高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1四川省成都市郫都區(qū)2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考試本試卷分為第Ⅰ卷（選擇題）和第Ⅱ卷（非選擇題）兩部分。共8頁，滿分100分，答題時(shí)間75分鐘。注意事項(xiàng)：1．答題前，務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡規(guī)定的位置上。2．答選擇題時(shí)，必須使用2B鉛筆將答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號(hào)。3．答非選擇題時(shí)，必須使用0.5毫米黑色簽字筆，將答案書寫在答題卡規(guī)定的位置上。4．所有題目必須在答題卡上作答，在試題卷上答題無效。5．考試結(jié)束后，只將答題卡交回。第Ⅰ卷選擇題一、單項(xiàng)選擇題：本題共15個(gè)小題，每小題3分，共45分。1.微生物在食品和飲料生產(chǎn)中發(fā)揮了重要作用。下表中相關(guān)敘述不正確的是（）選項(xiàng)應(yīng)用主要菌種發(fā)酵說明A味精谷氨酸棒狀桿菌在酸性條件下會(huì)積累谷氨酸，一系列處理后可制成味精B腐乳毛霉將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，故腐乳味道鮮美，易于消化吸收C醋醋酸菌O2和糖源都充足時(shí)分解糖類產(chǎn)生乙酸，缺少糖源時(shí)反應(yīng)簡(jiǎn)式是D酸奶乳酸菌厭氧細(xì)菌，在無氧條件下將葡萄糖分解成乳酸【答案】A〖祥解〗傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作離不開各種各樣的微生物。（1）乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下能將葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的發(fā)酵、泡菜的腌制等；（2）醋酸菌是好氧細(xì)菌，當(dāng)O2、糖源都充足時(shí)能將糖分解成醋酸，當(dāng)缺少糖源時(shí)則將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿幔姿峋捎糜谥谱鞲鞣N風(fēng)味的醋；（3）谷氨酸棒狀桿菌在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣，并通過攪拌使空氣形成細(xì)小的氣泡，迅速溶解在培養(yǎng)液中（溶氧），在溫度為攝氏30~37℃，pH為7到8的情況下，經(jīng)28~32小時(shí)，培養(yǎng)液中會(huì)生成大量的谷氨酸，在發(fā)酵過程中，當(dāng)pH呈酸性時(shí)，谷氨酸棒狀桿菌就會(huì)生成乙酰谷氨酰胺；當(dāng)溶氧不足時(shí)，生成的代謝產(chǎn)物就會(huì)是乳酸或琥珀酸。（4）傳統(tǒng)釀造醬油使用菌種中的曲霉、酵母菌、乳酸菌在醬油發(fā)酵過程中分泌的酶不同，它們所發(fā)揮的作用就不同。曲霉中的米曲霉分泌多種水解酶，分解如豆粕、麩皮、面粉等原料中的蛋白質(zhì)和碳水化合物，分解產(chǎn)物不僅滿足自身需要，也可供菌種中的酵母菌、乳酸菌利用。曲霉代謝生產(chǎn)的醇、酸、醛、酯、酚、縮醛和呋喃酮等多種成分，雖多為微量，卻構(gòu)成了醬油復(fù)雜的香氣。【詳析】A、谷氨酸棒狀桿菌在中性和弱堿性條件下會(huì)積累谷氨酸，在酸性條件下則容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，得到谷氨酸后，再經(jīng)過一系列處理后可制成味精，A錯(cuò)誤；B、毛霉可將原料中的蛋白質(zhì)分解成多肽和氨基酸，易于消化吸收，B正確；C、醋酸菌在糖源和氧氣充足時(shí)，可以直接將乙醇氧化成醋酸和水，反應(yīng)簡(jiǎn)式正確，C正確；D、乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸，用于乳制品的發(fā)酵、泡菜的腌制等，D正確。故選A。2.將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用蒸餾水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。M培養(yǎng)基可用于真菌a的篩選，某同學(xué)將獲得的真菌a利用如圖的方式進(jìn)行稀釋，統(tǒng)計(jì)甲、乙、丙三個(gè)平板中的菌落數(shù)分別是110、140和149，下列分析正確的是（）A.若采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中的真菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)的結(jié)果為活菌數(shù)B.若在培養(yǎng)真菌a的培養(yǎng)基中添加一定量的青霉素，可抑制細(xì)菌和酵母菌的繁殖C.選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是排除無關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾D.根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為1.33×1011個(gè)/L【答案】D〖祥解〗血球計(jì)數(shù)板可以用于人體內(nèi)紅、白血球計(jì)數(shù)之用，也用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量，因此若測(cè)定培養(yǎng)液中的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，也可稀釋涂布平板，根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)目。【詳析】A、若采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接對(duì)a培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)的是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，A錯(cuò)誤；B、青霉素可抑制細(xì)菌的繁殖，不能抑制酵母菌（真菌）的繁殖，B錯(cuò)誤；C、選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是減小實(shí)驗(yàn)誤差，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為（110+140+149）÷3÷0.1×105=1.33×108個(gè)/mL，故每升中有1.33×1011個(gè)，D正確。故選D。3.在2019年夏秋兩季，一些癌癥患者突然經(jīng)歷了治療的中斷，這是因?yàn)閮煞N常用堿性物質(zhì)癌癥化療藥物長(zhǎng)春堿（vinblastine）和長(zhǎng)春新堿（vincristine）的短缺。某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)酵母菌進(jìn)行基因工程改造，使用酵母菌和簡(jiǎn)單的可再生物質(zhì)（酵母培養(yǎng)基成分）來制造長(zhǎng)春堿前體物質(zhì)，生產(chǎn)過程不太容易受到疫情及疫情帶來的物流問題的干擾，而且生產(chǎn)過程不再依賴植物，因此也不會(huì)受到植物病害和自然災(zāi)害的影響。