(五)生物技術與工程1．(2022·四川成都高三模擬)泡菜傳統自然發酵方式的發酵周期相對較長，生產效率低。研究人員欲從泡菜中分離篩選出高產酸乳酸菌，為泡菜工廠化生產提供依據。請分析并回答下列問題：(1)配制CaCO3－MRS培養基。成分：蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、磷酸氫二鉀、葡萄糖、瓊脂粉、碳酸鈣等。①根據物理性質分類，該培養基屬于________培養基，為乳酸菌種提供氮源的成分是_______；②培養過程中，乳酸菌產生乳酸溶解碳酸鈣，形成溶鈣圈，便于_______________________。(2)高產酸乳酸菌的培養與分離。其部分實驗目的與具體操作如下所示，請完成下表。實驗目的簡要操作過程梯度稀釋在無菌條件下取樣品中泡菜汁1mL，加入①______________進行10倍梯度稀釋，依次得到10－5、10－6、10－7的稀釋液接種培養取上述稀釋液1mL分別加入無菌培養皿中，然后將CaCO3－MRS培養基澆注混勻冷凝后，將培養皿②________，并連續培養48h分離純化挑取③________________________進行平板劃線培養長期保存將菌種加入30%的甘油中在－20℃保存(3)高產酸乳酸菌的鑒定。提取篩選乳酸菌的DNA，通常采用16SrDNA(編碼rRNA對應的DNA序列)的通用引物進行PCR擴增并測序鑒定。以16SrDNA作為細菌分類依據的原因是不同菌屬的16SrDNA具有________。(4)高產酸乳酸菌發酵效果檢測。研究人員研究了兩種高產酸乳酸菌(乳酸菌A50f7和A50b9)在發酵泡菜過程中pH的變化，結果如圖所示。據圖分析，該研究實驗的自變量是___________，可以看出，接種兩種乳酸菌效果相近，其相近之處表現為________________________。2．落葉是城市綠化廢棄物的主要組成部分，落葉中纖維素含量較高且難降解。某科研單位以本市常見落葉樹為原料，以農家雞糞為菌劑來源對落葉進行微生物降解，用剛果紅染色法分離獲得利于落葉堆肥化處理的纖維素高效降解菌種。其大致過程如圖1，圖2為兩種不同的接種方法。請回答下列相關問題：(1)落葉中的纖維素是__________________的主要成分。②操作所用培養基中通常不加入瓊脂等凝固劑，該培養基的主要作用是_________________________________________________。(2)③操作為____________________________；④操作時，為了避免降解色素的微生物造成假陽性現象，可以采用的方法是____________________________。(3)若篩選獲得的菌株可產生纖維素酶，將這些酶進行固定化，一般不采用包埋法，其原因是______________________________________________________________________________。(4)若對篩選獲得的菌株進行計數，應選擇圖2中______圖對應的操作方法，用此方法測定的原理是_________________________________________________________________________。但是，用此方法統計的菌落數比接種活菌的實際數目要低，原因是_____________________。3．(2022·河南鄭州高三檢測)基因工程自20世紀70年代興起后，在農牧業、醫藥衛生和食品工業等方面，展示出廣闊的前景。如圖是通過基因工程獲得轉基因生物或產品的流程圖，請結合相關知識回答下列問題：(1)轉基因生物反應器是指利用基因工程技術手段將外源基因轉化到受體中進行高效表達，從而獲得具有重要應用價值的表達產物的生命系統，包括轉基因動物、轉基因植物和轉基因微生物。①若利用圖示流程構建小鼠乳腺生物反應器批量生產人抗利尿激素，應先從人體________細胞中獲取總RNA，通過反轉錄獲得cDNA，再PCR后獲得抗利尿激素基因。一條單鏈cDNA在PCR儀中進行n次循環，需要消耗________個引物。構建的表達載體導入的受體細胞是________________________________________________________________________。膀胱反應器有著和乳腺反應器一樣的優點：收集產物蛋白比較容易，不會對動物造成傷害。此外膀胱生物反應器還具有的顯著優勢在于不受轉基因動物的______________(答2點即可)的限制，而且從尿中提取蛋白質比在乳汁中提取簡便、高效。②若圖中的受體細胞是大腸桿菌，通常用Ca2＋處理大腸桿菌，其目的是使大腸桿菌處于________________________________的生理狀態。理論上制備能分泌抗利尿激素的“工程菌株”時，酵母菌比大腸桿菌更適合作為受體細胞，從細胞結構與功能的角度分析，原因是：___________________________________________________________________________。(2)全球新冠疫情形勢依然非常嚴峻，新冠病毒疫苗的研制和新冠病毒的快速檢測的研究具有重要作用。①目前新冠疫苗有滅活疫苗、基因疫苗、蛋白疫苗等。利用圖示流程制備新冠病毒S蛋白疫苗。圖中質粒A上m、n分別是啟動子和終止子，箭頭處是限制酶的切點(NcoⅠ：5′—C↓CATGG—3′；NheⅠ：5′—G↓GATCC—3′)，根據S蛋白的RNA制備的目的基因S無法與載體A連接，需要在S基因兩側加接末端，若b鏈處加接末端5′—GATC，則在a鏈處加接末端5′—________。由圖推測，目的基因S轉錄的模板鏈是________(填“a鏈”或“b鏈”)。②抗原檢測采用雙抗體夾心法，其原理如圖。結合墊處含有足量的、可移動的、與膠體金結合的抗體1，T處固定有抗體2，抗體1和抗體2與新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位點發生特異性結合，呈紅色。C處固定有抗體1的抗體，與抗體1結合也呈紅色。檢測過程中反復進行了抗原—抗體的特異性結合，若檢測結果為陽性，則過程中此特異性結合共發生________次。若待測樣本中不含新冠病毒，顯色結果為________________，結果為陰性。③利用單克隆抗體制備技術制備試劑盒中的抗體1。先給小鼠注射純化的N抗原蛋白，一段時間后，從小鼠的________(免疫器官)中獲取已免疫的B淋巴細胞，將獲得的細胞與骨髓瘤細胞融合，再經過選擇培養基篩選、________________________，獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞，再經體外培養或注射到小鼠腹腔內培養，最終獲得抗N抗原蛋白的單克隆抗體。4．2017年11月，世界上首例體細胞克隆猴在我國誕生，分別叫“中中”和“華華”，這一成功轟動了全世界，相比較克隆羊和克隆鼠，克隆猴對于研究人類疾病意義更大。如圖是克隆“中中”的相關示意圖。請回答下列問題：(1)在采集卵母細胞之前，需要給卵母細胞供體注射適量的__________________，以增加排卵。選用去核卵母細胞作為核移植的受體細胞的原因有_________________________(答出2點)。(2)從卵巢中吸取的卵母細胞，需在體外培養到__________________，再通過____________法去除細胞核，得到去核卵母細胞。(3)核移植形成的重組細胞需要用____________(物理方法)激活，使其完成細胞分裂和發育進程。體外培養早期胚胎時，培養液的成分除了無機鹽、有機鹽、激素和核苷酸等營養物質外，還需額外