白細胞檢驗

WBC、NE（中性粒細胞百分率）NE＃（中性粒細胞絕對值）、LY、LY＃、MO、MO＃、EO、EO＃、BA、BA＃PLT、MPV（血小板平均體積）PDW（血小板分布寬度）PCT（血小板比容）PLCR（大血小板比率）白細胞計數定義：測定單位體積外周血中各種白細胞的總數。血細胞分析儀法顯微鏡計數法原理用白細胞稀釋液，將血液稀釋一定倍數并破壞紅細胞后，滴入計數池中，在顯微鏡下計數一定范圍內的白細胞數，經換算即可求得每升血液中各種白細胞的總數。

器材1、顯微鏡2、微量吸管3、計數板4、蓋玻片

質量控制一、誤差技術誤差：由于操作不正規或器材不精確造成的誤差。這種誤差通過主觀努力可以避免或顯著減小。器材不符合要求采血部位不當稀釋倍數不準充液不當血液發生凝固包括計數域誤差、吸管誤差和計數室誤差。在計數室內計數的面積越大，計數的細胞越多，計數室和吸管使用的次數越多，誤差越小。若細胞數太低（＜3×109/L），可數8個大方格，或降低稀釋倍數；若細胞數太高（＞15×109/L），可適當增加稀釋倍數。固有誤差：二、有核紅細胞的影響校正公式：校正后的血細胞數/L＝X×100/（100+Y）

X：校正前的白細胞數

Y：白細胞分類計數時，計數100個白細胞的同時計數到的有核紅細胞。例：某病人白細胞計數結果為5×109/L，白細胞分類計數時，計數100個白細胞的同時發現20個有核紅細胞，請問該病人真正的白細胞計數結果為多少？

WBC＝

5×109×100/（100+20）

/L＝

4×109/L

三.常規考核標準（RCS）RCS(routinecheckingstandard)RCS=（四大格的所見白細胞最大值－最小值）/四大格所見白細胞平均值*100%白細胞≤4×109/L者，RCS＜30%白細胞（4.1－14.9）

×109/L者，RCS＜20%白細胞≥15×109/L者，RCS＜15%

方法學評價血細胞分析儀法：操作簡單、效率高、重復性好適合于大批量的標本集中監測缺點：儀器昂貴，準確性取決于儀器的性能及工作狀態，使用前需進行儀器的校準，堅持日常質控顯微鏡計數法：操作簡單、費用低廉，試用于基層醫療單位及分散就診缺點：費時，重復性差，結果的準確性取決于操作者的技術水平，作為儀器檢驗的校準白細胞分類計數

DifferentialCount（DC）一.外周血五種白細胞中性粒細胞:中性桿狀核粒細胞中性分葉核粒細胞嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞單核細胞淋巴細胞二.中性粒細胞形態細胞呈圓形，直徑10－15um細胞質豐富，呈粉紅色，含較多細小、均勻、密集的針尖樣的染淡粉紅色的中性顆粒細胞核為深紫紅色，染色質致密成塊狀，粗糙核最窄處＞1/3最寬處中性桿狀核粒細胞核最窄處＜1/3最寬處中性分葉核粒細胞嗜酸性粒細胞細胞呈圓形，直徑13－15um；胞核多為兩葉，呈眼鏡狀，也可偶見分葉的，染色質粗糙染紫紅色胞漿內充滿粗大、整齊、均勻、排列緊密的橘紅色嗜酸性顆粒。

嗜堿性粒細胞細胞呈圓形，直徑10－12um；細胞核常被顆粒遮蓋，核著色較淡，模糊不清。胞質量較少，呈淡紅色，含少量粗大但大小不均、排列不規則，分布不均勻的紫黑色嗜堿性顆粒。單核細胞細胞呈圓形或不規則型，直徑15－25um。核大，呈不規則圓形、腎形、馬蹄形或不規則分葉，染色質細致疏松如網狀，染色質和副染色質對比明顯，染紫紅色。胞漿豐富，染淡藍或灰蘭色，呈毛玻璃樣半透明，含大量細小、灰塵樣的紫紅色嗜天青顆粒。小淋巴細胞細胞呈圓形，直徑6－10um。核呈圓形，偶見凹陷，染色質粗糙致密成塊，染色質和副染色質界線不清。胞質量少，僅在核的一側出現一線天藍或深藍色胞漿，甚至完全不見。