下列有關(guān)說法正確的是（）A.在實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)將操作空間、操作者的衣著和手、微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具等進(jìn)行滅菌B.為鑒別出可生產(chǎn)長(zhǎng)春堿和長(zhǎng)春新堿的酵母菌，可在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)指示劑C.可采用平板劃線法獲得酵母菌的純培養(yǎng)物，一個(gè)菌落即一個(gè)群落D.擴(kuò)大培養(yǎng)酵母菌時(shí)，應(yīng)將固體培養(yǎng)基倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)【答案】B〖祥解〗消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物的方法殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。【詳析】A、在實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)將操作空間、微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具等進(jìn)行滅菌，而操作者的衣著和手需要進(jìn)行消毒處理，A錯(cuò)誤；B、為鑒別出可生產(chǎn)長(zhǎng)春堿和長(zhǎng)春新堿的酵母菌，可在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)指示劑，可以顯出不同的顏色，B正確；C、可采用平板劃線法獲得酵母菌的純培養(yǎng)物，培養(yǎng)皿中的一個(gè)菌落是同種生物的全部個(gè)體，屬于一個(gè)種群，C錯(cuò)誤；D、對(duì)于微生物進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)（富集培養(yǎng)）時(shí)需要用液體培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。故選B。4.黑曲霉是一種絲狀真菌，其代謝產(chǎn)物檸檬酸是廣泛應(yīng)用的一種食品添加劑。下圖是食品工業(yè)以紅薯粉為原料經(jīng)黑曲霉發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的簡(jiǎn)要流程圖。下列敘述正確的是（）A.黑曲霉與生產(chǎn)果醋時(shí)所用主要微生物的代謝類型相同B.黑曲霉是一種霉菌，培養(yǎng)該菌種時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)基PH調(diào)節(jié)至中性C.發(fā)酵罐內(nèi)接種的是黑曲霉的純培養(yǎng)物，所以發(fā)酵罐不需要嚴(yán)格滅菌D.若發(fā)酵罐C中的原料為大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成醬油【答案】A〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。【詳析】A、由培養(yǎng)時(shí)需要通氣振蕩可知，黑曲霉的異化作用類型為需氧型，因此其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，制作果醋利用的是醋酸菌，它的代謝類型均為異養(yǎng)需氧型，A正確；B、黑曲霉是一種霉菌，培養(yǎng)該菌種時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)基PH調(diào)節(jié)至酸性，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵罐內(nèi)接種的是黑曲霉的純培養(yǎng)物，為了獲得純凈的培養(yǎng)物，發(fā)酵罐需要嚴(yán)格滅菌，這樣可以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；D、以大豆為主要原料，其中富含蛋白質(zhì)，因此，利用產(chǎn)生蛋白酶的黑曲霉，將原料中的蛋白質(zhì)水解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可以制成醬油產(chǎn)品，D錯(cuò)誤。故選A。5.發(fā)酵工程在農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面均有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，酵母菌的繁殖和酒精的生成均在后發(fā)酵階段完成B.發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)藥物可以解決部分藥物來源不足、產(chǎn)量不足、價(jià)格貴等問題C.將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗D.微生物肥料可增加土壤肥力、改善土壤結(jié)構(gòu)、減少病害的發(fā)生【答案】A〖祥解〗啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和代謝物的生成在主發(fā)酵完成。主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環(huán)境下儲(chǔ)存一段時(shí)間進(jìn)行后發(fā)酵，這樣才能獲得澄清、成熟的啤酒。【詳析】A、啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和代謝物的生成在主發(fā)酵完成，A錯(cuò)誤；B、發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)藥物可以解決部分藥物來源不足、產(chǎn)量不足、價(jià)格貴等問題，進(jìn)而可以普通人用得起該藥，B正確；C、乙肝疫苗的主要成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白，將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，可生產(chǎn)乙型肝炎疫苗，C正確；D、微生物肥料可增加土壤肥力、改善土壤結(jié)構(gòu)、減少病害的發(fā)生，如根瘤菌肥和固氮菌肥等，D正確。故選A。6.如圖表示用某植物未成熟的花粉培育成完整植株的過程，X表示結(jié)構(gòu)，①~④表示相關(guān)過程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.過程①表示脫分化，X是愈傷組織，該過程一般需要光照B.過程②細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值小于過程③的比值C.該過程沒有體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性D.培養(yǎng)過程需對(duì)外植體和操作臺(tái)用95%的乙醇進(jìn)行消毒【答案】B〖祥解〗植物的組織培養(yǎng)是利用植物細(xì)胞具有全能性原理，使植物組織在培養(yǎng)基的條件下，通過細(xì)胞的脫分化作用和再分化作用，快速發(fā)育成一株完整的植物的高新技術(shù)手段。