獸醫微生物學重要學問點匯總

緒言

1、微生物學的定義：探討微生物形態、生理、遺傳變異、生態分布以與其

與人類關系的科學，廣義的微生物學還包括免疫學，甚至還包括寄生蟲學,

特殊是原蟲學。

2、微生物的特點：①個體微小，需借助顯微鏡視察，其群體可見。②結構

簡潔，繁殖快，分布廣。③比較面積大（有利于物質交換，代謝繁殖）。

④易變異，適應性強。

3、微生物的種類：三型八大類（三菌四體一病毒）

真菌細胞型：細胞核有核膜、核仁，細胞器完整。Eg：真菌。

原核細胞型：僅有原始核，無核仁、核膜，細胞器很不完善。DNA和RNA

同時存在（擬核/核體）Eg：細菌、放線菌、

支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。

非細胞型微生物：最小的一類微生物，無典型細胞結構。只能在活細胞

內生長繁殖。核酸類型為DNA或RNA.Eg:病毒。

4、微生物學的發展過程

第一階段——形態學時期：1683年荷蘭呂文虎克首次視察到微生物。

1861年巴斯德否定“自然發生說“；證明發酵由微生物引起的。

其次階段——生理學與免疫學的奠基時期:

I巴斯德（微生物學、生理學與免疫學的主要奠基人）的歷史性貢獻：①

酒是某種微生物的發酵產物②解決了酒的敗壞問題③探討炭疽病、人的

狂犬病，確定這些疾病由相應的微生物引起、微生物可以至弱作作預防傳

染病用，而且對至弱的途徑做了示范性的試驗④獨創免疫學的預防接種

⑤獨創巴氏消毒法

n科赫（建立微生物探討的基本操作技術和對病院細菌的探討，有突出貢

獻）功績：①獨創培育基并用于純化微生物②獨創染色視察、顯微攝影③

科赫法則④證明炭疽病緣由一炭疽桿菌發覺結核病源菌一結核桿菌

【科赫法則：①病原微生物應在同一疾病中查見，但在健康動物體內不存

在②該病原菌能被分別培育得純種③該純培育物接種至易感動物，能產

生同樣的疾病④自人工感染的試驗動物體內能再次分別培育得到相同的

病原】

【免疫方法：注射、口服、點眼、滴鼻、氣霧】

第三階段——近代與現代微生物

理論上取得的成就極其應用價值：①進入真正意義上的基因工程時代②

進行化學治療腰肌和抗生素的探討③組織移植、免疫耐受的探討，抗原

抗體反應在診斷與防治疾病上的應用

技術上的重大創新與其應用價值①電子顯微鏡的應用②標記抗原或標

記抗體的應用③細胞培育、空斑技術、蛋白質與核酸的提純④核磁共振

儀的運用⑤分子克隆、PCR（聚合酶鏈式反應）、DNA測試、基因組學

與電子計算機等技術的應用

微生物學領域的三大進展：微生物遺傳學、免疫學與病毒學

第一章細菌的形態結構

【內容提要】

細菌個體微小，經染色后在光學顯微鏡下才能視察。最常用的是革蘭染色

法，可講細菌分為革蘭陰性和革蘭陽性兩大類。

就某種細菌而言，菌體有肯定的大小、形態與排列方式。

細菌的基本結構包括細胞壁、細胞膜、細胞質與擬核等。

革蘭陽性菌的細胞壁有較厚的肽聚糖與特有的磷壁酸。

革蘭陰性菌有外膜，外膜由外膜蛋白、脂多糖等構成，外膜下有一薄層肽

聚糖。

細菌的特殊結構有英膜、鞭毛、菌毛、芽抱等，各有肯定的結構與特殊的

生理功能，與細菌的致病性與免疫原性有關。

細菌是原核生物界中的一大類單細胞微生物，它們個體微小，形態結構簡

潔，廣義的細菌除一般細菌外，還包括立克次體、衣原體、支原體、螺旋

體號放線菌。

復習思索題

1、細菌的大小、基本形態

答:

