天津科技大學海水養殖學論文魚類細菌病及最新研究進展學號 08051212姓名 馬凱同組人 陸軍 李鳳釗 胡青峰 湛文龍時間 2010/12/27細菌性魚病是指由各種致病菌引起的魚類疾病。該類疾病有發病急、傳播快、發病率和死亡率高等特點, 在微生物引起的魚類疾病中危害最大, 因此, 一直受到國內外魚病研究工作者的關注。近十年來, 隨著研究手段的提高和技術的發展, 該領域的研究日趨深人。本文主要介紹當今細菌性魚病的種類、診斷技術、病理及防治等方面的進展。一、細菌性魚病的主要種類第一次對魚類病原菌進行分離和明確描述的報道是在年由和正式發表的對癤瘡病的研究。其后隨著微生物學研究技術的發展和魚類集約化養殖的興起, 促進了世界各國對魚類細菌性疾病的研究。迄今已分離報道的魚類主要致病菌有近種見表, 其中也包括一些條件致病菌和一些已被魚病學研究者發現或認可, 但尚需國際細菌分類組織承認的種類。二海水養殖魚類常見細菌病2.1 弧菌病(Vibriosis)弧菌病是一種在海水魚類中經常發生的傳染病其中以鰻弧菌(Vibrio anguillarum)最為常見鰻香魚五條鰤大麻哈魚等都是敏感魚類Sano 1987 Fulvio 1987 對從意大利病魚中分離的9 個菌株和日本香魚的4 個菌株進行比較結果只對日本的3 個菌株的抗血清有弱的凝集反應Makoto 1993 報道從患病香魚中分離的149 個鰻弧菌菌株中l15個屬血清型A 34 個屬血清型C 血清型A 中菌株對藥物的抗性比例高于血清型C 的菌株他建議鰻弧菌的疫苗制成 A 型和C 型的雙價疫苗鰻弧菌的感染途徑主要為損傷的皮膚及口擬隆頭魚在皮膚涂抹病原菌后3 4 天顯癥黃聯琰1993 0lsson 等1996 對大菱鲆的感染機制的研究表明腸道是鰻弧菌的入口該作者98 年的進一步研究表明鰻弧菌被大菱鲆口服后在其腸內能持久存活在糞便中能繁殖但大菱鲆糞便中有拮抗性的Carnobacterium 與鰻弧菌共處時會抑制鰻弧菌生長O too1e 1996 用轉位子的導入作出的非運動性變異株研究了鰻弧菌的病原性結果腹腔注射非運動性變異株顯示和野生株同等毒力浸漬攻擊則毒力為l 500 認為其感染與鞭毛運動的走化性有關同是由鰻弧菌感染不同魚的病癥也有所不同真鯛患病時的癥狀主要是體表潰瘍先是身體斑塊褪色接著鰭基及軀干部出血至潰瘍眼球突出肝腎腫大(黃琪琰1993) 而牙鲆的鰻弧菌病的主要癥狀為病魚體色發黑消瘦鰭膜破損鰭出血糜爛該菌對牙鲆的侵害對象主要是牙鲆稚魚死亡率可達50 ,是對牙鲆幼體危害嚴重的疾病之一周麗等1997 黑瀨博行1989 從銀大麻哈魚中分離到該菌并且認為8 時對魚呈現病原性這與我國學者徐伯亥1988 報道的流行于香魚中的鰻弧菌的流行溫度10 基本一致香魚被感染后34 天死亡黃琪琰1993 我國肖慧等1999 報道鱸魚Lateolabrax japonicus 爛鰓爛尾病的病原菌也為鰻弧菌泰國 馬來西亞等東南亞國家養殖的尖吻鱸的弧菌病是由哈氏弧菌Vibrio harveys 引起的(Copland 1987)Kraxberger-beatty (1990)的實驗證實哈氏弧菌為鮭魚Centropomusundecimalis 的條件致病菌Saeed 1995 對引起科威特的居氏鯛Acanthopagrus cuvieri和巨石斑魚Epinephekus tauvina 死亡的弧菌病病原菌的鑒定認為由哈氏弧菌引起并且認為居氏鯛比巨石斑魚更易受感染我國吳后波1997 報道引起網箱養殖的高體鰤Serioladumerili 弧菌病的病原菌為哈氏弧菌王國良等對引起浙江沿海網箱養殖鱸魚Lateolabraxjaponicus 皮膚發生潰瘍的病原菌研究認為也是由哈氏弧菌引起的(王國良待發表)腸道白濁癥是引起牙鲆仔魚高死亡率的一種細菌性傳染病其病原菌為弧菌的一種Vibrio sp. 