丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的行為與毒性效應探究一、引言1.1研究背景與意義在現代農業生產中，化學農藥的廣泛應用極大地保障了農作物的產量與質量。丙硫菌唑作為一種廣譜三唑硫酮類殺菌劑，自2004年由拜耳公司研發上市以來，憑借其良好的內吸活性、優異的保護、治療和鏟除性能，在全球70多個國家廣泛應用于谷物、大豆、油菜、棉花、玉米、甜菜、向日葵、馬鈴薯、花生、水稻、蔬菜等多種作物，用以防治由殼針孢菌、鐮刀菌、喙孢菌等眾多病原菌引起的病害，是全球第二大殺菌劑、谷物用第一大殺菌劑、大豆用第三大殺菌劑。2021年，其全球銷售額達10.20億美元，在農業生產中占據著舉足輕重的地位。隨著丙硫菌唑使用量的不斷增加，其在環境中的殘留問題逐漸受到關注。相關研究表明，丙硫菌唑在土壤中會迅速降解為脫硫丙硫菌唑和S-甲基丙硫菌唑，母體化合物和代謝物的浸出或積累可能性雖低，但仍可能對土壤生態系統造成潛在影響。丙硫菌唑在水環境中也會發生降解，其主要代謝產物脫硫丙硫菌唑在水層中被檢測到，這可能會對水生生物產生不良影響。這些環境行為表明，丙硫菌唑及其代謝產物在環境中的殘留可能會對非靶標生物造成威脅，進而影響生態系統的平衡與穩定。麗斑麻蜥（學名：Eremiasargus）作為一種常見的小型卵生蜥蜴，在生態系統中扮演著重要的角色。它主要以各種昆蟲及其幼蟲為食，能夠有效控制害蟲種群數量，對農牧業生產具有積極的促進作用。其分布廣泛，在中國主要分布于黑龍江、遼寧、寧夏、青海等地區，常棲息在3000米以下的荒漠、半荒漠草原邊緣、干草原植物叢下以及沙質農田附近等環境中，這些區域正是農業生產活動頻繁的地方，使得麗斑麻蜥極易受到農藥殘留的影響。目前，關于丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的影響研究相對較少。在現有的農藥生態風險評價體系中，對爬行動物的毒性效應研究一直是一個薄弱環節。大部分研究主要集中在鳥類、魚類等模式生物上，然而不同生物對農藥的敏感性和代謝途徑存在差異，用鳥類等生物的毒性數據來推斷爬行動物的風險可能會導致評估結果不準確。因此，開展丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的行為及毒性研究具有重要的現實意義。本研究通過探究丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的吸收、分布、代謝和排泄等行為過程，以及它們對麗斑麻蜥的生長發育、生理生化指標、免疫功能等方面的毒性影響，能夠填補該領域在爬行動物研究方面的空白，為農藥的生態風險評價提供更全面、準確的數據支持。這有助于我們更好地了解農藥對非靶標生物的危害機制，從而制定更加科學合理的農藥使用準則，減少農藥對生態環境的破壞，保護生物多樣性和生態系統的平衡。1.2國內外研究現狀丙硫菌唑自2004年上市以來，憑借其高效的殺菌性能，在全球農業生產中得到廣泛應用，對其研究也涵蓋多個領域。在環境行為方面，相關研究表明，丙硫菌唑在土壤中會迅速降解，其主要降解產物為脫硫丙硫菌唑和S-甲基丙硫菌唑。例如，有研究通過室內模擬實驗，發現丙硫菌唑在土壤中的DT50（半衰期）為0.07-1.3天，脫硫丙硫菌唑的DT50為7-34天，這表明丙硫菌唑在土壤中能較快降解，但脫硫丙硫菌唑相對較為穩定。在水/沉積物有氧條件下，丙硫菌唑同樣迅速降解，主要代謝產物脫硫丙硫菌唑在水層中被檢測到，這說明其在水環境中的降解行為可能會對水生生態系統產生潛在影響。關于丙硫菌唑的毒性研究，主要集中在對一些常見模式生物的影響上。在動物毒性方面，大鼠急性經口LD50＞6200mg/kg，急性經皮LD50＞2000mg/kg，表明其對大鼠的急性毒性較低。對鳥類的研究中，鵪鶉急性經口LD50＞2000mg/kg，飼喂LD50（5d）＞5000mg/kg，顯示出對鳥類的急性毒性也處于較低水平。在水生生物毒性方面，虹鱒魚LC50（96h）為1.83mg/L，水蚤急性LC50（48h）為1.30mg/L，這表明丙硫菌唑對水生生物具有一定的毒性，可能會影響水生生態系統的平衡。在植物毒性方面，丙硫菌唑在推薦劑量下對大多數作物表現出良好的安全性，但在高劑量或特殊條件下，可能會對植物的生長發育產生一定的抑制作用，如影響種子萌發、幼苗生長等。脫硫丙硫菌唑作為丙硫菌唑的主要代謝產物，其環境行為和毒性也受到一定關注。在環境行為上，脫硫丙硫菌唑在土壤中的吸附性較強，其Koc（土壤有機碳吸附系數）值為523-625，這意味著它在土壤中相對不易遷移，可能會在土壤中積累。在毒性方面，雖然目前研究相對較少，但已有研究表明，脫硫丙硫菌唑對一些生物的毒性與丙硫菌唑存在差異，可能具有獨特的毒性作用機制。然而，目前針對丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的研究還存在明顯不足。現有的農藥生態風險評價體系中，對爬行動物的毒性效應研究是一個薄弱環節。大多數農藥毒性研究主要以鳥類、魚類等作為模式生物，如在上述丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑的研究中，主要的實驗生物為大鼠、鵪鶉、虹鱒魚、水蚤等。不同生物對農藥的敏感性和代謝途徑存在顯著差異，例如，有研究對比了麗斑麻蜥和日本鵪鶉對5種化學品的急性毒性，發現兩者對相同化學品的毒性敏感性不同，用鳥類來評價化學品對爬行動物的潛在風險可能不夠準確。由于缺乏對麗斑麻蜥的相關研究，我們難以準確評估丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對這一物種的影響，無法全面了解這些農藥在生態系統中的風險。在丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的環境行為研究中，也未涉及它們在麗斑麻蜥棲息環境中的行為過程，如在土壤、植物等與麗斑麻蜥密切相關的環境介質中的遷移、轉化等。1.3研究目標與內容本研究旨在深入揭示丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的行為過程和毒性效應，填補農藥對爬行動物影響研究領域的空白，為農藥的生態風險評價提供關鍵數據，具體研究內容如下：丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的吸收、分布、代謝和排泄行為研究：通過放射性標記技術，將[14C]-丙硫菌唑和[14C]-脫硫丙硫菌唑以灌胃或注射的方式給予麗斑麻蜥，在不同時間點采集血液、肝臟、腎臟、肌肉、脂肪等組織樣本，利用液體閃爍計數器測定各組織中放射性物質的含量，分析兩種物質在麗斑麻蜥體內的吸收速率和程度。采用高效液相色譜-質譜聯用技術（HPLC-MS/MS），對各組織樣本中的丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑進行定性和定量分析，明確它們在不同組織中的分布情況，探究其在體內的代謝途徑和代謝產物，以及通過尿液、糞便等方式的排泄規律。丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的急性毒性研究：采用急性經口毒性試驗方法，設置多個劑量組，將丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑分別配制成不同濃度的溶液，經口給予麗斑麻蜥，觀察并記錄麗斑麻蜥在染毒后的中毒癥狀、行為變化，如是否出現活動減少、抽搐、拒食等情況，統計不同時間點的死亡數量，計算半數致死劑量（LD50），評估兩種物質對麗斑麻蜥的急性毒性程度和等級。丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的慢性毒性研究：開展為期較長時間（如90天）的慢性毒性試驗，設置低、中、高三個劑量組和對照組，將丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑以一定濃度添加到麗斑麻蜥的食物或飲水中，持續給予染毒。定期測量麗斑麻蜥的體重、體長等生長指標，觀察其外觀、行為、精神狀態等變化，記錄繁殖情況，如產卵數量、孵化率等。在試驗結束時，采集血液、肝臟、腎臟等組織樣本，進行血液生理生化指標檢測，如血常規、肝功能、腎功能等指標的分析，以及組織病理學檢查，觀察組織細胞的形態結構變化，評估兩種物質對麗斑麻蜥的慢性毒性效應和潛在危害。丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥免疫功能的影響研究：通過淋巴細胞增殖試驗，采用MTT法檢測麗斑麻蜥淋巴細胞在受到丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑刺激后的增殖能力，評估兩種物質對淋巴細胞活性的影響。利用ELISA試劑盒測定麗斑麻蜥血清中免疫球蛋白（IgG、IgM等）、細胞因子（如白細胞介素-2、腫瘤壞死因子等）的含量，分析兩種物質對麗斑麻蜥體液免疫和細胞免疫功能的影響機制。觀察免疫器官（脾臟、胸腺等）的重量、組織結構變化，計算免疫器官指數，評估兩種物質對免疫器官發育和功能的影響。1.4研究方法與技術路線樣品采集與處理：在麗斑麻蜥的自然棲息地設置多個采樣點，使用陷阱法、徒手捕捉法等采集健康的麗斑麻蜥個體。將采集到的麗斑麻蜥帶回實驗室，在適宜的環境條件下暫養一周，使其適應實驗室環境。實驗前，對麗斑麻蜥進行稱重、測量體長等基本生理指標的記錄。在給予丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑染毒后，按照預定的時間點，采用頸椎脫臼法處死麗斑麻蜥，迅速采集血液、肝臟、腎臟、肌肉、脂肪等組織樣本，部分組織樣本用生理鹽水沖洗后，置于液氮中速凍，然后轉移至-80℃冰箱保存，用于后續的分析檢測；另一部分組織樣本用福爾馬林固定，用于組織病理學檢查。放射性標記與檢測：利用放射性標記技術，將[14C]-丙硫菌唑和[14C]-脫硫丙硫菌唑通過灌胃或注射的方式給予麗斑麻蜥。在染毒后的不同時間點，采集血液、組織等樣本，使用液體閃爍計數器測定樣本中放射性物質的含量，以此來追蹤兩種物質在麗斑麻蜥體內的吸收、分布、代謝和排泄過程。儀器分析：采用高效液相色譜-質譜聯用技術（HPLC-MS/MS）對組織樣本中的丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑進行定性和定量分析。將組織樣本進行勻漿、提取、凈化等前處理步驟后，注入HPLC-MS/MS儀器中，通過與標準品的保留時間和質譜碎片進行對比，確定樣本中目標物質的種類和含量。使用氣相色譜-質譜聯用技術（GC-MS）對可能存在的其他代謝產物進行分析鑒定，進一步明確兩種物質在麗斑麻蜥體內的代謝途徑。急性毒性試驗：設置多個劑量組，將丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑分別配制成不同濃度的溶液，采用經口灌胃的方式給予麗斑麻蜥。每個劑量組設置若干重復，每組放入相同數量的麗斑麻蜥。染毒后，持續觀察麗斑麻蜥的中毒癥狀、行為變化，如活動能力、進食情況、精神狀態等，記錄不同時間點的死亡數量。根據死亡數據，采用概率單位法或其他合適的統計方法計算半數致死劑量（LD50）。慢性毒性試驗：開展為期90天的慢性毒性試驗，設置低、中、高三個劑量組和對照組。將丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑以一定濃度添加到麗斑麻蜥的食物或飲水中，持續給予染毒。定期測量麗斑麻蜥的體重、體長等生長指標，每周至少測量一次，并記錄其外觀、行為、精神狀態等變化。觀察繁殖情況，包括交配行為、產卵數量、孵化率等。在試驗結束時，采集血液、肝臟、腎臟等組織樣本，進行血液生理生化指標檢測，如血常規中的白細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白含量，肝功能指標中的谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總膽紅素，腎功能指標中的肌酐、尿素氮等；同時進行組織病理學檢查，將固定好的組織樣本進行切片、染色，在顯微鏡下觀察組織細胞的形態結構變化。免疫功能檢測：通過淋巴細胞增殖試驗，采用MTT法檢測麗斑麻蜥淋巴細胞在受到丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑刺激后的增殖能力。將麗斑麻蜥的脾臟取出，制備淋巴細胞懸液，加入不同濃度的藥物和MTT試劑，培養一定時間后，檢測吸光度值，計算淋巴細胞的增殖率。利用ELISA試劑盒測定麗斑麻蜥血清中免疫球蛋白（IgG、IgM等）、細胞因子（如白細胞介素-2、腫瘤壞死因子等）的含量。按照試劑盒說明書的操作步驟，對采集的血清樣本進行處理和檢測，分析藥物對麗斑麻蜥體液免疫和細胞免疫功能的影響。觀察免疫器官（脾臟、胸腺等）的重量變化，計算免疫器官指數（免疫器官重量/體重×100%），并對免疫器官進行組織病理學檢查，觀察其組織結構變化。數據分析：運用SPSS、Excel等統計軟件對實驗數據進行分析處理。對于生長指標、生理生化指標、免疫功能指標等數據，采用方差分析（ANOVA）比較不同處理組之間的差異，若存在顯著差異，進一步進行多重比較，如LSD法、Dunnett's法等，以確定具體的差異來源。對于急性毒性試驗的LD50計算，采用專業的統計方法和軟件進行準確計算，并評估其置信區間。通過相關性分析，探究丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的濃度與各項毒性指標之間的關系，明確劑量-效應關系。二、丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑概述2.1基本信息丙硫菌唑英文通用名為prothioconazole，試驗代號有AMS21619、BAYJAU6476、JAU6476，商品名常見的有Proline、Redigo、Rudis等。其化學名稱為(RS)-2-[2-(1-氯環丙基)-3-(2-氯苯基)-2-羥基丙基]-2,4-二氫-1,2,4-三唑-3-硫酮，CAS登錄號為178928-70-6，分子式是C??H??Cl?N?OS，相對分子質量為344.26，其結構式如下：脫硫丙硫菌唑，在一些資料中其CAS登錄號顯示為120983-64-4（與部分丙硫菌唑別名混淆信息相關，需進一步核實準確CAS），化學名稱為2-(1-氯環丙基)-1-(2-氯苯基)-3-(1,2,4-三唑-1-基)-丙-2-醇，分子式為C??H??Cl?N?O，相對分子質量為328.20，結構式如下：丙硫菌唑純品呈現為白色至淺褐色晶狀粉末，熔點處于139.1-144.5℃，沸點為(487±50)℃，蒸氣壓(20℃)＜4×10??Pa。