獸藥殘留分析技術(shù)

與殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)第一頁，共五十七頁。第一局部獸藥殘留及其危害第二頁，共五十七頁。獸藥典型的獸藥是指用于預(yù)防和治療畜禽疾病的藥物。隨著集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)的開展，一些化學(xué)的、生物的藥用成分被開發(fā)成具有某些成效的動(dòng)物保健品或飼料添加劑，也屬于獸藥的范疇。獸藥的主要用于防病治病、促進(jìn)生長(zhǎng)、提高生產(chǎn)性能、改善動(dòng)物性食品的品質(zhì)等。第三頁，共五十七頁。獸藥在動(dòng)物性食品中的殘留獸藥的原形化合物及其代謝物在動(dòng)物的細(xì)胞、組織、器官或可食性產(chǎn)品〔如奶、蛋〕中的蓄積、貯存，稱為食品動(dòng)物的獸藥殘留。〔狹義〕化學(xué)物殘留：除獸藥外還包括通過食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)的農(nóng)藥〔如殺蟲劑、除草劑等〕和環(huán)境污染物(如重金屬、霉菌毒素等)。〔廣義〕第四頁，共五十七頁。獸藥在生態(tài)環(huán)境中的殘留在生產(chǎn)中大量使用的抗菌藥物、抗寄生蟲藥物及各種促生長(zhǎng)制劑等藥物都會(huì)以原形或以有活性的代謝產(chǎn)物形式隨動(dòng)物糞便、尿液或其他排泄物進(jìn)入環(huán)境。這些物質(zhì)在環(huán)境土壤、微生物、水生生物、植物等蓄積或貯存。第五頁，共五十七頁。獸藥殘留的產(chǎn)生外因獸藥和添加劑的使用

--防治動(dòng)物疫病

--使用藥物添加劑環(huán)境污染物內(nèi)因獸藥的體內(nèi)過程

--消除規(guī)律第六頁，共五十七頁。獸藥殘留的產(chǎn)生獸藥殘留產(chǎn)生的主要原因不遵守休藥期的規(guī)定標(biāo)簽外用藥

--劑量、劑型、給藥途徑、療程、適應(yīng)癥、動(dòng)物非法使用違禁藥物污染

--飼料加工、貯藏、運(yùn)輸?shù)谄唔摚参迨唔摗＋F藥殘留的危害急性毒性作用〔瘦肉精〕慢性毒性作用〔氯霉素、氨基糖苷類〕特殊毒性作用〔三致作用、激素樣作用、過敏反響〕--雌激素類〔己烯雌酚〕、同化激素〔苯丙酸諾龍〕--喹惡啉類〔卡巴氧〕--硝基呋喃類〔呋喃西林、呋喃它酮〕--砷制劑--苯并咪唑類--殺蟲劑〔666〕--氯羥吡啶、SM2等--甲醛、苯酚等第八頁，共五十七頁。獸藥殘留的危害對(duì)人類腸道微生物的影響

--破壞或抑制人體胃腸菌群中敏感菌的生長(zhǎng)

--導(dǎo)致條件性病原菌的大量繁殖或體外病原菌侵入腸道

--改變腸道菌群的代謝活性，使菌群改變藥物和食物固有活性和毒性的的生物轉(zhuǎn)化能力發(fā)生變化

--引起細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，導(dǎo)致人類感染性疾病治療的失敗第九頁，共五十七頁。第二局部獸藥殘留分析技術(shù)第十頁，共五十七頁。獸藥殘留分析技術(shù)的特點(diǎn)待測(cè)物質(zhì)濃度低樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多獸藥殘留代謝產(chǎn)物多樣或不明動(dòng)物種類多樣，對(duì)藥物代謝存在差異第十一頁，共五十七頁。殘留標(biāo)示物的選擇用藥后體內(nèi)存在多個(gè)殘留成分，那么需要監(jiān)控總殘留物。總殘留物在體內(nèi)的各組分比例相對(duì)穩(wěn)定，選擇總殘留物中1種或2種組分作為“參照物〞，稱為“殘留標(biāo)示物〞。通過測(cè)定殘留標(biāo)示物的含量表示樣品殘留量和MRLs。選擇殘留標(biāo)示物的原那么--消除慢、含量高、穩(wěn)定、毒性大第十二頁，共五十七頁。獸藥殘留分析方法的要求快速高通量定量準(zhǔn)確度和精確度確證法定要求質(zhì)控要求第十三頁，共五十七頁。獸藥殘留分析方法的要求ELISALC/MS/MS準(zhǔn)確度定量精確度法定要求確證質(zhì)控要求高通量快速LCorGC第十四頁，共五十七頁。分析方法的總體思路高水平(LevelⅠ)方法