【詳析】A、圖中過程①表示脫分化，②③表示再分化，X表示愈傷組織，脫分化過程一般需要避光，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞分裂素促進(jìn)發(fā)芽，生長(zhǎng)素促進(jìn)生根，過程②細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值小于過程③的比值，B正確；C、過程①~④是植物組織培養(yǎng)過程，由花粉細(xì)胞最終獲得了完整植物個(gè)體，說明花粉細(xì)胞具有全能性，C錯(cuò)誤；D、培養(yǎng)過程需對(duì)外植體和操作臺(tái)用75%的乙醇進(jìn)行消毒染，D錯(cuò)誤。故選B。7.花椰菜（2n=18）易患黑腐病導(dǎo)致減產(chǎn)，黑芥（2n=16）則有較好的黑腐病抗性。下圖是科研人員培育具有黑腐病抗性的花椰菜植株m、n和s的過程，已知植株m、n和s均含有花椰菜的全部染色體。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A.①過程需用酶解法處理，融合的原生質(zhì)體需要具有再生能力B.對(duì)黑芥進(jìn)行紫外線處理可能會(huì)使黑芥細(xì)胞發(fā)生染色體變異C.②過程只需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)即可D.③過程需接種黑腐病菌從而篩選獲得具有抗黑腐病的植株m、n、s【答案】C〖祥解〗植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠酶，根據(jù)酶的專一性，為獲得原生質(zhì)體時(shí)需用纖維素酶和果膠酶處理。【詳析】A、①過程需用果膠酶和纖維素酶處理去除細(xì)胞壁，得到原生質(zhì)體，并需檢驗(yàn)得到的融合的原生質(zhì)體是否有具有再生能力，A正確；B、對(duì)黑芥進(jìn)行紫外線處理的目的是發(fā)生染色體變異，使具有黑腐病抗性基因的染色體部分?jǐn)嗔眩罱K形成染色體變異的植株，B正確；C、②過程需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)和篩選符合條件的植株，排除同種原生質(zhì)體融合后發(fā)育得到的植株，C錯(cuò)誤；D、③過程需接種黑腐病菌，篩選獲得具有抗黑腐病的植株m、n、s，D正確。故選C。8.核苷酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑（如圖）。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶。現(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”來篩選特定的雜交瘤細(xì)胞。下列關(guān)于篩選原理的敘述，正確的是（）A.免疫的B細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖B.骨髓瘤細(xì)胞及其互相融合細(xì)胞可以通過補(bǔ)救合成途徑在HAT培養(yǎng)基上增殖C.雜交瘤細(xì)胞既擁有無限增殖的能力又含有轉(zhuǎn)化酶和激酶，所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖D.HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體【答案】C〖祥解〗據(jù)題圖分析可知，核苷酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑。在加入H、A、T三種物質(zhì)的HAT培養(yǎng)基中，已免疫的B淋巴細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，能進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑，但無法大量增殖；制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶，無法進(jìn)行補(bǔ)救合成途徑，又因全合成途徑被物質(zhì)A阻斷，因此在HAT培養(yǎng)基上不能增殖；只有融合成功的雜交瘤細(xì)胞既能大量增殖，又可以通過補(bǔ)救合成途徑合成核苷酸，因此被篩選出來。【詳析】A、免疫的B細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，本身不具備增殖能力，A錯(cuò)誤；B、骨髓瘤細(xì)胞及其相互融合細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上，全合成途徑被物質(zhì)A阻斷，又因缺乏轉(zhuǎn)化酶，補(bǔ)救合成途徑無法進(jìn)行，因此不能增殖，B錯(cuò)誤；C、雜交瘤細(xì)胞既擁有無限增殖的能力又含有轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以進(jìn)行補(bǔ)救合成，所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖，C正確；D、HAT培養(yǎng)基上只能篩選出雜交瘤細(xì)胞，并不能選出產(chǎn)生高純度的目標(biāo)抗體的雜交瘤細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選C。9.傳染性早熟病毒（IPV）是一種導(dǎo)致羅氏沼蝦性早熟和生長(zhǎng)緩慢的新型病毒，主要侵染羅氏沼蝦的神經(jīng)組織。研究人員利用蝦類神經(jīng)細(xì)胞系培養(yǎng)技術(shù)來研究IPV病毒與宿主細(xì)胞的互作情況，如圖是部分培養(yǎng)過程。下列說法正確的是（）A.丙、丁、戊瓶應(yīng)放置于含95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)B.乙過程加入木瓜蛋白酶的作用可能是將蝦類神經(jīng)組織分散成單個(gè)細(xì)胞C.丁過程會(huì)出現(xiàn)懸浮或貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，可以直接采用離心法進(jìn)行收集D.為避免培養(yǎng)過程中雜菌污染，丁、戊過程培養(yǎng)瓶蓋必須旋緊以防漏氣【答案】B〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。【詳析】A、丙、丁、戊瓶應(yīng)將其置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；B、由于動(dòng)物細(xì)胞間存在蛋白質(zhì)，故甲→乙和丙→丁過程需要用木瓜蛋白酶處理，分散成單個(gè)細(xì)胞，B正確；C、傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可直接用離心法收集，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞需要先用胰蛋白酶處理，C錯(cuò)誤；D、為避免培養(yǎng)過程中的雜菌污染，保證其氣體需要，丁、戊過程中需松動(dòng)培養(yǎng)瓶蓋，D錯(cuò)誤。故選B。10.2017年，某國(guó)批準(zhǔn)了首例使用細(xì)胞核移植技術(shù)培育“三親嬰兒”的申請(qǐng)。其培育過程可選用如下技術(shù)路線，下列敘述不正確的是（）A.捐贈(zèng)者的卵子去核實(shí)質(zhì)是指去除細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物B.卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者攜帶的抗維生素D佝僂病基因能夠遺傳給“三親嬰兒”C.