大小：細菌個體微小，需染色后在光學顯微鏡下才能視察到。細菌大小的

度量單位通常是微米。

形態：形態比較簡潔，有球狀、桿狀和螺旋狀三種基本形態與某些其他形

態。

細菌的繁殖方式都是簡潔的裂殖，不同細菌裂殖后其菌體排列方式不同。

有特征性的、相對穩定的形態和排列方式的細菌有球菌、雙球菌、鏈球

菌、葡萄球菌（四聯、八疊）、桿菌、螺形菌

相宜條件下培育的細菌在對數生長期形態典型。不亮環境或老齡期，會出

現與正常形態不一樣的個體，稱為蒼老型或退化型。

但有些細菌即使在相宜的環境中生長，其形態也很不一樣，有多形性。

2、菌落的概念，菌落的實際意義

菌落：某個細菌在相宜的條件下、在適合生長的固體培育基表面或內部，

培育后分裂繁殖出巨大的菌體，形成一個肉眼可見的、有肯定形態的獨立

群體。【單個細菌與其后代組成的“大家族”】

菌苔：生長的菌落連成一片。【多個“大家族”】

菌落的實際意義：菌落肉眼可見，各種細菌的菌落在大小、色澤、質地、

表面形態、邊緣結構等方面均有個各自的特征。視察細菌的菌落特征，可

推想該細菌的種類，工作中通常通過固體培育基上分別培育的菌落，進行

細菌的分別、純化、傳代、計數和鑒定等。

3、細菌的基本結構和特殊結構（繪制細菌結構模式圖）

基本結構：細胞壁、細胞膜、細胞質、擬核等基本結構。

特殊結構：莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽抱等。

4、比較革蘭氏陽性和陰性細菌細胞壁的異同

陽性陰性

厚度厚15~80nm薄10T5nm

肽聚糖多40%~95%少10%~20%

脂類少1%~4%多11%~22%

磷壁酸7X

外膜X7

脂蛋白X7

脂多糖X7

5、脂多糖和外膜蛋白的組成與功能

組成功能

(革蘭陰性菌所特有，

①能夠吸附鈣離子、鎂

位于外膜的最表面)由

脂多糖(LPS)離子等陽離子②為噬菌

類脂A、核心多糖和側

體供應特異的吸附受體

鏈多糖三部分組成

(外膜中向前的多種蛋微孔蛋白：分子篩作用，

白質的統稱，按含量和與細胞粘附和特定物質

外膜蛋白(OMP)功能分為主要次耍兩攝取有關、受體作用

類)脂蛋白：使外膜層與肽

主要OMP:微孔蛋白、聚糖堅固的連接，可作

脂蛋白為噬菌體的受體，或參

加鐵與其他養分物質的

轉運

6、細菌的遺傳物質

擬核和質粒。

遺傳物質DNA無核膜包圍，分布于菌體中心形成擬核（核體）。擬核含細

菌的遺傳基因，其功能是限制細菌的遺傳和變異。

質粒在擬核DNA之外，游離的小型雙股DNA分子，含細菌生命非必需基

因，其功能是限制產生菌毛、毒素、耐藥性和細菌素等遺傳性狀。質粒能

獨立復制傳給子代。

7、細菌莢膜的概念與主要功能

概念：某些細菌在其生活過程中，在細胞壁的外周產生一層包圍整個菌體、

邊界清晰的粘液樣物質。

主要功能：①抗吞噬②抗有害物質損傷③養分物質的儲存場所（主要含多

糖類）與廢物排出之地。

8、細菌芽泡的特點與意義

（某些革蘭陽性菌在肯定的環境條件下，在菌體內形成一個圓形或卵圓形

的休眠體，稱為芽胞或內芽抱。未形成芽胞的菌體稱為繁殖體或養分體，

老齡芽胞將脫離原菌體獨立存在，稱為游離芽胞）

特點：①對高溫、干燥、輻射、化學藥物等有強大的反抗力。

②含水量低，壁厚而致密，通透性差不易著色，折光性強。

③芽抱內新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態，但能保持潛在萌發力。

④不是繁殖器官，一個芽胞萌發只產生一個養分狀態的細胞。

意義：①芽抱反抗力強，可在自然界中存在多年，是重要的傳染源，但芽

施并不干脆引起疾病，只有發芽成為繁殖體后，才能快速大量繁殖而致病。

②芽抱反抗力強，故應以殺滅芽胞座位牢靠的滅菌標準。

③可依據其形態位置鑒別細菌

第二章細菌的生長繁殖與生態

【內容提要】

細菌菌體的形成是一個困難的過程，涉與物質攝取、生物合成、聚合作用

（DNA復制，轉錄、翻譯）與組裝四個步驟.

菌體以二等分分裂法無性繁殖。

細菌群體的生長繁殖和培育時間呈特定規律，用生長曲線表示，并可分為

遲緩期、對數期、穩定期與衰亡期四個階段。

大多數細菌可在人工培育基上生長。依據細菌對氧氣和溫度的需求差異，

可將細菌分為需氧菌、厭氧菌、兼性菌以與嗜溫菌、嗜冷菌、嗜熱菌等。

生化試驗系依據細菌傳代特點設計，用于細菌鑒定。

自然界中的細菌多以群落存在，生物被膜是一種重要的表現形式，其反抗

力較游離細菌強，其生長受控于密度感應系統。后者通過信號分子作用，

在基因水平完成對細菌群落生長的調控。

微生物種群之間在自然界存在著困難的相互作用，正常菌群對維護動物健

康至關重要。

復習思索題

1、形成細菌個體的代謝過程有何特點？

①細菌生長和繁殖速度極快，超過動物細胞1。~1。0倍

②細菌利用各種化合物作為能源的實力遠遠強于動物細胞

③細菌對養分的需求比動物細胞更為多種多樣，因為他們有多種代謝旁路

④細菌可利用超長流水線式的生產方式生成大分子物質

⑤細菌能生產諸如肽聚糖、脂多糖、磷壁酸等特殊物質

2、物質攝取的方式有哪幾種？各有何特點?

