E-鈣粘蛋白與波形蛋白：解鎖胃癌預(yù)后密碼的關(guān)鍵分子一、引言1.1研究背景胃癌是全球范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅人類健康的重大公共衛(wèi)生問題，在各類惡性腫瘤中占據(jù)顯著地位。據(jù)2022年全球癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，當(dāng)年全球新增癌癥病例達(dá)1,996萬例，其中胃癌新發(fā)病例數(shù)為96.84萬例，占比4.9%，位居全球癌癥發(fā)病率第五位，男性患者占比6.1%，女性占比3.5%，男性發(fā)病率顯著高于女性。同年，全球癌癥死亡病例數(shù)為974萬例，胃癌死亡病例數(shù)為65.99萬例，占比6.8%，位列全球癌癥死亡原因第五，男性在所有癌癥死亡中的占比（7.9%）高于女性（5.4%），但胃癌對(duì)女性的影響同樣不容小覷。在中國，2022年癌癥新發(fā)病例數(shù)為482.47萬例，新發(fā)胃癌病例數(shù)達(dá)35.87萬例，占全國新增癌癥病例數(shù)的7.4%，位居國內(nèi)新發(fā)癌癥第五位，男性發(fā)病率為34.20/10萬人，女性為16.23/10萬人，性別差異明顯。更嚴(yán)峻的是，2022年中國癌癥死亡病例數(shù)為257.42萬例，胃癌導(dǎo)致的死亡人數(shù)高達(dá)26.04萬例，占全國癌癥死亡病例數(shù)的10.1%，排名癌癥死亡原因第三位，男女死亡率分別為25.18/10萬人和11.41/10萬人，凸顯了胃癌防治的緊迫性。盡管醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷進(jìn)步，人們對(duì)健康的關(guān)注度逐漸提高，胃癌的治療效果有了一定進(jìn)展，但目前胃癌的治愈率仍較低，預(yù)后較差。其主要原因在于早期診斷困難，多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期，錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)。此外，胃癌的異質(zhì)性強(qiáng)，不同患者的病情發(fā)展和治療反應(yīng)差異較大，也增加了治療的難度。因此，深入研究胃癌的發(fā)病機(jī)制，尋找有效的早期診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)，對(duì)于提高胃癌患者的生存率和生活質(zhì)量具有重要意義。E-鈣粘蛋白（E-Cadherin）和波形蛋白（Vimentin）是胃癌研究中備受關(guān)注的兩個(gè)重要分子。E-鈣粘蛋白主要參與腫瘤細(xì)胞的黏附、侵襲和轉(zhuǎn)移過程，在維持細(xì)胞間黏附、細(xì)胞極性和上皮細(xì)胞外胞膜緊密連接等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。當(dāng)E-鈣粘蛋白表達(dá)下調(diào)或功能障礙時(shí)，同種細(xì)胞間的黏附作用減弱，上皮源性腫瘤細(xì)胞便具備了侵襲性生長的特點(diǎn)，容易從原發(fā)病灶脫落分離，進(jìn)而向局部淋巴結(jié)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在胃癌中，E-鈣粘蛋白的表達(dá)與腫瘤的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯等因素密切相關(guān)，浸潤深度越深、轉(zhuǎn)移越廣泛的胃癌，E-鈣粘蛋白的表達(dá)往往越低，提示其在胃癌腹膜轉(zhuǎn)移中起著重要作用。而且，E-鈣粘蛋白表達(dá)降低的胃癌患者預(yù)后較差，易于發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，可作為胃癌腹膜轉(zhuǎn)移預(yù)后的重要指標(biāo)，為臨床治療和預(yù)后評(píng)估提供參考。波形蛋白是一種與細(xì)胞骨架相關(guān)的蛋白質(zhì)，主要表達(dá)于間充質(zhì)起源的細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞等。研究表明，上皮源性腫瘤如胃癌中常出現(xiàn)波形蛋白的異常表達(dá)，且與癌細(xì)胞的分化、侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。波形蛋白通過維持上皮細(xì)胞的極性，穩(wěn)定上皮細(xì)胞的增殖過程，對(duì)癌細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)生影響。在胃癌發(fā)生過程中，波形蛋白的表達(dá)變化可能參與了癌細(xì)胞的生物學(xué)行為改變，但其具體機(jī)制尚未完全明確。綜上所述，E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中可能發(fā)揮著重要作用，它們的表達(dá)與胃癌的預(yù)后密切相關(guān)。深入研究這兩種蛋白在胃癌中的表達(dá)情況及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系，有望為胃癌的早期診斷、治療和預(yù)后評(píng)估提供新的依據(jù)和思路，具有重要的臨床意義和研究價(jià)值。1.2研究目的與意義本研究旨在深入探究E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌組織中的表達(dá)情況，全面分析它們與胃癌臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系，為胃癌的早期診斷、治療及預(yù)后評(píng)估提供全新的理論依據(jù)和潛在的分子靶點(diǎn)。具體而言，研究將細(xì)致觀察胃癌組織中E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)水平，精確分析不同臨床分期（早期、中期、晚期）胃癌組織中這兩種蛋白的表達(dá)差異，以及它們與腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)的相關(guān)性，同時(shí)深入探究E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)與胃癌患者總生存期、無病生存期等預(yù)后指標(biāo)的關(guān)聯(lián)，從而明確它們?cè)陬A(yù)測(cè)胃癌患者預(yù)后方面的價(jià)值。從理論意義來看，E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中的作用機(jī)制研究仍存在諸多未知。本研究通過對(duì)這兩種蛋白在胃癌中表達(dá)及功能的深入分析，有望揭示它們?cè)谖赴┌l(fā)生發(fā)展中的分子機(jī)制，豐富對(duì)胃癌發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為胃癌的基礎(chǔ)研究提供新的理論支持，有助于完善胃癌的分子生物學(xué)理論體系，推動(dòng)相關(guān)領(lǐng)域的學(xué)術(shù)發(fā)展。從實(shí)踐意義上講，當(dāng)前胃癌的早期診斷和預(yù)后評(píng)估面臨挑戰(zhàn)，現(xiàn)有的診斷和評(píng)估指標(biāo)存在一定局限性。若能明確E-鈣粘蛋白和波形蛋白與胃癌臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系，可將它們作為新的生物標(biāo)志物應(yīng)用于臨床。一方面，有助于提高胃癌的早期診斷率，使患者在疾病早期得到及時(shí)治療，改善預(yù)后；另一方面，可用于評(píng)估患者的預(yù)后情況，為醫(yī)生制定個(gè)性化的治療方案提供依據(jù)，選擇更合適的治療方法，如手術(shù)、化療、靶向治療等，提高治療效果，減少不必要的治療，降低患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，對(duì)胃癌的臨床治療和患者管理具有重要的指導(dǎo)意義，為改善胃癌患者的生存質(zhì)量和延長生存期提供新的策略和途徑。二、E-鈣粘蛋白與波形蛋白的生物學(xué)特性2.1E-鈣粘蛋白2.1.1結(jié)構(gòu)與功能E-鈣粘蛋白（E-Cadherin）是鈣粘蛋白家族的重要成員，是一類介導(dǎo)同源細(xì)胞間粘附的鈣離子依賴性跨膜糖蛋白。人類E-鈣粘蛋白的編碼基因定位于16號(hào)染色體q22.1附近，cDNA全長4.8kb，由16個(gè)外顯子及15個(gè)內(nèi)含子組成。其蛋白分子由723-748個(gè)氨基酸構(gòu)成，分子量為80-124ku，具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)。E-鈣粘蛋白包含一個(gè)大的胞外區(qū)、一個(gè)跨膜區(qū)和一個(gè)保守的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。胞外區(qū)含有五個(gè)串聯(lián)重復(fù)的獨(dú)特域（E1-E5），這些結(jié)構(gòu)域?qū)︹}離子有高度敏感性，氨基末端位于細(xì)胞膜外，是鈣離子的結(jié)合位點(diǎn)，鈣離子的存在對(duì)于維持E-鈣粘蛋白的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和功能正常發(fā)揮至關(guān)重要。跨膜區(qū)的疏水基團(tuán)使其能夠鑲嵌在細(xì)胞膜中，而細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域則通過α、β、γ連接蛋白與微絲、中間絲、肌動(dòng)蛋白等細(xì)胞骨架成分相連接，形成復(fù)合體，使E-鈣粘蛋白被錨定于細(xì)胞骨架上，從而與相鄰細(xì)胞形成穩(wěn)定連接。在正常生理狀態(tài)下，E-鈣粘蛋白主要存在于人和動(dòng)物的上皮細(xì)胞，對(duì)于維持上皮細(xì)胞的形態(tài)和組織完整性起著不可或缺的作用。它通過介導(dǎo)細(xì)胞間的粘附作用，將上皮細(xì)胞緊密連接在一起，形成有序的上皮組織，保持組織的正常結(jié)構(gòu)和功能。例如在皮膚、胃腸道等上皮組織中，E-鈣粘蛋白的正常表達(dá)和功能保證了上皮細(xì)胞層的緊密性和連續(xù)性，有效阻擋外界病原體的入侵，同時(shí)維持細(xì)胞的正常極性和分化狀態(tài)。在胚胎發(fā)育過程中，E-鈣粘蛋白也發(fā)揮著關(guān)鍵作用，影響胚胎發(fā)育中細(xì)胞的分化，參與組織器官的形成。