革蘭氏陰性短桿菌菌體稍彎兩端圓形一端單鞭毛或多鞭毛具運動性(增村和彥1989) 主要癥狀為病魚停止攝食腹部膨大腸道發白消化道內存有大量餌料隨病情發展魚體變黑消化道萎縮腹部下陷電鏡觀察表明病原菌附在腸膜微絨毛破壞微絨毛加之細菌分泌毒素共同影響魚的消化吸收導致死亡(宮崎昭雄1990)Ishmaru (1996) 用 DNA 相同性的方法對該病原菌的分類地位進行了研究認為是一新種命名為Vibrio ichthyoeteri2 2 滑走細菌病(Gliding Bacterial Disease)滑走細菌病是淡水養殖魚類的重要的細菌性疾病該病在海水養殖魚類中也有很多報道_對該病的最初報道主要集中在鮭魚如大鱗大麻哈魚Oncohynchus tschawytscha 稚魚細鱗大麻哈魚O. gorbuscha 和Solea solea 等(Dolores 1986) Hikida 等(1979)分離到該病病原菌為海岸屈撓桿菌(Flexibacter maritimus) Dolores 等(1986)從得病的牙鲆中第一次分離到海岸屈撓桿菌和屈撓桿菌一種(Flexibacter sp) 兩者均為彎曲而長的桿菌0.5 m2 3 m 能在固體物上滑行革蘭氏陰性患病牙鲆的主要癥狀是病魚無力游動在養殖池水表面作緩慢活動背鰭尾鰭等潰爛殘缺皮膚腐爛及壞死病癥惡化的個體頭部腹面發紅充血皮膚呈潰瘍內臟無異常(周麗等1997) 在春季溫度為14 18 時該病的發生率達高峰水溫高于20 時發生率遞減秋季很少發病一般被該菌感染的主要是稚魚Baxa 等(1986 1987)先后研究了海岸屈撓桿菌Flexibacter maritimus 各分離株的DNA 相關性感染實驗毒素活力和對抗菌素的敏感性等Alsina 和Blanch 1993 在西班牙養殖大菱鲆中也分離到該菌Bernardet 等1994 對從法國鱸魚中分離的9 個菌株進行了比較研究Chen(1995)首次報道在北美太平洋沿岸也發現了該菌養殖網箱內的白鱸(Atracto scionnobilis) 加洲鰣Engraukis mordax 沙瑙于Sardinops sagax 大鱗大麻哈魚(Oncorhyrchus tschawytscha)被感染我國目前尚未見對該菌報道2 3 巴斯德氏菌癥(Pasteurellosis)巴斯德氏菌癥 也叫類結節病是一種由殺魚巴斯德氏菌pasteurella picicida 引起的細菌性疾病該菌為革蘭氏陰性桿菌無芽孢無動力菌體大小因培養條件而異有時長桿形有時近球形具顯著的多形性該病在五條鰤中的流行時間為6 8 月水溫在2028 之間但在鯵魚(pseudocaranx dentex)中的暴發溫度為22 23 低于19 時死亡率明顯降低(Toshihiro 1992) 在牙鲆中的發病溫度范圍為20 27 (水野芳嗣1994) 在牙鲆中發病初期的主要癥狀為體色黑化無力游動背鰭腹鰭基部爛狀出血死亡魚體內臟腎脾有許多小白點(水野芳嗣1994) 