生物制藥工藝與技術知識點回顧姓名_________________________地址_______________________________學號______________________密封線1.請首先在試卷的標封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細閱讀各種題目，在規定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物制藥工藝的基本步驟包括：

a)基因克隆

b)真核表達

c)蛋白質分離純化

d)質量控制

e)藥物制劑

2.以下哪種方法不屬于蛋白質的分離純化技術？

a)鹽析

b)超濾

c)沉淀

d)凝膠過濾

e)柱層析

3.重組蛋白質藥物生產中常用的宿主細胞是：

a)大腸桿菌

b)小鼠細胞

c)鼠神經細胞

d)真核細胞

e)酵母細胞

4.以下哪種細胞培養技術適用于大規模生產生物制藥？

a)液體深層發酵

b)微生物發酵

c)組織培養

d)真核細胞培養

e)混合培養

5.生物制藥生產中，以下哪種技術用于提高產率？

a)細胞代謝工程

b)轉基因技術

c)細胞培養優化

d)分子生物學技術

e)生物反應器設計

6.以下哪種方法用于檢測蛋白質的活性？

a)蛋白質印跡

b)質譜分析

c)紫外分光光度法

d)X射線晶體學

e)高效液相色譜法

7.以下哪種技術用于蛋白質的定量分析？

a)熒光光譜法

b)旋光法

c)紅外光譜法

d)原子吸收光譜法

e)電泳法

8.生物制藥生產中，以下哪種技術用于控制污染？

a)過濾

b)滅菌

c)紫外線照射

d)高壓蒸汽滅菌

e)熱壓滅菌

答案及解題思路：

1.答案：a,b,c,d,e

解題思路：生物制藥工藝的基本步驟涵蓋了從基因到藥物的全過程，包括基因克隆、真核表達、蛋白質分離純化、質量控制以及藥物制劑。

2.答案：c

解題思路：鹽析、超濾、凝膠過濾和柱層析都是蛋白質分離純化的常用技術。沉淀通常指的是化學反應或物理變化導致的物質從溶液中析出，不屬于分離純化技術。

3.答案：a,d,e

解題思路：重組蛋白質藥物生產中，大腸桿菌因其簡單和高效而被廣泛使用。真核細胞和酵母細胞也是常用的宿主細胞，因為它們可以更好地進行真核表達。

4.答案：a,d

解題思路：液體深層發酵和真核細胞培養是大規模生產生物制藥的常用技術。微生物發酵通常用于生產抗生素等微生物產品。

5.答案：a,b,c,e

解題思路：細胞代謝工程、轉基因技術、細胞培養優化和生物反應器設計都是提高生物制藥產率的技術。分子生物學技術是支持這些技術的基礎。

6.答案：a

解題思路：蛋白質印跡是檢測蛋白質活性的常用方法，它基于蛋白質與特定配體的結合特性。

7.答案：e

解題思路：電泳法是蛋白質定量分析的標準技術，它可以分離和定量蛋白質混合物中的成分。

8.答案：b,c,d,e

解題思路：過濾、滅菌（包括高壓蒸汽滅菌和熱壓滅菌）、紫外線照射都是控制生物制藥生產中污染的重要技術。二、填空題1.生物制藥工藝的基本步驟包括______、______、______、______、______。

解答：工藝開發、細胞培養、發酵、分離純化、制劑。

2.重組蛋白質藥物生產中常用的宿主細胞是______。

解答：大腸桿菌（Escherichiacoli）。

3.以下哪種方法不屬于蛋白質的分離純化技術？______。

解答：電泳。

4.以下哪種細胞培養技術適用于大規模生產生物制藥？______。

解答：固定床培養。

5.生物制藥生產中，以下哪種技術用于提高產率？______。

解答：發酵過程優化。

6.以下哪種方法用于檢測蛋白質的活性？______。

解答：酶聯免疫吸附測定（ELISA）。

7.以下哪種技術用于蛋白質的定量分析？______。

解答：液相色譜質譜聯用（LCMS）。

8.生物制藥生產中，以下哪種技術用于控制污染？______。

解答：無菌操作技術。

答案及解題思路：

答案：

1.工藝開發、細胞培養、發酵、分離純化、制劑

2.大腸桿菌

3.電泳

4.固定床培養

5.發酵過程優化

6.酶聯免疫吸附測定（ELISA）

7.液相色譜質譜聯用（LCMS）

8.無菌操作技術

解題思路：

1.生物制藥工藝的基本步驟涵蓋了從工藝開發到制劑的全過程，保證藥物的質量和安全性。

2.大腸桿菌因其基因操作簡便、生長速度快等特點，是重組蛋白質藥物生產中的常用宿主細胞。

3.電泳是一種分析蛋白質電泳遷移率的技術，不屬于分離純化范疇。

4.固定床培養是一種適合大規模生產的細胞培養技術，可以提供穩定的環境和高效的細胞生長。

5.發酵過程優化通過調整培養基成分、溫度、pH值等參數，可以提高蛋白質的產率。

6.ELISA是一種常用的蛋白質活性檢測方法，通過酶催化反應來檢測目標蛋白質。

7.LCMS結合了液相色譜和質譜的優點，可以用于蛋白質的定量分析。

8.無菌操作技術是生物制藥生產中控制污染的關鍵，保證最終產品的安全性。三、判斷題1.生物制藥工藝的基本步驟不包括基因克隆。（×）

解題思路：生物制藥工藝的基本步驟通常包括目標基因的克隆、表達載體的構建、宿主細胞的轉化、細胞培養、發酵、蛋白質提取、純化以及制劑等。基因克隆是這一過程中的關鍵步驟之一。