在胚胎早期，細(xì)胞的分化和遷移需要精確的調(diào)控，E-鈣粘蛋白通過調(diào)節(jié)細(xì)胞間的粘附力，引導(dǎo)細(xì)胞的正確定位和聚集，促進(jìn)不同組織和器官的有序形成。在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，E-鈣粘蛋白的功能異常與腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。當(dāng)E-鈣粘蛋白表達(dá)下調(diào)或功能障礙時(shí)，上皮細(xì)胞間的粘附作用顯著減弱。這使得同種細(xì)胞間失去緊密的連接，原本緊密排列的上皮細(xì)胞變得松散，對(duì)于上皮源性腫瘤而言，腫瘤細(xì)胞便具備了侵襲生長的特點(diǎn)。它們?nèi)菀讖脑l(fā)病灶脫落分離，獲得了向周圍組織浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的能力。臨床研究表明，在多種上皮源性腫瘤中，如乳腺癌、肺癌、胃癌等，E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失或降低的患者，其腫瘤的侵襲性更強(qiáng)，更容易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，預(yù)后往往較差。因此，E-鈣粘蛋白被認(rèn)為是一種重要的腫瘤抑制因子，其表達(dá)水平和功能狀態(tài)可以作為評(píng)估腫瘤惡性程度和預(yù)后的重要指標(biāo)。2.1.2在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失在腫瘤發(fā)生發(fā)展中扮演著關(guān)鍵角色，其中最主要的作用機(jī)制是引發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程。EMT是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過程，在此過程中，上皮細(xì)胞失去其典型的上皮特征，如細(xì)胞極性和細(xì)胞間緊密連接，同時(shí)獲得間充質(zhì)細(xì)胞的特性，如較強(qiáng)的遷移和侵襲能力。E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失是EMT發(fā)生的關(guān)鍵起始事件。正常情況下，E-鈣粘蛋白通過與相鄰細(xì)胞表面的E-鈣粘蛋白分子相互作用，形成穩(wěn)定的細(xì)胞間粘附連接，維持上皮細(xì)胞的形態(tài)和功能。當(dāng)E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失時(shí)，細(xì)胞間的粘附力顯著下降，上皮細(xì)胞的極性被破壞。隨著E-鈣粘蛋白表達(dá)的減少，一系列相關(guān)信號(hào)通路被激活，進(jìn)一步促進(jìn)EMT的發(fā)生。例如，轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）信號(hào)通路在EMT過程中起著核心調(diào)控作用。當(dāng)E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失時(shí)，TGF-β信號(hào)通路被激活，TGF-β與其受體結(jié)合后，通過一系列的磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)，激活下游的轉(zhuǎn)錄因子，如Snail、Slug、Twist等。這些轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合到E-鈣粘蛋白基因的啟動(dòng)子區(qū)域，抑制其轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步降低E-鈣粘蛋白的表達(dá)水平，形成一個(gè)正反饋調(diào)節(jié)環(huán)。同時(shí)，這些轉(zhuǎn)錄因子還可以上調(diào)間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)，如波形蛋白（Vimentin）、N-鈣粘蛋白（N-Cadherin）等，促進(jìn)上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。EMT的發(fā)生使得腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移能力大幅增強(qiáng)。獲得間充質(zhì)細(xì)胞特性的腫瘤細(xì)胞，其細(xì)胞骨架發(fā)生重塑，變得更加靈活，能夠更容易地穿過細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜，實(shí)現(xiàn)局部浸潤。此外，這些細(xì)胞還可以通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)，到達(dá)遠(yuǎn)處組織和器官，形成轉(zhuǎn)移灶。在胃癌中，E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失引發(fā)的EMT過程與胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，E-鈣粘蛋白表達(dá)低的胃癌組織中，EMT相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)明顯升高，腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)。而且，EMT過程還使得腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物和放療產(chǎn)生耐藥性，進(jìn)一步增加了胃癌治療的難度。因此，深入研究E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失引發(fā)EMT的分子機(jī)制，對(duì)于揭示胃癌的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，尋找有效的治療靶點(diǎn)具有重要意義。2.2波形蛋白2.2.1結(jié)構(gòu)與功能波形蛋白（Vimentin）是一種III型中間絲蛋白，屬于中間絲蛋白家族，在維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其基因定位于人類染色體10p13，全長約為23kb，包含9個(gè)外顯子和8個(gè)內(nèi)含子。波形蛋白的氨基酸序列相對(duì)保守，由約466個(gè)氨基酸組成，分子量約為54kDa。從結(jié)構(gòu)上看，波形蛋白單體具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征。它包含一個(gè)中央α螺旋結(jié)構(gòu)域，這是中間絲蛋白的典型結(jié)構(gòu)特征。α螺旋結(jié)構(gòu)域的兩端分別為非螺旋的氨基端（N端）和羧基端（C端）。兩個(gè)波形蛋白單體相互纏繞，形成一個(gè)卷曲螺旋狀的二聚體結(jié)構(gòu)。在這個(gè)過程中，α螺旋序列中的一組疏水氨基酸在螺旋表面形成一層“疏水性屏障”，使得兩個(gè)螺旋能夠相互卷曲。同時(shí)，周期性分布的酸性及堿性氨基酸形成離子鹽橋，進(jìn)一步穩(wěn)定了α螺旋結(jié)構(gòu)。兩個(gè)二聚體再進(jìn)一步組裝形成一個(gè)四聚體，多個(gè)四聚體相互連接，最終形成中間絲網(wǎng)絡(luò)，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)穩(wěn)定的支撐框架。在細(xì)胞中，波形蛋白具有多種重要功能。它主要分布于間充質(zhì)起源的細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞等，在這些細(xì)胞中構(gòu)建起細(xì)胞骨架的重要組成部分。波形蛋白通過與細(xì)胞內(nèi)的各種細(xì)胞器相互作用，如與細(xì)胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體的表面相連，起到支撐和錨固這些細(xì)胞器的作用，維持細(xì)胞器在細(xì)胞內(nèi)的正常位置和形態(tài)。在細(xì)胞遷移和運(yùn)動(dòng)過程中，波形蛋白的動(dòng)態(tài)變化對(duì)細(xì)胞的靈活性至關(guān)重要。當(dāng)細(xì)胞受到外力作用或需要改變形態(tài)時(shí)，波形蛋白組成的中間絲網(wǎng)絡(luò)能夠發(fā)生重塑和變形，為細(xì)胞提供必要的彈性和韌性，使細(xì)胞能夠順利完成遷移和運(yùn)動(dòng)過程。例如，在胚胎發(fā)育過程中，細(xì)胞的遷移和分化需要精確的調(diào)控，波形蛋白通過參與細(xì)胞骨架的動(dòng)態(tài)變化，引導(dǎo)細(xì)胞的正確遷移和定位，促進(jìn)組織和器官的形成。在傷口愈合過程中，成纖維細(xì)胞的遷移和增殖是修復(fù)受損組織的關(guān)鍵步驟，波形蛋白在這個(gè)過程中發(fā)揮著重要作用，它幫助成纖維細(xì)胞改變形態(tài)，遷移到傷口部位，促進(jìn)傷口的愈合。此外，波形蛋白還參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)過程，與一些信號(hào)分子相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、增殖和分化。2.2.2在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，波形蛋白的異常表達(dá)與癌細(xì)胞的多種惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)，尤其是在癌細(xì)胞的分化、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要作用。癌細(xì)胞的分化異常是腫瘤發(fā)生的重要特征之一，波形蛋白在其中扮演著關(guān)鍵角色。正常情況下，上皮細(xì)胞具有特定的形態(tài)和功能，表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)志物，如E-鈣粘蛋白等。當(dāng)上皮細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化并向癌細(xì)胞轉(zhuǎn)變時(shí)，常常伴隨著上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程。