該技術(shù)可以有效避免母親線粒體DNA中的致病基因遺傳給后代D.“三親嬰兒”同時(shí)擁有自己父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者的部分基因【答案】B〖祥解〗一、分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。二、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來自雙親，其核遺傳物質(zhì)來自供核生物，而細(xì)胞質(zhì)基因來自提供細(xì)胞質(zhì)的生物。【詳析】A、核移植的受體細(xì)胞處于MII期，捐贈(zèng)者的卵子去核實(shí)質(zhì)是指去掉細(xì)胞中的紡錘體-染色體復(fù)合物，A正確；B、捐獻(xiàn)者攜帶的抗維生素D佝僂病基因位于其細(xì)胞核內(nèi)，而捐獻(xiàn)者給三親嬰兒提供的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，故捐獻(xiàn)者攜帶的抗維生素D佝僂病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，B錯(cuò)誤；C、母親為“三親嬰兒“提供的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，后代的線粒體基因來自捐獻(xiàn)者的卵母細(xì)胞，故該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代，C正確；D、“三親嬰兒”的細(xì)胞核基因一半來自母親，一半來自父親，線粒體基因來自于卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者，所以“三親嬰兒”同時(shí)擁有自己父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者的部分基因，D正確。故選B。11.“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列敘述不正確的是（）A.篩選某土壤微生物時(shí)，允許特定微生物生長(zhǎng)，抑制其他種類的微生物生長(zhǎng)，篩選到的一定都是目的菌B.基因工程育種時(shí)，需要通過標(biāo)記基因篩選出含有基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞C.胚胎移植前，需對(duì)通過體外受精或其他方式得到的胚胎進(jìn)行質(zhì)量篩選D.制備單克隆抗體時(shí)，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞【答案】A〖祥解〗一、單克隆抗體制備的兩次篩選：①利用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）：②進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。二、胚胎移植前，需對(duì)通過體外受精或其他方式得到的胚胎進(jìn)行質(zhì)量篩選，此時(shí)胚胎應(yīng)發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段。【詳析】A、篩選某土壤微生物時(shí)，允許特定微生物生長(zhǎng)，抑制其他種類的微生物生長(zhǎng)，篩選到的不一定都是目的菌，如以石油為唯一碳源篩選分解石油的微生物時(shí)，可能在該培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)自養(yǎng)型微生物，A錯(cuò)誤；B、基因工程育種時(shí)，需要通過標(biāo)記基因，篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞，B正確；C、胚胎移植前，需對(duì)通過體外受精或其他方式得到的胚胎進(jìn)行質(zhì)量篩選，挑取質(zhì)量好，活性強(qiáng)的胚胎進(jìn)行培養(yǎng)或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正確；D、制備單克隆抗體時(shí)，在篩選出雜交瘤細(xì)胞后，需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。上述篩選過程中涉及的抗體檢測(cè)屬于分子水平的篩選，所以，制備單克隆抗體時(shí)，需從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，D正確。故選A。12.“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)步驟是：研磨→去雜質(zhì)→析出→鑒定。某研究小組欲探究不同的去雜質(zhì)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。下列說法不正確的是（）去雜質(zhì)方式沉淀質(zhì)量（g）DNA濃度（ng/μL）OD260/OD280二苯胺鑒定離心0.06881.51.53藍(lán)色4℃冰箱靜置0.1028336.41.41（注：OD260與OD280的比值可檢查DNA純度。純DNA的OD260/OD280為1.8，當(dāng)存在蛋白質(zhì)污染時(shí)，這一比值會(huì)明顯降低）A.在漏斗中墊上紗布，將洋蔥研磨液過濾到燒杯，在4℃冰箱放置幾分鐘后取上清液B.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液C.豬肝、豬成熟紅細(xì)胞和菜花均可作為提取DNA的材料D.離心法可以獲得更高純度的DNA【答案】C〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。【詳析】A、在漏斗中墊上紗布，將洋蔥研磨液過濾到燒杯，DNA在濾液中，在4℃冰箱放置幾分鐘后取上清液，A正確；B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的，B正確；C、DNA粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇富含DNA的材料，豬肝和菜花均可作為提取DNA的材料，豬（哺乳動(dòng)物）成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，無DNA，不能作為提取DNA的材料，C錯(cuò)誤；D、離心研磨液的目的是加速沉淀，離心能夠加速細(xì)胞膜、細(xì)胞器、一些較大雜質(zhì)的沉淀，離心法可以獲得更高純度的DNA，D正確。故選C。13.生物技術(shù)與工程學(xué)相結(jié)合，可研究、設(shè)計(jì)和加工生產(chǎn)各種生物工程產(chǎn)品。下列有關(guān)敘述正確的是（）①由于外植體在植物組織培養(yǎng)過程中不感染病毒，用任何外植體都可制備脫毒苗②由iPS細(xì)胞產(chǎn)生特定細(xì)胞，可以在新藥的測(cè)試中發(fā)揮重要作用③用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器官移植的供體時(shí)，由于導(dǎo)入調(diào)控基因表達(dá)的DNA序列，而不是目的基因，因此無法抑制抗原的合成④PCR反應(yīng)過程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成，而后常用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物⑤利用基因工程技術(shù)的乳腺生物反應(yīng)器，可以讓哺乳動(dòng)物批量生產(chǎn)相應(yīng)的藥物⑥蛋白質(zhì)工程僅以蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)逆中心法則進(jìn)行，就可以改造或制造新蛋白質(zhì)A.