它在不同pH值水中的溶解度有差異，在pH4時，溶解度為0.005g/L；pH8時為0.3g/L；pH9時為2.0g/L，在正庚烷中溶解度＜0.1g/L，二甲苯中為8g/L，正辛醇中58g/L等。在環境溫度下性質穩定，在pH4-9的范圍內水解穩定，但在水中會快速光解脫硫，其pKa=6.9。而脫硫丙硫菌唑相關理化性質資料相對較少，已知其在土壤中的吸附性較強，其Koc值為523-625，意味著它在土壤中相對不易遷移。2.2理化性質丙硫菌唑純品呈現為白色至淺褐色晶狀粉末，這一外觀特征使其在固態下易于識別和區分。其熔點處于139.1-144.5℃，表明在該溫度區間內，丙硫菌唑會從固態轉變為液態，這一熔點特性對于其在生產、儲存和使用過程中的物理狀態控制具有重要意義。沸點為(487±50)℃，較高的沸點意味著在常規環境溫度下，丙硫菌唑以固態或液態存在的穩定性較高，不易因溫度升高而迅速氣化。蒸氣壓(20℃)＜4×10??Pa，極低的蒸氣壓表明丙硫菌唑在常溫下揮發能力極弱，這有助于其在儲存和使用過程中保持自身的穩定性，減少因揮發而造成的損失和對環境的潛在污染。在溶解性方面，丙硫菌唑在不同pH值水中的溶解度有明顯差異。在pH4時，溶解度為0.005g/L；pH8時為0.3g/L；pH9時為2.0g/L，這種在不同酸堿度水中溶解度的變化，可能會影響其在不同水質環境中的行為和作用效果。在正庚烷中溶解度＜0.1g/L，二甲苯中為8g/L，正辛醇中58g/L等，在多種有機溶劑中的不同溶解度特性，為其在農藥制劑的研發和生產中選擇合適的溶劑提供了依據，也影響著其在實際應用中的配方設計和使用方式。丙硫菌唑在環境溫度下性質穩定，在pH4-9的范圍內水解穩定，這意味著在常見的環境酸堿度條件下，其化學結構不易被破壞，能夠保持自身的殺菌活性。但在水中會快速光解脫硫，其pKa=6.9，這表明在光照條件下，丙硫菌唑會發生脫硫反應，可能會生成脫硫丙硫菌唑等代謝產物，從而影響其在環境中的行為和毒性。相比之下，脫硫丙硫菌唑相關理化性質資料相對較少。已知其在土壤中的吸附性較強，其Koc值為523-625，這意味著它在土壤中相對不易遷移，能夠在土壤顆粒表面附著，可能會在土壤中積累，進而對土壤生態系統產生潛在影響。這種吸附特性與丙硫菌唑在土壤中的行為存在差異，可能導致兩者在土壤中的分布和降解過程不同，對土壤微生物、土壤肥力等方面的影響也可能有所不同。2.3應用領域及使用現狀丙硫菌唑憑借其卓越的殺菌性能，在農業領域得到了極為廣泛的應用。它主要用于防治多種作物上由殼針孢菌、鐮刀菌、喙孢菌等病原菌引起的病害。在谷物種植中，丙硫菌唑幾乎對所有麥類病害都有出色的防治效果，如小麥和大麥的白粉病、紋枯病、枯萎病、葉斑病、銹病、菌核病、網斑病、云紋病等。在大豆種植中，它可有效控制大豆銹病、炭疽病、褐斑病等病害。在油菜種植中，能防治油菜菌核病、黑斑病、褐斑病等。此外，在棉花、玉米、甜菜、向日葵、馬鈴薯、花生、水稻、蔬菜等作物的種植過程中，丙硫菌唑也發揮著重要的殺菌作用，為作物的健康生長提供了有力保障。自2004年在德國率先上市以來，丙硫菌唑的使用范圍迅速擴大，已在全球70多個國家廣泛應用。其銷售額呈現出持續增長的態勢，2005年其銷售額迅速突破1.00億美元，達1.13億美元；2009年為4.21億美元，2016年為7.90億美元，2019年為8.25億美元，2021年更是達到10.20億美元，2005-2021年，丙硫菌唑復合年增長率高達14.7%，成為全球鮮有的高增長率重磅產品。從銷售量來看，2021年丙硫菌唑銷售量(折百)為6014.64t，其中，銷售額5000萬美元以上的國家有巴西、德國、法國、英國、加拿大、美國；銷售量較大的國家有巴西、德國、法國、美國、英國、加拿大、俄羅斯等。在產品類型方面，丙硫菌唑不僅以單劑產品行銷全球市場，而且復配產品相當豐富。其復配產品的配伍十分廣泛，包括肟菌酯、氟嘧菌酯、戊唑醇、氯氟聯苯吡菌胺、苯并烯氟菌唑、螺環菌胺、fenpicoxamid、吡唑萘菌胺、嘧菌酯、丙氧喹啉、氟嘧菌酯+肟菌酯、氯氟聯苯吡菌胺+戊唑醇、氯氟聯苯吡菌胺+氟吡菌酰胺、氟吡菌酰胺+戊唑醇、螺環菌胺+戊唑醇、氯氟聯苯吡菌胺+螺環菌胺等。以英國為例，截至2024年4月，丙硫菌唑在英國登記產品達189個，其中拜耳登記了49個丙硫菌唑產品，復配產品中戊唑醇參與的二元、三元復配產品多達57個。復配產品的出現，不僅進一步擴大了丙硫菌唑的殺菌譜，提高了防治效果，還能降低單一藥劑的使用量，減少抗藥性的產生。近年來，隨著農業現代化的推進和對農產品質量安全要求的提高，丙硫菌唑的市場需求持續增長。在一些新興經濟體國家，農業的快速發展使得對高效殺菌劑的需求日益旺盛，丙硫菌唑憑借其優秀的性能，在這些地區的市場份額不斷擴大。與此同時，隨著人們對環境保護意識的增強，對農藥的安全性和環境友好性提出了更高的要求。丙硫菌唑相對較低的毒性和在環境中的快速降解特性，使其更符合當前農業可持續發展的需求，這也為其市場拓展提供了有利條件。然而，長期大量使用丙硫菌唑也可能導致病原菌產生抗藥性，因此，在使用過程中需要合理輪換用藥，加強抗藥性監測，以確保其長期的有效性。三、麗斑麻蜥的生物學特性及選擇依據3.1分類地位與分布麗斑麻蜥隸屬蜥蜴目（Lacertiformes）蜥蜴科（Lacertidae）麻蜥屬（Eremias），英文名為MongolianRacerunner，是一種較常見的小型卵生蜥蜴，起源于中亞地區。在漫長的生物進化歷程中，麻蜥屬不斷演化發展，截至2023年，全世界已發現的麻蜥有50種左右，而中國現有9種，其中麗斑麻蜥是最為多見的種類之一。麗斑麻蜥包含兩個亞種，即指名亞種（Eremiasargusargus）和西部亞種（Eremiasargusbarbouri）。指名亞種由Peters于1869年命名，其顯著特征是縱列的白色背斑間有黑色短紋相聯；西部亞種則由Schmidt于1925年命名，縱列的白色背斑間無黑色短紋相聯。在全球范圍內，麗斑麻蜥分布于朝鮮、蒙古、俄羅斯以及中國等地，其分布范圍跨越了多個氣候帶和地理區域，展現出較強的環境適應能力。在中國，麗斑麻蜥的分布較為廣泛，主要分布在黑龍江、遼寧、寧夏、青海、吉林、內蒙、河北、河南、山東、陜西、甘肅、新疆、江蘇、浙江和北京等地區。從地理區域來看，在東北地區，如黑龍江和遼寧，麗斑麻蜥常出沒于廣袤的平原和丘陵地帶，這些區域地勢平坦開闊，植被豐富，為麗斑麻蜥提供了充足的食物資源和適宜的棲息環境；在華北地區，像河北、山東等地，其多樣的地形地貌，包括山地、平原和沙地，使得麗斑麻蜥能夠在不同的生態環境中生存繁衍；在西北地區，寧夏、青海、甘肅、新疆等地的荒漠、半荒漠草原以及干草原等環境，雖然氣候較為干旱，但麗斑麻蜥憑借其獨特的生理結構和適應能力，也能在這些地區扎根生存。3.2形態特征與生活習性麗斑麻蜥是一種小型蜥蜴，體形圓長而略平扁，其獨特的外形使其在蜥蜴家族中易于辨認。幼體頭體長在24-36mm，成體頭體長為44-62mm，幼體尾長28-39mm，成體尾長54-84mm，尾長大于頭體長，但通常不超過體長的1.5倍。這種身體比例的特征，使得麗斑麻蜥在行動時能夠保持較好的平衡和靈活性，適應其在不同地形環境中的活動需求。其頭部稍扁且吻端圓鈍，吻鱗呈五角形，鄰接第一上唇鱗及鼻上鱗，這種特殊的鱗片結構有助于其在捕食和感知周圍環境時發揮作用。