單純擴被動擴散，細胞內外物質最簡潔的一種交換方式。細胞膜兩側

散的物質靠濃度差（濃度梯度）進行分子擴散，不須要能量。無

特異性和選擇性，速度較慢，細胞內為溶質濃度一旦達到平衡，

擴散便停止。

促進擴某些物質與某些位于細胞膜的特異性載體蛋白相結合，然后將

散其轉運至細胞內，這一過程具有特異性和選擇性，不須要能量。

主動運細菌汲取養分物質的一種主要方式，須要特異性載體蛋白，能

輸將特異性溶質逆濃度梯度泵入細胞，因此須要能量。

基因位物質在運輸的同時受到化學修飾，從而能慍緣不斷輸入細胞，

轉此種方式在缺氧環境中最常見，其過程涉與從可溶物向分子的

化學變更，須要特異性載體蛋白的參加，須要能量。

3、細菌菌體分裂為什么只需校短時間?

細菌以二等分分裂法進行無性繁殖。大多數細菌菌體在相宜條件下分裂須

要較短時間，是因為在上一輪的復制還未完成時，下一輪的細胞分裂已經

啟動。此外染色體DNA存在多個復制叉，可使自帶的染色體DNA同時起

先部分復制。

4、何謂細菌的生長曲線？如何確定？有何意義？不同時期有何特點？

細菌生長曲線：將細菌接種在液體培育基并置于相宜的溫度下，定時取樣

檢查活菌數，可發覺其生長過程具有規律性。以時間為橫坐標、以活菌數

為縱坐標，可得出一條生長曲線。曲線顯示了細菌生長繁殖的四個期。

細菌的生長曲線是在體外人工培育條件下視察到的，在動物體內因受諸多

因素的制約，未必能出現此種典型的曲線，但對細菌生長規律的探討與實

踐有重要的參考價值。

以下為各個時期與其特點:

