基因工程1、（2023·山東菏澤·山東省鄄城縣第一中學校考三模）CRISPR/Cas9是一種基因編輯技術(shù)，Cas9蛋白能與人工設計的sgRNA形成復合體（如圖）．利用該技術(shù)可以對DNA進行一系列的定向改造。下列相關(guān)敘述錯誤的是（

）

A．Cas9蛋白屬于限制酶，能切割目的基因B．sgRNA具有能與目的基因發(fā)生堿基互補配對的結(jié)構(gòu)C．基因編輯技術(shù)能夠定點插入、刪除或替換部分堿基對D．通過基因編輯技術(shù)引起的變異屬于基因重組2、（2023·山東濰坊·濰坊一中統(tǒng)考模擬預測）某遺傳病由一對等位基因控制，致病基因有兩種類型突變，每種突變基因所編碼的蛋白質(zhì)分子量不同，其系譜圖及相關(guān)蛋白質(zhì)電泳結(jié)果如圖。下列說法正確的是（

）A．該病為常染色體或伴X染色體隱性遺傳病B．Ⅲ-1、Ⅲ-2相應蛋白質(zhì)的電泳條帶相同C．Ⅲ-3攜帶的致病基因來自I-2的可能性為1/2D．顯性基因的堿基數(shù)目大于隱性基因的堿基數(shù)目3、（2023·山東·泰安一中校考模擬預測）白細胞介素-2（IL-2）參與移植排斥反應，是免疫調(diào)節(jié)因子，對機體的免疫應答和抗病毒感染等有重要作用。科研人員將含IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒pPIC9K（部分結(jié)構(gòu)如圖所示）構(gòu)建成重組質(zhì)粒，并導入酵母菌GS115（組氨酸缺陷菌株）中，篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。下列敘述錯誤的是（）

A．組氨酸合成基因可作為標記基因篩選導入重組質(zhì)粒的酵母菌細胞B．構(gòu)建重組質(zhì)粒時可選用AvrⅡ和NotⅠ切割目的基因和pPIC9K質(zhì)粒C．重組質(zhì)粒導入酵母菌GS115前，需要先用Ca2+處理酵母菌GS115細胞D．抑制IL-2基因的表達可在一定程度上減輕機體器官移植后的免疫排斥反應4、（2023·山東泰安·統(tǒng)考模擬預測）通過設計引物，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應體系中引物1和引物2的5′端分別設計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。下列有關(guān)敘述正確的是（

）

A．在PCR反應體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、Taq酶等B．第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/2C．引物中設計兩種限制酶識別位點有利于目的基因定向插入運載體D．第2輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因5、（2023·山東泰安·統(tǒng)考模擬預測）環(huán)境DNA（eDNA）是“在環(huán)境樣品中所有被發(fā)現(xiàn)的不同生物的基因組DNA的混合”，它涵蓋的范圍非常廣泛，無論是土壤、空氣、液體，甚至是排泄物，都可以從中找到可作為樣品的eDNA。對所得的樣品，可使用普通的聚合酶鏈式反應(PCR)或直接霰彈槍法(shotgunstrategy)測序，能夠方便獲得多個DNA序列。2018年4月12日，美國華盛頓州立大學助理教授CarenGoldberg通過檢測環(huán)境DNA(eDNA)，確證了全球第四只斑鱉的存在。下列有關(guān)說法不正確的是（

）A．可分析環(huán)境樣品中的eDNA分別是屬于哪些物種，這與傳統(tǒng)的動植物分類調(diào)查其實是一致的B．eDNA技術(shù)可尋找環(huán)境中是否有單一物種的DNA，用于研究和追蹤珍稀物種的分布C．使用PCR測序，能夠方便獲得DNA序列D．每個eDNA中都有一個游離的磷酸基團6、（2023·山東聊城·統(tǒng)考三模）Cre-loxP系統(tǒng)能實現(xiàn)特定基因的敲除(如圖1)。把幾種熒光蛋白基因和Cre酶能識別并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起，構(gòu)建表達載體T(如圖2)。部分熒光蛋白基因會被Cre酶隨機“剪掉”,且兩個loxP1之間或兩個loxP2之間的基因，最多會被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表達，隨機呈現(xiàn)不同的顏色。下列說法錯誤的是（

