成受體胚胎移植后,應加強術后護理、觀察，對妊娠受體適當增加日糧營養,以滿足妊娠需要,妊娠后期更應加強管理,防止流產,并做好接產和羔羊護理工作。97結果與存在的問題7.1總體移植情況共處理供體63只，其中懷孕3只，未發情1只，未沖胚1只，可用胚493枚，未受精卵141枚，共處理受體（同期發情處理）500只，受體移植數量431只。7.2存在的問題（1）由于參加胚胎移植的人員中有幾個是教師，所以移植只好安排于暑假期間，但是對于鄂爾多斯地區來說，最佳的移植時間一般是在8月下旬-11月上旬，略有些早，影響供體的超排效果。（2）超排效果不夠穩定，利用外源性促性腺激