--確證和定量被分析物質(zhì)中等水平(LevelⅡ)方法

--定量但不需要確證被分析物質(zhì)低水平(LevelⅢ)方法

--篩選第十五頁，共五十七頁。分析方法的總體思路采用快速、大量檢測(cè)樣品的篩選分析方法，能鑒別含有殘留物的陽性樣品采用充分可靠的分析方法，殘留量的值不具有確證性，但具相應(yīng)的準(zhǔn)確度和有效性采用經(jīng)過確認(rèn)的分析方法對(duì)殘留物進(jìn)行鑒別和測(cè)定，殘留量的值必須是有效和肯定的酶聯(lián)免疫法液相色譜法氣相色譜法液質(zhì)聯(lián)用法氣質(zhì)聯(lián)用法三級(jí)二級(jí)一級(jí)第十六頁，共五十七頁。“篩選〞到“確證〞的方法體系定性定量飼料產(chǎn)品尿樣動(dòng)物組織三級(jí)方法二級(jí)方法一級(jí)方法定性為主定量為主定性為輔GC/MSLC/MSLC/MS/MSGC/MS/MSGCHPLC第十七頁，共五十七頁。獸藥殘留分析技術(shù)用于殘留分析的樣本制備技術(shù)樣品的前處理技術(shù)殘留檢測(cè)方法的選擇第十八頁，共五十七頁。樣本的范圍可食性組織及產(chǎn)品

--肝、腎、肌肉、脂肪、皮膚、血液

--奶、蛋

--其他加工食品其他

--毛發(fā)、尿、糞便等第十九頁，共五十七頁。樣本的收集取樣方法--代表性原那么、隨機(jī)采樣--各種標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定活體檢測(cè)--一般采集毛發(fā)、血液、尿液和糞便屠宰場(chǎng)取樣--藥物的靶組織--其他高濃度的樣本：肝、腎、膽汁、注射部位--排泄物：尿液第二十頁，共五十七頁。樣本的貯存容器材料

--一般為玻璃或塑料預(yù)處理

--勻化、縮分、過篩、離心、過濾、防腐、抑制降解等貯存溫度要求第二十一頁，共五十七頁。樣品前處理技術(shù)提取方法

--組織搗碎法

--振蕩法凈化方法

--液—液萃取

--液—固萃取濃縮與富集

--旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮

--氣流吹蒸法：氮?dú)狻⒖諝獾诙摚参迨唔摗悠返那疤幚砑夹g(shù)——提取提取化合物特性基質(zhì)組成提取劑選擇沉淀劑選擇設(shè)計(jì)順序效率試驗(yàn)配比試驗(yàn)干擾試驗(yàn)影響凈化第二十三頁，共五十七頁。樣品的前處理技術(shù)——凈化凈化液液萃取SPE純化相似相溶小柱選擇濃縮富集效率試驗(yàn)配比試驗(yàn)上樣洗滌洗脫第二十四頁，共五十七頁。殘留檢測(cè)方法簡(jiǎn)介快速篩選方法

--酶免疫測(cè)定(EIA)--ELISA--放射免疫測(cè)定法(RIA)--金標(biāo)試紙條(Dipstick)--生物傳感器

--微生物抑制測(cè)定法：抗菌藥

--TLC第二十五頁，共五十七頁。殘留檢測(cè)方法簡(jiǎn)介化學(xué)定量方法--氣相色譜法〔GC〕--高效液相色譜法〔HPLC〕--原子熒光(AF)--原子吸收(AA)第二十六頁，共五十七頁。殘留檢測(cè)方法簡(jiǎn)介儀器確證方法