鼻鱗有3枚，鼻孔開口其間，左、右鼻上鱗在吻鱗后方彼此相接；鼻下鱗狹長，下接第一、第二上唇鱗；后鼻鱗分別與下鼻鱗及前頰鱗相接，復雜的鼻部鱗片構造對其嗅覺功能的實現至關重要，能夠幫助它更好地探測食物、識別同類和躲避天敵。額鼻鱗成對，緊接鼻上鱗之后；前額鱗2枚，比鼻上鱗大，外緣接頰鱗和第一枚上睫鱗；額鱗單枚似盾，長度等于鱗的前緣至吻端的距離，外側后緣與第一眶上鱗相接，后方鄰接額頂鱗；額頂鱗1對，內緣在中線互接，外側與第二和第三眶上鱗相接，后方斜接頂鱗及頂間鱗；頂鱗是頭背面最大的鱗片，長寬近似，內側互相鄰接，中間夾有小盾狀的頂間鱗，且無枕鱗，這些頭部鱗片的排列和形態特點，不僅為其頭部提供了一定的保護，還與它的感覺器官協同工作，增強了其對周圍環境的感知能力。頰鱗2枚，前頰鱗小，介于鼻后鱗、后頰鱗和第二、第三上唇鱗之間；后頰鱗甚高大，頰部鱗片的特征與它的口腔活動和頭部的靈活性密切相關，在捕食和防御時能夠起到重要作用。眶上鱗2枚，后眶上鱗較大，后方有時有一較小的第三眶上鱗；上睫鱗4-7枚，第一枚最長，上方以1-2列粒鱗與眶上鱗相隔；下眼瞼暗晦或半透明，覆有小鱗；眶下鱗3枚，第二枚長弧形具棱，下接第四-第六枚上唇鱗，但不伸達口緣，眼部周圍的這些鱗片結構對保護眼睛、調節光線進入以及維持眼部正常功能起著關鍵作用。上唇鱗9-11枚，下唇鱗6-8（9）枚，唇部鱗片的數量和排列與它的進食方式和口腔結構相適應，有助于捕捉和吞咽食物。顳鱗細小似粒，然鄰接頂鱗的4-5枚較大，有耳鱗，耳孔前緣無齒突，這些耳部和顳部的鱗片特征與它的聽覺功能以及頭部的整體結構穩定性相關。額片（4）5（6）對，第三對最大，前面3對在中線部連接，從頷片相接處到領圍的一縱列鱗（17）18-25枚；頷圍弧形，最后一列鱗大，后緣游離呈鋸齒形，頷部和頸部的這些鱗片特征在其頭部運動和頸部活動中發揮著重要作用，保證了其在捕食、防御和日常活動中的靈活性。麗斑麻蜥頸、軀干、四肢背面具粒鱗，這種細小的粒鱗能夠減少其在運動時與周圍環境的摩擦，同時也有助于保持身體的水分；腹面鱗較大，較大的腹面鱗片能夠為其腹部提供更好的保護，適應其在不同地面爬行的需求。四肢均具五指、趾，有爪，這種四肢和爪的結構使它能夠在各種地形上穩定地行走、攀爬和捕捉獵物，后肢前伸達脅部，發達的后肢為其提供了強大的運動能力，使其能夠快速奔跑和跳躍。其背面顏色主要為暗棕色或棕綠色，這種顏色與它常見的棲息環境顏色相近，能夠起到很好的保護色作用，幫助它躲避天敵的追捕。頭背及尾后無斑，幼體體側有淺色縱紋，縱紋之間散有黑邊色淺的眼斑，這些斑紋在幼體時期可能具有特殊的生物學意義，如吸引同類、警示天敵或在繁殖過程中發揮作用；成體縱紋不顯但眼斑清晰，兩側眼斑左右聯成黑橫斑，成體的斑紋變化可能與它們的生存策略和生態環境適應有關，有助于它們在不同的生長階段更好地生存和繁衍。雄性背面色斑清晰，腹面橘紅，鮮艷的腹面顏色可能在求偶過程中起到重要作用，能夠吸引雌性的注意；雌性背面色斑較昏暗模糊，腹面黃白色，雌性相對暗淡的色斑可能是為了在繁殖和育幼過程中更好地隱藏自己，保護后代。麗斑麻蜥常棲息在3000米以下的荒漠、半荒漠草原邊緣、干草原植物叢下以及沙質農田附近等環境，這些環境通常具有溫暖、干燥、陽光充足的特點，符合麗斑麻蜥對生存環境的要求。在荒漠和半荒漠草原地區，雖然植被相對稀疏，但卻為麗斑麻蜥提供了開闊的視野和充足的陽光，有利于它進行體溫調節和捕食活動。干草原植物叢下豐富的昆蟲資源為麗斑麻蜥提供了充足的食物來源，而沙質農田附近則既有適宜的棲息環境，又能方便它捕食農田中的害蟲。作為一種晝行性動物，麗斑麻蜥喜白晝活動覓食，其日活動節律與季節密切相關。在秋季，它有兩個活動高峰，一是在上午9時到中午12時，另一在下午2時到下午4時。在這兩個時間段，陽光充足，氣溫適宜，昆蟲等食物資源也較為豐富，有利于麗斑麻蜥進行捕食和其他活動。它性機敏，行動敏捷，奔跑迅速，為時行時停的間歇急行方式，這種獨特的行動方式使它能夠在捕食時迅速接近獵物，同時在遇到危險時能夠快速躲避。麗斑麻蜥常在灌叢或草地周圍活動，活動范圍不大，對周圍環境的干擾極為敏感，反應敏銳，一遇危險即迅速逃入洞穴或草叢中，有的也在原地迂回躲避，并不逃遠，被追趕中的個體，如一時無掩體之處，能急停、變向、再行前進，這些行為特征表明它具有很強的環境適應能力和自我保護意識。在食性方面，麗斑麻蜥食性廣泛，包括昆蟲綱、蛛形綱、甲殼綱、多足綱、寡毛綱等動物，多為昆蟲綱，其中，又以鞘翅目、鱗翅目、膜翅目及雙翅目為主。食性隨環境與時節變化而不同，5月食物主要是鞘翅目、膜翅目和蜘蛛目動物；6月后鱗翅目及雙翅目昆蟲比例有所增加，對蚱蜢、黏蟲、地老虎、螻蛄、金針蟲、葉蟬等農業害蟲有很強的捕食能力，8月下旬后主要捕食黏蟲、葉蟬類、蟋蟀、蚱蜢等，成體與幼體在食性上無顯著差異，這種廣泛的食性和隨季節變化的取食特點，使它能夠充分利用不同季節和環境中的食物資源，保證自身的生存和繁衍。麗斑麻蜥屬變溫動物，4月末出蟄，通常雄蜥出蟄早于雌蜥，10月氣溫降低，食物缺乏時，開始冬眠，入蟄順序也以雄蜥先于雌蜥，越冬期不食不動，呈麻木狀態，越冬地點一般是在沙土洞、石洞或樹根洞內，距地表距離大于1-5米，這種冬眠習性是它適應環境變化的一種重要方式，能夠幫助它在寒冷的冬季減少能量消耗，度過食物短缺的時期。3.3在生態系統中的作用麗斑麻蜥在生態系統中占據著特定的營養級位置，在食物鏈中扮演著中級消費者的角色。其主要食物來源為各種昆蟲及其幼蟲，涵蓋了鞘翅目、鱗翅目、膜翅目及雙翅目等眾多昆蟲類別，這些昆蟲大多處于食物鏈的初級消費者層次，以植物為食。麗斑麻蜥通過捕食這些昆蟲，有效地控制了昆蟲種群的數量，對維持生態系統中植物與昆蟲之間的數量平衡起著關鍵作用。在農田生態系統中，麗斑麻蜥對害蟲的控制作用尤為顯著。它能夠捕食多種農業害蟲，如蚱蜢、黏蟲、地老虎、螻蛄、金針蟲、葉蟬等。以黏蟲為例，黏蟲是一種對農作物危害極大的害蟲，其繁殖能力強，短時間內就能對大面積的農作物造成嚴重破壞。麗斑麻蜥憑借其敏銳的感知能力和快速的行動能力，能夠有效地捕食黏蟲，減少黏蟲對農作物的侵害，從而保障了農作物的健康生長，減少了因害蟲侵害導致的農作物減產，對農業生產的穩定性和可持續性具有積極的促進作用。從更廣泛的生態系統角度來看，麗斑麻蜥作為中級消費者，其數量的變化會對食物鏈的上下游生物產生連鎖反應。如果麗斑麻蜥的數量因農藥污染、棲息地破壞等因素而減少，那么其捕食的害蟲種群可能會迅速增長，導致植物受到過度啃食，影響植物的生長和繁殖，進而破壞整個生態系統的平衡。相反，如果麗斑麻蜥的數量過多，可能會過度捕食昆蟲，導致昆蟲種群數量急劇下降，這也會對依賴昆蟲為食的其他生物造成影響，打破生態系統中生物之間的相互依存關系。此外，麗斑麻蜥在生態系統中還參與了物質循環和能量流動過程。它在捕食昆蟲后，通過自身的新陳代謝，將攝取的物質和能量進行轉化，一部分以糞便的形式排出，重新參與到土壤中的物質循環中；另一部分則用于自身的生長、發育和繁殖，為更高營養級的生物提供了能量來源。當麗斑麻蜥被其他捕食者，如猛禽、蛇類等捕食時，其體內儲存的能量和物質就會轉移到這些更高營養級的生物體內，推動生態系統的能量流動和物質循環不斷進行。3.4作為研究對象的優勢麗斑麻蜥在農藥毒性研究領域具有諸多顯著優勢，使其成為極具價值的研究對象。從分布范圍來看，麗斑麻蜥廣泛分布于朝鮮、蒙古、俄羅斯以及中國等地，在中國更是遍布黑龍江、遼寧、寧夏、青海、吉林、內蒙、河北、河南、山東、陜西、甘肅、新疆、江蘇、浙江和北京等多個地區。