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文檔簡介

綜合試卷第=PAGE1*2-11頁(共=NUMPAGES1*22頁) 綜合試卷第=PAGE1*22頁(共=NUMPAGES1*22頁)PAGE①姓名所在地區(qū)姓名所在地區(qū)身份證號(hào)密封線1.請(qǐng)首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名,身份證號(hào)和所在地區(qū)名稱。2.請(qǐng)仔細(xì)閱讀各種題目的回答要求,在規(guī)定的位置填寫您的答案。3.不要在試卷上亂涂亂畫,不要在標(biāo)封區(qū)內(nèi)填寫無關(guān)內(nèi)容。一、選擇題1.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖溶液有哪些?

A.磷酸鹽緩沖溶液

B.碳酸鹽緩沖溶液

C.TrisHCl緩沖溶液

D.以上都是

2.蛋白質(zhì)變性時(shí),其溶解度會(huì)發(fā)生什么變化?

A.溶解度增加

B.溶解度減少

C.溶解度不變

D.未知

3.酶的活性中心通常位于什么位置?

A.酶的表面

B.酶的內(nèi)部

C.酶的底物結(jié)合位點(diǎn)

D.以上都是

4.生物大分子的測定方法有哪些?

A.電泳

B.比色法

C.分光光度法

D.以上都是

5.常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器有哪些?

A.離心機(jī)

B.超聲波細(xì)胞破碎儀

C.高速冷凍離心機(jī)

D.以上都是

6.離子交換層析的原理是什么?

A.利用離子交換樹脂的吸附作用分離蛋白質(zhì)

B.利用蛋白質(zhì)與離子交換樹脂的靜電相互作用分離蛋白質(zhì)

C.以上都是

D.未知

7.紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用有哪些?

A.結(jié)構(gòu)鑒定

B.定量分析

C.活性中心定位

D.以上都是

8.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)有哪些?

A.凝膠過濾

B.離子交換層析

C.膜分離

D.以上都是

答案及解題思路:

1.答案:D。解題思路:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖溶液包括磷酸鹽緩沖溶液、碳酸鹽緩沖溶液、TrisHCl緩沖溶液等,用于調(diào)節(jié)溶液的pH值,保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。

2.答案:B。解題思路:蛋白質(zhì)變性時(shí),其空間結(jié)構(gòu)被破壞,導(dǎo)致溶解度降低。

3.答案:D。解題思路:酶的活性中心通常位于酶的表面、內(nèi)部或底物結(jié)合位點(diǎn),是酶催化反應(yīng)的關(guān)鍵部位。

4.答案:D。解題思路:生物大分子的測定方法包括電泳、比色法、分光光度法等,用于檢測和分析生物大分子的性質(zhì)和數(shù)量。

5.答案:D。解題思路:常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器包括離心機(jī)、超聲波細(xì)胞破碎儀、高速冷凍離心機(jī)等,用于分離、純化和檢測生物樣品。

6.答案:C。解題思路:離子交換層析的原理是利用離子交換樹脂的吸附作用和蛋白質(zhì)與離子交換樹脂的靜電相互作用,實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離和純化。

7.答案:D。解題思路:紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中可用于結(jié)構(gòu)鑒定、定量分析、活性中心定位等,是一種重要的分析技術(shù)。

8.答案:D。解題思路:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)包括凝膠過濾、離子交換層析、膜分離等,用于純化和分離生物大分子。二、填空題1.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的酸堿溶液有______、______、______等。

答案:HCl(鹽酸)、NaOH(氫氧化鈉)、Na2CO3(碳酸鈉)

解題思路:在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常用的酸堿溶液包括鹽酸、氫氧化鈉和碳酸鈉,它們?cè)谡{(diào)節(jié)溶液pH值、進(jìn)行滴定分析等方面有著重要作用。

2.蛋白質(zhì)變性后,其______、______、______等性質(zhì)會(huì)發(fā)生改變。

答案:溶解度、穩(wěn)定性、生物學(xué)活性

解題思路:蛋白質(zhì)變性會(huì)導(dǎo)致其三維結(jié)構(gòu)改變,從而影響其溶解度、穩(wěn)定性和生物學(xué)活性等性質(zhì)。

3.酶的活性中心通常位于______、______、______等部位。

答案:蛋白質(zhì)表面、底物結(jié)合位點(diǎn)、催化基團(tuán)

解題思路:酶的活性中心是其與底物結(jié)合并發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵部位,通常位于蛋白質(zhì)表面、底物結(jié)合位點(diǎn)和催化基團(tuán)等部位。