--HPLC-PDA--GC-MS--GC-MS-MS--HPLC-MS--LC-MS-MS第二十七頁，共五十七頁。樣品處理技術(shù)進(jìn)展SPE的應(yīng)用與自動(dòng)化膜別離技術(shù)免疫親和色譜(IAC)凝膠滲透色譜〔GPC〕分子印跡技術(shù)其他技術(shù)〔自動(dòng)索氏提取法、超聲波輔助提取、超臨界流體萃取、強(qiáng)化溶劑萃取、微波輔助萃取、加速溶劑萃取法〕第二十八頁，共五十七頁。色譜分析技術(shù)進(jìn)展超高效液相色譜系統(tǒng)(UPLC)第二十九頁，共五十七頁。色譜分析技術(shù)進(jìn)展高效毛細(xì)管電泳色譜系統(tǒng)(HPCE)第三十頁，共五十七頁。色譜分析技術(shù)進(jìn)展高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——GC-MS/MS、LC-MS/MS第三十一頁，共五十七頁。色譜分析技術(shù)進(jìn)展高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——GC-MS/MS第三十二頁，共五十七頁。色譜分析技術(shù)進(jìn)展高精密度串聯(lián)質(zhì)譜——LC-MS/MS第三十三頁，共五十七頁。色譜分析技術(shù)進(jìn)展高分辨質(zhì)譜系統(tǒng)(Q-TOF、Q-Exactive)第三十四頁，共五十七頁。檢測(cè)技術(shù)開展趨勢(shì)分析檢測(cè)方法篩選方法確證方法快速簡(jiǎn)便價(jià)格廉價(jià)現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用注重時(shí)效性儀器更新快多組分分析靈敏度高提高準(zhǔn)確性第三十五頁，共五十七頁。限制我國(guó)殘留檢測(cè)開展的問題問題：標(biāo)準(zhǔn)依賴性強(qiáng)，但標(biāo)準(zhǔn)滯后。——標(biāo)準(zhǔn)制修訂程序化、效應(yīng)化導(dǎo)致：標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施效果較差。——標(biāo)準(zhǔn)出臺(tái)后很快又被淘汰——現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)限制了檢測(cè)技術(shù)開展第三十六頁，共五十七頁。限制我國(guó)殘留檢測(cè)開展的問題問題：照搬國(guó)外的殘留監(jiān)控內(nèi)容。——檢測(cè)方法缺乏驗(yàn)證——缺乏藥理研究，沒有“中國(guó)特色〞的MRL導(dǎo)致：殘留檢測(cè)根底較差。——對(duì)不同藥物的殘留關(guān)注程度不一第三十七頁，共五十七頁。警惕殘留檢測(cè)開展的誤區(qū)誤區(qū)一：“兩極〞分化檢測(cè)方法篩選方法確證方法本錢上升一物多用注重首創(chuàng)忽略了篩選方法的初衷儀器追新型盲目多殘留水平看指標(biāo)過猶不及不切實(shí)際沒有聯(lián)系第三十八頁，共五十七頁。警惕殘留檢測(cè)開展的誤區(qū)誤區(qū)二：習(xí)慣“參考〞方法可行數(shù)據(jù)可信國(guó)外文獻(xiàn)資料國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)資料實(shí)驗(yàn)條件重現(xiàn)國(guó)外文獻(xiàn)資料國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)資料實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)參考撰稿發(fā)表內(nèi)容相似知其然，而不知所以然難以提升自身水平第三十九頁，共五十七頁。警惕殘留檢測(cè)開展的誤區(qū)誤區(qū)三：只認(rèn)“原形〞藥物消化吸收分布轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)物體內(nèi)藥物原形氧化還原水解結(jié)合結(jié)構(gòu)變化代謝物缺乏藥代動(dòng)力學(xué)研究，盲目檢測(cè)第四十頁，共五十七頁。正確引導(dǎo)殘留檢測(cè)開展方向積極研究藥物代謝和殘留消除規(guī)律藥理學(xué)藥效研究藥代研究藥物對(duì)機(jī)體的實(shí)際作用機(jī)體內(nèi)藥物的生物轉(zhuǎn)化藥物的生物利用度藥物的標(biāo)示殘留物藥物劑型研究消除規(guī)律研究確定監(jiān)控的靶點(diǎn)制定休藥期危險(xiǎn)性評(píng)估第四十一頁，共五十七頁。正確引導(dǎo)殘留檢測(cè)開展方向重視飼料投入品的調(diào)查和監(jiān)測(cè)飼料藥物添加劑國(guó)外引進(jìn)人用藥品企業(yè)自創(chuàng)禁用化合物清單允許添加的藥物要求檢測(cè)違禁藥標(biāo)簽不明示藥名要求出具合格報(bào)告出現(xiàn)干擾物質(zhì)有特征組分未知組分分析新添加物第四十二頁，共五十七頁。第三局部殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)第四十三頁，共五十七頁。殘留實(shí)驗(yàn)室的功能動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測(cè)飼料產(chǎn)品中違禁藥物(危害物質(zhì))檢測(cè)殘留分析技術(shù)的推廣應(yīng)用殘留分析技術(shù)的研發(fā)和標(biāo)準(zhǔn)化工作第四十四頁，共五十七頁。殘留實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)要求硬件要求

