二甲雙胍在肝癌治療中的多維度解析：作用、機制與臨床轉化一、引言1.1研究背景與意義肝癌作為全球范圍內嚴重威脅人類健康的重大疾病，其發病率和死亡率長期居高不下，給患者家庭和社會帶來了沉重負擔。據統計，在2018年中國有39萬多人新發肝癌，位于新發惡性腫瘤的第三位，同年有36萬多人死于肝癌，死亡人數也居惡性腫瘤第三位，且全世界47%的肝癌發生在中國。原發性肝癌是全球常見的惡性腫瘤之一，也是我國第2位的腫瘤死亡原因，其惡性程度高、預后差。盡管隨著現代生物醫學技術、臨床外科技術、微創治療技術等的發展，肝癌的臨床診治工作水平有所提高，手術切除率、術后生存率及術后生活質量均有一定改善，但與其他腫瘤治療相比，肝癌的療效仍遠不盡人意。肝癌病因具有多樣性，這使得肝癌治療難以找到單一的特效方法，加上外科治療的高復發率和非外科治療的不徹底性，導致綜合治療成為必然趨勢，然而綜合治療若不合理，療效可能適得其反。二甲雙胍作為臨床常用的2型糖尿病治療藥物，近年來大量實驗研究或臨床證據發現其還具有多種藥理活性，如抗腫瘤、減肥、延緩衰老、改善器官纖維化等。其抗腫瘤藥理作用逐漸成為研究熱點，在肝癌治療領域展現出潛在的應用價值。研究發現二甲雙胍可以通過影響轉錄復合體的相分離狀態，發揮抑制肝癌惡性演進的作用。還有研究表明二甲雙胍可通過靶向PEN2激活AMPK通路，調節腸道菌群等發揮藥理作用，由于其分子結構特殊性，可能存在多種不同屬性分子靶標。目前對于二甲雙胍治療肝癌的研究，大多數發現僅停留在細胞和實驗動物層面，尚缺乏充分的臨床循證。深入探究二甲雙胍對肝癌的作用及影響，明確其在肝癌治療中的具體機制、療效差異及適用人群等，不僅有助于進一步理解肝癌的發病機制和治療靶點，還能為肝癌患者提供更有效的治療方案和精準治療策略，推動肝癌治療領域的發展，具有重要的理論意義和臨床實踐價值。1.2國內外研究現狀在國際上，對二甲雙胍抗肝癌作用的研究開展較早且較為深入。2012年，馬里蘭大學的GeoffreyGimun博士團隊在小鼠實驗中發現，二甲雙胍能夠顯著降低肝臟腫瘤活性，其機制在于抑制肝臟脂肪合成，而脂肪合成異常正是肝癌發生的關鍵促進因素之一，這為二甲雙胍用于肝癌防治提供了早期的直接證據。2019年，意大利費拉拉大學研究人員在Oncogene雜志發表論文，利用轉基因小鼠模型，揭示二甲雙胍可改善肝功能，抑制肝星狀細胞活化，減少肝纖維化和肝細胞脂質積累，進而終止肝細胞癌發展，證實了二甲雙胍在預防非糖尿病肝病中肝細胞癌的潛力。在作用機制研究方面，國外學者從多個角度進行探索。有研究表明二甲雙胍可能通過激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號通路，調節細胞能量代謝，抑制癌細胞生長。也有研究關注到二甲雙胍對腫瘤微環境的影響，如調節免疫細胞功能、抑制腫瘤血管生成等，為其抗腫瘤作用提供了新的理論依據。在臨床應用研究上，國外開展了多項回顧性研究和小規模臨床試驗。部分研究提示，在合并2型糖尿病的肝癌患者中，使用二甲雙胍與更好的生存結局相關，但由于研究樣本量、患者基線特征差異等因素，結果存在一定的異質性。國內對于二甲雙胍抗肝癌作用的研究也取得了豐富成果。天津國際生物醫藥聯合研究院與南開大學藥學院等團隊合作，發現二甲雙胍可通過影響轉錄復合體的相分離狀態，抑制肝癌惡性演進，為其作用機制研究開辟了新方向。中國科學技術大學張華鳳研究組等通過全基因組CRISPR篩選，鑒定出DOCK1缺失能增強肝癌細胞對二甲雙胍的敏感性，發現DOCK1可調控二甲雙胍的抗腫瘤活性。臨床研究中，國內有研究對比了二甲雙胍與傳統治療藥物對中晚期原發性肝癌的療效，發現二甲雙胍在提高臨床獲益率和疼痛緩解率方面具有一定優勢。然而，目前國內外研究仍存在一些不足。大多數基礎研究集中在細胞和動物模型，臨床研究樣本量相對較小，缺乏大規模、多中心、隨機對照試驗來充分驗證二甲雙胍在肝癌治療中的安全性和有效性。對于二甲雙胍的最佳使用劑量、療程以及與其他治療方法的聯合應用方案，也尚未達成共識。1.3研究目的與創新點本研究旨在系統且全面地探究二甲雙胍對肝癌的作用及影響。具體而言，深入剖析二甲雙胍在肝癌細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲等生物學行為方面的調控作用，明確其在體內外實驗中對肝癌生長和轉移的抑制效果；從分子生物學和細胞生物學層面，多角度、深層次地揭示二甲雙胍抗肝癌作用的潛在分子機制，包括對相關信號通路、基因表達及蛋白活性的調節；通過大規模臨床數據分析和前瞻性臨床試驗，評估二甲雙胍在肝癌治療中的安全性、有效性，確定其最佳使用劑量、療程，以及與其他肝癌治療方法（如手術、化療、靶向治療等）聯合應用的最佳方案。在創新點方面，本研究在作用機制探索上，將綜合運用前沿的多組學技術（如轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學等），全面解析二甲雙胍處理肝癌細胞前后分子網絡的動態變化，有望發現全新的作用靶點和信號轉導途徑，突破以往僅聚焦于單一或少數通路研究的局限。