37TechnicalspecificationforearlypreventionofAureliacoeruleabloomsI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。1海月水母暴發(fā)早期防控技術(shù)規(guī)范GB/T12763.6海洋調(diào)查規(guī)范第6部分：海洋25.1以受災(zāi)單位為中心在其周邊海域設(shè)置站位，搜尋海月水母螅狀體(見(jiàn)附錄A),調(diào)查其暴發(fā)來(lái)源，通過(guò)對(duì)螅狀體進(jìn)行處置實(shí)現(xiàn)其暴發(fā)早期防控。5.2站位設(shè)置呈網(wǎng)格型或扇形，調(diào)查區(qū)域半徑通常約為30nmile以?xún)?nèi)；站位之間的距離宜在15nmile以?xún)?nèi)，通常等間距設(shè)置，宜不少于5個(gè)站位。5.3重點(diǎn)考慮在受災(zāi)單位周邊的封閉或半封閉港口、人工湖、養(yǎng)殖區(qū)及跨海大橋等大型沿海工程附近布設(shè)站位。5.4站位布設(shè)宜充分考慮受災(zāi)單位周邊海流、6碟狀體監(jiān)測(cè)6.14月至5月，于布設(shè)站位監(jiān)測(cè)海月水母碟狀體(見(jiàn)附錄A)。調(diào)查頻次宜設(shè)置為每月1次以上。6.2碟狀體調(diào)查按照GB/T12763.6的規(guī)定執(zhí)行，利用淺水I型或I型浮游生物網(wǎng)，由底到表垂直拖網(wǎng)采集碟狀體。樣品采集后用中性甲醛溶液固定，加入量為樣品體積的5%,通過(guò)體視顯微鏡觀察碟狀體。碟狀體豐度(E)的計(jì)算按公式(1)執(zhí)行：E-碟狀體豐度，單位為個(gè)每立方米(ind·m3);P——全網(wǎng)碟狀體個(gè)數(shù)，單位為個(gè)(ind);V——濾水量，單位為立方米(m3)。6.3根據(jù)碟狀體豐度時(shí)空分布初步推斷受災(zāi)單位周邊海域海月水母暴發(fā)的潛在源頭，即其螅狀體棲息地。若某站位發(fā)現(xiàn)其碟狀體，則該站位附近可能存在螅狀體棲息地；若某站位調(diào)查期間未發(fā)現(xiàn)碟狀體，則該站位附近可能不存在螅狀體。7螅狀體搜尋與監(jiān)測(cè)7.1.1于初步擬定的海月水母螅狀體棲息地站位附近區(qū)域通過(guò)水肺潛水肉眼觀察搜尋其螅狀體。水肺潛水應(yīng)按GB26123的規(guī)定執(zhí)行，宜于春夏秋季開(kāi)展。b)大型人工基質(zhì)底表面或其側(cè)面其他硬質(zhì)附著生物的底面，包括大型海上平臺(tái)、浮碼頭、橋墩、人工魚(yú)礁及養(yǎng)殖網(wǎng)衣等水下人工基質(zhì)，螅狀體通常高密度倒掛附著于上述基質(zhì)表面的下表面(見(jiàn)附錄B)。7.2.1站位周邊區(qū)域發(fā)現(xiàn)螅狀體后，宜隨機(jī)取10個(gè)~30個(gè)個(gè)體通過(guò)體視顯微鏡觀察其形態(tài)特征(見(jiàn)附錄A),結(jié)合分子遺傳學(xué)方法，按附錄C確認(rèn)其種類(lèi)。7.2.2根據(jù)螅狀體附著基質(zhì)的表面積設(shè)定樣方框。樣方框數(shù)量宜為15個(gè)以上，根據(jù)基質(zhì)表面情況宜均勻布設(shè)。樣方框在保證其數(shù)量情況下可根據(jù)基質(zhì)表面積設(shè)定不同大小，如20cm×20cm、10cm×10cm7.2.4根據(jù)每張樣方框照片，計(jì)數(shù)螅狀體數(shù)量，填寫(xiě)螅狀體調(diào)查記錄表(見(jiàn)附錄D)?