2.重組蛋白質藥物生產中常用的宿主細胞是大腸桿菌。（√）

解題思路：大腸桿菌因其繁殖速度快、基因操作簡單且成本較低，是重組蛋白質藥物生產中常用的宿主細胞。

3.鹽析是一種蛋白質分離純化技術。（√）

解題思路：鹽析是利用蛋白質在不同鹽濃度下溶解度的差異來分離和純化蛋白質的方法，是一種常見的蛋白質分離純化技術。

4.真核細胞培養適用于大規模生產生物制藥。（×）

解題思路：雖然真核細胞培養可以產生與人體內蛋白質相似的蛋白質，但由于培養條件復雜、成本高，一般不適用于大規模生產生物制藥。

5.細胞代謝工程是用于提高產率的技術。（√）

解題思路：細胞代謝工程通過改變細胞內代謝途徑，優化細胞代謝，從而提高目標產物的產率。

6.蛋白質印跡用于檢測蛋白質的活性。（×）

解題思路：蛋白質印跡（Westernblot）主要用于檢測特定蛋白質的存在，而不是蛋白質的活性。蛋白質活性通常通過其他生物化學方法來檢測。

7.紫外分光光度法用于蛋白質的定量分析。（√）

解題思路：紫外分光光度法是常用的蛋白質定量分析方法，基于蛋白質對紫外光的吸收特性來定量。

8.過濾是生物制藥生產中用于控制污染的技術。（×）

解題思路：過濾是生物制藥生產中常用的分離純化技術，但主要用于分離不同大小的分子或顆粒，而非直接用于控制污染。控制污染通常涉及無菌操作和消毒等手段。四、簡答題1.簡述生物制藥工藝的基本步驟。

a.目標蛋白的篩選和鑒定

b.目標蛋白的表達系統構建

c.目標蛋白的發酵和生產

d.目標蛋白的分離純化

e.目標蛋白的檢測與質量控制

f.目標蛋白的包裝和儲存

2.舉例說明幾種常用的蛋白質分離純化技術。

a.離心技術：如密度梯度離心、等速離心等

b.沉淀技術：如鹽析、有機溶劑沉淀等

c.吸附技術：如親和層析、離子交換層析等

d.電泳技術：如SDSPAGE、毛細管電泳等

e.液相色譜技術：如反相色譜、親和色譜等

3.簡述重組蛋白質藥物生產中宿主細胞的選擇依據。

a.宿主細胞的遺傳穩定性

b.宿主細胞的生長速率和繁殖能力

c.宿主細胞的表達水平

d.宿主細胞的代謝活性

e.宿主細胞的適應性和抗逆性

4.簡述提高生物制藥產率的方法。

a.優化發酵培養基成分

b.提高發酵溫度和pH值

c.優化培養條件，如溶氧、攪拌等

d.改進宿主細胞的表達系統

e.優化分離純化工藝

5.簡述檢測蛋白質活性的方法。

a.生物化學分析法：如酶活力測定、抗原抗體反應等

b.生物物理分析法：如紫外光譜、熒光光譜等

c.生物電分析法：如電導率、阻抗等

d.生物成像分析法：如熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等

6.簡述蛋白質定量分析的方法。

a.比色法：如紫外吸收法、熒光法等

b.比濁法：如濁度計測定、散射光度計測定等

c.電化學法：如電流法、電導率法等

d.質譜法：如基質輔助激光解吸電離質譜法、電噴霧電離質譜法等

7.簡述生物制藥生產中控制污染的技術。

a.設備清洗和消毒

b.生產環境的凈化和監控

c.原料和中間體的質量控制

d.生產過程的無菌操作

e.品管和實驗室質量控制

8.簡述生物制藥生產中常用的生物反應器類型。

a.恒溫培養反應器：如發酵罐、細胞培養袋等

b.低溫培養反應器：如冷室培養、冰凍保存等

c.流動培養反應器：如微流控芯片、連續培養系統等

d.生物膜培養反應器：如生物反應器膜生物反應器、生物膜反應器等

答案及解題思路：

1.答案：生物制藥工藝的基本步驟包括目標蛋白的篩選和鑒定、目標蛋白的表達系統構建、目標蛋白的發酵和生產、目標蛋白的分離純化、目標蛋白的檢測與質量控制、目標蛋白的包裝和儲存。