）

A．構(gòu)建表達載體T時用到的工具包括限制酶、DNA連接酶B．若小鼠細胞含一個表達載體T(不含Cre酶),其肌肉組織細胞呈無色C．若小鼠細胞含一個表達載體T(含Cre酶),其腦組織細胞只能呈紅色或黃色D．若小鼠細胞含兩個表達載體T(含Cre酶),其腦組織細胞可能出現(xiàn)兩種顏色7、（2023·山東煙臺·統(tǒng)考模擬預測）圖1是一個家庭中某單基因遺傳病的遺傳系譜圖。用特定限制酶切割Ⅲ-1、Ⅲ-2、Ⅲ-3與該病相關(guān)的基因，產(chǎn)生了大小不同的幾種片段。已知被檢測的基因為142bp（bp表示堿基對），結(jié)果如圖2所示。下列敘述錯誤的是（

）

A．由圖1可推斷該病是由常染色體上的隱性基因控制的遺傳病B．該遺傳病的致病基因比正常基因多1個如圖2所示的特定酶的酶切位點C．該遺傳病形成的原因是正常基因中發(fā)生了堿基對的缺失D．圖1中Ⅲ-2與一個該致病基因攜帶者婚配，子代患該病的概率為08、（2023·山東·山東師范大學附中校考模擬預測）下列關(guān)于基因工程及其應用的敘述，錯誤的是（

）A．花粉管通道法可以用微量注射器將含有目的基因的DNA溶液直接注入子房中B．只要從轉(zhuǎn)基因棉花中檢測到Bt抗蟲蛋白，就代表轉(zhuǎn)基因抗蟲棉培育成功C．Bt抗蟲蛋白被分解為多肽后與害蟲腸上皮細胞的特異性受體結(jié)合，導致細胞膜穿孔D．干擾素是一種糖蛋白，科學家用基因工程方法從大腸桿菌細胞內(nèi)獲得了干擾素9、（2023·山東濟南·濟南市歷城第二中學校考一模）（多選題）DNA瓊脂糖凝膠電泳的分子篩效應是指作為支持介質(zhì)的瓊脂糖，具有網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)，使大分子物質(zhì)在通過時受到較大阻力，借此分離不同大小的DNA片段。下列說法正確的是（

）A．瓊脂糖凝膠電泳可用于分離、鑒定DNA分子的混合物B．雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越大C．凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，用于分離后DNA的檢測D．凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來10、（2023·山東煙臺·統(tǒng)考模擬預測）（多選題）紅細胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，某科研團隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．構(gòu)建表達載體時需將EPO基因插入乳腺蛋白基因的啟動子的下游B．一般情況下，該轉(zhuǎn)基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺細胞中表達C．用顯微注射技術(shù)將含EPO基因的表達載體導入羊的乳腺細胞中可合成并提取EPOD．用PCR擴增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列11、（2023·山東菏澤·山東省鄄城縣第一中學校考三模）（多選題）PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針兩端分別標記一個報告熒光基團（Q蛋白質(zhì)）和一個淬滅熒光基團（R蛋白質(zhì)）。開始時，探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收，檢測不到熒光信號；當TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸至探針R處，會水解淬滅熒光基團，熒光監(jiān)測系統(tǒng)從而可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成的完全同步。下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．引物、探針和模板三者之間通過堿基互補配對相互結(jié)合B．TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向總是從子鏈的5'端向3'端延伸C．PCR產(chǎn)物的量與熒光信號的累積成正相關(guān)D．報告熒光基團和淬滅熒光基團的組成單位是脫氧核苷酸12、（2023·山東青島·統(tǒng)考三模）炎癥性腸病（IBD）是一種易導致結(jié)腸癌的慢性疾病，患者腸道內(nèi)會產(chǎn)生硫代硫酸鹽。科研人員以小鼠為研究對象，建立了下圖所示的炎癥性腸病檢測模型，GFP基因是綠色熒光蛋白基因。

(1)據(jù)圖分析，可以通過檢測熒光強弱來判定小鼠腸道內(nèi)硫代硫酸鹽的濃度，其原因是。(2)研究者利用基因工程技術(shù)構(gòu)建含硫代硫酸鹽檢測傳感器的大腸桿菌工程菌，通過PCR擴增R基因時應該選擇的引物是，在A、B兩端引物的5′端需添加的限制酶識別序列為和。限制酶識別序列和酶切位點如下表：限制酶HindⅢBamHⅠPastⅠEcoRⅠBglⅡ識別序列（5′→3′）A↓AGCTTG↓GATCCC↓T