4.生物大分子的測定方法有______、______、______等。

答案:重量法、體積法、光學(xué)法

解題思路:生物大分子的測定方法包括重量法、體積法和光學(xué)法等,這些方法分別通過測量樣品的重量、體積和光學(xué)性質(zhì)來估算生物大分子的含量。

5.常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器有______、______、______等。

答案:離心機(jī)、紫外可見分光光度計(jì)、pH計(jì)

解題思路:常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器包括離心機(jī)、紫外可見分光光度計(jì)和pH計(jì)等,它們?cè)趯?shí)驗(yàn)中用于分離、測量和調(diào)控樣品的性質(zhì)。

6.離子交換層析的原理是利用______與______之間的相互作用。

答案:離子交換劑、生物大分子

解題思路:離子交換層析是利用離子交換劑與生物大分子之間的電荷相互作用來分離純化目標(biāo)物質(zhì)的方法。

7.紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用有______、______、______等。

答案:結(jié)構(gòu)鑒定、官能團(tuán)分析、定量分析

解題思路:紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中可以用于結(jié)構(gòu)鑒定、官能團(tuán)分析和定量分析等,通過分析樣品的紅外光譜圖來獲得相關(guān)信息。

8.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)有______、______、______等。

答案:凝膠過濾層析、親和層析、離子交換層析

解題思路:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)包括凝膠過濾層析、親和層析和離子交換層析等,這些技術(shù)分別基于分子大小、特性和電荷等因素來分離純化目標(biāo)物質(zhì)。三、判斷題1.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖溶液pH值應(yīng)接近7。(×)

解題思路:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖溶液pH值通常不接近7,而是選擇接近生物體內(nèi)環(huán)境的pH值,通常是中性偏微堿性或微酸性,以維持實(shí)驗(yàn)條件與生物體內(nèi)環(huán)境的一致性。

2.蛋白質(zhì)變性后,其溶解度會(huì)降低。(√)

解題思路:蛋白質(zhì)變性是指蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,導(dǎo)致其生物活性喪失。變性過程中,蛋白質(zhì)的疏水相互作用被破壞,導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集,從而降低其溶解度。

3.酶的活性中心通常位于蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)中。(√)

解題思路:酶的活性中心是其催化反應(yīng)的關(guān)鍵區(qū)域,通常位于蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)中,因?yàn)樵诖私Y(jié)構(gòu)中,酶的底物才能與活性中心的氨基酸殘基正確結(jié)合,從而發(fā)揮催化作用。

4.生物大分子的測定方法有紫外可見光譜、熒光光譜、質(zhì)譜等。(√)

解題思路:生物大分子的測定方法確實(shí)包括紫外可見光譜、熒光光譜、質(zhì)譜等,這些方法可以用于測定生物大分子的濃度、結(jié)構(gòu)、大小和分子量等。

5.常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器有離心機(jī)、分光光度計(jì)、電泳儀等。(√)

解題思路:離心機(jī)、分光光度計(jì)和電泳儀等是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的儀器,它們分別用于樣品分離、濃度測定和蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的分離純化。

6.離子交換層析的原理是利用離子交換樹脂與生物大分子之間的相互作用。(√)

解題思路:離子交換層析是一種分離技術(shù),其原理是利用離子交換樹脂與生物大分子之間的電荷相互作用,通過改變洗脫液的條件,實(shí)現(xiàn)生物大分子的分離。

7.紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定、有機(jī)物結(jié)構(gòu)鑒定等。(√)

解題思路:紅外光譜可以用于分析生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸和多糖等在分子水平上的結(jié)構(gòu)特征,因此其在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用包括蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定、有機(jī)物結(jié)構(gòu)鑒定等。

8.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)有透析、超濾、電泳等。(√)

解題思路:透析、超濾和電泳是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù),它們分別用于去除小分子雜質(zhì)、分離分子大小不同的生物大分子和基于電荷、分子大小或分子形狀的分離。四、簡答題1.簡述生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的酸堿溶液及其作用。

答案:

常用的酸堿溶液包括:

鹽酸(HCl):用于調(diào)節(jié)溶液的pH值,通常用于蛋白質(zhì)的沉淀。

硫酸(H2SO4):強(qiáng)酸,用于蛋白質(zhì)的變性處理。

氫氧化鈉(NaOH):強(qiáng)堿,用于調(diào)節(jié)溶液的pH值,常用于蛋白質(zhì)的溶解。

碳酸鈉(Na2CO3):弱堿,用于緩沖溶液的制備。

氨水(NH3·H2O):弱堿,用于調(diào)節(jié)溶液的pH值,常用于蛋白質(zhì)的沉淀。

解題思路:

列出常見的酸堿溶液,并說明它們?cè)谏锘瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)中的作用,如調(diào)節(jié)pH值、蛋白質(zhì)沉淀、變性處理等。

2.簡述蛋白質(zhì)變性后的性質(zhì)變化。

答案:

蛋白質(zhì)變性后,其性質(zhì)變化包括:

結(jié)構(gòu)改變:三級(jí)結(jié)構(gòu)破壞,二級(jí)結(jié)構(gòu)可能保持。

水解:肽鍵可能斷裂。

生物活性喪失:酶活性降低或消失。

物理性質(zhì)改變:溶解度降低,顏色、形狀和氣味改變。

解題思路:

描述蛋白質(zhì)變性后的主要性質(zhì)變化,如結(jié)構(gòu)、水解、生物活性和物理性質(zhì)。

3.簡述酶的活性中心及其作用。

答案:

酶的活性中心是酶分子中直接參與催化反應(yīng)的區(qū)域,其作用包括:

結(jié)合底物:與底物形成酶底物復(fù)合物。

促進(jìn)反應(yīng):通過降低反應(yīng)活化能來加速化學(xué)反應(yīng)。

解題思路:

定義活性中心,并解釋其在催化反應(yīng)中的作用。

4.簡述生物大分子的測定方法。

答案:

生物大分子的測定方法包括:

分子量測定:凝膠電泳、超速離心等。

純度鑒定:SDSPAGE、HPLC等。

定量分析:紫外可見光譜、熒光光譜等。

解題思路:

列出生物大分子測定的常用方法,并簡要說明其原理。

5.簡述常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器及其用途。

答案:

常見的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器及其用途包括:

紫外可見分光光度計(jì):測定溶液的吸光度,用于定量分析。

超速離心機(jī):分離不同分子量的生物大分子。

凝膠電泳儀:分離和鑒定蛋白質(zhì)和核酸。

高效液相色譜儀(HPLC):分離和鑒定小分子化合物。

解題思路:

列出幾種常見的實(shí)驗(yàn)儀器,并說明其用途。

6.簡述離子交換層析的原理及其應(yīng)用。

答案:

離子交換層析的原理是基于帶電分子與離子交換樹脂之間的靜電相互作用。應(yīng)用包括:

蛋白質(zhì)純化:分離不同電荷的蛋白質(zhì)。

核酸純化:分離不同堿基組成的核酸。

解題思路:

解釋離子交換層析的原理,并說明其應(yīng)用領(lǐng)域。

7.簡述紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用。

答案:

紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用包括:

結(jié)構(gòu)鑒定:分析分子中的官能團(tuán)。

活性位點(diǎn)識(shí)別:研究酶的活性中心。

解題思路:

列出紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的具體應(yīng)用,如結(jié)構(gòu)鑒定和活性位點(diǎn)識(shí)別。

8.簡述生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)。

答案:

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù)包括:

凝膠過濾:根據(jù)分子大小分離。

離子交換層析:根據(jù)電荷分離。

膜分離:利用半透膜分離不同分子。

解題思路:

列出幾種生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的分離純化技術(shù),并簡要說明其原理。五、論述題1.論述生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室緩沖溶液的重要性及其應(yīng)用。

重要性:

緩沖溶液在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中扮演著的角色,它能夠維持溶液的pH值在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),這對(duì)于許多生物化學(xué)反應(yīng)和生物分子的穩(wěn)定性。緩沖溶液的重要性包括:

維持生物系統(tǒng)的pH穩(wěn)定;

保護(hù)生物分子免受pH變化的影響;

便于進(jìn)行生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和控制實(shí)驗(yàn)條件。

應(yīng)用:

緩沖溶液在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用廣泛,包括:

配制各種溶液,如酶反應(yīng)混合物、蛋白質(zhì)溶液等;

作為電泳緩沖液,維持電泳過程中的pH穩(wěn)定;

作為層析緩沖液,影響分離純化過程。

2.論述蛋白質(zhì)變性后的性質(zhì)變化及其原因。

性質(zhì)變化:

蛋白質(zhì)變性后,其性質(zhì)會(huì)發(fā)生顯著變化,包括:

失去天然構(gòu)象;

生物活性喪失;

疏水性暴露;

易受蛋白酶降解。

原因:

蛋白質(zhì)變性的原因主要是外界環(huán)境因素,如:

高溫;

強(qiáng)酸或強(qiáng)堿;

重金屬離子;

溶劑作用。

3.論述酶的活性中心在生物催化過程中的作用。

作用:

酶的活性中心在生物催化過程中起著的作用,包括:

結(jié)合底物;

促進(jìn)化學(xué)反應(yīng);

催化效率高;

特異性高。

4.論述生物大分子測定方法的選擇依據(jù)及其優(yōu)缺點(diǎn)。

選擇依據(jù):

選擇生物大分子測定方法時(shí),需考慮以下因素:

目標(biāo)分子的特性;

分析的靈敏度;

分析的準(zhǔn)確性;

分析方法的復(fù)雜性。

優(yōu)缺點(diǎn):

常見的生物大分子測定方法有SDSPAGE、Westernblot等,各有優(yōu)缺點(diǎn),如:

SDSPAGE:優(yōu)點(diǎn)是快速、簡便,缺點(diǎn)是靈敏度有限;

Westernblot:優(yōu)點(diǎn)是靈敏度較高,缺點(diǎn)是操作復(fù)雜。

5.論述生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器在實(shí)驗(yàn)過程中的作用。

作用:

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)揮著的作用,包括:

提高實(shí)驗(yàn)效率;

保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;

擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)研究的范圍。

6.論述離子交換層析在分離純化生物大分子中的應(yīng)用。

應(yīng)用:

離子交換層析在分離純化生物大分子中的應(yīng)用包括:

分離蛋白質(zhì);

分離核酸;

分離多糖。

7.論述紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的重要性及其應(yīng)用。

重要性:

紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中具有重要性,因?yàn)樗軌颍?/p>

提供生物分子的結(jié)構(gòu)信息;

分析生物分子的官能團(tuán)。

應(yīng)用:

紅外光譜在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用包括:

確定蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu);

分析酶的活性中心;

研究生物分子間的相互作用。

8.論述生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中分離純化技術(shù)的選擇依據(jù)及其優(yōu)缺點(diǎn)。

選擇依據(jù):

選擇分離純化技術(shù)時(shí),需考慮以下因素:

目標(biāo)分子的特性;

分離純化過程的效率;

分離純化過程的成本;

環(huán)境影響。

優(yōu)缺點(diǎn):

常見的分離純化技術(shù)有凝膠過濾層析、親和層析等,各有優(yōu)缺點(diǎn),如:

凝膠過濾層析:優(yōu)點(diǎn)是操作簡單,缺點(diǎn)是靈敏度有限;

親和層析:優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高,缺點(diǎn)是操作復(fù)雜。

答案及解題思路:

答案:

解題思路:

(對(duì)于每道論述題,解題思路應(yīng)包括:首先闡述問題的背景和重要性,然后詳細(xì)解釋相關(guān)概念和原理,接著結(jié)合具體案例進(jìn)行分析,最后總結(jié)得出結(jié)論。)六、計(jì)算題1.已知某緩沖溶液的pH值為7.4,求其pKa值。

2.計(jì)算蛋白質(zhì)分子量為10000的等電點(diǎn)。

3.若某酶的最適溫度為37℃,求其在25℃下的活性變化率。

4.已知某DNA分子長度為1kb,求其在100V電壓下的電泳遷移率。

5.若某緩沖溶液的離子強(qiáng)度為0.1,求其pH值。

6.計(jì)算某蛋白質(zhì)分子量為50000的等電點(diǎn)。

7.若某酶的最適pH值為7.0,求其在pH值為5.0時(shí)的活性變化率。

8.已知某DNA分子長度為500bp,求其在100V電壓下的電泳遷移率。

答案及解題思路:

1.解答:

pKa=pHlog([A]/[HA])

在緩沖溶液中,[A]/[HA]≈1(由于pH接近pKa)

因此,pKa≈pH=7.4

2.解答:

等電點(diǎn)(pI)是蛋白質(zhì)在等電條件下的pH值,對(duì)于小分子蛋白質(zhì),pI通常可以通過以下公式計(jì)算:

pI=1/2(pKa1pKa2)

如果沒有具體的pKa值,可以假設(shè)蛋白質(zhì)含有多個(gè)等電點(diǎn),取中間值。

例如若假設(shè)蛋白質(zhì)有兩個(gè)等電點(diǎn)pKa1和pKa2,則pI=1/2(pKa1pKa2)

3.解答:

活性變化率可以用Arrhenius方程來估計(jì):

k2/k1=e^(Ea/RT)

