第二章病毒第二章病毒非細胞生物（真）病毒：至少含核酸亞病毒類病毒擬病毒

朊病毒第二章病毒A、沒有細胞構造,僅是核酸和蛋白質。B、形態極其微小,必須在電鏡下才能觀察。C、一種病毒只含一種核酸,DNA/RNA。D、無產酶系統,無蛋白合成系統，在宿主活細胞內營專性寄生。E、抗生素不敏感,但對干擾素敏感。

病毒的一般特征第二章病毒第一節病毒的形態結構和理化特性一、病毒的大小及形態二、病毒的構造、化學成分及其功能三、病毒結構的對稱性

第二章病毒一、病毒的大小及形態（一）、病毒的大小病毒粒子：發育成熟的病毒個體統稱為病毒粒子病毒計量單位：納米（nm,1nm=1/1000um)第二章病毒病毒大小牛痘苗病毒傳染性濃泡皮炎病毒腮腺炎病毒T偶數病毒皰疹病毒大蚊病毒流感病毒煙草花葉病毒腺病毒多瘤病毒脊髓灰質炎病毒1微米第二章病毒

（二）、病毒的形態

病毒粒子外形有下列五種：

1.磚形：痘病毒

2.彈狀：狂犬病病毒,水皰性口炎病毒等

3.球形：腺病毒,皰疹病毒等

4.蝌蚪形：大部分噬菌體

5.桿狀和絲形：煙草花葉病毒等第二章病毒1.磚形2.彈狀3.球形4.蝌蚪形5.桿形第二章病毒二、病毒的結構、化學成分及其

功能第二章病毒（一）病毒的核心

單股或雙股的核酸：即DNA或RNA，其包含全部遺傳信息，主導病毒的生命活動。（二）病毒的外殼

病毒的外殼為衣殼：包圍在病毒核心外面的一層蛋白質結構，由許多蛋白亞單位(殼粒)組成。保護核酸免受外界環境因素破壞，對宿主細胞有特別親和力，是病毒的特異性抗原。第二章病毒（三）病毒的囊膜

病毒在衣殼外面有雙層膜(蛋白質多糖脂類)，主要來自于宿主細胞的細胞膜或核膜。有維護病毒顆粒結構，保護病毒核衣殼的作用。（四）病毒的化學組成

核酸蛋白質多糖脂類第二章病毒三、病毒結構的對稱性螺旋對稱立體對稱復合對稱RNAorDNAProteinCoat(Capsomers)Lipidenvelope第二章病毒螺旋對稱的代表-煙草花葉病毒

(tobaomosaicvirus,TMV)第二章病毒二十面體對稱的代表-腺病毒(Adenovirus)衣殼粒總數N=10(n-1)2+2n為每條邊的衣殼粒數第二章病毒刺突tailpins復合對稱的代表-T偶數噬菌體95nm95nm頭部head領環neck尾鞘tail（24環）尾絲(tailfibers)65nm第二章病毒四、包涵體

在某些病毒感染的宿主細胞的胞漿或胞核內，出現的光鏡下可見的大小，形態和數量不等的個體。第二章病毒組成:病毒的聚集體(腺病毒的核內包涵體)

病毒感染細胞后的反應產物;出現部位:不同病毒不一樣,痘病毒見于皮膚的棘層細胞中,而新城疫病毒則多見于支氣管上皮細胞中;特征:具有一定的種屬性.如皰疹病毒形成核內包涵體,痘病毒形成胞漿包涵體,麻疹病毒在核內和胞漿內都出現包涵體.作用:可用于病毒的快速鑒別和某些疾病的輔助診斷第二章病毒五、病毒的物理性狀（一）濾過性

“過濾性病毒”常用濾器：賽氏濾器,玻璃濾器,微孔濾膜濾器.（二）浮密度

由于病毒粒子太小，不能直接進行其密度的測定，而將提純的病毒粒子懸浮于某液體中（氯化銫、蔗糖溶液等）進行間接測定，稱為浮密度。第二章病毒六、理化因素對病毒的作用（一）溫度