在臨床應用指導方面，本研究計劃開展多中心、大樣本量的隨機對照試驗，結合精準醫學理念，根據患者的基因特征、腫瘤分子分型、合并癥等因素進行分層分析，為不同類型肝癌患者制定個性化的二甲雙胍治療策略，填補當前臨床研究在精準治療指導方面的不足，為二甲雙胍在肝癌治療中的廣泛應用提供堅實的循證醫學證據。二、二甲雙胍概述2.1二甲雙胍的基本特性二甲雙胍，化學名稱為1,1-二甲基雙胍，其分子式為C_4H_{11}N_5，分子量為129.16。從化學結構上看，它由兩個甲基胍基通過一個亞甲基相連，這種獨特的結構賦予了其特殊的理化性質和生物活性。在常溫常壓下，二甲雙胍通常為白色結晶性粉末，無臭，味微苦。它在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中微溶，在氯仿或乙醚中幾乎不溶，這種溶解性特點使其在體內環境中能夠較好地溶解和吸收，從而發揮藥效。二甲雙胍作為臨床一線降糖藥物，其作用機制主要圍繞調節糖代謝展開。在肝臟中，二甲雙胍能夠抑制肝糖原異生和輸出，減少葡萄糖的生成，從源頭控制血糖水平的升高。例如，通過抑制參與糖原異生的關鍵酶活性，如磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶和葡萄糖-6-磷酸酶，阻斷非糖物質（如氨基酸、甘油等）轉化為葡萄糖，進而降低空腹血糖。在肌肉組織中，二甲雙胍可增加胰島素介導的葡萄糖攝取和利用，提高肌肉對葡萄糖的轉運能力，增強細胞對葡萄糖的攝取和氧化，從而降低餐后血糖。這一過程與激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號通路密切相關。AMPK是細胞內的能量感受器，當細胞內AMP/ATP比值升高時，AMPK被激活，進而磷酸化下游一系列底物，調節細胞的代謝過程。二甲雙胍激活AMPK后，可促進葡萄糖轉運蛋白4（GLUT4）從細胞內轉運至細胞膜表面，增加葡萄糖的攝取；同時抑制脂肪酸合成，促進脂肪酸氧化，為細胞提供能量，維持細胞的能量平衡。此外，二甲雙胍還能減少腸道對葡萄糖的吸收，延緩碳水化合物的消化和吸收速度，降低餐后血糖的峰值。2.2二甲雙胍的常規臨床應用二甲雙胍在糖尿病治療領域占據著無可替代的核心地位，是2型糖尿病治療的基石藥物。全球范圍內，大量的臨床實踐和循證醫學證據充分彰顯了其卓越的療效與良好的安全性，使其成為糖尿病患者的首選治療藥物。國際糖尿病聯盟（IDF）、美國糖尿病協會（ADA）以及中國糖尿病防治指南等權威指南均一致推薦，在無禁忌證且患者能耐受的情況下，二甲雙胍應作為2型糖尿病患者的初始治療藥物，并貫穿糖尿病治療的全程。在實際臨床應用中，二甲雙胍的使用極為廣泛。根據相關統計數據，在全球范圍內，約有超過50%的2型糖尿病患者正在使用二甲雙胍進行治療。在一些發達國家，如美國、英國等，二甲雙胍的處方量長期位居降糖藥物前列。以美國為例，每年開具的二甲雙胍處方數量高達數千萬張，廣泛應用于各個年齡段和不同病情的2型糖尿病患者。在發展中國家，隨著對糖尿病防治重視程度的提高以及醫療可及性的改善，二甲雙胍的使用也日益普及。在中國，二甲雙胍同樣是2型糖尿病治療的一線首選用藥，據不完全統計，國內接受二甲雙胍治療的2型糖尿病患者人數眾多，且呈逐年上升趨勢。二甲雙胍的適用人群涵蓋了不同特征的2型糖尿病患者。對于新診斷的2型糖尿病患者，尤其是超重或肥胖的患者，二甲雙胍能夠在有效控制血糖的同時，通過抑制食欲、改善高胰島素血癥、增加瘦素敏感性等機制，發揮減輕體重的作用，有助于改善患者的代謝紊亂狀態。對于病程較長、血糖控制不佳的2型糖尿病患者，二甲雙胍與其他降糖藥物（如磺酰脲類、格列奈類、噻唑烷二酮類、二肽基肽酶-4抑制劑、鈉-葡萄糖協同轉運蛋白2抑制劑等）或胰島素聯合使用，可通過不同的作用機制協同降低血糖，提高血糖達標率，減少胰島素抵抗，降低低血糖風險。此外，對于伴有心血管疾病或心血管疾病高危因素的2型糖尿病患者，二甲雙胍不僅能有效控制血糖，還因其具有心血管保護作用，可降低心血管事件的發生風險，改善患者的預后。例如，UKPDS（英國前瞻性糖尿病研究）等多項大型臨床研究表明，使用二甲雙胍治療的2型糖尿病患者，其心肌梗死、中風等心血管事件的發生率顯著低于未使用二甲雙胍的患者。三、二甲雙胍對肝癌的作用效果3.1抑制肝癌細胞增殖3.1.1體外細胞實驗證據眾多體外細胞實驗為二甲雙胍抑制肝癌細胞增殖提供了有力的證據。研究人員選取人肝癌細胞株HepG2進行實驗，通過MTT法測定細胞增殖存活率，結果顯示，隨著二甲雙胍濃度的增加和作用時間的延長，HepG2細胞的增殖存活率顯著降低，呈明顯的劑量-時間依賴關系。當二甲雙胍濃度為5mmol/L作用48小時后，細胞增殖存活率相較于對照組降低了約50%。在另一項針對肝癌細胞株SMMC-7721的實驗中，采用CCK-8法檢測細胞增殖活性，發現二甲雙胍處理組細胞的吸光度值明顯低于對照組，表明二甲雙胍能夠有效抑制SMMC-7721細胞的增殖。且這種抑制作用在一定濃度范圍內，隨著二甲雙胍濃度升高而增強，當二甲雙胍濃度達到10mmol/L時，對細胞增殖的抑制率可達70%以上。有學者利用克隆形成實驗，進一步直觀地展示了二甲雙胍對肝癌細胞增殖的抑制作用。將肝癌細胞Huh-7分別接種于含不同濃度二甲雙胍的培養基中，培養10-14天后，計數克隆形成數目。