①③ B.②④⑤ C.②④⑥ D.①④⑤⑥【答案】B〖祥解〗PCR技術(shù)是對(duì)體內(nèi)DNA復(fù)制過程的模仿，也需要模板、原料、酶和引物等。待擴(kuò)增的DNA分子是模板，原料是4種脫氧核苷三磷酸，即dNTP，N代表A、T、G、C四種堿基。PCR過程包括多次循環(huán)，每個(gè)循環(huán)分為3個(gè)步驟。①變性：模板DNA雙鏈在高溫下（90～95℃）氫鍵斷裂，解旋成2條DNA單鏈，這個(gè)過程稱為變性。②退火：溫度降低（50～60℃）后，2個(gè)引物分別與各自互補(bǔ)的DNA單鏈結(jié)合，稱為退火。③延伸：分別以兩條DNA單鏈為模板，4種脫氧核苷三磷酸為原料，耐高溫的TaqDNA聚合酶在適宜的溫度（約72℃）下，以引物與模板形成的小段DNA雙鏈區(qū)為起點(diǎn)，催化合成一條新的DNA互補(bǔ)鏈。【詳析】①雖然外植體在植物組織培養(yǎng)過程中不感染病毒，但外植體可能本身攜帶病毒，因此不是用任何外植體都可制備脫毒苗，一般用莖尖制備脫毒苗，①錯(cuò)誤；②iPS細(xì)胞為多功能干細(xì)胞，能分裂分化產(chǎn)生的特定細(xì)胞，可以在新藥的測(cè)試中發(fā)揮重要作用，②正確；③用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器官移植的供體時(shí)，將供體器官基因組導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，③錯(cuò)誤；④PCR反應(yīng)過程可以在PCR擴(kuò)增儀中自動(dòng)完成，PCR的產(chǎn)物的分子量大小等不同，因此常用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物，④正確；⑤利用基因工程技術(shù)的乳腺生物反應(yīng)器，可以利用哺乳動(dòng)物源源不斷地批量生產(chǎn)相應(yīng)的藥物，⑤正確；⑥蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要，⑥錯(cuò)誤。故選B。14.CRISPR/Cas9是一種基因組編輯系統(tǒng)，能夠通過“剪切和粘貼”脫氧核糖核酸（DNA）序列的機(jī)制來編輯基因組。這套系統(tǒng)源自細(xì)菌的防御機(jī)制，是一種對(duì)任何生物基因組均有效的基因編輯工具。RISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向?qū)NA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白組成，向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合靶基因DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端。這兩個(gè)末端通過“斷裂修復(fù)”重新連接時(shí)通常會(huì)有個(gè)別堿基對(duì)的插入或缺失，從而實(shí)現(xiàn)基因編輯，如圖所示。CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)有時(shí)也會(huì)存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶。下列敘述不正確的是（）A.可以利用CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)，改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造一種新蛋白質(zhì)B.sgRNA的序列與目的基因特定堿基序列部分結(jié)合，結(jié)合區(qū)域最多含8種核苷酸C.若其他DNA中含有與sgRNA互補(bǔ)的序列，則可能造成sgRNA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶D.Cas9蛋白相當(dāng)于限制酶，能作用于脫氧核糖和堿基之間的磷酸二酯鍵【答案】D〖祥解〗由題意可知，CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)是由靶基因的向?qū)NA和Cas9蛋白構(gòu)成的復(fù)合體。向?qū)NA在基因組中負(fù)責(zé)尋找靶基因并與其結(jié)合，Cas9蛋白在向?qū)NA的引導(dǎo)下切割靶基因，使DNA雙鏈斷裂產(chǎn)生平末端。在隨后DNA自我修復(fù)的過程中，容易隨機(jī)引起一些堿基對(duì)的插入或缺失，導(dǎo)致基因功能改變。【詳析】A、CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)，可以定向改造基因，從而改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造一種新的蛋白質(zhì)，A正確；B、sgRNA與目的基因結(jié)合區(qū)域最多含8種核苷酸（4種脫氧核苷酸和4種核糖核苷酸），B正確；C、CRISPR/Cas9基因組編輯系統(tǒng)有時(shí)存在編輯出錯(cuò)而造成脫靶，其最可能的原因是其他DNA序列也含有與向?qū)NA（sgRNA）互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成向?qū)NA（sgRNA）錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶，C正確；D、Cas9蛋白識(shí)別并切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端，相當(dāng)于限制酶，能作用于磷酸和脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。故選D。15.用A和B兩種限制酶同時(shí)和分別處理同一DNA片段，限制酶對(duì)應(yīng)切點(diǎn)一定能切開。兩種酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果如圖1和圖2所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.圖1中限制酶A、B識(shí)別的核苷酸序列不相同B.推測(cè)圖1中Y是限制酶B的酶切位點(diǎn)C.圖1中X代表的堿基對(duì)數(shù)為4500D.圖2中的條帶是通過對(duì)DNA分子染色，在紫外燈下檢測(cè)出來的【答案】B〖祥解〗由題可知，圖2中三列條帶分別對(duì)應(yīng)用A和B兩種限制酶同時(shí)以及單獨(dú)使用限制酶A、限制酶B處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果，再通過①和②的結(jié)果結(jié)合圖1，分析可知①是單獨(dú)使用限制酶A處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果，②是單獨(dú)使用限制酶B處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果。