遲緩期細菌來到新環境的一個適應過程。菌體增大，代謝活躍，合成

并積累所需酶系統。RNA含量明顯增加，但DNA含量無變更。

此時細菌數并不增加。

對數期細菌此時生長快速，以恒定的速度進行分裂繁殖，活菌數以幾

何級數增長，達到頂峰。生長曲線接近一條斜的直線。該期的

病原菌致病力最強，其形態、染色特性與生理活性較典型，對

抗菌藥物的作用較為敏感。

穩定期因養分的消耗、代謝產物的蓄積等，細菌繁殖速度下降，死亡

數逐步上升，新繁殖的活菌數與死亡數大致平衡。該期細菌的

形態與生理形態常有變更。毒素等代謝產物大多在此時產生。

衰亡期細菌起先大量死亡，死菌數超過活菌數。細菌菌體變形或自溶，

染色不典型，難以進行鑒定。

5、何謂培育基？種類有哪些？

培育基還是人工配制的基質，含有細菌生長繁殖必需的養分物質。培育基

制成后，通常都要進行滅菌處理。

種類：按養分組成，狀態，功能差異區分

基礎培育基含多數細菌生長繁殖所需的基本養分成分，常用簇新牛肉浸

W,加入適量的蛋白陳、NaCh磷酸鹽，調整pH至7.2~7.6

即成。

養分培育基在基礎培育基內，添加葡萄糖、血液或血清等，即成養分培

育基，最常用的是血瓊脂平板（在養分瓊脂中加入5%的簇

新血液配制成）

液體培育基在液體培育基中加入1%~2%的瓊脂，加熱溶化再冷卻凝

固。用于細菌的分別純化、菌落視察、生物活性檢測等，可

制成試管斜面或傾倒平面。

固體培育基在液體培育基中加入0.5%的瓊脂。可做穿刺試驗，視察細

菌的運動力。

半固體培育

基

鑒別培育基針對特定菌種設計，依據其特定產物，在培育基中加入特定

作用底物或顯色指示劑，憑肉眼識別顏色既能鑒別菌種。

Eg三糖鐵培育基和麥康凱培育基。

選擇培育基在培育基中加入某些化學物質,對不同細菌分別產生抑制或

促進作用，從而可從混雜多種細菌的樣本分別出所需細菌。

Eg麥康凱培育基、SS培育基、伊紅美藍培育基等。

厭氧培育基為培育厭氧菌而設計。

6、試述主要的細菌生化反應的原理與用途。P28P29

各種細菌能夠分解利用的養分物質不同，對相同養分物質的分解產物也不

同，據此可以設計特定的生化反映，作為鑒定細菌只用。細菌的合成代謝

產物如毒素、色素等也有肯定的鑒別意義，但一般不用生化反應檢測。

常用的生化反應有氧化酶試驗、觸酶試驗、氧化發酵(O/F)試驗、VP試驗

與甲基紅試驗等。可采納微量法和常量法。目前一般多用商品化的微量生

化試劑檢測劑盒。

VP試驗由兩學者創建得名。大腸桿菌和產氣桿菌均能發酵葡萄糖，

產酸，產氣，兩者不能區分。但產氣桿菌能使丙酮酸脫落，

生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在堿性溶液中被空氣中的

分子樣所氧化，生成的乙二酰與培育基中含胭基的化合物

發生反映，生成紅色化合物，是為陽性。大腸桿菌不能生

成乙酰甲基甲醉，故為陰性。

甲基紅試驗在VP試驗中，產氣桿菌分解葡萄糖，產生的兩分子丙酮酸

轉變為一分子中性的乙酰甲基甲醇，故最終的酸類較少，

培育液pH>5.4。以甲基紅(MR)做指示劑是，溶液呈橘黃

色，是為陰性。大腸桿菌分解葡萄糖時，內酮酸不轉變為

乙酰甲基甲醇，故培育基酸性較強，pH<4.5,甲基紅指

示劑呈紅色，則為陽性。

7、生物被膜有何特點。

生物被膜中的細菌由于被多糖等物質包埋而受到愛護，對外環境的反抗力

與對抗生素的抗性均較同種游離的單個菌體強，影響抗生素的療效和滅菌

效果。電鏡下可視察到細菌的生物被膜呈連片狀的菌體團塊。探討表明有

的細菌如嗜水氣單胞菌，治病菌株可形成生物被膜，而非致病菌不形成。

生物被膜的形成手細菌的密度感應系統調控。

8、何謂密度感應系統調控？舉例說明其應用價值。P30

9、試述益生菌和益生元的概念與應用價值。

某些細菌或真菌有利于宿主胃腸道微生物區系的平衡，能抑制對宿主有害

的微生物的生長，用這些微生物制成的制劑稱為益生菌或益生素。飼料或

食品中的某些寡糖例假如寡糖(FOS)等成分，不被宿主消化汲取，但等

選擇性的刺激宿主消化道有益微生物或飼喂的益生菌的生長，對宿主產生

有益作用，此類成分叫益生元或益生素元。益生菌與一生緣亦可聯合運用。

二者對動物有肯定的保健作用。

10、何謂菌群失調？保持動物正常菌群有何重要意義?

