基本概念 第一節 物理消毒滅菌法 第二節 化學消毒滅菌法,第四章 消毒與滅菌,消毒（disinfection）:殺死目標范圍內病原微生物的方法。用于消毒的化學藥物稱為消毒劑。以殺滅細菌的繁殖體為標志。 滅菌（sterilization）:殺滅目標范圍內所有微生物的方法。以殺滅細菌的芽胞為標志。 消毒與滅菌是兩個不同的要領。滅菌可包括消毒，而消毒卻不能代替滅菌。消毒多用于衛生防疫方面，滅菌則主要用于醫療護理。 防腐（antisepsis）:防止或抑制微生物生長繁殖的方法。 無菌（asepsis）:目標范圍內沒有活的微生物存在。 無菌操作：防止微生物進入機體或物體的操作技術。,消毒與滅菌的概念,一、熱力消毒滅菌法 附：干燥與低溫抑菌法 二、輻射消毒殺菌法 三、超聲波消毒殺菌法 四、濾過除菌法,第一節 物理消毒滅菌法,1、干燥：干燥可使細菌繁殖體脫水、鹽類濃縮，阻礙細菌代謝，最后導致細菌死亡。 高濃度糖或鹽處理食物，可使細菌脫水，抑制細菌生長繁殖-生理干燥 2、低溫： （1）大多數細菌對低溫耐受力較強，只有少數病原菌（如腦膜炎球菌、流感桿菌）耐受性低。 （2）低溫環境下，細菌代謝緩慢，可抑制其生長繁殖。但仍保持生命，一旦溫度等條件適宜，即可恢復繁殖。可保存在04,干燥、低溫抑菌法,（一）干熱滅菌法：指相對濕度在20以下的高熱。 （二）濕熱消毒滅菌法：滅菌效果好。原因為： 1、濕熱比干熱穿透力強，可較快提高物體內部溫度 2、濕熱中病原體易吸收水分，促進Pro的凝固變性 3、熱蒸汽接觸物品變為液態可放出大量的潛熱。,一、熱力消毒滅菌法,兩種方法的比較,干熱滅菌與濕熱滅菌的比較,（一）干熱滅菌法,1、焚燒法：用于被污染的廢棄物、尸體。 2、燒灼法：用于緊急情況時耐熱物品的消毒及接種環、試管口等。 3、干烤法：干烤箱（160170，12h），用于玻璃器皿、粉劑等。 4、紅外線：用于醫療器械，玻璃器皿等。,紅外線,紅外線輻射是一種0.771000微米波長的電磁波,有較好的熱效應,尤以110微米波長的熱效應最強。 紅外線由紅外線燈泡產生,不需要經空氣傳導，所以加熱速度快，但熱效應只能在照射到的表面產生，因此不能使一個物體的前后左右均勻加熱。 紅外線的殺菌作用與干熱相似，利用紅外線烤箱滅菌的所需溫度和時間亦同于干烤。 人受紅外線照射較長會感覺眼睛疲勞及頭疼；長期照射會造成眼內損傷。因此，工作人至少應戴能防紅外線傷害的防護鏡。,1、高壓蒸氣滅菌法：最常用、最有效的滅菌方法。 適用于耐高溫和耐潮濕的所有物品，如手術器械、敷料、一般培養基、生理鹽水、蒸餾水等。 2、煮沸法：用于食具、刀剪、玻璃注射器等消毒。 3、流動蒸氣消毒法（常壓蒸氣消毒法）： 多用于不耐高溫的、營養豐富的培養基。 4、巴氏消毒法：用于牛奶、酒類、飲料等,（二）濕熱消毒滅菌法,1、高壓蒸氣滅菌法,用高壓蒸汽鍋進行。 在103.4kPa 蒸氣壓下，溫度可達121.3，經1520min ，可殺滅全部微生物。 適用范圍：除了那些不耐高溫和潮濕的物品外所有的物品，如手術器械、敷料、一般培養基、生理鹽水、蒸餾水等。 注意事項：物品擺放勿過滿；鍋內冷空氣排盡后，再加壓；壓力降至“0”時，方能開蓋。,2、煮沸法,條件： 100 ，5min可殺死細菌繁殖體； 100 ，12h可殺死細菌芽孢； 如加入2%Na2CO3，可提高沸點到105 ，還可防止金屬生銹。 適用范圍：用于食具、刀剪、玻璃注射器等。,3、流動蒸氣消毒法,利用蒸籠或阿諾蒸鍋進行。 條件： （1）100 水蒸氣，1530min可殺死細菌繁殖體。 （2）用間歇滅菌法可使芽孢發育為繁殖體后被殺滅。 適用范圍：多用于不耐高溫的、營養豐富的培養基。,間歇滅菌法,將物品經流動蒸汽加熱后，置37溫箱過夜，使細菌芽孢發育為繁殖體后，次日再經流動蒸汽加熱，反復三次。,4、巴氏消毒法,由法國科學家巴斯德創立。 條件：加熱61.662.8，30min或71.7，1530s（瞬時消毒）。 特點：用較低溫度殺死液體中的病原菌或特定微生物，而又不破壞被消毒物品的營養成分和氣味。 