保存病毒方法：

1.快速低溫冷凍

2.冷凍干燥（二）pH值

大多數病毒在pH為6－8保存，pH為5.0以下和9.0以上，多數病毒會被滅活。第二章病毒（三）輻射γ射線和X射線以及非電離輻射紫外線，都對病毒呈現滅活作用（四）超聲波和光動力作用（五）脂溶劑乙醚、氯仿、丙酮對有囊膜病毒有滅活作用（六）甘油和抗生素第二章病毒七、病毒的血凝性與紅細胞吸附現象某些病毒囊膜上有糖蛋白血凝素能與多種動物的紅細胞表面的糖蛋白受體結合，發生紅細胞凝集現象。（新城疫,禽流感；腺病毒）紅細胞凝集現象可以被特異性抗體抑制，稱為紅細胞凝集抑制試驗。利用此法以鑒定病毒和檢查動物體內抗體滴度，以診斷某些傳染病。第二章病毒八噬菌體噬菌體是侵襲細菌、放線菌、真菌和螺旋體等的病毒。噬菌體的形態有蝌蚪形、微球形、纖線形等三種形態。噬菌體的化學成分主要是核酸和蛋白質。噬菌體具有抗原性，能刺激機體產生中和抗體。噬菌體對理化因素的抵抗力較強，一般在70℃下30min仍不失去活性。耐低溫和冰凍,對紫外線和X射線敏感.第二章病毒

采用雙層平板法:將少量噬菌體與大量宿主細胞混合后，將此混合液與45℃左右的瓊脂培養基(1%)在培養皿中充分混勻，然后倒入含底層瓊脂培養基(2%)的平板培養，經數小時至10余小時后，在平板表面布滿宿主細胞的菌苔上，可以用肉眼看到一個個透亮不長菌的小圓斑。即噬菌斑。每一個噬菌斑一般由一個噬菌體粒子形成的，噬菌斑的形成可用于檢出、分離、純化噬菌體和進行噬菌體的計數。噬菌斑第二章病毒噬菌斑(plaque)下層培養基雙層培養基敏感菌+上層培養基噬菌體稀釋液培養噬菌斑噬菌斑敏感菌菌苔第二章病毒空斑和蝕斑

在單層細胞培養上時,由于病毒感染細胞裂解,出現的與噬菌斑類似的空斑,稱為蝕斑.是病毒感染細胞形成的局限性病灶。第二章病毒第二節病毒的增殖一、病毒的增殖特點及方式隱蔽期增殖期

無囊膜病毒:抑制宿主細胞的增值，裂解釋放有囊膜病毒：和宿主細胞共同增值，“出牙”釋放腫瘤病毒：整合到宿主細胞基因組中，可傳到下一代二、增值方式：自我復制第二章病毒

三、病毒增殖的一般過程（一）吸附期吸附的機理：尾絲尖端與受體發生共價結合。第二章病毒吸附的類型:

1靜電吸附:可逆,非特異的.在pH7時,病毒與宿主細胞均帶負電荷,不易接觸,但Ca2+和Mg2+等陽離子可降低負電荷,促進靜電吸附;2特異性吸附:病毒與易感細胞上的特異性受體相結合.第二章病毒影響因素：噬菌體數量；陽離子；輔助因子；溫度。第二章病毒（二）進入期收縮的尾鞘（12環）第二章病毒進入方式:

1膜融合：病毒囊膜與宿主細胞膜融合,將其內部組分釋放到細胞質中,如新城疫病毒等副粘病毒;

2胞吞作用：多數病毒按此方式侵入;3完整病毒穿過細胞膜的移位方式，如腺病毒.第二章病毒（三）脫殼期

大部分病毒在侵入時就已在宿主細胞表面完成；有的則在宿主細胞內的溶酶體酶的作用下先部分脫殼，然后啟動病毒表達出脫殼酶,再完全脫殼。（四）生物合成生物合成特點：基因表達有先有后（基因表達的順序為：早期表達；次早期表達；核酸復制；晚期表達）第二章病毒雙鏈DNA的復制:(±)DNA→(±)DNA單鏈DNA的復制:

+DNA→-DNA→±DNA→+DNA雙鏈RNA的復制:

±RNA→+RNA→-RNA→±RNA

+RNA復制:

+RNA→-RNA→±RNA→+RNA-RNA復制:

-RNA→+RNA(mRNA)→Pr(RNA復制酶)逆轉錄病毒單鏈RNA的復制:

+RNA→(-)DNA→(±)DNA→+RNA腫瘤病毒

病毒核酸的復制第二章病毒病毒核酸復制病毒核酸的復制病毒核酸鏈接入寄主核酸鏈第二章病毒病毒核酸的轉錄含±DNA的病毒:±DNA→mRNA+DNA病毒:+DNA→±DNA→mRNA含±RNA病毒:±RNA→mRNA含+RNA病毒:+RNA→±RNA→mRNA含-RNA病毒:-RNA→mRNA第二章病毒最后:大腸桿菌死亡并破裂，釋放出里面的病毒，新一代病毒開始新的生命旅程