；|(zhì)表面螅狀3體密度(D)按公式(2)計(jì)算：D基質(zhì)表面螅狀體密度，單位為個(gè)每平方米(ind·m?2):n樣方框數(shù)量，單位為個(gè)(ind):Nn第n個(gè)樣方內(nèi)螅狀體數(shù)量，單位為個(gè)(ind);S——樣方框面積，單位為平方米(m2)。基質(zhì)表面螅狀體總數(shù)量(T)按公式(3)計(jì)算：T——基質(zhì)表面螅狀體總數(shù)量，單位為個(gè)(ind);D——基質(zhì)表面螅狀體密度，單位為個(gè)每平方米(ind·m?2);8.1于次年4月前宜選取螅狀體密度大于103ind·m2的基質(zhì)開(kāi)展清除。8.2螅狀體清除遵循生態(tài)環(huán)境保護(hù)優(yōu)先的原則，應(yīng)根據(jù)其附著基質(zhì)的可移除性選擇清除方式，宜選擇a)水下清除：利用空化射流噴射清除基質(zhì)表面螅狀體，噴射壓力宜選4MPa～18MPa,清洗槍與螅狀體間距宜小于20cm。對(duì)于不適于噴射的基質(zhì)或當(dāng)噴射效果不佳時(shí)宜采用刮鏟、刷擦等方b)陸基清除：當(dāng)基質(zhì)易于移動(dòng)時(shí)，除采用水下清除外，也可將基質(zhì)轉(zhuǎn)移至陸基，按照水下清除9清除后管理分別比較站位周邊基質(zhì)表面螅狀體清除率和螅狀體清除前后水母體豐度基質(zhì)表面附著的螅狀體清除后，應(yīng)當(dāng)場(chǎng)按7.2監(jiān)測(cè)其表面剩余螅狀體密度和除率表征基質(zhì)表面螅狀體的清除效果。螅狀體清除率(R)按公式(4)或(5)計(jì)算：4R——螅狀體清除率；TDo——清除前基質(zhì)表面螅狀體密度，單位為個(gè)每平方米（ind?m-2Da——清除后基質(zhì)表面螅狀體密度，單位為個(gè)每平方米（ind?螅狀體清除記錄表見(jiàn)附錄E。螅狀體清除率越高， (ρ):ρ——水母體豐度/生物量，單位為個(gè)或千克每平方千米(ind?km-2或kg?km-2)；C——平均每小時(shí)底拖網(wǎng)獲得水母數(shù)量或重量，單位為個(gè)或千克每網(wǎng)每小時(shí)[ind?(net?h)-1或kg?-1]；a——網(wǎng)具每小時(shí)掃海面積，單位為平方千米每網(wǎng)每小時(shí)[km2?(net?h)-1]；），——若螅狀體清除后水母體豐度/生物量與清除前差異不顯著，或顯著高于螅狀體清除前豐度/生物量，則早期防控效果不好；需防范外源海月水母的入侵，考慮擴(kuò)大螅狀體清除范圍一步確認(rèn)布設(shè)站位周邊是否仍有大量螅狀體未發(fā)現(xiàn)5(資料性)海月水母螅狀體、碟狀體和水母體形態(tài)代表性圖海月水母螅狀體、碟狀體和水母體代表性圖見(jiàn)A.1。a)螅狀體b)碟狀體c)水母體圖A.1海月水母螅狀體、碟狀體和水母體形態(tài)6(資料性)圖B.1自然海區(qū)海月水母螅狀體附著特征7利用解剖針隨機(jī)挑取基質(zhì)表面少量螅狀體（10個(gè)～30個(gè)），使用CTAB法或者DNA提取試C.3.1反應(yīng)體系為50μL，包括1.25U～2.5U的TagDNA聚合酶，10mol/L的正反向引物各2μL，2.5m陰性對(duì)照用來(lái)檢測(cè)是否存在污染。C.3.4所有PCR均在PCR儀上完成。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)純化后利用測(cè)序儀進(jìn)行雙向測(cè)將COI基因序列在GenBank和BOLDSystem中進(jìn)行核苷酸序列比對(duì)，將16SrRNA基因序列在GenBank8I12345…）