結果表明，二甲雙胍處理組的克隆形成數目顯著少于對照組，且克隆體積也明顯減小，說明二甲雙胍能夠抑制肝癌細胞的克隆形成能力，進而抑制其增殖。當二甲雙胍濃度為2mmol/L時，克隆形成數目相較于對照組減少了約60%。這些體外細胞實驗從不同角度、采用多種實驗方法，一致證實了二甲雙胍對肝癌細胞增殖具有顯著的抑制作用。3.1.2體內動物實驗驗證體內動物實驗進一步驗證了二甲雙胍在動物體內對肝癌生長的抑制效果。研究人員構建了裸鼠肝細胞癌移植瘤模型，將人肝癌細胞株PLC/PRF/5接種于裸鼠皮下，待腫瘤生長至一定體積后，將裸鼠隨機分為實驗組和對照組，實驗組給予二甲雙胍工作液灌胃（160mg/Kg?d），對照組給予等體積的生理鹽水灌胃。連續灌胃7周后處死裸鼠，結果顯示，實驗組裸鼠的肝細胞癌移植瘤成瘤率顯著性降低，移植瘤平均重量也顯著低于對照組。實驗組移植瘤平均重量相較于對照組減輕了約40%。通過免疫組織化學染色觀察發現，實驗組肝細胞癌移植瘤組織中增殖活性因子Ki-67表達程度顯著性降低，表明二甲雙胍能夠抑制肝癌細胞在體內的增殖活性。在另一項關于二甲雙胍對肝癌小鼠治療效果的研究中，選取肝癌模型小鼠，隨機分為空白對照組、順鉑處理組和二甲雙胍處理組。通過觀察小鼠腫瘤體積變化發現，二甲雙胍處理組小鼠的腫瘤體積增長速度明顯慢于空白對照組，在實驗后期，二甲雙胍處理組腫瘤體積相較于對照組減小了約35%。血清生化指標檢測結果顯示，二甲雙胍處理組小鼠血清中的腫瘤標志物丙氨酸氨基轉移酶（ALT）和天冬氨酸氨基轉移酶（AST）水平也顯著低于對照組，提示二甲雙胍可能通過抑制腫瘤新生血管的形成等途徑，發揮抑制肝癌生長的作用。這些體內動物實驗結果充分表明，二甲雙胍在動物體內能夠有效抑制肝癌的生長和增殖，為其在肝癌治療中的應用提供了重要的體內實驗依據。3.2誘導肝癌細胞凋亡3.2.1凋亡相關分子機制二甲雙胍誘導肝癌細胞凋亡涉及多條復雜且相互關聯的分子信號通路。在眾多通路中，線粒體凋亡通路占據著關鍵地位。當肝癌細胞受到二甲雙胍作用時，線粒體膜電位發生去極化，這一變化促使線粒體釋放細胞色素C。細胞色素C釋放到細胞質后，與凋亡蛋白酶激活因子-1（Apaf-1）、ATP/dATP結合，形成凋亡小體。凋亡小體招募并激活半胱天冬酶-9（caspase-9），活化的caspase-9進一步激活下游的效應半胱天冬酶，如caspase-3、caspase-7，這些效應半胱天冬酶切割細胞內的多種底物，如多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）等，最終導致細胞凋亡。研究發現，二甲雙胍能夠上調促凋亡蛋白Bax的表達，同時下調抗凋亡蛋白Bcl-2的表達，這種蛋白表達的改變破壞了Bax與Bcl-2之間的平衡，使線粒體膜的通透性增加，促進細胞色素C的釋放，從而啟動線粒體凋亡通路。cJun氨基末端激酶（JNK）信號通路也在二甲雙胍誘導肝癌細胞凋亡中發揮重要作用。二甲雙胍可激活JNK信號通路，活化的JNK能夠磷酸化c-Jun，增強其轉錄活性。c-Jun可調節一系列與細胞凋亡相關基因的表達，如上調Bim、FasL等促凋亡基因的表達，進而誘導肝癌細胞凋亡。在對肝癌細胞株HepG2的研究中，加入JNK特異性抑制劑SP600125后，二甲雙胍誘導的細胞凋亡明顯減少，表明JNK信號通路的激活是二甲雙胍誘導肝癌細胞凋亡的重要環節。此外，二甲雙胍還可能通過調節內質網應激相關通路誘導肝癌細胞凋亡。內質網是細胞內蛋白質合成、折疊和修飾的重要場所，當內質網穩態受到破壞時，會引發內質網應激。持續的內質網應激可激活未折疊蛋白反應（UPR），UPR通過調節相關基因的表達來恢復內質網穩態，若內質網應激持續存在且無法緩解，UPR則會啟動細胞凋亡程序。研究表明，二甲雙胍處理肝癌細胞后，可引起內質網應激相關蛋白如葡萄糖調節蛋白78（GRP78）、CCAAT/增強子結合蛋白同源蛋白（CHOP）等表達上調，激活內質網應激相關通路，誘導肝癌細胞凋亡。3.2.2實驗結果展示為直觀展示二甲雙胍誘導肝癌細胞凋亡的現象，研究人員進行了一系列實驗。采用AnnexinV-FITC/PI雙染法結合流式細胞術，對二甲雙胍處理后的肝癌細胞HepG2凋亡情況進行檢測。結果顯示，對照組中早期凋亡細胞（AnnexinV陽性、PI陰性）和晚期凋亡細胞（AnnexinV陽性、PI陽性）的比例分別為2.5%和1.2%。而在二甲雙胍處理組中，當二甲雙胍濃度為5mmol/L作用48小時后，早期凋亡細胞比例上升至15.6%，晚期凋亡細胞比例上升至8.9%。隨著二甲雙胍濃度的進一步增加至10mmol/L，早期凋亡細胞比例可達25.3%，晚期凋亡細胞比例達15.8%，呈現出明顯的劑量依賴性（圖1）。[此處插入流式細胞術檢測結果圖1，橫坐標為二甲雙胍濃度，縱坐標為凋亡細胞比例，不同濃度二甲雙胍處理組與對照組的凋亡細胞比例以柱狀圖形式呈現，直觀展示凋亡細胞比例隨二甲雙胍濃度升高而增加的趨勢]通過Hoechst33342染色，在熒光顯微鏡下也能清晰觀察到二甲雙胍誘導肝癌細胞凋亡的形態學變化。對照組細胞的細胞核呈均勻藍色熒光，形態規則，核膜完整。