—實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地、格局、設(shè)施

—設(shè)備、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試劑耗材

—人員軟件要求

—資質(zhì)認(rèn)證與管理體系建設(shè)第四十五頁，共五十七頁。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地和格局面積要大。根據(jù)具體功能分割，不同實(shí)驗(yàn)室要求不一。〔天平室不宜太大，儀器室不宜太小〕根據(jù)實(shí)驗(yàn)流程分割。明確每個(gè)實(shí)驗(yàn)室名稱，防止功能混亂。第四十六頁，共五十七頁。功能實(shí)驗(yàn)室樣品保存室天平室〔稱量〕樣品預(yù)處理室〔組織勻漿、飼料粉碎、分樣〕樣品檢測(cè)室〔ELISA檢測(cè)〕儀器分析室〔大型儀器設(shè)備〕清洗消毒室試劑保存室〔危險(xiǎn)化學(xué)品〕耗材保存室標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)保存室第四十七頁，共五十七頁。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求必要設(shè)施平安設(shè)施：消防裝置、報(bào)警裝置等。環(huán)境設(shè)施：空調(diào)、通風(fēng)柜、排氣扇、去濕機(jī)等。防護(hù)設(shè)施：醫(yī)藥箱、沖淋裝置。三廢收集與處理設(shè)施。第四十八頁，共五十七頁。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求設(shè)備(按流程分類)樣本的保存設(shè)備：冰箱、培養(yǎng)箱等。樣品前處理設(shè)備：勻漿機(jī)、粉碎機(jī)、濃縮儀等。檢測(cè)用設(shè)備：酶標(biāo)儀、HPLC、LC-MS/MS等。設(shè)備(按功能分類)主要設(shè)備：出具檢測(cè)數(shù)據(jù)。輔助設(shè)備：對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)有一定的影響。第四十九頁，共五十七頁。主要檢測(cè)用儀器設(shè)備儀器名稱數(shù)量總價(jià)(元)酶標(biāo)儀1高效液相色譜儀2氣質(zhì)聯(lián)用儀1液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀1總計(jì)第五十頁，共五十七頁。主要檢測(cè)工程β-腎上腺素能激動(dòng)劑(如瘦肉精、萊克多巴胺)精神類藥物(如安定、氯丙嗪)蛋白同化激素(如睪酮、群勃龍)糖皮質(zhì)激素(如地塞米松、氫化可的松)抗生素(如四環(huán)素類)抗菌藥物(如磺胺類、喹諾酮類、硝基呋喃類)抗蟲藥物(如硝基咪唑類)農(nóng)藥(如六六六、滴滴涕)其他(如蘇丹紅、三聚氰胺)第五十一頁，共五十七頁。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

—標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品

—標(biāo)準(zhǔn)溶液常用試劑

—水

—固體試劑

—液體試劑專用試劑

—試劑盒第五十二頁，共五十七頁。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求常用耗材玻璃儀器〔包括小容量玻璃儀器〕塑料制品〔離心管、槍頭等一次性用品〕防護(hù)用品〔手套、護(hù)目鏡等〕專用耗材色譜耗材〔色譜柱、樣品瓶等〕前處理耗材〔SPE小柱、濾膜等〕保存用耗材(密封袋、標(biāo)準(zhǔn)溶液瓶)第五十三頁，共五十七頁。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的硬件要求人員了解行業(yè)動(dòng)態(tài)，關(guān)注食品平安。沒有固定專業(yè)要求，但要有化學(xué)實(shí)驗(yàn)根底。大型儀器要盡量配備具有操作經(jīng)驗(yàn)的人員。有較高的結(jié)果分析能力和判斷能力。第五十四頁，共五十