因患病、外科手術、環境變更和濫用抗菌藥物等緣由，宿主某個微生物

正常菌群中的細菌種類和數量發生變更，對機體造成損失，出現肯定病理

效應的狀態，稱為菌群失調。例如長期連續或短期大量口服大腸桿菌敏感

的抗菌藥物，殺死了腸道有益大腸桿菌，致使對抗菌藥物不敏感的致病性

大腸桿菌或其他腸道致病菌借機大量增值，引起腸道疾病。

正常菌群與其宿主之間形成一個共生關系，詳細表現在養分免疫和生物拮

抗三個方面。P32

11、試述悉生生物學和悉生動物的概念、試驗動物分類（包括定義）以與

培育試驗動物的意義。

悉生動物學：是用無菌動物技術探討微生物與其宿主相互關系的生命科

學，它是在科學探討與臨床醫學中應用悉生動物的科學。

悉生動物：一切生命形態都知道的動物。依據概念可分為五類，其中無特

定病原體動物應用正日趨廣泛。

無菌動物不帶任何微生物的動物，即無外源菌動物。事實上某些內

源性病毒或正常病毒很難去除，因此無菌動物事實上是一

個相對概念。無菌動物中還有一種無Y球蛋白動物。

悉生動物俠義的悉生動物是指無菌動物，廣義也指有目的地帶有某

種或某些已知微生物的動物。無菌動物帶有或接種了一種

微生物的動物叫單聯悉生動物，帶兩種微生物者稱雙聯微

生物，依次類推，稱為三聯或多聯微生物。

無特定病原體是指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物

動物(SPF)的動物。例如為了解除某些細菌如假單胞菌屬、變形桿菌

屬、克宙伯菌屬等的干擾，可通過無菌動物與這些細菌以

外的正常菌群相聯系培育SPF動物。

清潔動物是指動物來源于剖腹產，飼養與半屏蔽系統，其體內外不

能攜帶人畜共患病和動物主要傳染病的病原體。是無菌動

物與健康動物純正的正常微生物群相聯系的結果。

一般動物是指在開放條件下飼養，其體內外存在著多種微生物和寄

生蟲，但不能攜帶人畜共患病病原微生物的動物。

培育試驗動物的意義：由于無菌動物不受任何微生物的刺激和干擾，所以

可以用于探討動物體內外微生物區系對機體的影響與微生態學探討，可用

來探討免疫、腫瘤、病理與傳染病的凈化等。由于無菌動物的培育和飼養

技術很困難，所以通常用悉生動物代替。

第三章消毒、滅菌與獸醫微生物試驗室的生物平安

【內容提要】

消毒和滅菌是獸醫微生物學實踐中的最常用的措施。

常用的火焰滅菌法、熱空氣滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、巴氏消毒法與煮沸

滅菌法各有特點和好用范圍。

可見光中的紫外線和紅外線有殺菌作用，光復活作用是一個值得留意的現

象。「射線和微波等也常用于滅菌。

濾過除菌應用廣泛，制造生物制品等藥品的車間的空氣須要濾過并要求達

到肯定的干凈程度。

化學消毒劑的功效易受環境因素的影響，抗生素等用于細菌感染的治療。

細菌素對同種或類似細菌有肯定的抑殺作用。

依據從事的病原微生物的危害性的差異，獸醫微生物試驗室通常通常分為

生物平安等級1~4級(BSL1?4)4種規格，BSL~4是最高平安級別。我

國農業部將動物病原微生物分為一至四類，一類危害性最大。

復習思索題

1、滅菌、消毒、防腐、無菌的概念？

答：(1)滅菌：殺滅物體上全部微生物的方法，包括殺滅細菌芽胞霉菌抱

子在內的全部病原微生物和非病原微生物。

(2)消毒：殺滅物體上病原微生物的方法，僅要求達到消退傳染性的目

的，而對非病原微生物與其芽胞、胞子并不嚴格要求全部殺死。

(3)防腐：阻擋或抑制物品上微生物生長繁殖的方法，微生物不肯定死

亡。

(4)無菌：無菌為不存在活細菌的意思。防止或杜絕細菌進入動物、人

或其他物品的方法稱為無菌操作o

2、物理消毒滅菌方法主要有哪些？如何合理選用？

答：(1)熱力滅菌法：高溫滅菌法是最古老、作用最大、應用最廣、運用

最簡便以與效果最牢靠的滅菌方法。熱力使蛋白質中的氫鍵破壞使之變性

或凝固，使雙股DNA分開為單股，活化核酸酶使單股DNA斷裂。

細菌繁殖體對其最為敏感，其次的真菌和病毒，細菌芽胞對熱有很強的反

抗力作用。

熱力滅菌法分為干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類，在同一溫度下后者的效力比

前者大，這是因為濕熱中菌體蛋白較易凝固、濕熱穿透力比干熱強、蒸汽

變為液態時可釋放大量潛熱快速提高被滅菌物體的溫度。

（2）輻射滅菌法輻射包括電磁波輻射和粒子輻射。輻射除可被一些產色

素細菌利用作為能量源外，對多數細菌有根害作用。

（3）超聲波殺菌法

超聲波裂解細胞的主要機制：它通過水發生空（腔）化作用，在液體中

造成壓力變更，應力薄弱區形成很多小空腔，漸漸增大，最終崩裂。