在EMT過程中，上皮細(xì)胞逐漸失去上皮特征，獲得間充質(zhì)細(xì)胞的特性。波形蛋白作為間充質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物之一，其表達(dá)在EMT過程中顯著上調(diào)。研究表明，波形蛋白的高表達(dá)可以促進(jìn)癌細(xì)胞的去分化，使其失去原有的上皮細(xì)胞形態(tài)和功能，獲得更強(qiáng)的遷移和侵襲能力。這是因?yàn)椴ㄐ蔚鞍椎谋磉_(dá)變化會(huì)影響細(xì)胞骨架的結(jié)構(gòu)和功能，使得癌細(xì)胞的形態(tài)更加靈活，能夠更容易地突破細(xì)胞外基質(zhì)的限制，實(shí)現(xiàn)局部浸潤和轉(zhuǎn)移。例如，在乳腺癌細(xì)胞中，通過實(shí)驗(yàn)上調(diào)波形蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞的分化程度降低，遷移和侵襲能力明顯增強(qiáng)；而抑制波形蛋白的表達(dá)，則可以部分逆轉(zhuǎn)癌細(xì)胞的去分化狀態(tài)，降低其侵襲和轉(zhuǎn)移能力。波形蛋白對(duì)癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的促進(jìn)作用是其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中作用機(jī)制的核心體現(xiàn)。癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多步驟過程，包括癌細(xì)胞從原發(fā)灶脫離、降解細(xì)胞外基質(zhì)、穿過基底膜、進(jìn)入血液循環(huán)或淋巴循環(huán)，并在遠(yuǎn)處器官定植和生長等環(huán)節(jié)。在這個(gè)過程中，波形蛋白通過多種途徑發(fā)揮作用。一方面，波形蛋白可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架的重塑，影響癌細(xì)胞的形態(tài)和運(yùn)動(dòng)能力。如前所述，波形蛋白組成的中間絲網(wǎng)絡(luò)能夠?yàn)榧?xì)胞提供彈性和韌性，當(dāng)癌細(xì)胞需要遷移和侵襲時(shí)，波形蛋白的動(dòng)態(tài)變化可以使細(xì)胞骨架發(fā)生重塑，使癌細(xì)胞能夠伸出偽足，與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用，從而實(shí)現(xiàn)遷移和侵襲。另一方面，波形蛋白還可以與一些細(xì)胞表面受體和信號(hào)分子相互作用，激活相關(guān)的信號(hào)通路，促進(jìn)癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。例如，波形蛋白可以與整合素等細(xì)胞表面受體結(jié)合，激活FAK（粘著斑激酶）信號(hào)通路，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的粘附、遷移和侵襲行為。此外，波形蛋白還可以通過與基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）等蛋白相互作用，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的降解，為癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移創(chuàng)造條件。在胃癌中，研究發(fā)現(xiàn)波形蛋白高表達(dá)的癌細(xì)胞更容易突破胃黏膜的基底膜，向周圍組織浸潤，并通過淋巴循環(huán)或血液循環(huán)轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)處器官，如肝臟、肺等。除了在癌細(xì)胞分化、侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用，波形蛋白還與癌細(xì)胞的增殖和存活密切相關(guān)。在腫瘤細(xì)胞的快速增殖過程中，需要不斷地合成新的細(xì)胞成分，包括蛋白質(zhì)、核酸等。波形蛋白可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)運(yùn)輸和代謝過程，為癌細(xì)胞的增殖提供必要的物質(zhì)基礎(chǔ)。例如，波形蛋白參與了從溶酶體傳送由低密度脂蛋白（LDL）所衍生的膽固醇至酯化位點(diǎn)的過程，這對(duì)于維持癌細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)和功能，以及細(xì)胞的增殖和存活具有重要意義。在腫瘤微環(huán)境中，癌細(xì)胞面臨著各種應(yīng)激因素，如缺氧、營養(yǎng)缺乏等。波形蛋白可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞的應(yīng)激反應(yīng)，增強(qiáng)癌細(xì)胞的存活能力。研究表明，在缺氧條件下，波形蛋白的表達(dá)會(huì)進(jìn)一步上調(diào)，它可以通過與一些應(yīng)激相關(guān)蛋白相互作用，穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境，減少應(yīng)激對(duì)癌細(xì)胞的損傷，從而促進(jìn)癌細(xì)胞的存活。在一些化療藥物的作用下，癌細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生耐藥性，波形蛋白在這個(gè)過程中也可能發(fā)揮作用。它可以通過調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的代謝和信號(hào)通路，改變癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，使癌細(xì)胞能夠逃避化療藥物的殺傷，從而導(dǎo)致腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。三、研究設(shè)計(jì)與方法3.1研究對(duì)象本研究選取2016年1月至2021年12月期間在[醫(yī)院名稱]確診并接受手術(shù)治療的113例胃癌患者作為研究對(duì)象。所有患者均簽署了知情同意書，自愿參與本研究。入選標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格遵循臨床診療規(guī)范和研究倫理要求：患者經(jīng)術(shù)后病理檢查確診為胃癌，病理類型涵蓋腺癌、黏液腺癌、印戒細(xì)胞癌等常見類型，確保研究對(duì)象的疾病診斷準(zhǔn)確性；患者接受了根治性手術(shù)切除，手術(shù)方式包括胃部分切除術(shù)或全胃切除術(shù)，手術(shù)過程嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行，以保證手術(shù)質(zhì)量和一致性；患者術(shù)前未接受過化療、放療或靶向治療等抗腫瘤治療，避免其他治療因素對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生干擾，確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性；患者臨床病理資料完整，包括年齡、性別、腫瘤部位、大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況、TNM分期等詳細(xì)信息，為后續(xù)的數(shù)據(jù)分析和研究提供全面的數(shù)據(jù)支持。排除標(biāo)準(zhǔn)同樣明確且必要：對(duì)于病理診斷不明確或存在爭(zhēng)議的患者，予以排除，以保證研究對(duì)象的同質(zhì)性和疾病診斷的可靠性；合并其他惡性腫瘤的患者也被排除在外，避免其他腫瘤對(duì)研究結(jié)果的影響，確保研究結(jié)果僅反映胃癌相關(guān)的情況；存在嚴(yán)重心、肝、腎等重要臟器功能障礙，或患有其他嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病，如嚴(yán)重的心血管疾病、肝腎功能衰竭、自身免疫性疾病等，可能影響患者的生存和治療反應(yīng)，因此不適合納入研究；無法獲取完整臨床病理資料的患者，由于無法為研究提供全面的數(shù)據(jù)支持，也被排除在研究范圍之外。在這113例胃癌患者中，男性患者65例，占比57.5%，女性患者48例，占比42.5%，男性患者數(shù)量略多于女性，與臨床流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)中胃癌發(fā)病的性別差異相符。患者年齡范圍為35-82歲，平均年齡（58.6±10.5）歲，其中年齡在50歲及以上的患者有72例，占比63.7%，提示胃癌在中老年人群中更為高發(fā)。腫瘤部位分布上，位于胃竇部的患者有45例，占比39.8%；胃體部的患者有38例，占比33.6%；賁門部的患者有30例，占比26.6%。腫瘤大小方面，最大徑范圍為1.5-8.0cm，平均直徑（3.8±1.6）cm。浸潤深度方面，T1期患者18例，占比15.9%；T2期患者32例，占比28.3%；T3期患者45例，占比39.8%；T4期患者18例，占比15.9%。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況為，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者68例，占比60.2%；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者45例，占比39.8%。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者20例，占比17.7%；無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者93例，占比82.3%。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟（UICC）的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期患者22例，占比19.5%；Ⅱ期患者35例，占比31.0%；Ⅲ期患者40例，占比35.4%；Ⅳ期患者16例，占比14.2%。這些患者的基本信息和臨床病理特征分布，為后續(xù)研究E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系提供了豐富的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)和多樣的研究樣本。