適用范圍：用于牛奶、酒類、飲料等。,1、日光與紫外線:波長265-266nm的紫外線殺菌力最強。 穿透力弱，常用于空氣、物品表面的消毒 對眼睛角膜和皮膚均有損傷作用。應遮蓋患者的這些部位 2、電離輻射：高速電子、X射線、射線等可產生游離基，破壞DNA。 不使物品升溫， 稱“冷滅菌”。且穿透力強， 用于不耐熱物品的消毒，如藥品、塑料（一次性注射器、輸液器等） 不能用于人體的消毒。 3、微波：波長10-110-9m或更短的電磁波。 常用于藥品和食品滅菌。 微波長期照射可引起眼睛的晶狀混濁、睪丸損傷和神經功能紊亂等全身性反應,二、輻射殺菌法,不被人耳感受的20千Hz/秒的聲波，稱為超聲波。 可使細菌細胞裂解而死亡，但往往有殘存的活細胞。對G-菌效果最好，葡萄球菌最差。 主要用于粉碎細胞，提取其中的化學成分。,三、超聲波殺菌法,將液體或空氣通過含有微細小孔的濾器，只允許小于孔徑的物體如液體和空氣通過，大于孔徑的的物體不能通過。 主要用于一些不耐熱的血清、毒素、抗生素、藥液、空氣等除菌。一般不能除去病毒、支原體和細菌的L型。,四、 濾過除菌法,濾器的種類,濾膜濾器：由硝基纖維素制成薄膜，裝于濾器上，其孔徑大小不一，常用于除菌的為0.22um。硝基纖維素的優點是本身不帶電荷，故當液體濾過后，其中有效成分喪失較少。 蔡氏濾器（Seitz）：是用金屬制成，中間夾石棉濾板，有石棉K、EK、EK-S三種，常用EK號除菌。 玻璃濾器：是用玻璃細砂加熱壓成小碟，嵌于玻璃漏斗中一般為G1、G2、G3、G4、G5、G6六種，G5、G6可阻止細菌通過。 實驗室等處應用的超凈工作臺，就是利用過濾除菌的原理去除進入工作臺空氣中的細菌。,第二節 化學消毒滅菌法,一、消毒劑的應用范圍（重點） 二、消毒劑的作用機制（了解） 三、消毒劑的種類和選用：酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑、烷化劑。 四、影響消毒滅菌效果的因素（重點）,一、消毒劑的應用范圍,由于消毒劑對人體細胞也有毒性作用，故不能內服。 主要用于人體體表、病人排泄物與分泌物及周圍環境和醫療器械的消毒。,1、使菌體蛋白質變性凝固：如重金屬鹽類、醇類、醛類、酸、堿等。 2、干擾或破壞細菌的酶系統和代謝：如某些氧化劑（H2O2、高錳酸鉀、過氧乙酸）、重金屬鹽類（氯化汞、硫柳汞、硝酸銀等）可與細菌酶蛋白中的巰基（SH）結合，使酶失活，致細菌代謝障礙。 3、改變細菌細胞壁或細胞膜的通透性：使胞質內代謝產物逸出，導致細菌死亡。如酚類、表面活性劑等。,二、消毒劑的作用機制,三、消毒劑的種類和選用,1、消毒劑的性質、濃度與作用時間 2、微生物的種類與數量 3、溫度及酸堿度 4、有機物的影響,四、影響消毒滅菌效果的因素,1、消毒劑的性質、濃度與作用時間,（1）消毒劑的性質不同，消毒效果不同。,各種消毒劑的理化性質不同，對微生物的作用大小也差異。例如表面活性劑對革蘭氏陽性菌的滅菌效果比對革蘭氏陰性菌好，龍膽紫對葡萄球菌的效果特別強。,但乙醇只有7080%有消毒作用，95%的主要用于固定組織標本 有些消毒劑高濃度會損傷人體，如高錳酸鉀超過0.5%會燒傷皮膚、黏膜。,（2）在一定范圍內，消毒劑濃度越大，作用時間越長，消毒效果越好。,2、微生物的種類與數量,不同微生物種類對消毒劑的敏感程度也不同。,微生物的數量越多，消毒劑的濃度應越高，消毒時間也應越長。,對細菌而言,G-菌G+菌,有莢膜菌無莢膜菌,細菌的芽胞細菌的繁殖體,老齡菌幼齡菌,對其他而言：病毒因種而異，真菌多不敏感,3、溫度及酸堿度,在消毒過程中，隨溫度升高而化學反應速度加快。如2%戊二醛對炭疽芽孢殺滅作用，20需15min，56僅需1min 。 PH值也可影響殺菌作用：可通過改變消毒劑的溶解度和分子結構起作用。也可直接對微生物的生長產生影響。如季胺鹽類化合物的戊二醛藥物在堿性環境中殺滅微生物效果較好；酚類和次氯酸鹽藥劑則在酸性條件下殺滅微生物的作用較強。,4、有機物的影響,環