楠田理一(1991)報道赤點石斑魚仔魚發生脾臟和腎臟形成小白點的疾病結果表明其沉降反應相與對照用的鰤魚病原菌一致認為由殺魚巴斯德氏菌引起Aoki 等1985 年發現許多菌株具抗藥性Fukuda 和Kususa 1985 Kusuda1988 對五條鰤進行了免疫接種試驗研究但仍停留在實驗室階段Magarinos(1996)等認為該菌的細胞附著性和入侵性主要在感染初期該菌在機體內獲得鐵的機能菌體外產物及莢膜成分是發揮病原性的主要因素該菌感染一定時間后由于其他細菌的生長常規培養檢測有一定的難度Dolores 1988 用熒光抗體技術檢測黑鯛仔魚的巴斯德氏菌不僅延長了有效檢測時間且靈敏度有大大提高Kawhara 等1989 用該技術研究巴斯德氏菌在五條鰤組織中人分布認為不管用何種方式感染細菌在3 小時侵入內臟在脾臟和腎中形成病灶導致敗血癥的發生該病在其他許多海水魚中也有報道如金鯛真鯛和Pictiblenniusyatabei 及海水養殖的香魚(Matsduoka 1990) Toranzo 等(1991)報道在西班牙養殖的真鯛中也暴發了該病并很快蔓延到其他魚類造成大量死亡尤其在稚魚階段我國天津海區養殖的黑鯛真鯛和鱸魚中都有巴斯德氏菌引起的魚病發生王玉佩等19922.4 愛德華氏綜合病Edwardsiellosis)愛德華氏綜合病 又稱腹水病在牙鲆中的主要癥狀為病魚腹部膨脹肛門擴張發紅常出現脫腸癥狀眼球白濁化突出有的可見肝臟出血和腎臟肥大一般死亡率不是很高病魚攝食不良體色黑化無力游動引起的原因為腸內細菌緩慢愛德華氏菌Edwardsiellatarda 感染所致該菌為短桿菌0.5-1 m 1-3 m 具運動性革蘭氏陰性其流行無明顯年齡特征仔魚到成魚均有可能感染(Austin 1993) 主要發生在養殖的牙鲆中Takaji等(1993)認為該菌不產生毒素但它對鰻魚的補體的調理作用有一定的抗性而且對其中性細胞也具有抵抗作用Mamnur 1994 對養殖牙鲆的愛德華氏菌的研究認為從牙鲆中分離到的菌株和其環境中分離到的菌株共有一種熱穩定的 O 抗原并且認為養殖環境中引起牙鲆疾病的只有一種血清型Suprapto(1995)認為屬于血清型A 的有毒愛德華氏菌株產生對日本鰻鱺和牙鲆致死的熱不穩定物質而且毒素在緩慢愛德華氏菌的毒力中起重要作用Suprapto(1996)對該菌的進一步研究表明有病原性的菌株的胞外產物和胞內因子都對日本鰻鱺和牙鲆有毒性但非病原性菌株兩者都沒有毒性胞外產物在培養72 小時后產生適溫是25 30 胞內因子在培養24 小時就產生馬久地隆幸1995 用德華氏菌對牙鲆進行了不同方式的感染實驗同年他還用福爾馬林滅活死菌對牙鲆進行不同方式免疫試驗結果卻出現慢性死亡據確認是由于菌體外產物和菌體成分中含有對牙鲆致死的的毒性物質我國廣東養殖的真鯛 笛鯛也有該病流行的報道張永嘉19932.5 鏈球菌癥( Streptococcal Infections)Kusuda 等1976 報道從鰤魚和真鯛病魚中分離到Streptococcus sp 為鏈球菌屬的一種革蘭氏陽性2 個或數個菌相連成鏈狀球菌每個0.7 m 1.4 m 無運動性性溶血主要癥狀為眼球突出及白濁化頭部和上下領發紅鰓蓋及鰓內側發紅或充血解剖能發現腹腔內有積水肝臟出血流行時間從夏季高溫開始當溫度低于15 時基本不再暴發是危害鰤魚養殖的最嚴重的疾病曾造成日本每年損失l0000t 鰤魚(Sano 