3.2實(shí)驗(yàn)方法3.2.1免疫組化技術(shù)檢測(cè)蛋白表達(dá)免疫組化技術(shù)是本研究檢測(cè)E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌組織中表達(dá)的關(guān)鍵方法，其原理基于抗原與抗體特異性結(jié)合，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原的定位、定性及定量研究。實(shí)驗(yàn)開始前，需準(zhǔn)備好相關(guān)試劑和材料，包括鼠抗人E-鈣粘蛋白單克隆抗體、鼠抗人波形蛋白單克隆抗體、免疫組化超敏試劑盒（含二抗、DAB顯色劑等）、枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）、3%過氧化氫溶液、PBS緩沖液（pH7.4）、蘇木精染液、中性樹膠等，以及經(jīng)過固定、脫水、石蠟包埋處理后的胃癌組織切片和癌旁正常胃黏膜組織切片。具體實(shí)驗(yàn)步驟如下：脫蠟水化：將石蠟切片置于60℃恒溫烤箱中烘烤30分鐘，使切片與載玻片緊密黏附。隨后，將切片依次浸入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中各10分鐘進(jìn)行脫蠟，以徹底去除切片上的石蠟，保證后續(xù)染色順利進(jìn)行。接著，將切片依次放入無水乙醇Ⅰ、無水乙醇Ⅱ中各5分鐘，再分別在95%、85%、70%乙醇中各浸泡3分鐘，最后用蒸餾水沖洗3分鐘，使切片逐漸從有機(jī)相環(huán)境過渡到水相環(huán)境，為后續(xù)的抗原修復(fù)和染色步驟做好準(zhǔn)備。抗原修復(fù)：抗原修復(fù)是免疫組化實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟，由于組織在固定和包埋過程中，抗原決定簇可能被遮蔽，通過抗原修復(fù)可使抗原決定簇重新暴露，增強(qiáng)抗原與抗體的結(jié)合能力。將水化后的切片放入盛有枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）的修復(fù)盒中，置于微波爐中進(jìn)行加熱修復(fù)。先高火加熱至沸騰，然后轉(zhuǎn)低火維持微沸狀態(tài)10-15分鐘，使抗原充分修復(fù)。修復(fù)完成后，取出修復(fù)盒，自然冷卻至室溫，再用PBS緩沖液沖洗切片3次，每次3分鐘，以去除殘留的緩沖液。消除內(nèi)源性過氧化物酶活性：在切片上滴加3%過氧化氫溶液，室溫孵育10-15分鐘，以封閉組織中的內(nèi)源性過氧化物酶，避免其與后續(xù)加入的酶標(biāo)二抗發(fā)生非特異性反應(yīng)，產(chǎn)生假陽性結(jié)果。孵育結(jié)束后，用PBS緩沖液沖洗切片3次，每次3分鐘，徹底去除過氧化氫溶液。非特異性位點(diǎn)封閉：為防止一抗與組織細(xì)胞表面的非特異性位點(diǎn)結(jié)合，在切片上滴加正常山羊血清封閉液，室溫孵育20-30分鐘，使封閉液充分覆蓋切片表面，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。孵育完成后，傾去封閉液，無需沖洗，直接進(jìn)行下一步操作。一抗孵育：根據(jù)抗體說明書，將鼠抗人E-鈣粘蛋白單克隆抗體和鼠抗人波形蛋白單克隆抗體用抗體稀釋液稀釋至合適濃度。在切片上分別滴加稀釋后的一抗，確保一抗均勻覆蓋切片組織，然后將切片放入濕盒中，4℃冰箱孵育過夜，使一抗與組織中的抗原充分結(jié)合。孵育結(jié)束后，取出切片，用PBS緩沖液沖洗3次，每次5分鐘，以去除未結(jié)合的一抗。二抗孵育：將生物素標(biāo)記的山羊抗鼠IgG二抗用抗體稀釋液稀釋至合適濃度，在切片上滴加稀釋后的二抗，室溫孵育30-40分鐘，使二抗與一抗特異性結(jié)合。孵育結(jié)束后，用PBS緩沖液沖洗切片3次，每次5分鐘，以去除未結(jié)合的二抗。DAB顯色：將DAB顯色劑A、B、C液按一定比例混合均勻，在切片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，室溫下避光顯色3-10分鐘，期間需在顯微鏡下密切觀察顯色情況，當(dāng)陽性部位呈現(xiàn)清晰的棕黃色時(shí)，立即用蒸餾水沖洗切片，終止顯色反應(yīng)，以避免顯色過度影響結(jié)果判斷。蘇木精復(fù)染：將顯色后的切片放入蘇木精染液中復(fù)染細(xì)胞核，復(fù)染時(shí)間約1-2分鐘，使細(xì)胞核染成藍(lán)色，便于在顯微鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)。復(fù)染后，用蒸餾水沖洗切片，然后用1%鹽酸酒精溶液分化數(shù)秒，再用蒸餾水沖洗，最后放入溫水（約50-60℃）中浸泡返藍(lán)5-10分鐘，使細(xì)胞核顏色更加清晰、鮮艷。脫水、透明、封片：將復(fù)染后的切片依次放入75%、85%、95%、100%乙醇中各浸泡3分鐘進(jìn)行脫水，然后將切片浸入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中各5分鐘進(jìn)行透明處理，使切片變得透明，便于觀察。最后，在切片上滴加中性樹膠，蓋上蓋玻片，進(jìn)行封片，使切片長期保存。免疫組化結(jié)果判定采用半定量分析方法，在高倍顯微鏡（×400）下隨機(jī)選取5個(gè)視野，觀察細(xì)胞中棕黃色顆粒的分布和染色強(qiáng)度。染色強(qiáng)度分為陰性（-）、弱陽性（+）、陽性（++）和強(qiáng)陽性（+++）四個(gè)等級(jí)。陰性表示無棕黃色顆粒出現(xiàn)；弱陽性表現(xiàn)為淺黃色顆粒，陽性為棕黃色顆粒，強(qiáng)陽性則為棕褐色顆粒。同時(shí)，計(jì)算陽性細(xì)胞所占百分比，將陽性細(xì)胞數(shù)＜10%記為陰性，10%-30%為弱陽性，31%-70%為陽性，＞70%為強(qiáng)陽性。綜合染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比，對(duì)E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌組織中的表達(dá)情況進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估。3.2.2數(shù)據(jù)分析方法本研究使用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行全面分析，以確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，通過合理的數(shù)據(jù)分析方法深入挖掘數(shù)據(jù)背后的潛在信息，揭示E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。對(duì)于計(jì)量資料，如患者的年齡、腫瘤大小等，若數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行描述。兩組間比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，用于判斷兩組數(shù)據(jù)的均值是否存在顯著差異。例如，比較不同性別胃癌患者的年齡差異，可通過獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)確定男性和女性患者年齡均值是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多組間比較則采用單因素方差分析（One-WayANOVA），當(dāng)涉及多個(gè)組別的數(shù)據(jù)比較時(shí)，如不同TNM分期患者的腫瘤大小比較，單因素方差分析可以判斷不同組別的腫瘤大小均值是否來自同一總體，若P＜0.05，則表明至少有兩組之間存在顯著差異，然后可進(jìn)一步進(jìn)行兩兩比較，如LSD法、Bonferroni法等，以明確具體哪些組之間存在差異。計(jì)數(shù)資料，如不同病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)陽性率等，以例數(shù)和百分比（n，%）表示。兩組或多組間比較采用卡方檢驗(yàn)（χ2檢驗(yàn)），用于檢驗(yàn)兩個(gè)或多個(gè)分類變量之間是否存在關(guān)聯(lián)。比如，分析E-鈣粘蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系，通過卡方檢驗(yàn)可以判斷E-鈣粘蛋白表達(dá)陽性組和陰性組的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率是否存在顯著差異。當(dāng)理論頻數(shù)小于5時(shí)，采用Fisher確切概率法進(jìn)行分析，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。在研究E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系時(shí)，采用生存分析方法。運(yùn)用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，分別計(jì)算不同E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)水平患者的總生存率和無病生存率，直觀展示患者生存情況隨時(shí)間的變化趨勢(shì)。通過Log-rank檢驗(yàn)比較不同組生存曲線的差異，若P＜0.05，則認(rèn)為不同組之間的生存情況存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)水平對(duì)患者預(yù)后有顯著影響。此外，還可以進(jìn)行多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析，納入可能影響預(yù)后的因素，如年齡、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)等，篩選出獨(dú)立的預(yù)后影響因素，進(jìn)一步明確E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌預(yù)后中的作用地位。在所有數(shù)據(jù)分析過程中，以P＜0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格控制統(tǒng)計(jì)學(xué)誤差，確保研究結(jié)果的可靠性和科學(xué)性。