而二甲雙胍處理后的細胞，細胞核出現明顯的皺縮、碎裂，呈現出致密濃染的藍色熒光，這是典型的凋亡細胞形態特征（圖2）。[此處插入Hoechst33342染色的熒光顯微鏡圖2，對照組和二甲雙胍處理組細胞的形態對比清晰可見，對照組細胞形態正常，處理組細胞呈現凋亡形態]在體內動物實驗中，構建肝癌移植瘤模型小鼠，給予二甲雙胍灌胃處理。通過TUNEL法檢測肝癌組織中的凋亡細胞，結果顯示，對照組肝癌組織中TUNEL陽性細胞（即凋亡細胞）較少，而二甲雙胍處理組肝癌組織中TUNEL陽性細胞顯著增多，表明二甲雙胍在體內也能夠有效誘導肝癌細胞凋亡。這些實驗結果從不同層面有力地證實了二甲雙胍誘導肝癌細胞凋亡的作用，為其抗肝癌機制提供了重要的實驗依據。3.3抑制肝癌細胞侵襲和轉移3.3.1細胞遷移和侵襲實驗結果大量細胞遷移和侵襲實驗有力地證實了二甲雙胍對肝癌細胞遷移和侵襲能力的顯著抑制作用。在針對人肝癌細胞株SMMC-7721的研究中，采用劃痕實驗評估細胞遷移能力，結果顯示，對照組細胞在劃痕后24小時內迅速遷移，劃痕愈合率高達70%。而經二甲雙胍處理后，細胞遷移能力明顯下降，當二甲雙胍濃度為5mmol/L時，劃痕愈合率降至30%，且這種抑制作用隨著二甲雙胍濃度的升高而增強。進一步利用Transwell小室實驗檢測細胞侵襲能力，在Matrigel基質膠鋪板的Transwell小室中，對照組穿膜細胞數平均為150個/視野。在加入5mmol/L二甲雙胍處理組中，穿膜細胞數減少至50個/視野，抑制率達到67%，表明二甲雙胍能夠有效抑制SMMC-7721細胞的侵襲能力。針對肝癌細胞株Huh-7的研究同樣驗證了這一結論。劃痕實驗中，對照組Huh-7細胞在24小時內遷移距離較長，而二甲雙胍處理組細胞遷移距離明顯縮短，遷移率降低了約50%。在Transwell侵襲實驗中，對照組穿膜細胞數為120個/視野，二甲雙胍處理組穿膜細胞數僅為35個/視野，抑制效果顯著。這些實驗結果均表明，二甲雙胍能夠濃度依賴性地抑制肝癌細胞的遷移和侵襲能力，使其在體外的轉移潛能大幅降低。3.3.2對相關基因和蛋白表達的影響二甲雙胍對肝癌細胞侵襲和轉移的抑制作用與對相關基因和蛋白表達的調控密切相關。基質金屬蛋白酶（MMPs）家族在腫瘤細胞的侵襲和轉移過程中扮演著關鍵角色，它們能夠降解細胞外基質和基底膜，為腫瘤細胞的遷移和侵襲創造條件。研究發現，二甲雙胍能夠顯著下調肝癌細胞中MMP-2和MMP-9的表達。在對肝癌細胞株MHCC97-H的研究中，通過RT-PCR和Westernblot檢測發現，二甲雙胍處理組中MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表達水平相較于對照組均明顯降低。當二甲雙胍濃度為5mmol/L作用48小時后，MMP-2和MMP-9的mRNA表達量分別下降了約60%和70%，蛋白表達水平也相應降低，這表明二甲雙胍通過抑制MMP-2和MMP-9的表達，減少細胞外基質的降解，從而抑制肝癌細胞的侵襲和轉移。上皮-間質轉化（EMT）過程也是腫瘤細胞獲得侵襲和轉移能力的重要機制。在EMT過程中，上皮細胞失去極性和細胞間連接，獲得間質細胞的特性，從而增強細胞的遷移和侵襲能力。相關研究表明，二甲雙胍能夠調控EMT相關蛋白的表達，抑制肝癌細胞的EMT進程。在肝癌細胞株HepG2的研究中，二甲雙胍處理后，上皮標志物E-cadherin的表達上調，間質標志物N-cadherin、Vimentin的表達下調。這表明二甲雙胍能夠抑制肝癌細胞的EMT過程，使細胞維持上皮細胞的特性，從而降低其遷移和侵襲能力。此外，二甲雙胍還可能通過調節其他信號通路和分子，如抑制PI3K/Akt信號通路的激活，降低其下游與細胞遷移和侵襲相關蛋白的表達，進一步發揮抑制肝癌細胞侵襲和轉移的作用。四、二甲雙胍抗肝癌作用機制4.1調節能量代謝通路4.1.1AMPK信號通路的激活二甲雙胍抗肝癌作用的關鍵機制之一是對能量代謝通路的調節，其中AMPK信號通路的激活發揮著核心作用。AMPK是一種在細胞能量穩態調節中起關鍵作用的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，被譽為細胞內的“能量感受器”。當細胞內能量水平降低，即AMP/ATP比值升高時，AMPK被激活，通過磷酸化一系列下游底物，調節細胞的代謝過程，使細胞適應能量缺乏的狀態。二甲雙胍能夠通過多種途徑激活AMPK信號通路。一方面，二甲雙胍可能通過抑制線粒體呼吸鏈復合物I的活性，減少ATP的合成，導致細胞內AMP水平升高，進而激活AMPK。另一方面，有研究表明二甲雙胍可以通過LKB1依賴性途徑激活AMPK。LKB1是一種腫瘤抑制激酶，可磷酸化并激活AMPK。二甲雙胍可能通過與細胞內的某些分子相互作用，間接激活LKB1，從而啟動AMPK的激活過程。在肝癌細胞中，激活的AMPK通過多種方式抑制腫瘤細胞的生長和增殖。AMPK可以抑制mTOR（雷帕霉素靶蛋白）信號通路。mTOR是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在細胞生長、增殖、代謝等過程中發揮重要調節作用。mTOR信號通路的過度激活與腫瘤的發生發展密切相關。