1987)1981 年在日本牙鲆中也有發現危害較大死亡率在8 左右(Dolores 等1986) Keiji(1986)對分離自患病香魚的性溶血鏈球菌的研究認為其最適生長條件為25 30 0 3 NaClpH7 認為它對鯉魚和黑鯛不致病對五條鰤和真鯛有一定的致病性對香魚和大麻哈魚有很強的致病性厚田靜南(1990)報道了在養殖大麻哈魚中發生該病的流行癥狀為鰾壁白濁肥厚心臟形成假膜等酒井正博(1990)報道在銀鮭發生溶血性鏈球菌癥剛從淡水移入海水的馴化過程中就發生死亡一直延續一個月至水溫10 停止癥狀為眼球突出鰭發紅出血腹部膨滿出血紅霉素類藥物有較好治療作用杉田顯浩(1997)在青蘭子魚稚魚中也發現該病死亡率高達60 除上述癥狀外還發現魚體在水面反復狂跳2.6 諾卡氏菌癥( Nocarydiosis)諾卡氏菌癥的主要癥狀為病魚體表有點狀出血斑 小而隆起的濃腫有時口唇部糜爛本病的典型癥狀是脾臟及腎臟上有白色結節的病變另一種流行癥狀主要發生鰓上也叫鰓型諾卡氏菌癥可在鰓上見到直徑為5mm 的不規則結節也有兩種癥狀混合出現的Kariya(1968)報道了該病是由帕卡奇諾卡氏菌Nocardia kampachi 引起的主要發生在鰤魚amberjack 和鰺魚Caranx delicatissimus 中該病主要在秋季流行但七月到二月均可暴發上述癥狀均有發現1984 年發生在日本養殖牙鲆的當齡魚中病性發展緩慢但是長期地連續地死亡累積死亡率達15 是危害嚴重的疾病之一病原菌為帕卡奇諾卡氏菌Nocardia kampachi 革蘭氏陽性菌體分枝絲狀無運動性(Dolores 1986) 諾卡氏菌也是引起淡水魚諾卡氏菌癥的病原但菌種為星狀諾卡氏菌Nocardia asteroides 黃琪琰1993 Chen(1992)將從臺灣大口黑魲病魚中分離的星狀諾卡氏菌Nocardia asteroides注射給健康的大口黑鱸結果和自然發病魚一樣形成典型的肉芽腫并從死魚中再次分離到細菌證明了該菌為大口黑鱸的病原菌_2.7 黃膽癥( Joundice)最初在 80 年代發現于日本在養殖的五條鰤Seriola quiqueradiata 中有黃膽癥的流行但是一直沒能搞清其病因黃膽癥的主要癥狀為魚體眼和口周圍腹部等體色發黃有的個體肌肉發黃患病魚魚體消瘦引起魚大量死亡發病以II 齡鰤魚為主網箱中死亡率達10 以上Sorimachl 等(1993)用L 15 培養基加10%的小牛胚胎血清或營養肉湯從發病的高體鰤中分到一種細菌并證明了該菌為病原菌認定其是一新種電鏡顯示為非螺旋形桿狀菌無鞭毛Takaji(1994)研究了該菌的培養特性但細菌密度仍沒達到107 個毫升因而無法研究其生化特性用分析16S rRNA 的方法可能有助于確立其系統發育地位Kita-Kukamoto 1993 我國尚未有該病的報道2.8 細菌性腎病(BKD)細菌性腎病 BKD 是一種由Renibacterium salmonm inarum 菌引起的在鮭鱒魚中經常發生的傳染性疾病是海水網箱養殖鮭魚的最大威脅Sanders 1980 該菌為革蘭氏陽性發病特點是在腎臟中出現灰白色的濃腫但有1 2 個月的潛伏期而且細菌培養也需要1 2 星期菌斑才出現早期檢測較困難所以危害更大對該病的研究主要集中在早期診斷上常用的方法主要有免疫擴散法熒光抗體法凝集反應酶聯免疫吸附法Masahiro1987 