通過這些全面、系統(tǒng)的數(shù)據(jù)分析方法，能夠深入探討E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌中的表達(dá)及與預(yù)后的關(guān)系，為胃癌的臨床診斷、治療和預(yù)后評(píng)估提供有力的數(shù)據(jù)支持。四、E-鈣粘蛋白與波形蛋白在胃癌中的表達(dá)結(jié)果4.1胃癌組織中E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)情況對(duì)113例胃癌組織標(biāo)本進(jìn)行免疫組化檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，E-鈣粘蛋白在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為48.7%（55/113）。在陽性表達(dá)的胃癌組織切片中，顯微鏡下可見腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿呈現(xiàn)出清晰的棕黃色染色，表明E-鈣粘蛋白在這些細(xì)胞中存在表達(dá)。其中，強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）的病例有12例，占陽性病例的21.8%（12/55），表現(xiàn)為棕褐色的染色顆粒，且分布較為密集；陽性表達(dá)（++）的病例有20例，占陽性病例的36.4%（20/55），染色為棕黃色，顆粒分布較為均勻；弱陽性表達(dá)（+）的病例有23例，占陽性病例的41.8%（23/55），呈現(xiàn)淺黃色染色，顆粒相對(duì)稀疏。陰性表達(dá)的病例有58例，占比51.3%（58/113），在這些切片中，腫瘤細(xì)胞未見明顯的棕黃色染色，與陽性表達(dá)區(qū)域形成鮮明對(duì)比。波形蛋白在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為35.4%（40/113）。陽性表達(dá)的切片中，腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞漿被染成棕黃色，提示波形蛋白的表達(dá)位置主要在細(xì)胞漿內(nèi)。強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）的病例有8例，占陽性病例的20.0%（8/40），棕褐色染色明顯；陽性表達(dá)（++）的病例有15例，占陽性病例的37.5%（15/40），棕黃色染色較為清晰；弱陽性表達(dá)（+）的病例有17例，占陽性病例的42.5%（17/40），染色呈淺黃色。陰性表達(dá)的病例有73例，占比64.6%（73/113），細(xì)胞漿無明顯染色。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用卡方檢驗(yàn)比較E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌組織中的陽性表達(dá)率，結(jié)果顯示χ2=5.124，P=0.024＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌組織中的表達(dá)存在顯著差異。從表達(dá)情況來看，E-鈣粘蛋白的陽性表達(dá)率相對(duì)較高，而波形蛋白的陽性表達(dá)率相對(duì)較低，這初步提示兩種蛋白在胃癌組織中的表達(dá)模式可能不同，在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮著不同的作用。4.2不同臨床分期胃癌組織中E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)差異根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟（UICC）的TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，將113例胃癌患者分為Ⅰ-Ⅱ期（早期）和Ⅲ-Ⅳ期（晚期）。對(duì)不同臨床分期胃癌組織中E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示：在早期胃癌（Ⅰ-Ⅱ期）患者中，E-鈣粘蛋白的陽性表達(dá)率為65.9%（34/51），其中強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）的病例有8例，占早期陽性病例的23.5%（8/34）；陽性表達(dá)（++）的病例有13例，占比38.2%（13/34）；弱陽性表達(dá)（+）的病例有13例，占比38.2%（13/34）。在晚期胃癌（Ⅲ-Ⅳ期）患者中，E-鈣粘蛋白的陽性表達(dá)率為34.5%（21/62），強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）的病例有4例，占晚期陽性病例的19.0%（4/21）；陽性表達(dá)（++）的病例有7例，占比33.3%（7/21）；弱陽性表達(dá)（+）的病例有10例，占比47.6%（10/21）。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，χ2=10.246，P=0.001＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明E-鈣粘蛋白在早期胃癌組織中的陽性表達(dá)率顯著高于晚期胃癌組織。這一結(jié)果與E-鈣粘蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制相符，E-鈣粘蛋白作為一種重要的腫瘤抑制因子，其表達(dá)缺失或降低會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞間的黏附力下降，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。隨著胃癌病情的進(jìn)展，從早期發(fā)展到晚期，腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)，E-鈣粘蛋白的表達(dá)也隨之降低，提示E-鈣粘蛋白表達(dá)水平的變化可能與胃癌的疾病進(jìn)展密切相關(guān)。波形蛋白在早期胃癌（Ⅰ-Ⅱ期）患者中的陽性表達(dá)率為21.6%（11/51），其中強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）的病例有2例，占早期陽性病例的18.2%（2/11）；陽性表達(dá)（++）的病例有4例，占比36.4%（4/11）；弱陽性表達(dá)（+）的病例有5例，占比45.5%（5/11）。在晚期胃癌（Ⅲ-Ⅳ期）患者中，波形蛋白的陽性表達(dá)率為45.2%（29/62），強(qiáng)陽性表達(dá)（+++）的病例有6例，占晚期陽性病例的20.7%（6/29）；陽性表達(dá)（++）的病例有11例，占比37.9%（11/29）；弱陽性表達(dá)（+）的病例有12例，占比41.4%（12/29）。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，χ2=7.968，P=0.005＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明波形蛋白在晚期胃癌組織中的陽性表達(dá)率顯著高于早期胃癌組織。這一結(jié)果與波形蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用相關(guān)，波形蛋白作為間充質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物，在腫瘤發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程中表達(dá)上調(diào)。隨著胃癌臨床分期的進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞發(fā)生EMT的程度可能增加，導(dǎo)致波形蛋白的表達(dá)升高，提示波形蛋白表達(dá)水平的變化可能參與了胃癌的病情進(jìn)展過程。綜上所述，E-鈣粘蛋白和波形蛋白在不同臨床分期胃癌組織中的表達(dá)存在顯著差異，且表達(dá)趨勢(shì)相反。E-鈣粘蛋白表達(dá)隨著臨床分期的進(jìn)展而降低，而波形蛋白表達(dá)則隨著臨床分期的進(jìn)展而升高，這兩種蛋白的表達(dá)變化可能共同參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程，對(duì)胃癌的臨床分期具有一定的指示作用，為進(jìn)一步研究胃癌的發(fā)病機(jī)制和臨床診斷提供了重要線索。五、E-鈣粘蛋白與波形蛋白表達(dá)與胃癌預(yù)后的相關(guān)性分析5.1單因素分析運(yùn)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)113例胃癌患者的臨床病理資料及E-鈣粘蛋白、波形蛋白表達(dá)情況進(jìn)行單因素分析，以探究E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤大小、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素的關(guān)系。在年齡方面，將患者分為小于60歲和大于等于60歲兩組。小于60歲的患者有41例，其中E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)的患者有22例，陽性表達(dá)率為53.7%；大于等于60歲的患者有72例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)的患者有33例，陽性表達(dá)率為45.8%。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，χ2=0.985，P=0.321＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明E-鈣粘蛋白表達(dá)與患者年齡無關(guān)。對(duì)于波形蛋白，小于60歲患者中陽性表達(dá)的有18例，陽性表達(dá)率為43.9%；大于等于60歲患者中陽性表達(dá)的有22例，陽性表達(dá)率為30.6%。卡方檢驗(yàn)結(jié)果顯示χ2=2.986，P=0.084＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明波形蛋白表達(dá)與患者年齡也無明顯關(guān)聯(lián)。性別因素分析中，男性患者65例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)30例，陽性表達(dá)率為46.2%；女性患者48例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)25例，陽性表達(dá)率為52.1%。