【詳析】A、因?yàn)槭褂肁+B兩種酶處理DNA片段酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果與單獨(dú)使用一種酶處理DNA片段酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果如圖2所示并不相同，所以圖1中限制酶A、B識(shí)別的核苷酸序列一定不同，A正確；B、根據(jù)圖2中①電泳分離結(jié)果存在3500bp長(zhǎng)度的條帶可知①是單獨(dú)使用限制酶A處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果，再根據(jù)①電泳分離結(jié)果存在500bp長(zhǎng)度和6000bp長(zhǎng)度的條帶可知Y是限制酶A的酶切位點(diǎn)，B錯(cuò)誤；C、結(jié)合圖1和圖2中第一列A+B酶同時(shí)處理的電泳條帶結(jié)果分析可知，圖1中X代表的堿基對(duì)數(shù)為4500，C正確；D、電泳凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來，D正確。故選B。第Ⅱ卷非選擇題二、非選擇題：共5個(gè)大題，共55分。請(qǐng)將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。16.為確定某致病細(xì)菌對(duì)不同抗生素的敏感性，研究人員設(shè)置了四組實(shí)驗(yàn)：分別將含有A、B、C、D四種抗生素（含量相同）等大小的濾紙片均勻置于同一平板上的不同位置，放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間后，觀察其透明圈的大小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表。回答下列問題：實(shí)驗(yàn)組別抗生素種類實(shí)驗(yàn)結(jié)果1A濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈2B濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈3C濾紙片周圍的透明圈比含A的小4D濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落（1）制備培養(yǎng)基時(shí)需添加______（至少答出3點(diǎn)）等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，配制好的培養(yǎng)基要用______法滅菌。在微生物培養(yǎng)過程中，用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板倒置，其原因是______。（2）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素種類為______；在排除雜菌污染的情況下，不宜選用抗生素D治療該致病菌引起的疾病，是因?yàn)榧?xì)菌對(duì)抗生素D容易產(chǎn)生______。（3）該實(shí)驗(yàn)還缺少一組空白對(duì)照，請(qǐng)嘗試補(bǔ)充：______。（4）利用下圖A的方法接種菌液樣品需使用的接種工具是______，用這種方法測(cè)定菌體密度時(shí)，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量多，原因是______。圖B接種方法也可以分離、純化微生物，其中純化菌種的原理是______。【答案】（1）①.水、無機(jī)鹽、碳源、氮源②.濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）③.防止冷凝水污染培養(yǎng)基；防止培養(yǎng)基中的水分過快散失（2）①.抗生素A②.耐藥性（3）增加一組不含抗生素的濾紙片進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)（等量無菌水代替抗生素的濾紙片進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)）（4）①.涂布器②.當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落③.通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面〖祥解〗題意分析，根據(jù)表格內(nèi)容可知，使用抗生素A時(shí)，濾紙片周圍出現(xiàn)了透明圈，且透明圈最大，故抗生素A的抗菌效果最好。為了增強(qiáng)本實(shí)驗(yàn)的說服力，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)增加一組不含抗生素的濾紙片進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)作為空白對(duì)照組，以排除濾紙片本身對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。【小問1詳析】培養(yǎng)基為微生物提供營(yíng)養(yǎng)，需添加水、無機(jī)鹽、碳源、氮源；濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）可對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；為了防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落到培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基以及避免培養(yǎng)基中的水分過快蒸發(fā)，用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板倒置。【小問2詳析】根據(jù)表格可知，使用抗生素A時(shí)，濾紙片周圍出現(xiàn)了透明圈，且透明圈最大，故為了達(dá)到良好的抗菌效果，最好應(yīng)選用抗生素A；在排除雜菌污染的情況下，第4組的透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，說明細(xì)菌對(duì)抗生素D產(chǎn)生了耐藥性（抗藥性）。【小問3詳析】該實(shí)驗(yàn)還缺少一組空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，應(yīng)增加一組不含抗生素的濾紙片進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，以排除濾紙片本身對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，這樣可以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力。【小問4詳析】圖A的方法為稀釋涂布平板法，需使用的接種工具是涂布器；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落，因此用這種方法測(cè)定菌體密度時(shí)，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量多；通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，達(dá)到分離、純化微生物的作用。17.非洲狼尾草光合效率高，為培育高光合效率的水稻新品種，研究人員將粳稻與非洲狼尾草的原生質(zhì)體融合并培育出雜種幼苗，如圖1。