解題思路：按照生物制藥工藝的基本流程，依次列出各步驟。

2.答案：常用的蛋白質分離純化技術有離心技術、沉淀技術、吸附技術、電泳技術、液相色譜技術。

解題思路：列舉幾種常見的蛋白質分離純化技術，并簡要說明其原理和應用。

3.答案：宿主細胞的選擇依據包括遺傳穩定性、生長速率和繁殖能力、表達水平、代謝活性、適應性和抗逆性。

解題思路：從宿主細胞的特性出發，闡述選擇宿主細胞時需要考慮的幾個關鍵因素。

4.答案：提高生物制藥產率的方法有優化發酵培養基成分、提高發酵溫度和pH值、優化培養條件、改進宿主細胞的表達系統、優化分離純化工藝。

解題思路：根據影響生物制藥產率的因素，提出提高產率的方法。

5.答案：檢測蛋白質活性的方法有生物化學分析法、生物物理分析法、生物電分析法、生物成像分析法。

解題思路：列舉幾種檢測蛋白質活性的方法，并簡要說明其原理和應用。

6.答案：蛋白質定量分析的方法有比色法、比濁法、電化學法、質譜法。

解題思路：列舉幾種蛋白質定量分析的方法，并簡要說明其原理和應用。

7.答案：生物制藥生產中控制污染的技術有設備清洗和消毒、生產環境的凈化和監控、原料和中間體的質量控制、生產過程的無菌操作、品管和實驗室質量控制。

解題思路：從生產過程中可能出現的污染環節出發，闡述控制污染的技術措施。

8.答案：生物制藥生產中常用的生物反應器類型有恒溫培養反應器、低溫培養反應器、流動培養反應器、生物膜培養反應器。

解題思路：列舉幾種生物制藥生產中常用的生物反應器類型，并簡要說明其特點和應用。五、論述題1.論述生物制藥工藝技術在現代醫藥領域的應用。

答案：

生物制藥工藝技術在現代醫藥領域的應用廣泛，主要包括以下方面：

（1）基因工程藥物：如重組人胰島素、干擾素、單克隆抗體等。

（2）組織工程與再生醫學：利用生物制藥技術進行細胞培養、組織工程等，實現人體組織的再生和修復。

（3）疫苗生產：如流感疫苗、乙肝疫苗等，通過生物制藥技術提高疫苗的效力和安全性。

（4）生物治療：如免疫細胞治療、基因治療等，利用生物制藥技術對抗腫瘤、遺傳病等疾病。

解題思路：

首先介紹生物制藥工藝技術在現代醫藥領域的應用范圍，然后針對每個應用領域進行詳細闡述，結合實際案例進行分析。

2.論述生物制藥生產中宿主細胞選擇的重要性。

答案：

宿主細胞選擇在生物制藥生產中具有以下重要性：

（1）影響生物活性物質的產量和質量。

（2）影響生物反應器的操作條件和工藝流程。

（3）影響生產成本和效率。

（4）影響生物制品的安全性。

解題思路：

首先闡述宿主細胞選擇對生物制藥生產的重要性，然后從產量、質量、操作條件、成本、效率及安全性等方面進行詳細分析。

3.論述生物制藥生產中質量控制的重要性。

答案：

生物制藥生產中質量控制的重要性體現在以下方面：

（1）保證生物制品的安全性和有效性。

（2）滿足國內外法規要求。

（3）提高產品質量和競爭力。

（4）降低生產成本和風險。

解題思路：

首先介紹生物制藥生產中質量控制的重要性，然后從安全性、法規、質量、成本和風險等方面進行詳細闡述。

4.論述生物制藥生產中生物反應器設計的要求。

答案：

生物反應器設計應滿足以下要求：

（1）適合宿主細胞的生長和代謝。

（2）提供穩定、可控的發酵環境。

（3）保證生物制品的質量和產量。

（4）降低生產成本和風險。

解題思路：

首先闡述生物反應器設計的要求，然后從宿主細胞、發酵環境、產品質量、成本和風險等方面進行詳細分析。

5.論述生物制藥生產中環境污染及防治措施。

答案：

生物制藥生產過程中可能產生環境污染，主要包括以下方面：

（1）廢水排放：含有機物、微生物、藥物殘留等。

（2）廢氣排放：含揮發性有機物、氮氧化物等。

（3）固體廢棄物：含生物活性物質、培養基等。

防治措施：

（1）廢水處理：采用生物處理、化學處理等方法。

（2）廢氣處理：采用吸附、催化燃燒等方法。

（3）固體廢棄物處理：進行資源化利用、無害化處理。

解題思路：

首先介紹生物制藥生產中可能產生的環境污染，然后針對廢水、廢氣、固體廢棄物三個方面進行分析，并提出相應的防治措施。

6.論述生物制藥生產中生物安全與生物倫理問題。

答案：

生物制藥生產中生物安全與生物倫理問題主要包括：

（1）生物安全：防止病原體、毒素等對人員和環境造成危害。

（2）生物倫理：遵循倫理原則，保證生物制品的生產和應用符合倫理規范。

解題思路：

首先介紹生物安全與生物倫理問題，然后分別從生物安全和生物倫理兩個方面進行詳細分析。

7.論述生物制藥產業在國民經濟中的地位和作用。

答案：

生物制藥產業在國民