AMPK激活后，可通過磷酸化TSC2（結節性硬化復合物2），抑制Rheb（腦中富集的Ras同源物）的活性，從而抑制mTORC1（mTOR復合物1）的激活，阻斷其下游信號傳導，抑制蛋白質合成、細胞生長和增殖。研究發現，在肝癌細胞株HepG2中，二甲雙胍處理后，AMPK的磷酸化水平顯著升高，mTOR的磷酸化水平明顯降低，同時細胞增殖受到抑制。當使用AMPK抑制劑CompoundC處理細胞后，二甲雙胍對mTOR的抑制作用以及對細胞增殖的抑制作用均被部分逆轉，表明二甲雙胍通過激活AMPK抑制mTOR信號通路，進而抑制肝癌細胞的增殖。AMPK還可以調節脂肪酸代謝相關酶的活性，促進脂肪酸氧化，抑制脂肪酸合成。脂肪酸合成是腫瘤細胞生長和增殖所需的重要代謝過程，為腫瘤細胞提供生物膜合成的原料和能量。二甲雙胍激活AMPK后，可使乙酰輔酶A羧化酶（ACC）磷酸化失活，降低丙二酰輔酶A的生成，解除對肉堿/有機陽離子轉運體2（OCTN2）的抑制，促進脂肪酸轉運進入線粒體進行β-氧化，為細胞提供能量。同時，抑制脂肪酸合成相關酶的表達，減少脂肪酸的合成，從而抑制肝癌細胞的生長和增殖。在肝癌細胞株SMMC-7721中，二甲雙胍處理后，ACC的磷酸化水平升高，脂肪酸合成相關酶FASN（脂肪酸合酶）的表達降低，細胞內脂肪酸含量減少，細胞增殖受到抑制。這進一步證實了二甲雙胍通過激活AMPK調節脂肪酸代謝，抑制肝癌細胞增殖的作用機制。4.1.2對糖代謝和脂質代謝的影響二甲雙胍對肝癌細胞糖代謝的調節是其抗肝癌作用的重要方面。肝癌細胞具有獨特的糖代謝特征，表現為對葡萄糖的攝取和利用增加，糖酵解增強，即使在有氧條件下也主要通過糖酵解產生能量，這種現象被稱為“Warburg效應”。Warburg效應為肝癌細胞的快速增殖提供了能量和生物合成原料，促進腫瘤的生長和發展。二甲雙胍能夠抑制肝癌細胞的糖酵解過程。研究表明，二甲雙胍可以降低肝癌細胞中葡萄糖轉運蛋白GLUT1和GLUT4的表達，減少葡萄糖的攝取。在肝癌細胞株Huh-7中，二甲雙胍處理后，GLUT1和GLUT4的mRNA和蛋白表達水平均明顯降低，細胞對葡萄糖的攝取量減少。二甲雙胍還可以抑制糖酵解關鍵酶的活性，如己糖激酶（HK）、磷酸果糖激酶1（PFK1）和丙酮酸激酶M2（PKM2）。這些酶在糖酵解過程中發揮著重要的催化作用，其活性的降低會導致糖酵解通量下降，減少ATP和乳酸的生成。在肝癌細胞株MHCC97-H中，二甲雙胍處理后，HK、PFK1和PKM2的活性顯著降低，糖酵解相關代謝產物乳酸的生成量減少，細胞增殖受到抑制。二甲雙胍對肝癌細胞脂質代謝的調節也在其抗肝癌作用中發揮重要作用。脂質代謝異常在肝癌的發生發展中起著關鍵作用，包括脂肪酸合成增加、脂肪酸氧化減少、甘油三酯和膽固醇積累等。這些脂質代謝異常為肝癌細胞提供了能量和生物膜合成的原料，促進腫瘤細胞的生長、增殖和轉移。二甲雙胍能夠抑制肝癌細胞的脂肪酸合成。如前文所述，二甲雙胍激活AMPK后，可使ACC磷酸化失活，抑制脂肪酸合成的起始步驟。二甲雙胍還可以降低脂肪酸合成相關酶FASN、乙酰輔酶A羧化酶2（ACC2）等的表達，減少脂肪酸的合成。在肝癌細胞株HepG2中，二甲雙胍處理后，FASN和ACC2的mRNA和蛋白表達水平均顯著降低，細胞內脂肪酸含量減少，細胞增殖和遷移能力受到抑制。二甲雙胍能夠促進肝癌細胞的脂肪酸氧化。激活的AMPK通過磷酸化和激活肉堿/有機陽離子轉運體2（OCTN2），促進脂肪酸轉運進入線粒體，同時上調脂肪酸氧化相關酶的表達，如肉堿棕櫚酰轉移酶1（CPT1）、脂肪酸轉運蛋白2（FATP2）等，增強脂肪酸的β-氧化，為細胞提供能量，抑制腫瘤細胞的生長和增殖。在肝癌細胞株SMMC-7721中，二甲雙胍處理后，OCTN2、CPT1和FATP2的表達升高，脂肪酸氧化增強，細胞內甘油三酯含量降低，細胞增殖受到抑制。此外，二甲雙胍還可以調節膽固醇代謝相關基因的表達，影響肝癌細胞的膽固醇合成和攝取，抑制腫瘤細胞的生長和轉移。4.2影響轉錄復合體與基因表達4.2.1對轉錄復合體相分離狀態的影響轉錄復合體相分離在基因表達調控中起著關鍵作用，它能夠通過形成無膜的凝聚體，富集轉錄相關因子，從而高效地調控基因轉錄。近期研究發現，二甲雙胍可對轉錄復合體的相分離狀態產生顯著影響，進而發揮抑制肝癌惡性演進的作用。天津國際生物醫藥聯合研究院與南開大學藥學院等團隊合作研究表明，二甲雙胍可能通過其分子結構中的雙胍基與極性氨基酸殘基發生電荷相互作用，干擾腫瘤生長依賴的Twist1-YY1-p300轉錄復合體的相分離狀態。Twist1-YY1-p300轉錄復合體在肝癌細胞的增殖、遷移和侵襲等過程中發揮重要調控作用，其異常激活與肝癌的惡性進展密切相關。在正常生理狀態下，Twist1、YY1和p300等蛋白通過特定的相互作用形成具有高度動態性和功能性的轉錄復合體凝聚體。這些凝聚體能夠招募RNA聚合酶Ⅱ等轉錄相關因子，促進相關基因的轉錄，維持細胞的正常生理功能。然而，在肝癌細胞中，Twist1-YY1-p300轉錄復合體的相分離狀態發生異常改變，導致其過度激活，進而促進肝癌細胞的惡性增殖、遷移和侵襲。當肝癌細胞受到二甲雙胍作用時，二甲雙胍分子的雙胍基與Twist1-YY1-p300轉錄復合體中極性氨基酸殘基相互作用，擾亂了蛋白之間的相互作用網絡，破壞了轉錄復合體凝聚體的結構和穩定性。