選修1專題2課題1微生物的實驗室培養（測）（滿分60分，40分鐘完成）班級姓名總分一、單選題（30分，每題3分）1.下列檢測某熟制食品中大腸桿菌是否超標的實驗操作，不合理的是()A.待檢測食品需要經過滅菌操作后取樣檢測B.應設置未接種的培養基，作為實驗的對照C.用稀釋涂布平板法接種計數大腸桿菌的活菌數D.接種后將培養皿倒置并在適宜溫度下培養【答案】A【解析】待檢測食品滅菌后會將大腸桿菌殺死，則不能檢測大腸桿菌是否超標，A錯誤；應設置未接種的培養基，作為實驗的對照，B正確；用稀釋涂布平板法接種計數大腸桿菌的活菌數，C正確；接種后應該將培養皿倒置，并在適宜溫度下培養，D正確。2.關于微生物的營養，說法正確的是（）A．同一種物質不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的無機物僅提供無機鹽D．無機氮源也可能提供能量【答案】D【解析】對異養微生物來說，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源，如牛肉膏，A錯誤；CO2和N2是無機物，也是某些微生物的碳源和氮源，B錯誤；有機碳源能提供能量，無機碳源不能提供能量，C錯誤；自然界中一些微生物如硝化細菌，可以以無機氮源合成細胞物質，同時通過氧化外界無機物獲得生長所需能量，叫做化能合成作用，D正確。3.下列有關平板劃線接種法的操作錯誤的是（）A．將接種環放在火焰上灼燒B．將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環液C．蘸取菌液和劃線要在火焰旁進行D．劃線時要將最后一區的劃線與第一區的劃線相連【答案】D【解析】要將接種環在火焰上灼燒滅菌，A正確；應將冷卻的接種環伸入菌液蘸取，溫度高會殺死菌種，B正確；蘸取菌液和劃線都要在火焰旁進行，防止雜菌的污染，C正確；劃線時最后一區的劃線與第一區劃線不能相連，D錯誤；答案是D。4.稀釋涂布平板法是微生物培養中的一種常用的接種方法。下列相關敘述錯誤的是（）A．操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B．需將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到固體培養基表面C．不同濃度的菌液均可在培養基表面形成單個的菌落D．操作過程中對培養基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理【答案】C【解析】稀釋涂布平板法，包括系列稀釋和涂布平板兩個過程，涂布平板之前需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋，A正確．涂布平板時，需要將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養基表面，B正確；只有稀釋度足夠大的菌液才能在培養基表面形成單個的菌落，C錯誤；操作過程中對培養基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理，以防止雜菌污染，D正確；答案是C。5.用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時（）①都需要用固體培養基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用菌落數來計數活菌A．①②B．①③C．②④D．③④【答案】B【解析】①正確，固體培養基上面可以獲得大腸桿菌的單菌落；②錯誤，分離純化大腸桿菌可使用接種環或涂布器進行劃線法或涂布平板法接種；③正確，在火焰旁會形成一個相對無菌區來進行接種，可以避免雜菌感染；④錯誤，平板劃線法只能用來分離純化獲得單菌落，而不能用來計數。故答案選B。6.下圖是實驗室使用某種接種方法在培養基上培養某種微生物的結果，相關說法錯誤的是()A.該圖最可能是用稀釋涂布平板法進行接種的B.在操作時，為防止雜菌污染，需進行嚴格的消毒和滅菌C.恒溫培養箱中培養時需要將平板倒置D.該接種方法常用于微生物的分離純化【答案】A【解析】培養基上微生物的分布有疏有密，應為劃線培養法接種，該接種方法常用于微生物的分離純化，A項錯誤，D項正確；在操作時，為防止雜菌污染，應對培養基和接種針等進行滅菌，對操作空間、衣著和手進行消毒，B項正確；恒溫培養箱中培養時需要將平板倒置，防止冷凝水滴在培養基上，C項正確。7.平板劃線操作時劃出了五個區域，適宜培養后，觀察結果是（）A．從第一區域到第五區域菌落數逐漸增加B．從第一區域到第五區域菌落數逐漸減少C．五個區域內的菌落數差不多D．中間區域較多，兩端區域較少【答案】B【解析】平板劃線法通過接種環在固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面；在數次劃線后培養，可以分離出由一個細菌繁殖而來的肉眼可見的子細胞群即菌落。因此，除了第一次劃線樣品中獲取菌種，以后的每次劃線都是從上一次劃線獲取菌種，從而達到稀釋分離的目的，最終得到由一個細菌繁殖而來的肉眼可見的子細胞群為菌落，故從第一區域到第五區域菌落數逐漸減少，B項正確，A、C、D項錯誤。8.下列關于微生物的實驗室培養過程中的操作屬于滅菌的是（）A．接種前用酒精棉球擦拭雙手和工作臺面B．