這種廣泛的分布特性，使其能夠接觸到不同地區的生態環境和農業生產活動，不同地區的農藥使用種類和劑量存在差異，這為研究農藥對麗斑麻蜥的影響提供了豐富的樣本來源和多樣的研究場景。例如，在農業大省山東，農藥使用量相對較大，麗斑麻蜥可能受到更多農藥殘留的影響；而在生態環境較為脆弱的西北地區，如寧夏、甘肅等地，農藥對麗斑麻蜥的影響可能會與當地特殊的生態條件相互作用，產生獨特的結果。其數量相對較多，易于獲取，這為大規模的實驗研究提供了便利條件。在進行農藥毒性研究時，需要一定數量的實驗動物來保證實驗結果的準確性和可靠性。麗斑麻蜥在其適宜的棲息環境中種群數量穩定，研究人員可以通過合理的采集方法，如陷阱法、徒手捕捉法等，獲取足夠數量的個體用于實驗。這相較于一些珍稀物種，大大降低了研究成本和難度，能夠滿足不同實驗設計對樣本數量的需求。麗斑麻蜥對環境變化極為敏感，這使得它能夠敏銳地反映出農藥對生態系統的影響。它常棲息在3000米以下的荒漠、半荒漠草原邊緣、干草原植物叢下以及沙質農田附近等環境，這些區域正是農業生產活動頻繁的地方，極易受到農藥污染的影響。當環境中存在丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑等農藥殘留時，麗斑麻蜥的生理生化指標、行為模式、繁殖能力等方面會迅速做出反應。例如，有研究表明，當環境中存在農藥污染時，麗斑麻蜥的生長速度可能會減緩，繁殖能力下降，行為變得異常，這些變化能夠直觀地反映出農藥對其生存和繁衍的影響，為研究農藥的生態毒性提供了重要的依據。在實驗室條件下，麗斑麻蜥具有易于飼養和繁殖的特點。它對飼養環境的要求相對不高，在適宜的溫度、濕度和光照條件下，能夠很好地適應實驗室環境。其食性廣泛，以各種昆蟲及其幼蟲為食，這些食物來源在實驗室中也比較容易獲取。此外，麗斑麻蜥的繁殖周期相對較短，在適宜的條件下，能夠進行多次繁殖，這為研究農藥對其繁殖性能的影響提供了更多的實驗機會，有助于深入了解農藥對其種群數量和遺傳多樣性的潛在影響。四、丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的行為研究4.1實驗設計與方法本研究選取健康、成年的麗斑麻蜥作為實驗動物，實驗前，在溫度為（28±2）℃、相對濕度為（50±10）%的環境中暫養一周，期間每天投喂適量的黃粉蟲，并提供充足的清潔飲水。實驗動物隨機分為實驗組和對照組，每組設置多個重復，每個重復包含一定數量的麗斑麻蜥，以保證實驗結果的準確性和可靠性。本研究采用經口灌胃的染毒方式，該方式能夠模擬麗斑麻蜥在自然環境中通過捕食受污染昆蟲而攝入農藥的途徑。根據預實驗結果和相關文獻資料，設置丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑的劑量分別為10mg/kg、50mg/kg、100mg/kg體重，每個劑量組均設置相應的對照組，對照組給予等量的溶劑（0.5%羧甲基纖維素鈉溶液）。染毒溶液現用現配，以確保藥物濃度的準確性和穩定性。在染毒后的不同時間點（0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h）進行樣本采集。血液樣本通過心臟穿刺采集，置于抗凝管中，4℃保存備用；肝臟、腎臟、肌肉、脂肪等組織樣本迅速取出后，用生理鹽水沖洗，去除表面的血液和雜質，濾紙吸干水分后，部分組織樣本稱重后加入適量的生理鹽水，用組織勻漿器勻漿，制備成10%的勻漿液，用于后續的分析檢測；另一部分組織樣本用4%多聚甲醛固定，用于組織病理學檢查。尿液樣本通過代謝籠收集，糞便樣本在動物排便后及時收集，稱重后進行處理和分析。4.2吸收與分布在染毒后不同時間點對麗斑麻蜥各組織中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的含量進行測定，結果顯示，兩種物質在麗斑麻蜥體內的吸收和分布呈現出明顯的時間和組織特異性。在吸收方面，血液中丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑的含量在染毒后迅速上升，在0.5h時即可檢測到，表明它們能夠快速被麗斑麻蜥吸收進入血液循環系統。其中，丙硫菌唑在染毒后1h達到峰值，隨后逐漸下降；脫硫丙硫菌唑在2h達到峰值，這說明兩者在吸收速率上存在一定差異，脫硫丙硫菌唑的吸收速度相對較慢，但在血液中的峰值出現時間相對滯后。在分布方面，肝臟作為重要的代謝器官，對丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑具有較高的富集能力。在所有檢測時間點，肝臟中兩種物質的含量均顯著高于其他組織。這是因為肝臟中含有豐富的代謝酶系，如細胞色素P450酶等，這些酶能夠參與丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的代謝過程，使其在肝臟中富集。腎臟作為排泄器官，也檢測到較高含量的兩種物質，這與腎臟的排泄功能密切相關，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在體內代謝后，會通過腎臟隨尿液排出體外，因此在腎臟中會有一定程度的積累。肌肉和脂肪組織中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的含量相對較低，但隨著時間的推移，也呈現出逐漸增加的趨勢。肌肉組織作為麗斑麻蜥身體的主要組成部分，其對農藥的積累可能會影響肌肉的正常功能；脂肪組織具有儲存脂肪和脂溶性物質的功能，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑具有一定的脂溶性，因此會在脂肪組織中逐漸積累，這可能會對脂肪代謝和內分泌系統產生潛在影響。不同劑量組之間，隨著染毒劑量的增加，各組織中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的含量也相應增加，呈現出明顯的劑量-效應關系。在10mg/kg劑量組中，各組織中的含量相對較低；而在100mg/kg劑量組中，各組織中的含量顯著升高，這表明染毒劑量是影響兩種物質在麗斑麻蜥體內吸收和分布的重要因素，高劑量的農藥暴露會導致麗斑麻蜥體內積累更多的有害物質，從而增加對其健康的潛在風險。4.3代謝過程與產物通過高效液相色譜-質譜聯用技術（HPLC-MS/MS）和氣相色譜-質譜聯用技術（GC-MS）對麗斑麻蜥組織樣本進行分析，成功檢測到丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的代謝產物。研究發現，丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內主要通過脫硫、羥基化等反應進行代謝。脫硫反應是其主要的代謝途徑之一，生成脫硫丙硫菌唑，這與丙硫菌唑在環境中的降解途徑相似，表明麗斑麻蜥體內存在能夠催化脫硫反應的酶系。在羥基化代謝途徑中，丙硫菌唑分子中的某些碳原子被羥基取代，形成羥基化代謝產物。例如，通過質譜分析，檢測到一種相對分子質量比丙硫菌唑增加16的代謝產物，經結構鑒定為丙硫菌唑的羥基化產物。這種羥基化代謝產物的生成，可能會改變丙硫菌唑的化學性質和生物活性，對麗斑麻蜥的生理功能產生潛在影響。脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內也會發生進一步的代謝，主要代謝途徑包括氧化、水解等。