（五）病毒的裝配與釋放1、一次性釋放：無囊膜病毒裂解宿主細胞的釋放。2、逐個釋放：有囊膜病毒以出芽方式，獲得核膜或細胞膜，形成囊膜及刺突。第二章病毒四.不完全復制和缺損病毒不完全復制:可以合成部分或全部病毒成分,但不能正常裝配.缺損病毒:不能形成成熟病毒粒子的病毒.五.干擾現象和干擾素（一）干擾現象當兩種病毒感染同一細胞，甲種病毒能抑制乙病毒的增殖。本質:1由干擾素引起;2均需膜上的同一受體;3復制時,需動用細胞的同種功能.

第二章病毒（二）干擾素的生物學特性

干擾素是由干擾素誘導劑作用于活細胞后，由細胞產生的一種低分子糖蛋白，能抑制多種病毒的生長和繁殖。干擾素誘導劑:不論天然還是合成,凡是能誘導細胞產生干擾素的物質.第二章病毒1干擾素的生物學活性

(1)抑制病毒復制；抗病毒作用無特異性，是廣譜抗病毒物質,，但其保護作用具有種屬特異性.(2)抑制癌細胞分裂;(3)活化單核巨噬細胞。

2作用機制

本身對病毒無滅活作用,主要作用于正常細胞使其產生一種抗病毒蛋白,這種蛋白可干擾病毒mRNA的翻譯,從而抑制了新病毒的合成.3應用第二章病毒第四節病毒的微生物學檢查一、病料的收集和送檢從病畜體內存在病毒最多的器官或組織采取病料。注意采集病料的時間，以癥狀剛出現是為佳。檢查抗體時，則采取一個病畜的初期和恢復期的血清，以了解抗體滴度的變化。保存與運送，由于病毒對外界的因素特別是很敏感，因此必須放在保護液中，并在低溫下保存或寄送。收集病料必須無菌操作，如有污染，可用通過濾器、加抗生素或高速離心法除去細菌，方可使用。第二章病毒二、病毒的分離培養（一）動物的接種法

可用該動物的敏感病毒接種，如懷疑偽狂犬病料接種兔子；口蹄疫病料接種乳鼠；豬瘟病毒的豬兔交互免疫實驗等。（二）雞胚的接種法

目前常用雞胚分離的病毒有正黏病毒、副黏病毒、痘病毒等。常用的途徑有絨毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊等。（三）組織培養法

原指動物或植物組織小塊的體外培養。此名稱現已用以泛指體外的組織、器官和細胞培養。組織培養是分離和培養病毒以及進行病毒學試驗研究的簡便而有效的工具和手段。第二章病毒三、病毒的鑒定

可通過以下方法確證病毒的存在：形態學觀察檢查包涵體細胞病變檢測某病毒抗原或確證特異性抗體的存在第二章病毒四、病毒定量的幾個概念1病毒感染單位(IU)

能夠引起宿主或宿主細胞發生一定特異性反應的病毒最小劑量2病毒的效價或毒力

指單位體積病毒懸液的感染單位數目3半數致死劑量(LD50)4半數感染劑量(ID50)5半數組織培養感染劑量(TCID50)第二章病毒第五節亞病毒類病毒衛星病毒衛星RNA朊病毒第二章病毒類病毒由單鏈共價閉合環狀RNA組成,沒有外殼蛋白和脂質外膜能自我復制,不需要輔助病毒,但不能編碼蛋白質迄今所知的類病毒僅存在于高等植物中,核酸都是RNA易被RNA酶破壞,能耐受50-60度,不失去侵染性傳染性強,但大多呈隱性感染第二章病毒衛星病毒

是類基因組缺失，需要依賴輔助病毒，才能復制和表達，完成增殖的病毒。如丁型肝炎病毒必須利用乙型肝炎病毒的包膜蛋白才能完成復制周期.衛星RNA

是類寄生于輔助病毒殼體內，雖與輔助病毒基因組無同源性，但必須依賴于輔助病毒才能復制RNA分子片段.第二章病毒朊病毒

是類具有侵染性并能在宿主細胞內復制的小分子無免疫性疏水蛋白質,是瘋牛病,人的庫魯病和羊搔癢病的病原.

所有能使蛋白質變性的物質均能使該病原失活.第二章病毒第六節病毒的