P211走進(jìn)高考第一題一基因工程的定義和原理：定義—課本原理：基因工程實(shí)現(xiàn)異種生物的基因轉(zhuǎn)移，能夠使受體獲得新基因，體現(xiàn)出新性狀，是一種廣義的基因重組。在體外完畢。自然界的實(shí)例：噬菌體感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌的DNA上，屬基因重組，但是在生物體內(nèi)完畢。1不同生物的DNA分子含有相似構(gòu)造2基因是控制生物性狀的基本構(gòu)造單位和功效單位。3多個生物共用一套遺傳密碼4中心法則二基因工程或DNA重組技術(shù)的基本工具：1工具酶：（1）限制性核酸內(nèi)切酶——基因剪刀?或手術(shù)刀（2）DNA連接酶——基因縫合針或針線2運(yùn)載體——基因的運(yùn)輸工具1.1DNA重組技術(shù)的基本工具T磷酸二酯鍵1234512345A1限制性核酸內(nèi)切酶——基因剪刀?或手術(shù)刀工具（1）來源（2）特性：①識別DNA分子特定的核苷酸序列（識別的核苷酸序列有6、4、5、8個脫氧核苷酸）；②有特定的酶切位點(diǎn)。（3）作用部位：兩個相鄰核苷酸的磷酸二酯鍵（而不是脫氧核苷酸內(nèi)部的酯鍵）什么叫黏性末端？例EcoRⅠ限制酶識別的回文序列被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的脫氧核糖核苷酸，他們之間正好互補(bǔ)配對，這樣的切口叫黏性末端。限制酶特點(diǎn)？專一性識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。不識別RNA(4)成果：產(chǎn)生黏性末端或平末端（由于切割方式不同造成的）什么叫平末端？例SmaⅠ限制酶識別的回文序列2基因的針線——DNA連接酶DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一種重組的DNA分子就形成了。DNA連接酶對所連接的兩端的核苷酸序列無專一性磷酸二酯鍵工具(1)作用部位是:限制酶切割后有兩種不同的成果，一種產(chǎn)生黏性末端，一種產(chǎn)生平末端。那么恢復(fù)它們的連接時，所用DNA連接酶與否能夠不加選擇？E.coliDNA連接酶：只連接黏性末端T4DNA連接酶：連接黏性末端和平末端DNA連接酶對所連接的兩端的核苷酸序列無專一性(2)分兩類：DNA連接酶DNA聚合酶限制酶連接兩個DNA分子成一個雙鏈連接單個脫氧核苷酸成一條DNA單鏈一個DNA分子作用部位在兩DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個核苷酸加到已存在的核酸片段的3’末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵切斷兩個相鄰脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵作用結(jié)果將存在的DNA片段連接成重組DNA分子合成新的DNA分子形成黏性末端或平末端作用實(shí)質(zhì)：都是催化兩個相鄰脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵作用底物區(qū)別DNA連接酶、DNA聚合酶、限制酶3、基因進(jìn)入細(xì)胞的載體——分子運(yùn)輸車能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制有切割位點(diǎn)有標(biāo)記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別、篩選。1種類：2載體含有三個的條件：對受體細(xì)胞無害每種酶切位點(diǎn)最佳只有一種，避免環(huán)狀DNA分子打開，丟失某些片斷。3最慣用的是質(zhì)粒，且通過人工改造的4受體細(xì)胞：（1）種類（2）導(dǎo)入受體細(xì)胞方式