考點二細胞工程1．植物組織培養的過程——原理：植物細胞的全能性(1)植物組織培養中添加蔗糖的目的是提供營養和調節滲透壓。(2)脫分化階段不需要光，再分化階段需要光。(3)生長素與細胞分裂素的比值高時，促進根的分化、抑制芽的形成；比值低時，促進芽的分化、抑制根的形成。(4)體內細胞未表現全能性的原因：基因的表達具有選擇性。2．植物體細胞雜交技術——原理：植物細胞的全能性、細胞膜的流動性3．針對三類目標(試管苗、人工種子、細胞產物)的培養流程4．動物細胞培養——原理：細胞增殖(1)動物細胞培養中兩次使用胰蛋白酶的作用不同：第一次：處理剪碎的組織，使其分散成單個細胞；第二次：使貼壁生長的細胞從瓶壁上脫落下來。(2)使用或冷凍保存的是10代以內的細胞，原因是保持細胞正常的二倍體核型。(3)避免雜菌污染的措施：培養液及培養用具滅菌處理，加入一定量的抗生素，定期更換培養液。(4)區分原代培養和傳代培養的關鍵是是否分瓶培養。5．動物體細胞克隆技術(核移植技術)——原理：動物細胞核的全能性(1)核移植獲得的克隆動物與提供細胞核的親本性狀可能不同的三個原因：①克隆動物遺傳物質來自兩個親本。②發育過程中可能發生基因突變或染色體變異。③外界環境可能引起不可遺傳的變異。(2)克隆動物的產生是無性繁殖，而試管動物則是在體外受精形成受精卵，由受精卵發育成的個體，因此屬于有性繁殖。6．單克隆抗體的制備——原理：細胞膜的流動性、細胞的增殖2次篩選目的不同：①第1次：獲得雜交瘤細胞。②第2次：獲得能分泌所需特異性抗體的雜交瘤細胞。1．(2019·全國Ⅱ，38)植物組織培養技術在科學研究和生產實踐中得到了廣泛的應用。回答下列問題：(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術的特點有___________________________________________________________(答出2點即可)。(2)通過組織培養技術，可把植物組織細胞培養成胚狀體，再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在適宜條件下可萌發生長。人工種皮具備透氣性的作用是______________________________。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質，因此應含有植物激素、__________和________等幾類物質。(3)用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的______進行組織培養。(4)植物組織培養技術可與基因工程技術相結合獲得轉基因植株。將含有目的基因的細胞培養成一個完整植株的基本程序是______________________________________(用流程圖表示)。思維延伸——填充(1)(2019·全國Ⅲ，38節選)培養胡蘿卜根組織可獲得試管苗，獲得試管苗的過程如圖所示，步驟③切取的組織塊中要帶有形成層，原因是________________________；從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養基，其原因是________________________________________________。而步驟⑥要進行照光培養，其作用是____________________________________________。(2)(2020·天津，15節選)在誘導形成愈傷組織階段時通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是____________________________________________________________________________。2．(2020·全國Ⅰ，38)為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程。回答下列問題：(1)上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是_____________________________。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：______________________。(3)為了得到能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養基屬于______________，使用該培養基進行細胞培養的結果是____________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據的基本原理是_________________________________________________________________。(4)若要使能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有_________________________________________________________________(答出2點即可)。3．(2021·湖南，22節選)M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達。現設計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A，流程如圖所示。回答下列問題：(1)在構建含有片段F的重組質粒過程中，切割質粒DNA的工具酶是____________________，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的__________________斷開。(2)在無菌、無毒等適宜環境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養時，需要定期更換培養液，目的是__________________________________________________________________。(3)與胚胎細胞核移植技術相比，體細胞核移植技術的成功率更低，原因是_____________________________________________________________________________________________。(4)鑒定轉基因動物：以免疫小鼠的________淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，篩選融合雜種細胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路：___________________________________________________________________。