對該病目前尚未有商品菌苗出售也沒有其他解決方法對其傳染途徑的研究表明它不僅存在水平傳播還存在垂直傳播Pascho 等1991 因而目前對該病的另一個研究重點是對親魚的隔離交配Elliot 1995 對將低感染組的親魚和高感染組的親魚分開養殖交配在將稚魚孵化轉入海水生活98 天后死亡率分別為12 和44%,對死魚的病原菌的檢測結果是前一組未檢測到該菌而后者85 檢測到了該病原菌這可能是今后對該病的較有效的防治方法2.9 殺鮭氣單胞菌癥( Aeromonas salmonicida infections)殺鮭氣單胞菌(Aeromonas salmonicida)所致的魚癤節病是一種分布廣泛的細菌性疾病主要危害鮭鱒魚類該菌是一種條件致病菌可經鰓皮膚及口傳染細菌濃度107 個毫升浸浴30 分種即可發病(黃琪琰1993) 目前該菌引起其他海水魚類的疾病也有報道日本養殖的歐尾六線魚許氏平鲉和牙鲆均有被該菌感染的報道雖然死亡率不高但卻長時間持續發病(飯田貴之1997) Wiklund 1995 報道引起波羅的海和北海水域牙鲆皮膚潰瘍的病原菌是非定形殺鮭氣單胞菌泉川晃一(1997)報道非定形殺鮭氣單胞菌能引起養殖許氏平鲉以皮膚潰瘍為特點的大量死亡福田穰(1998)的研究認為牙鲆的殺鮭氣單胞菌癥主要發生在20 克以下的牙鲆中癥狀為無眼側鰓蓋發紅其他無明顯的外觀和內部癥狀20以前牙鲆帶菌性低該菌也感染真鯛黃蓋鰈等菌分類組織承認的種類。三、診斷技術與流行病學魚類細菌病準確的診斷必須建立在對致病菌準確鑒定的基礎上, 而傳統的細菌鑒定即生理生化性狀分析費時長、工作量大, 給魚病的及時治療和流行病學調查帶來極大的困難。為改進繁雜的傳統鑒定方法, 魚病研究者花費大量的心血尋找快速準確的方法, 如表型快速鑒定技術、血清學快速鑒定技術等。近十年來, 魚類致病菌的免疫快速診斷已取得了豐碩成果。主要采用的技術有細菌凝集試驗、免疫熒光技術、免疫擴散試驗、抗體致敏膠粒凝集試驗、協同凝集試驗、免疫印跡技術、酶聯免疫吸附技術等, 應用這些技術所進行的快速鑒定幾乎涵蓋了所有的魚類致病菌種類。這些技術的應用使得檢驗靈敏度不斷提高。特別是近幾年, 單克隆抗體技術、核酸探針、檢測等新的分子生物學技術在魚類致病菌鑒定中得到采用, 從而使檢測的速度和專一性進一步提高。隨著致病菌診斷技術的不斷發展, 大量深人的魚類細菌病流行病學調查得以開展。對眾多致病菌在水體、底泥、動物攜帶者中的生存能力及環境對其影響進行了廣泛調查對致病菌的可能傳播途徑和感染模式進行了探索尤其是對某些菌經口感染和體表接觸感染等方式做了細致的研究工作并對各致病菌的宿主范圍及各種魚種群間、種群內抗菌攻擊能力進行了大量研究。這些都為細菌性魚病的防治研究提供了重要的依據。四、細菌性魚病病理學研究在細菌性魚病研究的最初階段, 人們就已開始描述細菌性魚病發生的過程和癥狀特征, 這便是細菌性病理學研究的開始。隨著組織學和醫學微生物學理論和技術的進步, 魚類細菌病的病理學研究亦逐步深入。初期人們通過肉眼觀察魚的體表、內臟癥狀, 進行描述年以后運用組織切片進行顯微觀察, 成了研究魚類細菌病病理學的主要手段進人年代,又運用電子顯微鏡對組織病理進行超微結構觀察。為便于更準確地觀察致病菌在感染魚體組織中的侵襲途徑, 等應用熒光抗體染色技術與組織切片技術相結合, 對組織中特定致病菌進行了定位觀察。而和二則應用免疫金標記技術, 對鰓魚愛德華氏菌的感染途徑進行了超微結構觀察。