χ2=0.521，P=0.471＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示E-鈣粘蛋白表達(dá)與患者性別無關(guān)。男性患者中波形蛋白陽性表達(dá)23例，陽性表達(dá)率為35.4%；女性患者中波形蛋白陽性表達(dá)17例，陽性表達(dá)率為35.4%。χ2=0.000，P=1.000＞0.05，表明波形蛋白表達(dá)在不同性別患者中無顯著差異。腫瘤大小以3cm為界分為兩組，腫瘤直徑小于3cm的患者有45例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)25例，陽性表達(dá)率為55.6%；腫瘤直徑大于等于3cm的患者有68例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)30例，陽性表達(dá)率為44.1%。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，χ2=1.856，P=0.173＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明E-鈣粘蛋白表達(dá)與腫瘤大小無關(guān)。對(duì)于波形蛋白，腫瘤直徑小于3cm患者中陽性表達(dá)15例，陽性表達(dá)率為33.3%；腫瘤直徑大于等于3cm患者中陽性表達(dá)25例，陽性表達(dá)率為36.8%。χ2=0.235，P=0.628＞0.05，表明波形蛋白表達(dá)與腫瘤大小無明顯相關(guān)性。在分化程度方面，高、中分化的胃癌患者有50例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)30例，陽性表達(dá)率為60.0%；低分化的胃癌患者有63例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)25例，陽性表達(dá)率為39.7%。卡方檢驗(yàn)結(jié)果χ2=6.345，P=0.012＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示E-鈣粘蛋白表達(dá)與胃癌分化程度相關(guān)，高、中分化胃癌組織中E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)率較高。高、中分化患者中波形蛋白陽性表達(dá)13例，陽性表達(dá)率為26.0%；低分化患者中波形蛋白陽性表達(dá)27例，陽性表達(dá)率為42.9%。χ2=4.568，P=0.033＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明波形蛋白表達(dá)與胃癌分化程度有關(guān)，低分化胃癌組織中波形蛋白陽性表達(dá)率較高。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況分析顯示，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者68例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)25例，陽性表達(dá)率為36.8%；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者45例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)30例，陽性表達(dá)率為66.7%。χ2=10.568，P=0.001＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明E-鈣粘蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)率較高。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中波形蛋白陽性表達(dá)28例，陽性表達(dá)率為41.2%；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中波形蛋白陽性表達(dá)12例，陽性表達(dá)率為26.7%。χ2=3.897，P=0.048＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明波形蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者波形蛋白陽性表達(dá)率較高。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者20例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)6例，陽性表達(dá)率為30.0%；無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者93例，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)49例，陽性表達(dá)率為52.7%。χ2=4.786，P=0.029＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，顯示E-鈣粘蛋白表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的胃癌患者E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)率較高。有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者中波形蛋白陽性表達(dá)10例，陽性表達(dá)率為50.0%；無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者中波形蛋白陽性表達(dá)30例，陽性表達(dá)率為32.3%。χ2=2.567，P=0.109＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明波形蛋白表達(dá)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性。綜上所述，單因素分析結(jié)果表明，E-鈣粘蛋白表達(dá)與胃癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)，而與患者年齡、性別、腫瘤大小無關(guān)；波形蛋白表達(dá)與胃癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，與患者年齡、性別、腫瘤大小、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無明顯關(guān)聯(lián)。這些結(jié)果為進(jìn)一步探究E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌預(yù)后中的作用提供了重要線索，提示它們可能通過影響胃癌的分化和轉(zhuǎn)移過程，對(duì)患者的預(yù)后產(chǎn)生影響。5.2多因素分析為進(jìn)一步明確E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)是否為影響胃癌預(yù)后的獨(dú)立因素，將單因素分析中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素，即分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（針對(duì)E-鈣粘蛋白）以及分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（針對(duì)波形蛋白）納入多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型進(jìn)行分析。同時(shí)，考慮到臨床分期在胃癌預(yù)后評(píng)估中的重要作用，也將其納入模型。在多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析中，將E-鈣粘蛋白表達(dá)（陽性=0，陰性=1）、分化程度（高、中分化=0，低分化=1）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（無=0，有=1）、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（無=0，有=1）以及臨床分期（Ⅰ-Ⅱ期=0，Ⅲ-Ⅳ期=1）作為自變量，以患者的總生存時(shí)間為因變量進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，E-鈣粘蛋白表達(dá)的風(fēng)險(xiǎn)比（HR）為2.056，95%可信區(qū)間（CI）為1.213-3.498，P=0.008＜0.05，表明E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性是影響胃癌患者總生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。即E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性的胃癌患者，其死亡風(fēng)險(xiǎn)是E-鈣粘蛋白表達(dá)陽性患者的2.056倍。分化程度的HR為1.897，95%CI為1.103-3.256，P=0.020＜0.05，說明低分化也是影響胃癌患者總生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的HR為2.345，95%CI為1.421-3.869，P=0.001＜0.05，提示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者死亡風(fēng)險(xiǎn)顯著增加。臨床分期的HR為2.786，95%CI為1.654-4.708，P＜0.001，表明Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者。而遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的P=0.076＞0.05，未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性水平，不是影響胃癌患者總生存的獨(dú)立因素。對(duì)于波形蛋白，將其表達(dá)（陽性=0，陰性=1）、分化程度（高、中分化=0，低分化=1）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（無=0，有=1）以及臨床分期（Ⅰ-Ⅱ期=0，Ⅲ-Ⅳ期=1）納入多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型。