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文檔簡介
常見微生物培養基的制備課程名稱:食品微生物檢測技術培養基的種類和作用本次課內容培養基中成分分析培養基的配制過程培養基的種類和作用01培養基的種類和作用培養基在微生物生長繁殖中所承擔的作用培養基的種類和作用什么是培養基?
為了研究各種微生物,需要使它們在人工培養條件下生長。培養基是人工配制的適合于微生物生長繁殖和積累代謝產物所需要的營養基質。培養基的種類和作用液體培養基不加任何凝固劑,增菌培養,性質判定。固體培養基在液體培養基中加入凝固劑(瓊脂1.5%-2.0%)使其成為固體狀態。用作微生物的分離鑒定、菌種保藏等。半固體培養基凝固劑含量比較少,呈現半凝固狀態(0.2%-0.7%)。常用于觀察微生物的運動特征等。培養基的種類和作用——按物理狀態分選擇培養基加入特殊營養物質或選擇性抑制劑,有利于所需微生物的生長。LST肉湯培養基鑒別培養基加入某些指示劑,與微生物代謝產物發生特定的化學反應,產生明顯的特征變化血瓊脂培養基Baird-Parker培養基基礎培養基培養基的種類和作用——按作用分天然培養基合成培養基半合成培養基含用化學成分還不清楚或化學成分不恒定的天然有機物。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基高氏1號培養基、查氏培養基合成培養基中加入某種天然成分馬鈴薯葡萄糖培養基培養基的種類和作用——按成分不同分化學成分完全了解的物質配制而成的培養基培養基的成份分析02培養基的成份分析食品研究工程研究中心實習生在實踐中遇到的困難同種培養基培養不同的微生物,但培養結果卻完全不同?微生物細胞的化學組成主要成分細菌酵母菌霉菌水分75~8570~8085~90(占細胞鮮重的%)蛋白質50~8032~7514~15
占細碳水化合物12~2827~637~40
胞干脂肪5~202~154~40
重的核酸10~206~81%
無機鹽2~303.8~76~12培養基的成分分析培養基的成份怎么確定?微生物細胞中幾種主要元素的含量(干重的百分數)元素細菌酵母菌霉菌碳5049.847.9
氮1512.45.2
氫86.76.7
氧2031.140.2
磷3——
硫1——培養基的成份分析培養基的成份怎么確定?培養基就是人工創造的“食物”,滿足微生物的生長需求。微生物的營養需求和動植物存在元素統一性。人類的營養需求蛋白質水碳水化合物脂類礦物質膳食纖維維生素微生物的營養需求氮源水碳源無機鹽生長因子培養基的成份分析培養基的配置要根據待培養的微生物的營養要求而調整。微生物的營養要求常常有碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子等,此外微生物的培養還需要特定的條件,如氧氣濃度、溫度、滲透壓、pH、光照等。培養基的成份分析孟加拉紅培養基適合真菌(酵母和霉菌)的生長和計數的培養基。蛋白胨5.0g葡萄糖10.0g磷酸氫二鉀1.0g硫酸鎂0.5g蒸餾水1000mL?孟加拉紅溶液0.033g氯霉素0.1g瓊脂20g培養基的成份分析氮源元素水平NN·ON·HN·C·H·ON·C·H·O·X化合物水平氮氣硝酸鹽NH3、銨鹽CO(NH2)2、一般氨基酸、簡單蛋白質復雜蛋白質、核酸等原料水平空氣KNO3、NaNO3(NH4)2SO4尿素、蛋白胨、明膠牛肉膏、酵母膏、餅粕粉、蠶蛹粉、魚粉、花生餅粉等培養基的成份分析凡是提供微生物營養所需的氮元素的營養源,稱為氮源。氮源物質的主要作用是合成細胞物質中含氮物質孟加拉紅培養基適合真菌(酵母和霉菌)的生長和計數的培養基。蛋白胨5.0g葡萄糖10.0g磷酸氫二鉀1.0g硫酸鎂0.5g蒸餾水1000mL?孟加拉紅溶液0.033g氯霉素0.1g瓊脂20g培養基的成份分析碳源元素水平C·OC·O·XC·HC·H·OC·H·O·NC·H·O·N·X化合物水平CO2NaHCO3烴類糖、有機酸、醇、脂類等多數氨基酸、簡單蛋白質復雜蛋白質、核酸原料水平CO2NaHCO3、CaCO3天然氣、石油等一般氨基酸、明膠等葡萄糖、蔗糖、各種淀粉、糖蜜等玉米粉、馬鈴薯、麥麩、米糠等培養基的成份分析凡是提供微生物營養所需的碳元素(碳架)的營養源,稱為碳源。