研究人員同時(shí)開展了不同濃度的聚乙二醇（PEG）對(duì)原生質(zhì)體融合率的影響實(shí)驗(yàn)（已知PEG濃度較高時(shí)對(duì)細(xì)胞具有毒害作用），實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示（異源融合率是指不同種的原生質(zhì)體發(fā)生融合的概率）。回答下列問題：（1）在進(jìn)行原生質(zhì)體融合前，需______，方法是______。誘導(dǎo)粳稻與非洲狼尾草的原生質(zhì)體融合的方法除用PEG處理外，還有______（答兩點(diǎn)）等具體方法。實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體融合的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)是______。（2）原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是______，④過程與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)相比不需要加入______，⑤過程是再分化，其實(shí)質(zhì)是______。和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是______。（3）已知非洲狼尾草正常體細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，粳稻正常體細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，則融合后形成的雜種細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)可形成______組織團(tuán)塊，這稱為愈傷組織，進(jìn)一步培育成“非洲狼尾草一粳稻”植物新品種，其體細(xì)胞有絲分裂后期有______條染色體。（4）分析圖2能夠得出不同PEG濃度下同源融合率均______（填“大于”“小于”或“等于”）異源融合率。若想要進(jìn)一步確定誘導(dǎo)粳稻與非洲狼尾草原生質(zhì)體融合的最佳PEG濃度，實(shí)驗(yàn)思路是：______。【答案】（1）①.除去細(xì)胞壁②.用纖維素酶和果膠酶處理③.電融合法、離心法、高Ca2+-高pH融合法（答出兩點(diǎn)即可）④.細(xì)胞膜具有流動(dòng)性（2）①.（雜種細(xì)胞）再生出細(xì)胞壁②.血清等天然成分③.基因的選擇性表達(dá)④.打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種；培育植物新品種（答到一點(diǎn)即可）（3）①.不定形的薄壁②.2（m+n）（4）①.大于②.在PEG濃度為30%～40%范圍內(nèi)設(shè)置一系列濃度梯度，其中異源融合率最高的PEG濃度即為最適融合濃度〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交過程中需要先進(jìn)行去壁處理，植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，可利用酶解法，即利用纖維素酶和果膠酶分解細(xì)胞壁得到植物原生質(zhì)體。【小問1詳析】植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，進(jìn)行原生質(zhì)體融合需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁進(jìn)而獲得原生質(zhì)體。促進(jìn)植物原生質(zhì)體融合的方法包括電融合法、離心法、高Ca2＋-高pH融合法和PEG處理。實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體融合的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。【小問2詳析】原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是雜交細(xì)胞再生出細(xì)胞壁，④過程是植物的組織培養(yǎng)，較動(dòng)物細(xì)胞而言，其不需要加入血清等天然成分，再分化屬于分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和，培育出新品種等。【小問3詳析】愈傷組織是指高度分化的植物組織脫分化后形成的不定形的薄壁細(xì)胞組織，已知非洲狼尾草正常體細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，粳稻正常體細(xì)胞內(nèi)有n條染色體，融合后形成的雜種細(xì)胞培育成“非洲狼尾草一粳稻”植物新品種（m+n條染色體），其體細(xì)胞有絲分裂后期有2（m+n）條染色體。【小問4詳析】同源融合率=總?cè)诤下?異源融合率，根據(jù)圖1柱狀圖分析，不同PEG濃度同源融合率均大于異源融合率。圖中當(dāng)PEG濃度為35%時(shí)異源融合率最高，若想要進(jìn)一步確定誘導(dǎo)粳稻與非洲狼尾草原生質(zhì)體融合的最佳PEG濃度，應(yīng)在PEG濃度為30%～40%范圍內(nèi)設(shè)置一系列濃度梯度，其中異源融合率最高的PEG濃度即為最適融合濃度。18.癌癥的免疫療法通過重新激活抗腫瘤的免疫細(xì)胞，克服腫瘤的免疫逃逸，在癌癥治療方法中取得越來越突出的地位，科研人員在不斷研究中發(fā)現(xiàn)多種免疫治療方法的結(jié)合是提高治療效果的途徑之一。（1）癌細(xì)胞由于原癌基因、抑癌基因等突變導(dǎo)致其表面物質(zhì)發(fā)生改變，如某些種類癌細(xì)胞表面高表達(dá)膜蛋白PSMA和PD-L1，如圖1所示：PD-L1能抑制T細(xì)胞的活化，使癌細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸。臨床上可利用PD-1的單克隆抗體進(jìn)行癌癥治療，據(jù)圖1推測(cè)，其原因是______。（2）CD28是T細(xì)胞表面受體，T細(xì)胞有效激活依賴于CD28在癌細(xì)胞與T細(xì)胞結(jié)合部位的聚集。因此，科研人員嘗試構(gòu)建既能結(jié)合PSMA，還能結(jié)合CD28的雙特異性抗體PSMA×CD28，誘導(dǎo)T細(xì)胞定向殺傷癌細(xì)胞，如圖2。制備過程為：先將______分別注射到小鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后分離出B淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)其與小鼠的______細(xì)胞融合；與植物體細(xì)胞雜交相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法是______。利用HAT培養(yǎng)基（其原理參考選擇題第8題）篩選得到A、B兩種雜交瘤細(xì)胞后，再誘導(dǎo)兩種雜交瘤細(xì)胞融合成雙雜交瘤細(xì)胞AB，______（選填“能”或“不能”）再次利用HAT培養(yǎng)基篩選雙雜交瘤細(xì)胞，原因是______。（3）科研人員將癌細(xì)胞和T細(xì)胞共同培養(yǎng)，加入不同抗體，探究比較不同抗體及抗體濃度變化對(duì)T細(xì)胞活化作用的影響。實(shí)驗(yàn)各組由活化T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IL-2含量如圖3所示，結(jié)果說明______。【答案】（1）PD-1單抗阻斷了PD-1和PD-L1結(jié)合，使PD-L1無法抑制T細(xì)胞的活化（2）①.PSMA、CD28②.骨髓瘤③.