有殘存，費用頗大，故未應用于消毒滅菌。目前主要用于裂解細胞，提

取細胞組分進行探討。

（4）濾過除菌法

概念：是通過機械、物理阻流作用將液體或空氣中的細菌等微生物除去

的方法。

適用條件：通常不能除去病毒、支原體、細菌L型等微生物。糖培育液、

各種特殊的培育基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、維生素、募基酸等不

能加熱滅菌的液體常用濾器過濾除菌。此外，還可以進行病毒的分別。利

用空氣過濾器可以進行超凈工作臺、無菌隔禽器、無菌操作室、試驗動物

室以與疫苗、藥品、食品等生產廠房的空氣濾過除菌。

（5）干燥與低溫抑菌法

干燥—失水->新陳代謝障礙一菌體蛋白質變性或鹽類濃度增高一死亡

利用高濃度的鹽溶液或糖溶液保存食品，是由于高濃度的溶液吸取菌體內

的水分，造成微生物的生理性干燥而達到抑菌的目的。

類型概念方法、滅菌機制條件

干火以火焰干脆灼灼燒（干脆用火焰滅菌）適用于耐燒的接種針（環）、金屬

熱焰燒殺死物品中器具、試管口等的滅菌

滅滅病原微生物的焚燒（干脆點燃或者焚燒爐常用于燒毀的物品，如患病動物尸

菌菌方法內焚燒）體、病畜禽的墊料與其他污染廢棄

法法物等

熱利用干熱滅菌在干熱狀況下，由于熱空氣適用于高溫下不損壞、不變質、不

空器，以干熱空氣的穿透力較低，需在160c蒸發的物品，如各種玻璃器皿、瓷

氣進行滅菌的方維持2h才能達到殺死全部器、金屬器械等

滅法微生物與其芽胞、泡子的目

菌的。

法

濕煮常壓下煮沸10~20min可殺外科手術器械、注射器、針頭以與

熱沸死全部細菌的繁殖體，芽胞食具等多用此法消毒

滅消長需煮沸l~2h才能被殺死。

菌毒若在水中加入2%碳酸鈉或

法法2%~5%石炭酸，可以提高

沸點，增加殺菌力

巴以較低溫度殺①.低溫維持巴氏消毒法：在目前主要應用于葡萄酒、啤酒、果

氏滅液態食品中63~65C維持30min;酒、牛乳等食品的消毒。

消的病原微生物②高溫瞬時巴氏消毒法：在超高溫巴氏消毒法的鮮乳在常溫

毒或特定微生物，71~72℃保持15s;下保質期可長達半年。

法而又不嚴峻損③超高溫巴氏消毒法：在

害其養分成分132℃保持1?2s。加熱消毒

和風味的消毒后快速冷卻至10℃以下（冷

方法擊法）

流是利用一個標10CTC的蒸汽維持30min足

通準大氣壓下以殺死細菌的繁殖體，但細

蒸10。℃的流通菌的芽胞和真菌抱子不能被

汽蒸汽進行物品全部殺滅。該法常用阿諾德

消消毒，又稱常壓流通蒸汽滅菌器或蒸籠。

毒蒸汽消毒法

法

流利用反復多次在流通蒸汽滅菌器內進行第此法常用于一些不耐高溫的培育

通的流通蒸汽問一次流通蒸汽滅菌后，將物基，如雞蛋培育基、血清培育基、

蒸歇加熱以達到品移植37七保溫箱中保溫糖培育基的滅菌。如將物品在

汽殺滅全部微生過夜，待芽胞萌發出芽，次7。~8。℃力口熱lho連續6次，也

滅物的方法，又稱日以同樣的方式再進行一次可達到滅菌目的，且可不破壞血清

菌間歇滅菌法或滅菌和保溫過夜，如此連續3等物質。依據滅菌對象不同，溫度、

法丁達爾滅菌法次以上，可達到完全滅菌的加熱時間、次數，均可適當增減。

效果。

高用高壓蒸汽滅在103.4kPa蒸汽壓卜，于是應用最廣、最有效的滅菌方法。

壓菌器進行滅菌1213c維持15-20min,凡耐高溫、不怕潮濕的物品，如各

蒸的方法。可殺死包括細菌芽胞在內的種培育基、溶液、玻璃器皿、金屬

汽全部微生物。器械、敷料、橡皮手套、工作服和

滅試驗小動物尸體等均可。

菌

法

類別概念方法、滅菌機制條件

非可是指紅外線和紫可見光具有微弱的殺菌作光感作用對原生動物、細菌、

電見外線之間的肉眼用，若將某些染料如結晶毒素、病毒和噬菌體等均有滅

離光可見的光線，波紫、美藍、汞澳紅、伊紅、火作用。

輻長400~800nm沙黃等加到培育基或涂在革蘭陽性菌對光感作用比陰性

射外傷表面，能增加可見光敏感，美藍、汞演紅、伊紅僅

的殺菌作用，這一現象稱作用于革蘭陽性菌，而沙黃則

為光感作用。一般在有氧作用于革蘭陰性菌。

的狀況才出現光感作用。

（染料激活氧或染料氧化

起殺菌作用）

日直射日光有劇烈多數微生物在直射日光的效果影響因素眾多。實際生活

光的殺菌作用照耀下半小時到數小時即中，日光對被污染的土壤、牧

可死亡。芽胞往往須經場、畜舍、用具等的消毒以與

20h才。死亡。江河的自凈作用均有重要意義

紫紫外線波長紫外線損害DNA構型，干紫外線的穿透力弱，故只能用

外200~300nm部擾DNA的復制和轉錄；使于微生物試驗室、無菌室、手

線分具有殺菌作空氣中的分子氧變為臭術室、傳染病房、種蛋室等的