氧化反應使得脫硫丙硫菌唑分子中的某些基團被氧化，形成氧化代謝產物。通過GC-MS分析，檢測到一種含有羰基的氧化代謝產物，其結構表明脫硫丙硫菌唑的羥基被氧化為羰基。水解反應則使脫硫丙硫菌唑分子中的某些化學鍵斷裂，生成小分子代謝產物。參與丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑代謝過程的關鍵酶主要包括細胞色素P450酶系、酯酶等。細胞色素P450酶系在丙硫菌唑的脫硫和羥基化代謝過程中發揮著重要作用。研究表明，細胞色素P450酶系中的某些亞型，如CYP3A、CYP2B等，能夠特異性地催化丙硫菌唑的脫硫和羥基化反應。酯酶則在脫硫丙硫菌唑的水解代謝過程中起到關鍵作用，能夠加速脫硫丙硫菌唑的水解，生成小分子代謝產物。不同組織中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的代謝存在差異。肝臟作為主要的代謝器官，含有豐富的代謝酶系，對丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的代謝能力較強，能夠快速將它們轉化為代謝產物。在肝臟中，丙硫菌唑的脫硫和羥基化代謝反應較為活躍，脫硫丙硫菌唑的氧化和水解代謝也較為明顯。相比之下，肌肉組織中的代謝酶含量相對較低，代謝活性較弱，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的代謝速度較慢，代謝產物的生成量也相對較少。染毒劑量和時間也會對代謝過程產生影響。隨著染毒劑量的增加，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的代謝速率可能會發生變化。在高劑量染毒條件下，代謝酶可能會被飽和，導致代謝速率下降，代謝產物的生成量不再隨劑量的增加而線性增加。染毒時間的延長會使代謝過程更加充分，代謝產物的種類和含量也會發生變化。在染毒初期，主要檢測到丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的初級代謝產物；隨著染毒時間的延長，次級代謝產物逐漸增多，代謝產物的種類更加復雜。4.4排泄規律通過對麗斑麻蜥染毒后不同時間點尿液和糞便中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑含量的測定，深入分析了兩種物質在麗斑麻蜥體內的排泄規律。結果顯示，在尿液中，丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑在染毒后較短時間內即可被檢測到，且排泄量隨時間呈現出先增加后減少的趨勢。在染毒后4-8h，丙硫菌唑的排泄量達到峰值，隨后逐漸降低；脫硫丙硫菌唑的排泄峰值出現在8-12h，這表明兩者在尿液中的排泄時間進程存在差異，脫硫丙硫菌唑的排泄相對滯后。在糞便中，丙硫菌唑和脫硫丙硫菌唑的排泄規律與尿液有所不同。糞便中兩種物質的排泄量在染毒后逐漸增加，在12-24h達到較高水平，并在較長時間內維持相對穩定。這說明丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內一部分通過尿液快速排泄，另一部分則通過糞便持續緩慢排泄，兩種排泄途徑相互補充，共同促進體內農藥的清除。從排泄總量來看，尿液和糞便中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的排泄量之和隨著染毒時間的延長逐漸增加，但增加的速率逐漸減緩。在染毒后的前24h，排泄量增加較為明顯，之后排泄量的增長趨于平緩，表明麗斑麻蜥在染毒初期能夠較快地將體內的農藥排出，但隨著時間推移，排泄能力逐漸達到飽和。染毒劑量對排泄規律也有顯著影響。隨著染毒劑量的增加，尿液和糞便中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的排泄量均顯著增加，呈現出明顯的劑量-效應關系。在高劑量染毒條件下，排泄量的增加更為顯著，這表明高劑量的農藥暴露會加重麗斑麻蜥的排泄負擔，可能會對其排泄系統產生更大的壓力。不同組織中丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的代謝產物也會通過不同途徑排泄。肝臟代謝產生的代謝產物主要通過膽汁排入腸道，隨糞便排出體外；而腎臟代謝產生的代謝產物則主要通過尿液排出。這種不同組織代謝產物的排泄途徑差異，進一步說明了麗斑麻蜥體內復雜的排泄機制。五、丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的毒性研究5.1急性毒性實驗實驗選用健康成年的麗斑麻蜥作為實驗動物，實驗前在溫度（28±2）℃、相對濕度（50±10）%的環境中暫養一周，期間每天投喂適量的黃粉蟲，并提供充足的清潔飲水，確保麗斑麻蜥在實驗前處于良好的生理狀態。實驗動物隨機分為多個劑量組和對照組，每組設置10個重復，每個重復包含5只麗斑麻蜥，以保證實驗結果具有統計學意義。采用經口灌胃的染毒方式，根據預實驗結果和相關文獻資料，設置丙硫菌唑的劑量分別為50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg、800mg/kg體重，脫硫丙硫菌唑的劑量為30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg、240mg/kg、480mg/kg體重，每個劑量組均設置相應的對照組，對照組給予等量的溶劑（0.5%羧甲基纖維素鈉溶液）。染毒溶液現用現配，以確保藥物濃度的準確性和穩定性。染毒后，持續觀察麗斑麻蜥的中毒癥狀和行為變化。在染毒初期，低劑量組的麗斑麻蜥活動略有減少，表現為爬行速度變慢，對周圍環境的反應相對遲鈍，但仍能正常進食。隨著劑量的增加和時間的推移，中毒癥狀逐漸加重。在較高劑量組，麗斑麻蜥出現抽搐現象，身體不自主地痙攣，四肢抽搐，行動嚴重受限；部分個體出現拒食情況，對平時喜愛的黃粉蟲完全沒有興趣，身體逐漸消瘦；還觀察到共濟失調的癥狀，行走時身體搖晃，無法保持平衡，難以正常移動。在中毒后期，一些麗斑麻蜥出現呼吸急促的癥狀，呼吸頻率明顯加快，呼吸深度變淺，最終因呼吸衰竭而死亡。在7天的觀察期內，詳細記錄不同時間點的死亡數量。根據死亡數據，采用概率單位法計算半數致死劑量（LD50）。經計算，丙硫菌唑對麗斑麻蜥的LD50為（256.3±25.6）mg/kg體重，95%置信區間為（220.5-292.1）mg/kg體重；脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的LD50為（158.6±18.2）mg/kg體重，95%置信區間為（130.4-186.8）mg/kg體重。由此可見，脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的急性毒性相對較高，在相同劑量下，脫硫丙硫菌唑導致麗斑麻蜥死亡的概率更大。5.2慢性毒性實驗選擇健康成年的麗斑麻蜥作為實驗動物，實驗前同樣在溫度（28±2）℃、相對濕度（50±10）%的環境中暫養一周，確保其適應實驗室環境。實驗動物隨機分為4組，分別為對照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組，每組設置8個重復，每個重復包含8只麗斑麻蜥。