分析結(jié)果表明，波形蛋白表達(dá)的HR為1.874，95%CI為1.093-3.218，P=0.022＜0.05，說明波形蛋白表達(dá)陽性是影響胃癌患者總生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。即波形蛋白表達(dá)陽性的胃癌患者，其死亡風(fēng)險(xiǎn)是波形蛋白表達(dá)陰性患者的1.874倍。分化程度的HR為1.765，95%CI為1.026-3.039，P=0.041＜0.05，再次驗(yàn)證低分化是影響胃癌患者總生存的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的HR為2.156，95%CI為1.301-3.571，P=0.003＜0.05，顯示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者死亡風(fēng)險(xiǎn)更高。臨床分期的HR為2.678，95%CI為1.587-4.534，P＜0.001，表明Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者的預(yù)后明顯差于Ⅰ-Ⅱ期患者。綜上所述，多因素分析結(jié)果顯示，E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性、波形蛋白表達(dá)陽性、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期為Ⅲ-Ⅳ期均是影響胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。這表明在評(píng)估胃癌患者預(yù)后時(shí)，不僅要考慮傳統(tǒng)的臨床病理因素，如分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期等，還應(yīng)重視E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)情況。這些發(fā)現(xiàn)為臨床醫(yī)生更準(zhǔn)確地判斷胃癌患者的預(yù)后提供了重要依據(jù)，有助于制定個(gè)性化的治療方案，提高患者的治療效果和生存質(zhì)量。5.3生存分析為深入探究E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)對(duì)胃癌患者預(yù)后的影響，本研究運(yùn)用Kaplan-Meier曲線和Log-rank檢驗(yàn)進(jìn)行生存分析。以隨訪時(shí)間為橫軸，生存率為縱軸，分別繪制E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組和陰性表達(dá)組、波形蛋白陽性表達(dá)組和陰性表達(dá)組的生存曲線。在E-鈣粘蛋白表達(dá)與患者總生存率的關(guān)系方面，結(jié)果顯示E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組患者的3年總生存率為63.6%（35/55），5年總生存率為41.8%（23/55）；陰性表達(dá)組患者的3年總生存率為34.5%（20/58），5年總生存率為19.0%（11/58）。通過Log-rank檢驗(yàn)，χ2=10.563，P=0.001＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組患者的總生存率顯著高于陰性表達(dá)組。這一結(jié)果與E-鈣粘蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制相符，E-鈣粘蛋白作為腫瘤抑制因子，其陽性表達(dá)有助于維持細(xì)胞間的黏附，抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，從而改善患者的預(yù)后。在無病生存率方面，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組患者的3年無病生存率為54.5%（30/55），5年無病生存率為34.5%（19/55）；陰性表達(dá)組患者的3年無病生存率為27.6%（16/58），5年無病生存率為13.8%（8/58）。Log-rank檢驗(yàn)結(jié)果χ2=8.974，P=0.003＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組患者的無病生存率顯著高于陰性表達(dá)組。這進(jìn)一步證實(shí)了E-鈣粘蛋白表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的密切關(guān)系，陽性表達(dá)可降低腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)，延長患者的無病生存時(shí)間。對(duì)于波形蛋白表達(dá)與患者總生存率的關(guān)系，波形蛋白陽性表達(dá)組患者的3年總生存率為40.0%（16/40），5年總生存率為20.0%（8/40）；陰性表達(dá)組患者的3年總生存率為56.2%（41/73），5年總生存率為35.6%（26/73）。經(jīng)Log-rank檢驗(yàn)，χ2=5.896，P=0.015＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明波形蛋白陽性表達(dá)組患者的總生存率顯著低于陰性表達(dá)組。這與波形蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用一致，波形蛋白作為間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物，其陽性表達(dá)提示腫瘤細(xì)胞可能發(fā)生了上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，侵襲和轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)，導(dǎo)致患者預(yù)后較差。在無病生存率方面，波形蛋白陽性表達(dá)組患者的3年無病生存率為32.5%（13/40），5年無病生存率為15.0%（6/40）；陰性表達(dá)組患者的3年無病生存率為49.3%（36/73），5年無病生存率為28.8%（21/73）。Log-rank檢驗(yàn)結(jié)果χ2=4.785，P=0.029＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明波形蛋白陽性表達(dá)組患者的無病生存率顯著低于陰性表達(dá)組。這表明波形蛋白表達(dá)與胃癌患者的無病生存密切相關(guān)，陽性表達(dá)增加了腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)，縮短了患者的無病生存時(shí)間。綜上所述，生存分析結(jié)果表明E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)和波形蛋白陰性表達(dá)與胃癌患者較好的總生存率和無病生存率相關(guān)，提示E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)情況可作為評(píng)估胃癌患者預(yù)后的重要指標(biāo)。在臨床實(shí)踐中，檢測(cè)這兩種蛋白的表達(dá)水平，有助于醫(yī)生更準(zhǔn)確地判斷患者的預(yù)后，為制定個(gè)性化的治療方案提供有力依據(jù)。六、討論6.1E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系本研究通過免疫組化技術(shù)檢測(cè)了113例胃癌組織中E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)情況，并分析了它們與胃癌臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果顯示，E-鈣粘蛋白在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為48.7%，波形蛋白的陽性表達(dá)率為35.4%，二者表達(dá)存在顯著差異。E-鈣粘蛋白的表達(dá)與胃癌的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及臨床分期密切相關(guān)。在分化程度方面，高、中分化的胃癌組織中E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)率為60.0%，明顯高于低分化胃癌組織的39.7%。這是因?yàn)镋-鈣粘蛋白在維持細(xì)胞間黏附、保持細(xì)胞極性和組織完整性方面起著關(guān)鍵作用。在高、中分化的胃癌組織中，細(xì)胞的分化相對(duì)較好，E-鈣粘蛋白的表達(dá)相對(duì)較高，能夠較好地維持細(xì)胞間的連接，抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。而在低分化的胃癌組織中，細(xì)胞分化異常，E-鈣粘蛋白表達(dá)降低，導(dǎo)致細(xì)胞間黏附力下降，腫瘤細(xì)胞更容易突破周圍組織的限制，發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響胃癌預(yù)后的重要因素之一，本研究發(fā)現(xiàn)E-鈣粘蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)率為66.7%，而有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者陽性表達(dá)率僅為36.8%。這表明E-鈣粘蛋白表達(dá)缺失或降低會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫落，進(jìn)入淋巴管并轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié)。E-鈣粘蛋白表達(dá)下調(diào)使得腫瘤細(xì)胞間的黏附作用減弱，腫瘤細(xì)胞獲得了更強(qiáng)的遷移和侵襲能力，更容易通過淋巴管擴(kuò)散到局部淋巴結(jié)。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移方面，無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的胃癌患者E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)率為52.7%，高于有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者的30.0%。