用，其中氧，釋放出氧化實力強的空氣消毒，或用于不能用高溫

265~266nm殺氧原子。或化學藥品消毒的表面消毒；

菌力最強。試驗室通常運用的紫外線光復活作用。

殺菌燈，殺菌力強而穩定

紅紅外線是波長為利用紅外線烤箱滅菌。此法多用于醫療器械的滅菌。

外0.77~1000微無需空氣傳導，可是照耀

線米的電磁波，尤物體表面快速升溫。

以1~10微米的滅菌作用與干熱相像，滅

熱效應最強菌時間、所需溫度亦同于

熱空氣火菌法。

微微波主要是一種消毒中常用的微波頻率為可透過玻璃、塑料薄膜、陶瓷

波波長1mm到915~2450MHzo主要是等物質，但不能透過金屬表面。

1m的超高頻電利用微波的加熱作用。目前主要用于食品工業，醫藥

磁波方面用于維生素和中藥藥丸等

的滅菌。時間短，加熱勻稱是

其顯著特點。

電離輻射放射性同位素的射線使水電離出游離基在足夠計量時，對各種細菌均

射線（即Q射線、（劇烈的還原劑和氧化有致死作用。在實際工作中，

B射線、Y射線）劑）干脆作用于細菌；其他等缺乏穿透力不好用，主

和X射線以與高射線使酶失活；導致包要應用X射線、丫射線、B射線。

能質子、中子等括DNA在內的細胞內物電離輻射多用于大量一次性塑

可將被照耀物質質分解；料制品的消毒，亦可用于食品、

原子核四周的電飼料的消毒，且不破壞其養分

子擊出，引起電成分。

離，故稱為電離

輻射。

3、影響消毒劑作用的因素

消毒劑的性質和作用時間：絕大多數消毒劑在高濃度時殺菌作用大，濃

度低至肯定程度只有抑菌作用。過濃不肯定能提高消毒效力。肯定濃度下,

對細菌作用的時間越長，效果越好。

微生物的種類和數量：同一消毒劑對不同種類處于不同事情的微生物效

果不同。微生物數數量越大，所需消毒時間就越長。

溫度：一般溫度上升可增加殺菌效果。

④酸堿度：消毒劑的殺菌效果受PH的影響。PH也影響消毒劑的電離度,

一般未電離的因子易通過細胞壁殺菌效果好。

⑤有機物：環境中有有機物，特殊是蛋白質能和很多消毒劑結合，嚴峻影

響效果。

⑥藥物的相互拮抗：消毒劑理化性質不同，兩種藥品合用時可能產生相互

拮抗，使藥效降低

影響消毒效果的還有濕度、穿透力、表面張力與拮抗物質等。

4、試述我國《獸藥GMP》對獸藥生產干凈室（區）空氣干凈度的劃分。

答：100級、10000級、100000級、300000級

5.比較消毒劑、防腐劑，化學治療劑的殺菌機制。

答：消毒劑和防腐劑之間沒有嚴格界限C消毒劑與化學治療劑不同，它在

殺滅病原微生物的同時，對動物體的組織細胞也有損害作用，所以只能外

用或用于環境的消毒，其中少數不被汲取的化學消毒劑亦可用于消化道的

消毒。而化學治療劑對于宿主和病原微生物的作用具有選擇性，她能使微

生物受抑制或死亡，而對宿主細胞毒副作用甚小。

消毒劑：用來殺滅病原微生物的化學藥劑。

防腐劑：用于抑制微生物生長繁殖的化學藥劑。

化學治療劑：用于消退宿主體內病原微生物或其他寄生蟲的化學藥品稱為

化學治療劑。

6、抗生素和細胞素二者的作用原理如何？

(1)抗生素：某些微生物在代謝中產生的一類能抑制或殺死另一些病原

微生物的物質。作用原理：①干擾細菌細胞壁的合成；②損傷細胞膜而影

響其通透性；③影響菌體蛋白質的合成；④影響核酸的合成；

(2)細菌素：是某種細菌產生的一種具有殺菌作用的蛋白質。只能作用

于與它同種不同株的細菌以與與它親緣關系相近的細菌

第四章細菌的感染與致病機理

【內容提要】

細菌是否有致病性，經典的依據是柯赫法則，近年來提出的基因水平的柯

赫法則對此標準

做了補充和完善。

就某種病原菌而言，其致病性一般通過測定LD50來定量。

細菌的致病性在很大程度上取決于其毒力因子，包括侵襲力與毒素，以與

毒力因子的分泌系統。

侵襲力導致病原菌在機體內定殖、突破機體的防衛屏障、內化作用、繁殖

與擴散。

毒素有外毒素和內毒素之分，外毒素是具有特異性毒性作用的蛋白質，典

型結構為A-B亞單位的聚體。內毒素為LPS的類脂A,耐熱，具有致熱

作用等。

有關病毒致病性的現代觀點不僅要考慮病原菌，還要考慮宿主與二者的相

互作用，機會致病菌因此得以重視。

細菌的毒力可用人工的方法增加或減弱，并受到溫度、離子濃度等多種環

境因子、非編碼小RNA與二元信號轉導系統等的調整。

復習思索題（1~6重點）

1.致病性與毒力的概念。

（1）肯定種類的病原菌在肯定的條件下，能在宿主體內引起感染的實力

稱為致病性。

（2）病原菌致病力的強弱程度稱為毒力。

2.經典的柯赫法則。

由德國細菌學家羅伯特?柯赫890年提出，是確定某種細菌是否具有致病

性的主要依據：

（1）特殊的病原菌應在同一疾病中查見，在健康者不存在：