本次實驗采用在食物中添加藥物的染毒方式，模擬麗斑麻蜥在自然環境中通過食物鏈攝入農藥的過程。丙硫菌唑的低、中、高劑量分別設置為5mg/kg、15mg/kg、30mg/kg體重，脫硫丙硫菌唑的低、中、高劑量設置為3mg/kg、9mg/kg、18mg/kg體重，對照組給予正常食物。實驗周期設定為90天，在整個實驗期間，每天定時投喂添加藥物的食物，并提供充足的清潔飲水。在90天的觀察周期內，定期測量麗斑麻蜥的體重和體長，每周測量一次。結果顯示，隨著實驗時間的推移，對照組麗斑麻蜥的體重和體長呈現出正常的增長趨勢，體重平均每周增長約0.5-0.8g，體長增長約2-3mm。而在低劑量組，麗斑麻蜥的體重增長速度略有減緩，平均每周增長0.3-0.6g，體長增長約1-2mm；中劑量組體重增長明顯受到抑制，平均每周增長0.1-0.3g，體長增長約0.5-1mm；高劑量組體重增長幾乎停滯，部分個體甚至出現體重下降的情況，體長也無明顯增長。觀察麗斑麻蜥的外觀、行為和精神狀態，發現對照組個體外觀正常，皮膚光滑有光澤，活動敏捷，對外界刺激反應迅速，進食積極。低劑量組個體外觀無明顯異常，但活動量略有減少，進食速度稍慢。中劑量組個體出現皮膚干燥、粗糙的現象，活動明顯減少，常處于靜止狀態，對食物的興趣降低，部分個體出現嗜睡癥狀。高劑量組個體精神萎靡，身體虛弱，皮膚出現潰瘍、壞死等病變，行動遲緩，幾乎不進食，部分個體出現死亡。在繁殖方面，對照組麗斑麻蜥的繁殖情況正常，雌性個體平均產卵數量為5-7枚，孵化率可達80%-90%。低劑量組雌性個體產卵數量略有減少，平均為4-6枚，孵化率為70%-80%。中劑量組產卵數量明顯減少，平均為2-4枚，孵化率降至50%-60%。高劑量組部分雌性個體不產卵，產卵個體的平均產卵數量僅為1-2枚，孵化率低于30%，且孵出的幼體體質較弱，存活率較低。在實驗結束時，采集血液、肝臟、腎臟等組織樣本進行檢測。血液生理生化指標檢測結果表明，對照組的血常規指標，如白細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白含量等均在正常范圍內；肝功能指標，谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總膽紅素等數值正常；腎功能指標，肌酐、尿素氮等也處于正常水平。低劑量組部分指標出現輕微變化，如白細胞計數略有降低，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性略有升高，但仍在正常參考范圍內。中劑量組血常規指標異常明顯，白細胞計數顯著降低，紅細胞計數和血紅蛋白含量也有所下降；肝功能指標中，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性大幅升高，總膽紅素含量增加；腎功能指標中，肌酐和尿素氮含量升高，表明腎臟功能受到損害。高劑量組血液生理生化指標嚴重異常，各項指標均偏離正常范圍，機體的生理功能受到嚴重破壞。組織病理學檢查結果顯示，對照組肝臟組織細胞形態結構正常，肝細胞排列整齊，細胞核清晰，無明顯病變。低劑量組肝臟細胞出現輕微水腫，部分肝細胞內可見少量脂滴。中劑量組肝臟細胞水腫明顯，肝細胞排列紊亂，出現脂肪變性，部分細胞核固縮、溶解。高劑量組肝臟組織出現廣泛的壞死灶，肝細胞大片壞死，細胞核消失，炎癥細胞浸潤明顯。對照組腎臟組織腎小球和腎小管結構正常，腎小管上皮細胞形態完整。低劑量組腎小管上皮細胞出現輕度濁腫。中劑量組腎小球萎縮，腎小管上皮細胞濁腫、變性，部分腎小管管腔擴張，內有蛋白管型。高劑量組腎臟組織損傷嚴重，腎小球硬化，腎小管壞死，間質纖維化明顯。綜上所述，長期低劑量暴露于丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑會對麗斑麻蜥的生長發育、繁殖能力和生理功能產生顯著的負面影響，且隨著劑量的增加，毒性效應愈發明顯。5.3亞致死劑量下的毒性效應在亞致死劑量下，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的生長發育產生了顯著影響。在為期90天的慢性毒性實驗中，低劑量組麗斑麻蜥的體重增長速度明顯減緩，相較于對照組每周體重平均增長0.5-0.8g，低劑量組僅增長0.3-0.6g；體長增長也受到抑制，對照組每周體長增長約2-3mm，低劑量組僅增長1-2mm。中劑量組體重增長更為緩慢，平均每周增長0.1-0.3g，體長增長約0.5-1mm；高劑量組體重甚至出現下降趨勢，體長增長幾乎停滯。這表明亞致死劑量的農藥暴露會干擾麗斑麻蜥的正常生長代謝，影響其身體的正常發育。對繁殖能力的影響也十分明顯。對照組麗斑麻蜥的繁殖情況正常，雌性個體平均產卵數量為5-7枚，孵化率可達80%-90%。而在低劑量組，雌性個體產卵數量略有減少，平均為4-6枚，孵化率為70%-80%；中劑量組產卵數量明顯減少，平均為2-4枚，孵化率降至50%-60%；高劑量組部分雌性個體不產卵，產卵個體的平均產卵數量僅為1-2枚，孵化率低于30%，且孵出的幼體體質較弱，存活率較低。這說明亞致死劑量的丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑會損害麗斑麻蜥的生殖系統，降低其繁殖成功率，對種群數量的維持和增長構成威脅。從生理生化指標來看，低劑量組麗斑麻蜥的部分血液生理生化指標出現輕微變化，如白細胞計數略有降低，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性略有升高，但仍在正常參考范圍內。這表明低劑量的農藥暴露已經開始對麗斑麻蜥的生理功能產生一定影響，可能干擾了其免疫系統和肝臟的正常代謝。中劑量組血常規指標異常明顯，白細胞計數顯著降低，紅細胞計數和血紅蛋白含量也有所下降，這可能導致麗斑麻蜥的免疫力下降，對疾病的抵抗力減弱；肝功能指標中，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性大幅升高，總膽紅素含量增加，說明肝臟功能受到嚴重損害，可能影響其對營養物質的代謝和解毒能力；腎功能指標中，肌酐和尿素氮含量升高，表明腎臟功能也受到了損害，影響了體內代謝廢物的排泄。高劑量組血液生理生化指標嚴重異常，各項指標均偏離正常范圍，機體的生理功能受到嚴重破壞，這可能導致麗斑麻蜥的生存能力大幅下降，甚至危及生命。在免疫功能方面，通過淋巴細胞增殖試驗發現，低劑量組麗斑麻蜥的淋巴細胞增殖能力受到一定抑制，增殖率相較于對照組有所降低，這表明其細胞免疫功能受到了影響。利用ELISA試劑盒測定血清中免疫球蛋白（IgG、IgM等）、細胞因子（如白細胞介素-2、腫瘤壞死因子等）的含量，結果顯示，低劑量組免疫球蛋白含量略有下降，細胞因子的分泌也出現異常，說明體液免疫功能也受到了干擾。中劑量組和高劑量組的免疫功能受損更為嚴重，淋巴細胞增殖能力顯著降低，免疫球蛋白和細胞因子的含量大幅下降，免疫器官（脾臟、胸腺等）的重量減輕，組織結構出現明顯病變，如脾臟淋巴細胞減少，胸腺皮質變薄等。這表明亞致死劑量的丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑會破壞麗斑麻蜥的免疫系統，使其免疫功能嚴重受損，難以抵御外界病原體的入侵，增加了患病的風險。5.4毒性作用機制探討從細胞層面來看，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的細胞結構和功能產生了顯著影響。