碳源物質的功能:構成細胞物質;為機體提供整個生理活動所需要的能量。孟加拉紅培養基適合真菌(酵母和霉菌)的生長和計數的培養基。蛋白胨5.0g葡萄糖10.0g磷酸氫二鉀1.0g硫酸鎂0.5g蒸餾水1000mL?孟加拉紅溶液0.033g氯霉素0.1g瓊脂20g培養基的成份分析無機鹽大量元素:(微生物生長所需濃度在10-3~10-4mol/L)P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe等滲透壓的維持(Na+)
、酶的激活劑(Mg2+)、pH的穩定(PO43-)、微量元素:(微生物生長所需濃度在10-6~10-8mol/L)Cu、Zn、Mn、Mo、Co等
酶的激活劑(Cu2+、Mn2+
、Zn2+等)、
特殊分子結構成分(Co、Mo等)是微生物生長必不可少的一類營養物質,它們為機體生長提供多種重要的生理功能,包括大量元素和微量元素。培養基的成份分析生長因子主要包括維生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶(堿基)及其衍生物,此外還有甾醇、胺類、脂肪酸等等。是一類對微生物正常代謝必不可少且不能用簡單的碳源或氮源自行合成的有機物。功能:構成細胞的重要組成成分,如嘌呤,嘧啶構成核酸調節代謝,維持生命的正常活動。在科研和生產中,常常應用酵母膏、玉米漿、麥芽汁或者天然動植物組織浸出液等作為生長因子的來源。
培養基的成份分析孟加拉紅培養基適合真菌(酵母和霉菌)的生長和計數的培養基。蛋白胨5.0g葡萄糖10.0g磷酸氫二鉀1.0g硫酸鎂0.5g蒸餾水1000mL?孟加拉紅溶液0.033g氯霉素0.1g瓊脂20g培養基的成份分析凝固劑常用凝固劑為瓊脂(瓊脂條或瓊脂粉),從海藻中提取的多糖類物質,大多數生物無法降解利用。培養基的成份分析45℃固化,約100℃融化,滅菌過程中不會被破壞。孟加拉紅培養基適合真菌(酵母和霉菌)的生長和計數的培養基。蛋白胨5.0g葡萄糖10.0g磷酸氫二鉀1.0g硫酸鎂0.5g蒸餾水1000mL?孟加拉紅溶液0.033g氯霉素0.1g瓊脂20g培養基的成份分析特殊成份抑制劑類:選擇性抑制雜菌生長,增加待檢菌的檢出率鹽類:氯化鈉、氯化鋰、氰化鉀、亞碲酸鉀(鈉)、亞硒酸鈉等染色劑類:煌綠、結晶紫、孔雀綠、孟加拉紅等膽鹽類:豬(牛、羊)膽鹽、去氧膽酸鹽類等抗菌素:氯霉素、青霉素、鏈霉素、桿菌肽、多粘菌素等指示劑類:利用分解營養物質,產酸產堿能力酚紅、甲基紅、復紅、伊紅、溴甲酚紫、中性紅美藍、孔雀綠等培養基的成份分析培養基的成份分析氨基酸屬于哪類?
多功能營養物碳源氮源生長因子培養基的成分分析培養基的制備操作03基礎培養基制備流程
制備流程查配方計算稱量01溶解02定容03調pH04滅菌08包扎07分裝06過濾0509基礎培養基制備流程稱量按照培養基配方,準確稱量各成份放于瓷缸中。牛肉膏蛋白胨培養基(固體基礎培養基)配方:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,NaCl5.0g,瓊脂20.0g,蒸餾水1000ml,pH7.4。準確選擇培養基——適合原則準確稱取各成分——適量原則基礎培養基制備流程溶解配制固體培養基時在瓊脂的熔化過程中,需不斷攪拌,并控制火力不要使培養基溢出或燒焦。瓊脂燒焦避免溢出基礎培養基制備流程調pH培養基的pH必須控制在一定的范圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。——適宜原則不同微生物培養條件
7-8細菌
7.5-8.5放線菌
3.8-6.0酵母菌
4.0-5.8霉菌基礎培養基制備流程任務:200mL乳糖蛋白胨溴甲酚紫培養基的制備基本成分:蛋白胨10g乳糖5g牛肉浸膏3g氯化鈉5g溴甲酚紫0.016g水1000mLpH7.2-7.4固體培養基制備液體培養基制備瓊脂添加2%溴甲酚紫0.0032g溴甲酚紫在調pH前添加不需要添加瓊脂0.0
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