ICS65.020.01CCSB05DB23黑龍江省地方標準DB23/T3025—2021唐棣組培快繁技術(shù)規(guī)程黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB23/T3025—2021前言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由黑龍江省林業(yè)和草原局提出。本文件起草單位：中國科學院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所農(nóng)業(yè)技術(shù)中心、哈爾濱集智農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司、黑龍江省森林草原防火預(yù)警監(jiān)測中心、黑龍江省林業(yè)科學研究院、黑龍江省森林植物園、大興安嶺林下經(jīng)濟科技開發(fā)有限公司。本文件主要起草人：趙恒田、臧丹丹、趙容健、宋維瑄、曲虹、劉淑華、馮雪婷、王寧、李金霞、周玉遷、馬德順。ⅠDB23/T3025—2021唐棣組培快繁技術(shù)規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了唐棣（Amelanchiersinica‘Xingye’）組培快繁的術(shù)語和定義、組織培養(yǎng)環(huán)境、培養(yǎng)基配制、外植體制備、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗、移栽及生產(chǎn)檔案。本文件適用于唐棣組培快繁。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義組織培養(yǎng)環(huán)境應(yīng)符合LY/T1882的規(guī)定。5培養(yǎng)基配制a)初代培養(yǎng)基：MS＋1.0mg/LIBA＋1.5mg/L6-BA＋30g/L蔗糖＋固化劑，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制pH5.6～pH5.8；b)繼代芽分化增殖培養(yǎng)基：MS＋1.0mg/LIBA＋2.5mg/L6-BA＋2.0mg/LGA3＋30g/L蔗糖＋固化劑，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制pH5.6～pH5.8；c)生根培養(yǎng)基：MS＋0.1mg/LNAA＋0.2g/L活性炭+30g/L蔗糖＋固化劑，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制pH5.6～pH5.8；培養(yǎng)基配制后10h內(nèi)完成滅菌，采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105MPa、溫度121℃條件下滅菌20min～30min。1DB23/T3025—2021培養(yǎng)基應(yīng)保存于潔凈環(huán)境中，注意避光和防塵。滅菌后的培養(yǎng)基在常溫條件可保存7d，2℃～4℃條件下可保存14d。6外植體制備6.1外植體選擇選擇生長發(fā)育良好、無病蟲害、無機械損傷的植株作為采樣母株，剪取帶芽的莖段作為外植體，采集時間以晴天上午為宜。6.2外植體消毒將外植體流水沖洗1h～2h。在超凈工作臺上用70%酒精浸泡消毒8s～15s。倒去酒精后，用無菌水沖洗外植體3次～4次。用0.1%HgCl2浸泡5min～8min。無菌水沖洗4次～6次。用無菌濾紙吸干外植體表面的水分。7誘導(dǎo)培養(yǎng)將消毒后的外植體剪成1.5cm～2cm帶有1個～2個芽的莖段，將剪好的莖段芽尖朝上插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，深度0.5cm，置于光下培養(yǎng)20d～25d，光照周期10h/d～12h/d、光照強度1500Lux～2000Lux，培養(yǎng)溫度22℃～28℃，空氣相對濕度70%～80%。8增殖培養(yǎng)分化的芽接入增殖培養(yǎng)基中，光照培養(yǎng)30d～35d，光照周期10h/d～12h/d、光照強度3000Lux～5000Lux，培養(yǎng)溫度22℃～28℃，空氣相對濕度70%～80%。待形成芽叢，分割新長出的不定芽，可按需求重復(fù)繼代。選取培養(yǎng)瓶中長度1.5cm～3cm生長健壯的芽接種至生根培養(yǎng)基中，光照培養(yǎng)60d～90d，光照周期10h/d～12h/d、光照強度3000Lux～5000Lux，培養(yǎng)溫度22℃～28℃，空氣相對濕度70%～80%。組培苗高度3cm～4cm，基部長出≥3條、長2cm～3cm的新根時，進行煉苗。10.2封瓶煉苗2DB23/T3025—2021將黑壤土、草碳土和細河沙過細篩，以2：1：1的體積比混勻后，裝入規(guī)格為35cm×50cm×7cm的育苗盤中。澆透水。將苗盤浸入0.5g/L的多菌靈溶液中消毒。11.2移栽取出組培苗，用清水洗凈基部培養(yǎng)基，在散射光下移栽至育苗盤中。11.3移栽后管理移栽初期，保持空氣濕度≥80%，適時澆水，保持基質(zhì)濕潤，溫度控制在18℃～25