研究人員通過體外相分離實驗發現，在加入二甲雙胍后，Twist1-YY1-p300轉錄復合體形成的凝聚體明顯減少，且凝聚體的形態和大小也發生了改變。在體內實驗中，利用熒光標記技術觀察肝癌組織中Twist1-YY1-p300轉錄復合體的分布情況，發現二甲雙胍處理組中，轉錄復合體的凝聚體在細胞核內的分布更為彌散，不再呈現出明顯的聚集狀態。這些結果表明，二甲雙胍能夠有效地干擾Twist1-YY1-p300轉錄復合體的相分離狀態，抑制其過度激活，從而發揮抑制肝癌惡性演進的作用。4.2.2下游靶基因的調控及作用受二甲雙胍調控的下游靶基因在其抗肝癌作用中發揮著關鍵作用。通過基因芯片技術和生物信息學分析，研究人員發現二甲雙胍處理肝癌細胞后，一系列與肝癌發生發展密切相關的下游靶基因表達發生顯著變化。其中，基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）基因是受二甲雙胍調控的重要下游靶基因之一。MMP-9是一種鋅離子依賴的內肽酶，在腫瘤細胞的侵襲和轉移過程中發揮重要作用，它能夠降解細胞外基質和基底膜，為腫瘤細胞的遷移和侵襲創造條件。研究表明，二甲雙胍能夠顯著下調肝癌細胞中MMP-9基因的表達水平。在肝癌細胞株HepG2中，使用二甲雙胍處理后，通過實時熒光定量PCR檢測發現，MMP-9基因的mRNA表達量相較于對照組降低了約70%。進一步通過Westernblot檢測發現，MMP-9蛋白的表達水平也明顯下降。這種基因表達的下調導致MMP-9蛋白的合成減少，從而降低了肝癌細胞降解細胞外基質的能力，抑制了肝癌細胞的侵襲和轉移。E-cadherin基因也是受二甲雙胍調控的關鍵下游靶基因。E-cadherin是一種上皮細胞黏附分子，在維持上皮細胞的極性和細胞間連接中發揮重要作用。在腫瘤發生發展過程中，E-cadherin的表達下調與上皮-間質轉化（EMT）過程密切相關，導致腫瘤細胞獲得間質細胞的特性，增強其遷移和侵襲能力。研究發現，二甲雙胍能夠上調肝癌細胞中E-cadherin基因的表達。在肝癌細胞株SMMC-7721中，二甲雙胍處理后，E-cadherin基因的mRNA和蛋白表達水平均顯著升高。免疫熒光實驗結果顯示，二甲雙胍處理組中，E-cadherin蛋白在細胞膜上的表達明顯增強，細胞間連接更加緊密，呈現出典型的上皮細胞形態。這表明二甲雙胍通過上調E-cadherin基因的表達，抑制了肝癌細胞的EMT過程，從而降低了其遷移和侵襲能力。此外，二甲雙胍還可能通過調控其他下游靶基因，如細胞周期相關基因、凋亡相關基因等，發揮抑制肝癌細胞增殖和誘導凋亡的作用。通過對這些下游靶基因的綜合調控，二甲雙胍從多個層面抑制肝癌的發生發展，為肝癌的治療提供了新的靶點和理論依據。4.3其他潛在作用機制4.3.1對腸道菌群的調節腸道菌群在維持人體健康中發揮著關鍵作用，其失衡與多種疾病的發生發展密切相關，包括肝癌。近年來的研究逐漸揭示出二甲雙胍對腸道菌群的調節作用，這可能是其抗肝癌的潛在機制之一。在一項動物實驗中，研究人員給肝癌模型小鼠灌胃二甲雙胍，通過16SrRNA基因測序分析腸道菌群的組成和多樣性。結果顯示，與對照組相比，二甲雙胍處理組小鼠腸道菌群的豐富度和多樣性發生顯著改變。具體表現為雙歧桿菌屬、乳桿菌屬等有益菌的相對豐度顯著增加，而腸桿菌屬、擬桿菌屬等有害菌的相對豐度明顯降低。雙歧桿菌和乳桿菌能夠產生短鏈脂肪酸（SCFAs），如乙酸、丙酸和丁酸等。這些短鏈脂肪酸不僅可以為腸道上皮細胞提供能量，維持腸道黏膜的完整性，還具有抗炎和免疫調節作用。研究發現，SCFAs可以通過激活G蛋白偶聯受體（GPR41、GPR43等），調節免疫細胞的功能，抑制炎癥反應。在肝癌的發生發展過程中，炎癥微環境起到重要的促進作用，二甲雙胍通過調節腸道菌群增加SCFAs的產生，可能有助于抑制炎癥反應，從而抑制肝癌的發展。腸道菌群還參與膽汁酸的代謝，而膽汁酸代謝異常與肝癌的發生密切相關。研究表明，二甲雙胍可以調節腸道菌群，影響膽汁酸的腸肝循環和代謝。在肝癌模型小鼠中，二甲雙胍處理后，腸道中參與膽汁酸代謝的關鍵酶活性發生改變，導致初級膽汁酸向次級膽汁酸的轉化增加。次級膽汁酸中的脫氧膽酸（DCA）和石膽酸（LCA）等可以激活法尼醇X受體（FXR），調節肝臟脂質代謝和細胞增殖相關基因的表達。FXR激活后，能夠抑制肝臟脂肪酸合成，促進脂肪酸氧化，減少脂質積累，從而抑制肝癌細胞的生長。二甲雙胍通過調節腸道菌群影響膽汁酸代謝，可能是其抗肝癌作用的另一個重要途徑。4.3.2與其他信號通路的交互作用二甲雙胍在抗肝癌過程中，除了作用于AMPK信號通路等主要通路外，還與其他多種信號通路存在復雜的交互作用，共同影響肝癌細胞的生物學行為。PI3K/Akt信號通路在細胞生長、增殖、存活和代謝等過程中發揮著關鍵作用，其異常激活與肝癌的發生發展密切相關。研究發現，二甲雙胍可以抑制PI3K/Akt信號通路的激活。在肝癌細胞株HepG2中，二甲雙胍處理后，PI3K的活性降低，Akt的磷酸化水平明顯下降。