滅活病毒誘導(dǎo)法④.不能⑤.雜交瘤細(xì)胞A、B、雙雜交瘤細(xì)胞AB都能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，無法選擇（3）PSMA×CD28和PD-1單抗聯(lián)合使用能夠顯著激活T細(xì)胞，且在一定范圍內(nèi)隨抗體濃度增加激活作用增強(qiáng)；（單獨(dú)使用PSMA×CD28或PD-1單抗，都不能顯著激活T細(xì)胞）〖祥解〗一、單克隆抗體：由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。二、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞；利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。三、單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞；第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。【小問1詳析】據(jù)圖分析，PD-1的單克隆抗體與PD-1特異性結(jié)合，阻斷了PD-L1和PD-1的結(jié)合，使PD-L1無法抑制T細(xì)胞的活化，從而發(fā)生細(xì)胞免疫，消滅癌細(xì)胞。【小問2詳析】制備雙特異性抗體PSMA×CD28，則抗原是CD28和PSMA，將兩種物質(zhì)分別注射到小鼠體內(nèi)，刺激B細(xì)胞增殖分化出相應(yīng)的漿細(xì)胞；將兩類漿細(xì)胞分別和小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，形成兩種雜交瘤細(xì)胞，再誘導(dǎo)兩種雜交瘤細(xì)胞融合；由于雜交瘤細(xì)胞A、B、雙雜交瘤細(xì)胞AB都能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，所以不能利用HAT培養(yǎng)基篩選雙雜交瘤細(xì)胞。與植物體細(xì)胞雜交相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法是滅活病毒誘導(dǎo)法。【小問3詳析】據(jù)圖分析，自變量是抗體種類，其中PSMA×CD28和PD-1單抗聯(lián)合使用能夠顯著激活T細(xì)胞（活化T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子IL-2含量升高），且隨PSMA×CD28濃度增加激活作用增強(qiáng)；單獨(dú)使用PSMA×CD28或PD-1單抗，都不能顯著激活T細(xì)胞。19.2019年新冠疫情爆發(fā)以來，疫情防控成為社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)問題。下圖所示為某科研團(tuán)隊(duì)針對(duì)新冠病毒（RNA病毒）運(yùn)用基因工程研制新冠病毒疫苗的過程。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼的酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。回答下列問題：（1）獲取目的基因的過程中，首先提取新冠病毒的核酸，再通過______酶的作用獲得cDNA（互補(bǔ)DNA），并可借助特異性引物通過PCR擴(kuò)增圖中的片段，PCR是依據(jù)______的原理發(fā)展的技術(shù)，PCR反應(yīng)緩沖液中一般需要添加______。PCR擴(kuò)增過程中所添加引物的作用是______，若一個(gè)含有目的基因的DNA擴(kuò)增n代，則共消耗______對(duì)引物。（2）圖中過程①有兩種限制酶選擇方案（注：圖中幾種限制酶切割產(chǎn)生的末端不同，且都能實(shí)現(xiàn)完全酶切）：方案一：選用______一種限制酶；方案二：最優(yōu)選用______兩種限制酶；方案二優(yōu)于方案一的原因是______。（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌之前，需要用一定濃度的Ca2+處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于______。篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌時(shí)，須在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中加入______，培養(yǎng)一段時(shí)間后，挑選出______色的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。【答案】（1）①.逆轉(zhuǎn)錄②.DNA半保留復(fù)制③.Mg2+④.使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸⑤.2n-1（2）①.BamHⅠ②.SalⅠ和KpnⅠ③.既能防止質(zhì)粒和目的基因的自身環(huán)化，又能保證目的基因和質(zhì)粒的正向連接（3）①.一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)②.青霉素和X-gal③.白〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；目的基因的檢測(cè)與鑒定。【小問1詳析】首先提取新冠病毒的RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA。PCR的原理是DNA半保留復(fù)制，PCR反應(yīng)緩沖液中一般需要添加Mg2+作為酶的激活劑。其中引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。由于每一個(gè)DNA子鏈合成都需要一個(gè)引物，因此若一個(gè)含有目的基因的DNA擴(kuò)增n代，則形成的子代DNA含有2（n+1）條鏈，由于兩條模板鏈不含引物，因此共消耗2（n+1）－2個(gè)引物，即消耗2n-1對(duì)引物。【小問2詳析】含目的基因的DNA和質(zhì)粒上都有BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，可以用BamHⅠ切割DNA分子獲得目的基因，再切割質(zhì)粒，可得到重組質(zhì)粒，由于基因的轉(zhuǎn)錄存在方向性，如果用一種限制酶，可能切割后的目的基因會(huì)自連，同時(shí)會(huì)使目的基因反接在質(zhì)粒上。為避免目的基因反接在質(zhì)粒上，可選用兩種不同的限制酶切割，而用SalⅠ切割質(zhì)粒會(huì)破壞青霉素抗性基因，結(jié)合圖中轉(zhuǎn)錄方向和限制酶切割位點(diǎn)，可選用SalⅠ和KpnⅠ來切割質(zhì)粒和目的基因，既防止了目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，又能保證目的基因和質(zhì)粒的正向連接。【小問3詳析】將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌之前，需要用一定濃度的Ca2+處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，便于重組DNA導(dǎo)入。目的基因拼接在質(zhì)粒的lacZ基因上，打破了lacZ基因的序列，而單獨(dú)導(dǎo)入空質(zhì)粒的細(xì)胞內(nèi)質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼的酶可以