初期的病理學研究是解釋細菌致死的直接原因及依據細菌病的特定病理特征建立病理學診斷技術。隨著研深人, 人們發現通過對致病菌引起的各種病理生理變化觀察可以較為容易地找出魚體死亡的直接原因, 但由于許多細菌引起的病理生理變化具有比較相似的特征, 因此仍需依賴病原的鑒定才能完善病理學準確的診斷技術。今天的魚類病理學研究與致病菌的侵襲力及侵襲途徑研究相結合, 朝著研究致病機理而努力。五、魚類致病菌致病性的研究長期以來, 人們對魚類致病菌的致病性研究一直停留在用分離菌進行各種感染方式導致發病來判斷其致病力的階段, 而對疾病的發生、發展等感染過程缺乏了解。近幾年來隨著醫學微生物學技術的不斷發展, 對魚類致病菌致病性的研究已成為魚類細菌學研究的重點和最為活躍的研究領域。主要包括對常見的主要魚類致病菌在魚體內外的生存能力、侵襲能力以及抗宿主的防御能力等方面進行研究。大量的研究結果表明許多魚類致病菌具有較強的適應環境的生存能力、通過某種吸附方式導致最初侵襲的能力、適應體內環境的高效離子轉運蛋白系統、抵抗魚體血清溶血或吞噬細胞吞噬作用的能力以及分泌各種毒性物質能力等等。借助于醫學微生物學和分子生物學技術, 當今對魚類致病菌的致病性研究已進人超微結構觀察和分子生物學階段。如對致病菌的毒性因子進行了蛋白質結構及調控遺傳結構的分析, 尋找其毒性結構基因、遺傳表達的位點及其方式。或通過電鏡觀察致病菌的侵襲途徑, 了解致病菌的吸附方式及吸附侵襲受體。六、魚類細菌病的控制目前對魚類細菌病進行控制的主要手段是用抗菌藥物。早在年 報道了用磺胺類藥物治療虹蹲魚癤瘡病, 這是抗菌藥物用于水產業的最早報道。此后, 人們陸續將許多醫用、獸用抗生素應用于水產病害治療。年氯霉素被首先引人水產業, 此后很快擴展到土霉素、卡那霉素、紅霉素、利福平等, 并對其療效范圍、施藥方式和劑量進行了大量研究報道進人年代后, 對革蘭氏陰性菌具廣譜殺菌作用的喳諾酮類藥物, 在各國獲準在水產上使用, 從而開創了唆諾酮類藥物的新時代。年代初期不少研究者又開始了新一代喳諾酮類藥物研發, 并研制出了以氟呱酸、環丙沙星等為代表的第三代喳諾酮類藥物, 它們具有更強、更快的殺菌效果, 到目前為止尚未發現由質粒介導的耐藥性的致病菌, 并且新型藥物改變了藥物透人細胞的能力, 可相應提高胞內藥物濃度, 更易殺滅體內致病菌。新一代的喳諾酮類藥物是目前最具開發前景和較為理想的藥物。在對魚類細菌病治療的過程中, 人們發現控制魚類細菌病預防比治療更為重要。盡管水產防病養殖同諸多因素有關, 但借鑒預防醫學人們便想到了使用細菌疫苗對養殖魚類進行免疫保護。年首次進行了魚類細菌疫苗的嘗試, 今天漁用細菌疫苗已成為最具發展潛力、充滿勃勃生機的新興工業。當今此領域的研究主要是發展價廉、長效、易于接種的疫苗七海水養殖魚類細菌性疾病的防治方法7.1 免疫接種促進某一養殖魚類健康生長的重要方法是增強宿主對疾病的抵抗力 魚類雖然是低等的脊椎動物但已具備了有效的免疫系統包括特異性免疫和非特異性免疫免疫接種是提高魚類特異性免疫的最佳方法而使用免疫刺激劑正成為提高魚非特異性免疫力的有效方法1942 年Duff 用滅活的殺鮭氣單胞菌用投喂法免疫鱒魚使蹲魚獲得一定免疫力的實驗揭開了魚類免疫接種的序幕免疫接種在目前防治魚類細菌性疾病中發揮了較好的作用1975年美國疫苗有限公司獲準生產商品性魚用疫苗第一個被生產的疫苗是腸道紅嘴病菌苗ERM 日本也于1988 年8 