牛奶在80℃下煮15min以殺死其中的微生物C．接種前灼燒接種環D．通過紫外光或者噴灑石炭酸溶液處理實驗室【答案】C【解析】接種前用酒精棉球擦拭雙手和工作臺面屬于消毒，故A錯誤。牛奶在80℃下煮15min以殺死其中的微生物屬于消毒，故B錯誤。灼燒接種環屬于滅菌，故C正確。用紫外光或者噴灑石炭酸溶液處理實驗室屬于消毒，故D錯誤。9.下列在微生物的實驗室培養過程中，關于平板劃線操作的敘述正確的是（）A．使用已滅菌的接種環、培養皿，操作過程中不再滅菌B．打開含菌種的試管需要通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞好棉塞C．將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線即可D．最后應將平板倒置，放入培養箱中培養【答案】D【解析】使用已滅菌的接種環、培養皿，操作過程中還需滅菌，因為接種環會感染細菌，A錯誤；打開含菌種的試管需通過火焰滅菌，取出菌種后還需通過火焰滅菌，再塞上棉塞，B錯誤；將沾有菌種的接種環迅速伸人平板內，劃三至五條平行線，還需蓋上培養皿蓋，防止空氣中雜菌混入，C錯誤；最后將平板倒置，防止蓋子中水滴落引起污染，有利培養基水蒸發，D正確。10.黑茶是以肉食為主的中國邊疆游牧民族的主要飲品。在一系列微生物的作用下，黑茶會產生一種對人體非常有益的金黃色顆粒“金花”。研究人員對“金花”中的微生物進行了分離和鑒定，過程如圖。下列說法不正確的是()A.向“金花”樣品中加入蒸餾水制成樣品懸液B.可根據菌落特征對菌種進行初步鑒定C.涂布平板上長出的菌落可通過劃線進一步純化D.可通過基因組測序對菌種進行準確鑒定【答案】A【解析】向“金花”樣品中加入無菌水制成樣品懸液，A項錯誤；可根據菌落特征對菌種進行初步鑒定，B項正確；涂布平板上長出的菌落可通過劃線進一步純化，C項正確；可通過基因組測序對菌種進行準確鑒定，D項正確。二、非選擇題（30分，每格2分）11.（14分）微生物培養技術在醫療、工業生產等方面均有應用。燒傷病人容易感染綠膿桿菌，臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。請回答下列相關問題：(1)適于綠膿桿菌生長的培養基中的營養成分一般含有___________，除了提供以上幾種主要營養物質外，培養基還需要滿足微生物生長對___________、特殊營養物質以及氧氣的要求。(2)若對綠膿桿菌進行分離計數，需要將含有綠膿桿菌的菌液采用___________法接種于固體培養基表面進行培養，這種接種方法的好處是___________。(3)對培養基進行滅菌后，待培養基冷卻至50℃時，需要在___________附近倒平板。接種時所用的接種環在接種前后都需要通過___________法滅菌。(4)將分別含等劑量不同抗生素的相同大小的小濾紙圓片均勻置于該平板上的不同位置，在適宜條件下培養一段時間，結果濾紙片周圍均出現透明圈，這說明綠膿桿菌對實驗所用抗生素表現為___________(填“敏感”或“不敏感”)。【答案】(1)碳源、氮源、水和無機鹽

pH(2)稀釋涂布平板可得到單個的菌落(或可將菌群分散成單個的細菌)(3)酒精燈火焰灼燒敏感【解析】（1）適于綠膿桿菌生長的培養基中的營養成分一般含有碳源、氮源、水和無機鹽，除了提供以上幾種主要營養物質外，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。（2）若對綠膿桿菌進行分離計數，需要將含有綠膿桿菌的菌液采用稀釋涂布平板法接種于固體培養基表面進行培養，這種接種方法的好處是可得到單個的菌落(或可將菌群分散成單個的細菌)。（3）對培養基進行滅菌后，待培養基冷卻至50℃時，需要在酒精燈火焰附近倒平板；接種時所用的接種環在接種前后都需要通過灼燒法滅菌。（4）將含有綠膿桿菌的菌液采用稀釋涂布平板法接種于固體培養基表面，稀釋的目的是為了最終在培養基表面形成單菌落，濾紙片周圍均出現透明圈說明綠膿桿菌對實驗所用抗生素表現為敏感，已經被抗生素殺死。12.（16分）炭疽桿菌是一類需氧芽胞桿菌，其代謝過程會將大量的代謝產物排出胞外。由炭疽桿菌引起的炭疽病是一種人畜共患、死亡率較高的急性傳染病。對炭疽病疑似患者，可根據噬菌體的宿主專一性，通過下圖所示的實驗確診。請據圖回答下列問題：（1）噬菌體的主要化學成分是____，上述實驗中噬菌體與炭疽桿菌的種間關系屬于____。（2）微生物接種的方法很多，最常用的是________，經上述方法獲得的純種微生物如需長期保存，可采用____的方法。（3）②是將分離培養獲得的可疑菌挑選出來進行接種，此過程中對配制的液體培養基等需采取的滅菌方法是____，該培養基所用的碳源為____（無機碳／有機碳）。（4）在過程③中細菌大量繁殖，并因為________的積累而使液體培養基變渾濁。取培養后的等量菌液加入A、B試管，再將如圖處理后的兩試管放在35℃環境下培養6小時后觀察，若實驗組液體培養基的渾濁度比對照組（高或低）【答案】（1）DNA和蛋白質寄生（2）稀釋涂布平板法和平板劃線法甘油管藏（3）高壓滅菌有機碳（4）代謝產物低【解析】（1）噬菌體是病毒，主要化學成分是DNA和蛋白質，如圖所示，上述實驗中噬菌體與炭疽桿菌的種間關系屬于寄生。（2）微生物接種的方法很多，最常用的是稀釋涂布平板