大淋巴細胞細胞呈圓形，直徑10－15um。核呈圓形或橢圓形，常偏于一側，染色質致密呈塊狀，但要比小淋巴細胞略為疏松，紫紅色。胞質豐富，呈透明天藍色，常有少量大而稀疏的紫紅色嗜天青顆粒。

三.白細胞分類計數原理(一).電阻抗法通過微孔的血細胞所產生的脈沖信號幅度與血細胞體積成正比。白細胞脈沖信號的大小由被計數細胞在溶血液中的大小決定。

小細胞中間細胞大細胞flRELNOR1R2R3R4WBC白細胞體積分布直方圖(二).容量、電導、光散射（VCS）白細胞分類法

根據流體力學原理使用鞘流技術，使溶血后液體內剩余白細胞逐個通過檢測器接受VCS三種技術的同時檢測。CoulterMaxm血細胞分析儀

體積（volumeV):

細胞體積的大小

電導性（conductivityC):細胞核與細胞質的比例、顆粒的大小和密度

光散射(scatterS):檢查細胞膜表面特征和內部結構。光散射對細胞顆粒的結構和密度的區分能力強，粗顆粒產生的光散射比細顆粒強。淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統采用電阻抗法（測量細胞體積）和射頻（檢測細胞核和顆粒密度）的聯合檢測。細胞懸浮液中加入溶血劑使紅細胞溶解，白細胞形態改變不大。當這些細胞通過檢測系統時，同時進行直流和射頻兩種電流的檢測。以DC（細胞大小）信號為橫坐標；以RF（核及顆粒的密度）為縱坐標結果將細胞分成淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞三個群體。

射頻檢測原理

電阻法檢測原理手工分類計數方法1、制作血片并染色，干燥后待用2、低倍鏡觀察白細胞的數量、分布和染色情況3、選擇血涂片體尾交界處染色良好的部位，用油鏡分類100－200個細胞4、記錄五種白細胞的細胞數四.鏡檢部位

一般體積小的細胞分布在頭部和體部比較多；而尾部和兩側以中性粒細胞和單核細胞較多，異常大的細胞在片尾末端出現，所以在體尾交界處觀察細胞。白細胞總數＜3×109/L，分類50－100個細胞白細胞總數＞15×109/L，分類200個細胞其間的白細胞數，分類100個細胞五.記錄方法手工完全記錄法：將所見的白細胞按其分類用“正”或“++++”的方法記錄至所需總數手工半記錄法：用上法記錄除中性粒細胞以外的各種白細胞，同時默記總數至所需細胞數分類記數器法六.白細胞計數及分類計數的臨床意義

分裂池：原、早、中成熟池：晚、桿儲備池：桿、分循環池：血液循環邊緣池：附著骨髓外周血（一）、生理變化

1.年齡

2.日間變化:

3.運動、疼痛、和情緒的影響

4.妊娠和分娩

結論：白細胞計數波動在30%以下，在臨床診斷上無意義，只有通過定時和反復觀察才有意義。（二）.病理變化

1.中性粒細胞增多急性感染、嚴重組織損傷、急性中毒、急性大出血白血病或惡性腫瘤。2.中性粒細胞減少某些感染、某些血液病、慢性?；瘬p傷、自身免疫性疾病、脾功能亢進。（二）.病理變化

淋巴細胞增多某些病毒、細菌感染、某些慢性感染、淋巴細胞白血病淋巴細胞減少接觸放射線及應用腎上腺皮質激七.嗜酸性粒細胞直接計數原理:用嗜酸性粒細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數，同時破壞紅細胞和大部分其它白細胞，并將嗜酸性粒細胞著色，然后滴入細胞計數池中，計數一定范圍內嗜酸性粒細胞數，即可求得每升血液中嗜酸性粒細胞數。

臨床意義:1.生理變化:興奮刺激（交感興奮）↓下丘腦↓釋放ACTH腎上腺皮質單核—巨噬（產生腎上腺皮質激素）吞噬分解E