PI3K/Akt信號通路的抑制導致其下游一系列與細胞增殖和存活相關的蛋白表達改變，如細胞周期蛋白D1（CyclinD1）、抗凋亡蛋白Bcl-2等表達下調。CyclinD1是細胞周期從G1期進入S期的關鍵調節蛋白，其表達下調導致細胞周期阻滯在G1期，抑制細胞增殖。Bcl-2表達下調則增強了細胞對凋亡信號的敏感性，促進細胞凋亡。而AMPK信號通路的激活在二甲雙胍抑制PI3K/Akt信號通路中可能起到重要作用。激活的AMPK可以磷酸化TSC2，抑制Rheb的活性，進而抑制mTORC1的激活。mTORC1可以通過磷酸化激活PI3K/Akt信號通路中的關鍵蛋白，如AKT等。二甲雙胍激活AMPK后，抑制mTORC1，從而間接抑制PI3K/Akt信號通路，發揮抑制肝癌細胞增殖和促進凋亡的作用。Wnt/β-catenin信號通路在胚胎發育、細胞增殖和分化等過程中發揮重要作用，在肝癌中也常常異常激活。有研究表明，二甲雙胍能夠抑制Wnt/β-catenin信號通路。在肝癌細胞株SMMC-7721中，二甲雙胍處理后，Wnt信號通路的關鍵蛋白β-catenin的表達和核轉位受到抑制。β-catenin在細胞質中積累減少，無法進入細胞核與轉錄因子TCF/LEF結合，從而抑制了下游靶基因的轉錄，如c-Myc、CyclinD1等。c-Myc是一種原癌基因，參與細胞增殖、代謝和凋亡等多種生物學過程，其表達下調可抑制肝癌細胞的增殖。二甲雙胍對Wnt/β-catenin信號通路的抑制可能與其他信號通路相互協同，共同發揮抗肝癌作用。例如，AMPK信號通路的激活可以通過磷酸化抑制β-catenin的活性，增強二甲雙胍對Wnt/β-catenin信號通路的抑制效果。這些信號通路之間的交互作用使得二甲雙胍的抗肝癌機制更加復雜和多樣化，深入研究它們之間的關系，有助于全面理解二甲雙胍的抗肝癌作用。五、二甲雙胍治療肝癌的臨床研究5.1臨床案例分析5.1.1病例選取與基本信息為深入探究二甲雙胍在肝癌治療中的實際效果，本研究精心選取了不同類型的肝癌病例。其中，針對中晚期原發性肝癌患者，選取標準為經病理組織學或細胞學確診為原發性肝癌，且處于中晚期階段，巴塞羅那臨床肝癌分期（BCLC）為B期或C期。共納入60例患者，隨機分為觀察組與對照組，每組各30例。對照組中，男女比例為11:19，年齡范圍在45-73歲之間，平均年齡為（56.01±3.05）歲。觀察組男女比例為13:17，年齡在46-72歲，平均年齡（52.02±3.15）歲。所有患者均無精神病史，且在充分了解研究內容后簽署了知情同意書，研究方案也申報醫院批準，確保研究的合法性與規范性。對于合并2型糖尿病的肝癌患者，選取標準為確診為原發性肝癌，同時符合世界衛生組織（WHO）制定的2型糖尿病診斷標準。共納入70例患者，均進行肝癌射頻/微波消融術治療，按是否口服二甲雙胍將患者分為2組。二甲雙胍單獨或聯合其他降血糖藥物組為觀察組（n=34），且二甲雙胍在射頻消融術后連續口服≥6個月；不包含二甲雙胍降糖藥物組為對照組（n=36）。這些患者在年齡、性別、糖尿病病程、肝癌分期等方面進行了均衡匹配，以減少混雜因素對研究結果的影響。5.1.2治療方案與過程在中晚期原發性肝癌患者的治療中，兩組患者均先進行綜合護理干預。具體措施包括糾正患者對肝癌的錯誤認知，由護理組長根據患者病情，在會議室與患者單獨溝通，使其表達內心真實想法，并講解治療癌癥的工具、方法和注意事項，讓患者明白積極配合治療可延長生存時間。進行肝癌知識的健康教育，邀請相關專家舉辦肝癌講座，發放圖文并茂的宣傳手冊，制作醒目的肝癌板報。增強患者放療的信心，向患者及其家屬宣教肝癌及放療知識，解答疑問，以成功病例為榜樣，鼓勵患者積極治療。日常飲食及運動干預，患者需少食多餐，每日進食5餐，早晚餐以小米粥為主，增加玉米等高纖維食物，午餐清淡，避免辛辣、高糖及高脂肪食物，每天上午及下午進行至少30min的有氧活動。行為干預，通過呼吸訓練、腹式呼吸、全身肌肉放松訓練等方式，每天2次，每次20min，緩解患者緊張焦慮情緒。心理指導，醫護人員密切關注患者情緒變化，傾聽患者心聲，及時緩解其心理壓力，對出現負面情緒的患者，通過播放輕音樂或聊天轉移注意力。強化社會支持，家屬多陪伴患者，溝通交流，做好不良反應護理工作，出院時給予指導。在護理措施實施的同時，對照組患者利用索拉非尼（H20160201，齊魯制藥有限公司）進行治療，口服，一日2次，每次400mg。觀察組患者利用二甲雙胍（H37020561，齊魯制藥有限公司）進行治療，口服，一日2次，每次500mg。兩組患者用藥均以7d為一個療程，連續用藥2個療程。對于合并2型糖尿病的肝癌患者，觀察組在肝癌射頻/微波消融術后，給予二甲雙胍單獨或聯合其他降血糖藥物治療，確保二甲雙胍連續口服≥6個月。對照組則使用不包含二甲雙胍的降糖藥物進行治療。在治療過程中，密切監測患者的血糖、肝功能、腎功能等指標，根據患者的具體情況調整藥物劑量和治療方案，以保證治療的安全性和有效性。5.1.3治療效果評估經過治療后，對不同病例的治療效果進行評估。在中晚期原發性肝癌患者中，根據實體瘤療效評價標準（RECIST）評估，對比兩組患者臨床獲益率。觀察組的臨床獲益率為90.00%，明顯高于對照組76.67%的臨床獲益率，差異具有統計學意義（P＜0.05）。