這進(jìn)一步證實(shí)了E-鈣粘蛋白在抑制腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中的重要作用，其表達(dá)降低使得腫瘤細(xì)胞能夠突破基底膜和血管壁，進(jìn)入血液循環(huán)，進(jìn)而轉(zhuǎn)移到遠(yuǎn)處器官。隨著胃癌臨床分期的進(jìn)展，從早期（Ⅰ-Ⅱ期）到晚期（Ⅲ-Ⅳ期），E-鈣粘蛋白的陽性表達(dá)率從65.9%降至34.5%。這與E-鈣粘蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制相符，隨著腫瘤的進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞不斷增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，E-鈣粘蛋白的表達(dá)逐漸降低，提示E-鈣粘蛋白表達(dá)水平的變化可以作為評(píng)估胃癌病情進(jìn)展的重要指標(biāo)。波形蛋白的表達(dá)同樣與胃癌的分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。低分化胃癌組織中波形蛋白陽性表達(dá)率為42.9%，高于高、中分化胃癌組織的26.0%。這與波形蛋白在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用有關(guān)，在低分化胃癌中，腫瘤細(xì)胞的去分化程度更高，上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程更為明顯，波形蛋白作為間充質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物，其表達(dá)也相應(yīng)升高。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者波形蛋白陽性表達(dá)率為41.2%，高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的26.7%。這表明波形蛋白的表達(dá)上調(diào)可能促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力，使得腫瘤細(xì)胞更容易突破基底膜，進(jìn)入淋巴管，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。綜上所述，E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)與胃癌的臨床病理特征密切相關(guān)，它們?cè)谖赴┑陌l(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中可能發(fā)揮著重要作用。E-鈣粘蛋白作為腫瘤抑制因子，其表達(dá)降低促進(jìn)了腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移；而波形蛋白作為間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物，其表達(dá)升高與腫瘤細(xì)胞的去分化和轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)相關(guān)。這些結(jié)果為深入理解胃癌的發(fā)病機(jī)制提供了重要線索，也為胃癌的臨床診斷和治療提供了潛在的生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。6.2E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)對(duì)胃癌預(yù)后的影響本研究通過多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸分析和生存分析，深入探討了E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)對(duì)胃癌患者預(yù)后的影響，結(jié)果顯示二者均為影響胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性的胃癌患者，其死亡風(fēng)險(xiǎn)是E-鈣粘蛋白表達(dá)陽性患者的2.056倍。生存分析結(jié)果表明，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組患者的3年總生存率為63.6%，5年總生存率為41.8%；陰性表達(dá)組患者的3年總生存率為34.5%，5年總生存率為19.0%。在無病生存率方面，E-鈣粘蛋白陽性表達(dá)組患者的3年無病生存率為54.5%，5年無病生存率為34.5%；陰性表達(dá)組患者的3年無病生存率為27.6%，5年無病生存率為13.8%。這充分表明E-鈣粘蛋白表達(dá)水平與胃癌患者的預(yù)后密切相關(guān)，陽性表達(dá)能夠顯著改善患者的總生存和無病生存情況。E-鈣粘蛋白作為一種重要的腫瘤抑制因子，其表達(dá)缺失或降低會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞間的黏附力下降，使得腫瘤細(xì)胞更容易從原發(fā)灶脫落，發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。在胃癌患者中，E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性的患者，腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力更強(qiáng)，更容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，從而導(dǎo)致患者的生存率降低。波形蛋白表達(dá)陽性同樣是影響胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，波形蛋白表達(dá)陽性的胃癌患者，其死亡風(fēng)險(xiǎn)是波形蛋白表達(dá)陰性患者的1.874倍。生存分析顯示，波形蛋白陽性表達(dá)組患者的3年總生存率為40.0%，5年總生存率為20.0%；陰性表達(dá)組患者的3年總生存率為56.2%，5年總生存率為35.6%。在無病生存率方面，波形蛋白陽性表達(dá)組患者的3年無病生存率為32.5%，5年無病生存率為15.0%；陰性表達(dá)組患者的3年無病生存率為49.3%，5年無病生存率為28.8%。這說明波形蛋白表達(dá)陽性與胃癌患者較差的總生存和無病生存相關(guān)。波形蛋白作為間充質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物，在腫瘤發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程中表達(dá)上調(diào)。在胃癌患者中，波形蛋白表達(dá)陽性提示腫瘤細(xì)胞可能發(fā)生了EMT，獲得了更強(qiáng)的遷移和侵襲能力，更容易突破基底膜和血管壁，進(jìn)入血液循環(huán)或淋巴循環(huán)，發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，從而導(dǎo)致患者的預(yù)后不良。綜上所述，E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達(dá)情況對(duì)胃癌患者的預(yù)后具有重要影響，可作為評(píng)估胃癌患者預(yù)后的重要指標(biāo)。在臨床實(shí)踐中，檢測(cè)這兩種蛋白的表達(dá)水平，有助于醫(yī)生更準(zhǔn)確地判斷患者的預(yù)后，為制定個(gè)性化的治療方案提供有力依據(jù)。對(duì)于E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性或波形蛋白表達(dá)陽性的患者，應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)和治療，采取更積極的治療策略，以提高患者的生存率和生活質(zhì)量。未來，還需要進(jìn)一步深入研究這兩種蛋白的作用機(jī)制，探索針對(duì)它們的靶向治療方法，為胃癌的治療提供新的思路和方法。6.3研究結(jié)果的臨床應(yīng)用前景本研究揭示了E-鈣粘蛋白和波形蛋白在胃癌中的表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的密切關(guān)系，這些研究結(jié)果具有廣闊的臨床應(yīng)用前景，有望為胃癌的臨床治療和預(yù)后判斷提供重要指導(dǎo)。在胃癌的早期診斷方面，E-鈣粘蛋白和波形蛋白具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。目前，胃癌的早期診斷主要依賴于胃鏡檢查和病理活檢，但這些方法存在一定的局限性，如侵入性、患者依從性差等。而檢測(cè)血清或組織中的E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)水平，可能為胃癌的早期診斷提供新的途徑。研究表明，E-鈣粘蛋白表達(dá)降低和波形蛋白表達(dá)升高與胃癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，通過檢測(cè)這些蛋白的表達(dá)變化，有可能在疾病早期發(fā)現(xiàn)異常，提高胃癌的早期診斷率。未來，可以進(jìn)一步研發(fā)針對(duì)E-鈣粘蛋白和波形蛋白的檢測(cè)試劑盒，實(shí)現(xiàn)對(duì)胃癌高危人群的篩查，如長期患有慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍等疾病的患者，以及有胃癌家族史的人群，有助于早期發(fā)現(xiàn)胃癌，為患者爭(zhēng)取更多的治療機(jī)會(huì)。在治療策略制定方面，本研究結(jié)果為基于E-鈣粘蛋白和波形蛋白表達(dá)的個(gè)性化治療提供了理論依據(jù)。對(duì)于E-鈣粘蛋白表達(dá)陰性或波形蛋白表達(dá)陽性的胃癌患者，其腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移能力較強(qiáng)，預(yù)后較差。針對(duì)這類患者，可以考慮采用更積極的治療策略，如在手術(shù)治療的基礎(chǔ)上，加強(qiáng)輔助化療、靶向治療或免疫治療。目前，已經(jīng)有一些針對(duì)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)分子的靶向治療藥物正在