月批準生產香魚弧菌疫苗目前國外在生產上應用的疫苗已達三十幾種主要的菌苗有ERM 菌苗香魚鰻魚及虹蹲的弧菌苗愛德華氏菌苗等由于細菌比病毒容易培養目前研究細菌疫苗的重點仍在菌苗的制備方法和給予途徑對免疫效果的影響上Nordmo(1997)研究了不同攻毒方法對大西洋鮭癤病疫苗的免疫效果Press(1996)研究疫苗的不同注射方法對大西洋癤病的疫苗的成分的保留效果Magarinod(1994)研究了用不同方法制備的殺魚巴斯德菌苗對金鯛的防病作用佐右浩(1992)研究了疫苗的不同給予方式對鰤魚溶血性鏈球菌癥的有效性我國對魚用菌苗的研究主要集中在淡水魚中尤其在對草魚的赤皮病爛鰓病和腸炎的防治中發揮了很好的作用已在全國推廣關于海水魚用菌苗的報道不多秦啟偉(1993)報道了用創傷弧菌菌苗免疫防治青石斑魚細菌病在實驗室內取得令人滿意的結果7.2 免疫刺激劑O1ivier 等1985 年的關于單獨用弗氏完全佐劑注射coho 鮭魚能提高其抗癤病的免疫力的研究促使人們研究用免疫刺激劑來提高魚類非特異性免疫緊隨Olivier 以后Kitao 和Yoshida 等1986 報道了腹腔注射FK-565 一種乳酰四肢能提高虹鱒對殺鮭氣單胞菌的抵抗力和巨噬細胞活力Salati 等1987 用注射脂多糖的方法對真鯛Pagrus major 的研究表明能提高血液吞噬細胞活力馬場威1993 將鯉魚在左旋咪唑溶液中浸漬24 小時后發現鯉魚的非特異性抗感染能力增加其效果至少可持續2 周還發現其前腎吞噬細胞的游走能力于3 日后顯示明顯的活性對死菌和左旋咪唑的吞噬能力分別于浸漬1 日和3 日后明顯增加Park 等1996 報道用腹腔注射一種蛋白質束縛多糖制劑PS-K 能提高尼羅羅非魚對愛德華氏菌的抵抗力采用劑量為0.1mg/g 體重時在注射后第3 天即可觀察到抵抗力增強一周時抵抗力最強并且可持續到21 天Matsuyama 等_1992 用-1 3 葡聚糖腹腔注射五條鰤再用腹腔注射鏈球菌感染魚體發現存活率有很大提高檢測其前腎細胞吞噬活力補體和溶菌酶活性均有提高免疫刺激劑對培養的巨噬細胞也有很明顯的作用如Solem 等(1995)用脂多糖處理培養的大西洋鮭的巨噬細胞發現能提高巨噬細胞的呼吸裂解活性刺激吞噬活力并且具有殺傷細菌的能力使用免疫刺激劑能保護魚類免受一些傳染性疾病的感染而降低死亡率但它并不是能使魚類免受所有的疾病的感染魚體接受免疫刺激劑后能抵抗一些細菌性疾病病原如鰻弧菌V. anguillarum 殺鮭弧菌V. salmonicida 殺鮭氣單胞菌A Salmonicida 鏈球菌Streptococuus, sp. 等由于免疫刺激劑主要通過增加吞噬細胞活力而提高魚類的非特異性免疫力因而它不能增加魚對R. salmoninarum 的抵抗力該菌能抵抗吞噬細胞而在其內生活Nelson 1989 盡管如此由于免疫刺激劑產生作用的時間短而引起魚類疾病的主要是非特異性的條件致病菌因而它在魚類防病中的作用正越來越受到人們的重視7.3 抗菌素雖然抗菌素在防治魚類細菌性疾病中存在諸如魚體存有藥物殘留及產生抗藥菌株等缺點但在目前它仍不失為防治細菌性疾病的有效方法自50 年代氯霉素被首先引入水產業此后幾年磺胺類藥物幾乎成為水產業的萬能藥進入70 年代后具有對革蘭氏陰性菌廣譜殺菌作用的哇諾酮類藥物如惡喹酸氟哌酸等獲準在水產上應用從而開創了喹諾酮類魚藥的新時代日本漁業部門對魚藥的使用有嚴格的規