（2）此病原菌能被分別培育而得到純種；

（3）此純培育物接種易感動物，能導致同樣病癥。

3.LD50的概念。

答：半數致死量（LD50）是指能使接種的試驗動物在感染后肯定時限內

死亡一半所需的微生物量或毒素量。

4.外毒素與內毒素的區分。

概念特性組成

化學產生耐熱毒，性毒性致熱免疫能否

性質性作用程度性原性產生

類毒

素

外毒是某蛋白由某通常特異高,往對宿強，刺能，用大多

素些病質些革不耐性，為往致主不激機甲醛數外

原菌蘭陽熱細胞死致熱體產處理毒素

在生性菌毒素、生中由A、

長繁或陰腸毒和抗B兩種

殖過性菌素或體（抗亞單

程中分泌神經毒素）位組

所產毒素，成。A

生的對特亞單

對宿點的位為

主細細胞毒素

胞有或組的活

毒性織發性中

的可揮特心，B

溶性點作亞單

蛋白用位為

質結合

部位

內毒特指脂多由革極為全身弱，很常致較弱，不能LPS

素革蘭糖蘭陰耐熱性，致少致宿主免疫由o

陰性性菌發熱、死發熱應答特意

菌中裂解腹瀉、不足多糖

的脂產生嘔吐以中側鏈、

多糖和毒非特

(LPS性異核

)成心多

分,細糖和

菌在類脂A

死亡組成。

后裂

開或

用人

工方

5.感染的類型。

答：隱形感染和顯性感染

6.細菌毒力減弱的方法

答：（1）長時間在體外連續培育傳代；

（2）在高于最適生長溫度條件下培育；

（3）在含有特殊化學物質的培育基中培育；

（4）通過非易感動物；

（5）通過基因工程的方法；

7.試述致病菌侵入宿主細胞的主要過程。

答：定殖（細菌感染的第一步就是在體內定殖）一干擾或躲避宿主的防衛

機制（抗吞噬作用、抗體液免疫機制）-內化作用（指某些細菌在粘附在

細胞組織后能進入吞噬細胞或非吞噬細胞內部的過程）一在體內增殖（核

心問題，增殖速度對致病性極其重要）一在體內擴散

8.什么樣的細菌能進行內化作用，意義何在？

答：（1）結合桿菌、李氏桿菌、衣原體等嚴格的胞內寄生菌與大腸桿菌、

沙門菌、耶爾森菌等胞外寄生菌；

（2）意義：細菌通過這種位移作用進入深層組織，或進入血液循環，借

以從感染的病發原灶擴散至全身或較遠的靶器官。宿主細胞為進入其中的

細菌供應了一個增殖的小環境和庇護所，使細菌躲避宿主免疫機制的殺

滅。

9.胞外蛋白酶有何致病作用，舉例說明。

細菌分泌的蛋白酶稱為胞外蛋白的。它們具有多種致病作用，例如激活外

毒素、滅活細菌中的補體等，有的蛋白酶本身就是外毒素。此外，最主要

的作用是造成組織基質或細胞膜的損傷，增加其通透性，有利于細菌在體

內擴散。此毒素常見的有：透亮質酸酶，分解基地組織，葡萄球菌、鏈

球菌可產生；膠原酶，分解ECM中的膠原蛋白，見之于梭菌、氣單胞

菌等；神經氨酸酶，分解細胞膜的磷脂，產氣莢膜梭菌等可產生。

10.什么是類毒素，有何用途？

答：外毒素在64%的甲醛溶液作用下，經過一段時間可脫毒，但仍保留

原有抗原性，稱為類毒素。注入機體后可刺激機體產生抗毒素，可作為疫

苗進行免疫接種。

11.舉例說明細菌毒力因子重要的分泌系統的主要特點。

答：具有接觸介導的特征：以腸致病性大腸桿菌（EPEC）為例，置37℃

的處于對數生長期的EPEC與宿主細胞接觸后，T3SS大量分泌蛋白質并

進入宿主細胞。EPEC的4型菌毛（BFP）對嗷活此分泌系統起關鍵作用。

T3SS的這種接觸激活作用可被氯霉素抑制。

12.什么是機會致病菌？為什么應予以重視？

是指某些細菌通常不主動入侵宿主，但當宿主的免疫屏障被打開或免疫功

能異樣時，這類細菌就會進入機體的血液或組織，造成感染并致病。

細菌致病性與毒力的傳統概念的缺陷是僅考慮病原菌本身，即著重探討那

些專性致病菌，忽視了宿主因素以與宿主和病原菌的相互作用。

13.環境因子如何影響細菌毒力因子的調整，舉例。

（1）溫度：嗜水汽單胞菌的毒素、菌毛在25?左右表達量最佳；

（2）鐵：它不僅可以誘導鐵載體、鐵載體受體與其它鐵結合蛋白受體等

與鐵代謝有關的成分表達，而且還對某些細菌毒素有調整作用，如類志賀

毒素；

（3）鈣：鈣對耶爾森菌Yops的表達有調整作用。Yops是耶爾森菌的一

系列外膜蛋白，是重要的毒力因子；

（4）滲透壓：滲透壓對霍亂弧菌的毒力與菌毛的表達有調整作用，在宿

主組織相近的生理范圍內表達量最高。

14.什么是非編碼小RNA

答：是一大類不編碼蛋白質的RNA分子，存在于所以生物體中。sRNA

作為一種新的調控因子，可與mRNA結合，導致后者降解；或與蛋白質

結合，影響蛋白質的生物學功能°

15.什么是二元信號轉導系統？其在病原信號傳遞上有何作用。

答：最簡潔的二元信號轉導系統（TCSTS）由組氨酸激酶（HK）和反應調

整因子（RR）組成。感受到外界環境