吐司面包中菌落總數(shù)測(cè)定3-2吐司面包的稀釋和培養(yǎng)Contents目錄一、吐司面包菌落總數(shù)測(cè)定的稀釋

二、吐司面包菌落總數(shù)測(cè)定的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備序號(hào)實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料準(zhǔn)備情況1恒溫培養(yǎng)箱：2冰箱：2～5℃3恒溫水浴箱：4天平：感量為0.1g5均質(zhì)器6振蕩器7無菌吸管或微量移液器及吸頭8無菌錐形瓶9無菌培養(yǎng)皿10精密pH試紙根據(jù)任務(wù)單進(jìn)行實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1吐司面包菌落總數(shù)測(cè)定的稀釋培養(yǎng)基的制備觀看培養(yǎng)基制備視頻按照GB4789.2-2016附錄A，制備培養(yǎng)基1成分2制法試劑重量胰蛋白胨5.0g酵母浸膏2.5g葡萄糖1.0g瓊脂15.0g蒸餾水1000ml將上述成分加于蒸餾水中，煮沸溶解，調(diào)節(jié)pH值至7.00.0.2，分裝試管或錐形瓶121℃高壓滅菌15min。吐司面包稀釋流程

01檢樣0210倍稀釋

03100倍稀釋

041000倍稀釋

05傾皿吐司面包的稀釋吐司面包的稀釋流程檢樣在電子天平上稱取25g樣品，置于225ml生理鹽水的均質(zhì)袋中，均質(zhì)器拍打，制成1：10的樣品勻液。吐司面包的稀釋流程稀釋吐司面包的稀釋流程強(qiáng)調(diào)稀釋操作要點(diǎn)和操作的規(guī)范性稀釋流程點(diǎn)燃酒精燈，消毒1稀釋流程標(biāo)記試管2稀釋流程稀釋，均質(zhì)3稀釋流程標(biāo)記平板410-110-110-210-2空白空白稀釋流程教師示范稀釋移取樣液5稀釋流程教師示范稀釋傾注平板6在培養(yǎng)皿中加入平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（15～20mL），輕搖培養(yǎng)皿，使試樣與培養(yǎng)基混勻。提示：倒培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)皿的開口盡量要小；同時(shí)，開口對(duì)著酒精燈。提示：搖動(dòng)培養(yǎng)皿時(shí)，切勿使培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿蓋上。傾注平皿注意事項(xiàng)1及時(shí)將15-20ml冷卻至46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46℃1℃恒溫水浴鍋中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。2這里培養(yǎng)基46℃的感知需要依靠手背感知不燙手為宜。溫度過高會(huì)將細(xì)菌燙死，溫度過低會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固。2吐司面包菌落總數(shù)測(cè)定的培養(yǎng)培養(yǎng)培養(yǎng)待培養(yǎng)基凝固后，將培養(yǎng)皿放入恒溫培養(yǎng)箱。

提示：培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱時(shí)要倒置。注意選擇設(shè)置為36℃±1℃的培養(yǎng)箱。培養(yǎng)時(shí)間為48±2h。培養(yǎng)注意事項(xiàng)1待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃1培養(yǎng)482h。2如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長(zhǎng)的菌落時(shí)，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約4ml）后培養(yǎng)。思考1：為什么平板要翻轉(zhuǎn)？思考1：因?yàn)樵谂囵B(yǎng)過程中培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)至皿蓋，凝結(jié)成水珠下滴至培養(yǎng)基上影響菌落生長(zhǎng)，因此需要翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)。思考2：吐司面包培養(yǎng)需要覆蓋薄層培養(yǎng)基嗎？培養(yǎng)注意事項(xiàng)12思考1：因?yàn)樵谂囵B(yǎng)過程中培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)至皿蓋，凝結(jié)成水珠下滴至培養(yǎng)