思維延伸——判斷與填充(1)動物細胞培養時剪碎動物組織的操作不需要在無菌環境中進行(2021·浙江1月選考，18)()(2)單克隆抗體制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合(2021·山東，15)()(3)(2019·江蘇，29節選)采集豬的組織塊，用________________________處理獲得分散的成纖維細胞，放置于37℃的CO2培養箱中培養，其中CO2的作用是__________________________。題組一植物細胞工程1．(2022·黑龍江齊齊哈爾高三測試)人工種子是由體細胞胚、人工種皮以及提供胚發育的營養(人工胚乳)三部分組成。人工種子在農業、林業生產中具有重要的作用。某研究人員利用體細胞胚作為材料制作人工種子，體細胞胚選用的是胚狀體。回答下列問題：(1)胚狀體是由植物莖、葉等外植體經過________________技術獲得的一種類似于自然胚的結構。該技術的原理是__________________，包括的兩個重要過程是________________。除胚狀體之外，人工種子還可選用__________________(答兩種)等作為材料。(2)制備體細胞胚常出現細胞不能同步發育的現象，同一外植體上常出現不同發育時期的體細胞胚，給制作人工種子帶來麻煩。為使體細胞胚達到同步化，研究人員在細胞培養時常采用一定低溫處理外植體一段時間，再將溫度提升到正常培養溫度。這種做法的原理是____________________________________________________________________________。(3)植物激素是調節體細胞胚發育的重要因素，培養體細胞胚的培養基中需要加入的兩種關鍵植物激素是____________________________________________________________________。(4)目前常選用一些膠質化合物薄膜制作人工種皮，理想的人工種皮應該具備一定封閉性和良好的透氣性，原因是_____________________________________________________________。2．(2022·江西宜春高三三模)非對稱細胞融合技術常指利用某種外界因素(如射線)照射某一細胞原生質體，選擇性地破壞其細胞核，使其染色體片段化并喪失再生能力；再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與另一原生質體融合，從而實現有限基因的轉移，在保留親本之一全部優良性狀的同時，改良其某個不良性狀。用這種方法可以將胡蘿卜的抗黑腐病性狀轉移到煙草中，獲得抗黑腐病(由真菌引起)煙草雜種植株，流程如圖所示。回答下列問題：(1)原生質體培養液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是________________。與誘導動物細胞融合相比，②過程不宜采用的誘導方法是_____________；③④過程中需添加的兩種關鍵性植物激素是________________________，④過程的實質是____________________。(2)紫外線作用于根細胞原生質體，使染色體片段化，說明非對稱細胞融合技術的原理之一是________________________________________________________________________。(3)非對稱細胞融合過程中，染色體丟失的程度在同一組合不同的雜種中是不一致的，導致融合后再生后代中的________________數量變化很大。影響細胞融合染色體丟失程度的因素，除了紫外線還可能與____________________________________________________________________________________________________________________________(答兩點)等有關。(4)對雜種植株進行____________接種實驗，可篩選出對黑腐病具有高抗性的雜種植株。題組二動物細胞工程3．我國研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA，經體細胞核移植技術培育出第一批靈長類動物——食蟹猴，流程如圖所示，①～⑥表示過程，該動物可作為研究癌癥等人類疾病的動物模型。請分析回答：(1)進行過程①時，為了防止________________________對細胞自身造成危害，應定期更換培養液；培養液通常加入抗生素其目的是_______________________________________________________________________________________________________________。(2)據圖分析，過程③是利用________技術，將成纖維細胞注入猴去核的MⅡ中期卵母細胞。用于過程③的細胞通常是10代以內的細胞，其原因是_____________________________。一般利用未受精的去核卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，其原因是_________________。(3)2001年，美國科學家已經培育出胚胎細胞核移植猴，核移植是指__________________________________________________________________________________________________。獲得食蟹猴的體細胞核移植技術難度明顯高于胚胎細胞核移植，原因是__________________，________________恢復其全能性較難。通過核移植方法獲得的食蟹猴，與核供體相比，食蟹猴體細胞的染色體數目________________________________________(填“減半”“加倍”或“不變”)。4．(2022·黑龍江哈爾濱九中高三二模)2021年12月8日，中國國家藥監局應急批準騰盛華創醫藥技術(北京)有限公司新冠病毒中和抗體聯合治療藥物安巴韋單抗注射液(BRⅡ－196)及羅米司韋單抗注射液(BRⅡ－198)注冊申請，是中國全自主研發的單抗，聯合用于治療新冠病毒感染患者，效果顯著。結合所學生物知識，回答下列問題：(1)制備新冠單克隆抗體時，可以將新冠抗原注入不同人體內，下表表示免疫次數和抗體效價(每分子抗體能結合抗原的數量)之間的關系，若血清抗體效價需達到1∶4000以上，則人體要至少經過________________次免疫才能符合要求，第一次免疫和第二次免疫時，人體內能產生新冠抗體的細胞分別是由______________________________增殖分化形成的。人體編號抗體效價免疫次數ABCDE第一次1∶10001∶10001∶10001∶10001∶1000第二次1∶20001∶25001∶36001∶22001∶3000第三次1∶40001∶46001∶80001∶50001∶4500(2)制備新冠單克隆抗體過程中，涉及的技術原理是__________________________，專一抗體檢測陽性和克隆化培養的目的是________________________________________，培養動物細胞的四個基本條件有適宜的