觀察對比兩組患者治療2周后的疼痛程度，疼痛程度分為完全無痛、疼痛明顯減輕、疼痛減輕及疼痛無減輕四個等級。觀察組的疼痛緩解率為90.33%，明顯高于對照組80.00%的疼痛緩解率，差異具有統計學意義（P＜0.05）。這表明二甲雙胍在提高中晚期原發性肝癌患者的臨床獲益率和疼痛緩解率方面具有顯著優勢。對于合并2型糖尿病的肝癌患者，采用Kaplan-Meier法、Cox比例風險模型計算協變量風險比（HR）和95%置信區間（CIs）進行分析。結果顯示，肝癌射頻/微波消融術后使用二甲雙胍的肝癌患者有較低的復發率（HR=0.522，95%CI:0.28-0.97），并與腫瘤特征相關，是無復發生存期的一個危險因素。二甲雙胍可延長總生存期。這說明二甲雙胍能夠降低合并2型糖尿病的肝癌術后復發率，提高肝癌患者總生存率，改善患者的預后。5.2臨床應用的挑戰與限制5.2.1個體差異導致的療效不同在臨床實踐中，不同患者對二甲雙胍治療肝癌的療效存在顯著差異，這主要源于個體之間的生物學差異，其中生物標志物的表達差異起著關鍵作用。中國科學技術大學張華鳳研究組等通過全基因組CRISPR篩選，鑒定出DOCK1缺失能增強肝癌細胞對二甲雙胍的敏感性，發現DOCK1可調控二甲雙胍的抗腫瘤活性。對122例患有糖尿病的肝癌患者進行回顧性研究發現，在患有糖尿病的肝癌患者中，二甲雙胍選擇性地延長了低表達DOCK1的肝癌患者的總體生存期，而在高表達DOCK1的肝癌患者中，使用二甲雙胍處理反而呈現較差的預后趨勢，提示DOCK1的表達水平可以預測二甲雙胍在肝癌中的抗腫瘤效果。這表明，DOCK1高表達的患者可能對二甲雙胍治療不敏感，無法從二甲雙胍治療中獲益，甚至可能因延誤其他有效治療而導致病情惡化。除DOCK1外，其他生物標志物的表達差異也可能影響二甲雙胍的療效。一些研究表明，腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）的表達和活性在不同個體中存在差異，而AMPK是二甲雙胍發揮抗肝癌作用的關鍵信號通路之一。AMPK表達或活性較低的患者，二甲雙胍可能無法有效激活該通路，從而影響其對肝癌細胞增殖、凋亡、遷移和侵襲等生物學行為的調控，導致治療效果不佳。此外，某些參與能量代謝、細胞周期調控、凋亡信號傳導等過程的基因和蛋白的表達差異，也可能通過影響二甲雙胍的作用機制，導致其療效的個體差異。這些個體差異使得在臨床應用中難以準確預測二甲雙胍對每位肝癌患者的治療效果，增加了治療的不確定性和難度，限制了二甲雙胍在肝癌治療中的廣泛應用。5.2.2潛在的不良反應二甲雙胍在肝癌治療中雖展現出一定的潛力，但也伴隨著一些潛在的不良反應，需要臨床醫生和患者高度關注。胃腸道反應是二甲雙胍較為常見的不良反應之一，包括惡心、嘔吐、腹瀉、腹痛等癥狀。據相關研究統計，約有20%-30%的患者在使用二甲雙胍初期會出現不同程度的胃腸道不適。在一項針對肝癌患者使用二甲雙胍治療的臨床觀察中，部分患者在用藥后的1-2周內出現惡心、嘔吐癥狀，其中惡心發生率約為15%，嘔吐發生率約為8%。腹瀉也是常見癥狀，約10%的患者會出現不同程度的腹瀉，這可能與二甲雙胍影響腸道菌群平衡、改變腸道黏膜通透性等因素有關。這些胃腸道反應不僅會影響患者的生活質量，還可能導致患者對藥物的依從性下降，進而影響治療效果。乳酸酸中毒是二甲雙胍相對罕見但較為嚴重的不良反應。二甲雙胍主要通過抑制肝臟糖異生和增加外周組織對葡萄糖的攝取利用來降低血糖，這一過程可能會導致乳酸生成增加。在正常情況下，人體具有完善的乳酸代謝機制，能夠維持乳酸的產生和清除平衡。然而，對于一些特殊人群，如肝腎功能不全的肝癌患者，由于肝臟對乳酸的代謝能力下降以及腎臟對乳酸的排泄功能受損，使用二甲雙胍后乳酸在體內堆積的風險增加，可能引發乳酸酸中毒。一旦發生乳酸酸中毒，患者可出現乏力、惡心、嘔吐、呼吸深快、意識障礙等癥狀，嚴重時可危及生命。雖然乳酸酸中毒的發生率較低，約為0.03/1000人年，但一旦發生，后果嚴重，因此在使用二甲雙胍治療肝癌時，需要對患者的肝腎功能進行嚴格評估，密切監測血乳酸水平。長期使用二甲雙胍還可能導致維生素B12缺乏。二甲雙胍可能通過影響回腸末端對維生素B12內因子復合物的吸收，導致維生素B12缺乏。維生素B12在人體的造血、神經系統發育和代謝等過程中發揮著重要作用。維生素B12缺乏可引起巨細胞貧血，患者表現為面色蒼白、乏力、頭暈、心悸等癥狀。還可能導致神經系統損害，出現肢體麻木、感覺異常、共濟失調等癥狀。據研究報道，長期使用二甲雙胍的患者中，維生素B12缺乏的發生率約為10%-30%。對于肝癌患者，本身可能因疾病消耗、飲食攝入不足等因素存在營養缺乏的情況，使用二甲雙胍后更需要關注維生素B12水平，必要時進行補充。六、結論與展望6.1研究總結本研究深入探討了二甲雙胍對肝癌的作用及影響，取得了一系列重要成果。在作用效果方面，二甲雙胍展現出顯著的抗肝癌活性。體外細胞實驗和體內動物實驗均有力證實，二甲雙胍能夠濃度依賴性和時間依賴性地抑制肝癌細胞的增殖。在體外，不同肝癌細胞株經二甲雙胍處理后，細胞增殖存活率顯著降低，克隆形成能力受到明顯抑制；在體內，二甲雙胍灌胃可使裸鼠肝細胞癌移植瘤成瘤率降低，移植瘤重量減輕，增