其中,Ea是活化能,R是氣體常數(shù),T是溫度(開爾文),k1和k2分別是不同溫度下的反應(yīng)速率常數(shù)。

由于沒有具體的數(shù)據(jù),我們無法直接計(jì)算,但可以表示為:

活性變化率=(k25℃/k37℃)×100%

4.解答:

電泳遷移率(Rf)可以通過以下公式計(jì)算:

Rf=(遷移距離/總距離)×100%

遷移距離取決于DNA分子的長度、濃度、緩沖液的特性等。

對(duì)于100V電壓下的1kbDNA分子,Rf值取決于實(shí)驗(yàn)條件,通常在0.5到0.8之間。

5.解答:

pH值可以通過以下公式計(jì)算:

pH=70.5log(I)

其中,I是離子強(qiáng)度,對(duì)于0.1的離子強(qiáng)度:

pH=70.5log(0.1)≈6.05

6.解答:

同第2題的解答,如果蛋白質(zhì)有多個(gè)等電點(diǎn),取中間值來計(jì)算pI。

7.解答:

活性變化率可以用HendersonHasselbalch方程來估計(jì):

log([活性]/[非活性])=pKalog([H]/[OH])

在pH5.0時(shí),[H]是高濃度的,[OH]是低濃度的,活性變化率可以表示為:

活性變化率=(log([活性]/[非活性]))×100%

8.解答:

同第4題的解答,電泳遷移率(Rf)取決于DNA分子的長度、濃度、緩沖液的特性等。

對(duì)于100V電壓下的500bpDNA分子,Rf值取決于實(shí)驗(yàn)條件,通常在0.2到0.6之間。七、應(yīng)用題1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模x擇合適的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器和分離純化技術(shù)。

題目:

設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案,用于研究某植物提取物中特定酚類化合物的生物活性。請(qǐng)選擇合適的實(shí)驗(yàn)儀器和分離純化技術(shù)。

解答:

實(shí)驗(yàn)儀器:高效液相色譜儀(HPLC)、紫外可見分光光度計(jì)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

分離純化技術(shù):固相萃取(SPE)、反相高效液相色譜(RPC)。

2.設(shè)計(jì)一種實(shí)驗(yàn)方案,測定某蛋白質(zhì)的分子量。

題目:

某蛋白質(zhì)純度較高,需測定其分子量。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。

解答:

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)樣品制備:取一定量的蛋白質(zhì)樣品,用SDSPAGE樣品緩沖液處理。

(2)電泳:進(jìn)行SDSPAGE電泳,用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)分子量Marker作為參照。

(3)轉(zhuǎn)膜:將電泳后的蛋白質(zhì)條帶轉(zhuǎn)移至NC膜上。

(4)染色:使用考馬斯亮藍(lán)G250染色蛋白質(zhì)條帶。

(5)定量:用掃描儀掃描條帶,分析蛋白質(zhì)分子量。

3.設(shè)計(jì)一種實(shí)驗(yàn)方案,分離純化某生物大分子。

題目:

分離純化某基因表達(dá)產(chǎn)物,已知其分子量為50kDa,請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。

解答:

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)樣品制備:取表達(dá)產(chǎn)物,用細(xì)胞破碎技術(shù)破碎細(xì)胞。

(2)粗分離:使用離子交換層析進(jìn)行初步分離。

(3)純化:通過凝膠過濾層析進(jìn)一步純化目標(biāo)分子。

(4)鑒定:采用SDSPAGE電泳和Westernblotting技術(shù)鑒定純化產(chǎn)物。

4.設(shè)計(jì)一種實(shí)驗(yàn)方案,鑒定某酶的活性中心。

題目:

鑒定某酶的活性中心,已知該酶催化某種反應(yīng)。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。

解答:

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)酶活性測定:在適宜條件下測定酶的催化活性。

(2)突變酶活性測定:對(duì)酶進(jìn)行點(diǎn)突變,構(gòu)建活性中心附近的突變酶。

(3)活性比較:比較野生型酶和突變酶的催化活性,確定活性中心。

5.設(shè)計(jì)一種實(shí)驗(yàn)方案,利用紅外光譜分析某有機(jī)物的結(jié)構(gòu)。

題目:

分析某有機(jī)物的結(jié)構(gòu),已知其分子式為C8H10O。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。

解答:

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)樣品制備:制備純凈的有機(jī)物樣品。

(2)紅外光譜掃描:使用紅外光譜儀對(duì)樣品進(jìn)行掃描。

(3)解析譜

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