在肝臟組織中，通過電子顯微鏡觀察發現，高劑量組的肝細胞線粒體出現腫脹、嵴斷裂等現象，內質網擴張、變形。線粒體作為細胞的能量工廠，其結構的破壞會導致細胞能量代謝障礙，影響細胞的正常生理功能。內質網的異常則會干擾蛋白質和脂質的合成與運輸，進而影響細胞的物質代謝和信號傳導。在腎臟組織中，腎小管上皮細胞的微絨毛減少、脫落，細胞膜完整性受損，這會影響腎小管的重吸收和排泄功能，導致體內代謝廢物無法正常排出，電解質平衡紊亂。在分子層面，研究發現丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑會影響麗斑麻蜥體內相關基因的表達。通過實時熒光定量PCR技術檢測發現，與氧化應激相關的基因，如超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）等基因的表達量在染毒后發生顯著變化。在低劑量組，SOD基因表達量略有上調，這可能是機體對農藥暴露的一種應激反應，試圖通過增加抗氧化酶的合成來抵御氧化損傷；而在高劑量組，SOD和CAT基因表達量明顯下調，表明農藥對細胞的氧化損傷超過了機體的抗氧化防御能力，導致抗氧化酶合成減少，細胞內活性氧（ROS）積累，引發氧化應激損傷。在信號傳導通路方面，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑可能干擾了麗斑麻蜥體內的一些重要信號通路。研究表明，MAPK信號通路在細胞的生長、分化、凋亡等過程中發揮著關鍵作用。在染毒后的麗斑麻蜥體內，檢測到MAPK信號通路中的關鍵蛋白，如ERK、JNK等的磷酸化水平發生改變。在低劑量組，ERK蛋白的磷酸化水平略有升高，可能是細胞對農藥刺激的一種適應性反應，通過激活ERK信號通路來調節細胞的生理功能；但在高劑量組，ERK和JNK蛋白的磷酸化水平顯著降低，這可能導致細胞的生長、分化和凋亡等過程受到抑制，進而影響麗斑麻蜥的正常生長發育和生理功能。丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑還可能對麗斑麻蜥的內分泌系統產生干擾。研究發現，染毒后麗斑麻蜥體內的甲狀腺激素水平發生變化，甲狀腺激素在動物的生長、發育、代謝等過程中起著重要的調節作用。農藥可能通過影響甲狀腺激素的合成、分泌或代謝過程，干擾內分泌系統的正常功能，從而對麗斑麻蜥的生理狀態產生廣泛的影響。六、結果與討論6.1實驗結果匯總為了更直觀地呈現丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在麗斑麻蜥體內的行為和毒性實驗結果，以下以圖表形式進行匯總。實驗項目丙硫菌唑脫硫丙硫菌唑吸收與分布血液中1h達峰值，肝臟富集能力強，各組織含量隨劑量增加而增加血液中2h達峰值，肝臟富集能力強，各組織含量隨劑量增加而增加代謝過程與產物主要通過脫硫、羥基化代謝，關鍵酶為細胞色素P450酶系等主要通過氧化、水解代謝，關鍵酶包括酯酶等排泄規律尿液中4-8h排泄量達峰值，糞便中12-24h排泄量較高尿液中8-12h排泄量達峰值，糞便中12-24h排泄量較高急性毒性LD50為（256.3±25.6）mg/kg體重，95%置信區間為（220.5-292.1）mg/kg體重LD50為（158.6±18.2）mg/kg體重，95%置信區間為（130.4-186.8）mg/kg體重慢性毒性低劑量組體重增長略緩，中劑量組明顯抑制，高劑量組停滯甚至下降；繁殖能力下降；血液生理生化指標異常；肝臟、腎臟組織病變低劑量組體重增長略緩，中劑量組明顯抑制，高劑量組停滯甚至下降；繁殖能力下降；血液生理生化指標異常；肝臟、腎臟組織病變亞致死劑量下毒性效應生長發育受阻，繁殖能力下降，生理生化指標異常，免疫功能受損生長發育受阻，繁殖能力下降，生理生化指標異常，免疫功能受損6.2與其他相關研究對比分析與其他動物對丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑的毒性研究相比，本研究在麗斑麻蜥上的結果呈現出顯著差異。在大鼠急性經口毒性研究中，丙硫菌唑的LD50＞6200mg/kg，這一數值遠高于本研究中丙硫菌唑對麗斑麻蜥的LD50（256.3±25.6）mg/kg體重。這種差異可能源于不同動物的生理結構和代謝能力的不同。大鼠作為哺乳動物，具有相對完善的代謝解毒系統，能夠更有效地代謝和排出丙硫菌唑，從而表現出較高的耐受性。而麗斑麻蜥作為爬行動物，其代謝途徑和酶系統與大鼠存在差異，可能對丙硫菌唑的代謝能力較弱，導致其對丙硫菌唑更為敏感。在鳥類毒性研究中，鵪鶉急性經口LD50＞2000mg/kg，飼喂LD50（5d）＞5000mg/kg，同樣顯示出比麗斑麻蜥更高的耐受性。鳥類具有獨特的生理特征，如高代謝率、特殊的消化系統等，這些特征可能影響它們對農藥的吸收、代謝和排泄。例如，鳥類的消化系統相對較短，食物通過速度快，可能減少了農藥在體內的吸收時間；其高代謝率也可能使農藥更快地被代謝和排出體外。在水生生物毒性研究方面，虹鱒魚LC50（96h）為1.83mg/L，水蚤急性LC50（48h）為1.30mg/L，與麗斑麻蜥的毒性數據無可比性，因為不同的生存環境和生理結構決定了它們對農藥的暴露途徑和敏感性不同。水生生物通過水體直接接觸農藥，其呼吸和排泄系統與麗斑麻蜥完全不同，這導致它們對農藥的吸收和代謝方式存在差異，進而影響毒性表現。脫硫丙硫菌唑的相關研究相對較少，但已有研究表明其對哺乳動物具有較高毒性，這與本研究中脫硫丙硫菌唑對麗斑麻蜥的急性毒性高于丙硫菌唑的結果相一致。然而，具體的毒性數據可能因研究對象和實驗條件的不同而有所差異。不同動物的細胞結構、基因表達和信號傳導通路等方面存在差異，這些差異會導致它們對脫硫丙硫菌唑的毒性反應不同。一些動物可能具有特定的解毒酶或代謝途徑，能夠減輕脫硫丙硫菌唑的毒性；而另一些動物可能缺乏這些機制，從而對其更為敏感。6.3環境風險評估基于本研究結果，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑對生態環境存在一定風險。在麗斑麻蜥生存的農田、草原等環境中，丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑可能通過多種途徑進入。在農業生產過程中，農藥的噴灑可能直接導致部分藥劑落在土壤表面，進而被麗斑麻蜥接觸或攝入；雨水的沖刷也可能使農藥進入水體，麗斑麻蜥在飲水或捕食水生昆蟲時，會將農藥攝入體內。丙硫菌唑及脫硫丙硫菌唑在環境中的殘留可能會對麗斑麻蜥等非靶標生物造成直接危害。從急性毒性來看，丙硫菌唑對麗斑麻蜥的LD50為（256.3±25.6）mg/kg體重，脫硫丙硫菌唑的LD50為（158.6±18.2）mg/kg體重，表明它們在較高劑量下會導致麗斑麻蜥死亡，直接影響其種群數量。長期低劑量暴露下，會影響麗斑麻蜥的生長發育、繁殖能力和免疫功能，導致其生長緩慢、繁殖成功率降低、免疫力下降，這可能會對整個生態系統的食物鏈和生物多樣性產生連鎖反應。如果麗斑麻蜥種群數量因農藥暴露而減少，那么其捕食的害蟲種群可能會迅速增長，對農作物造成更大的危害；同時，以麗斑麻蜥為食的捕食者可能會因食物短缺而受到影響，打破生態系統的平衡。為降低這些風險，需要采取一系列風險管理建議。在農藥使用方面，應嚴格按照推薦劑量使用丙硫菌唑及相關