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文檔簡介

ICSC T/CACM1326.33—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofDesmoschinensis 中華中醫藥學會T/CACMT/CACM1326.33—目前 活 附錄A(規范性附錄)試劑的配制和保存方 前——T/CACM1326.1——T/CACM1326.2——T/CACM1326.3——T/CACM1326.4——T/CACM1326.5——T/CACM1326.6——T/CACM1326.7——T/CACM1326.8——T/CACM1326.9——T/CACM1326.10GB/T1.1-2009《標準化工作導則第1部分:標準的結構和編寫》給出的規則起草。T/CACMT/CACM1326.33—本標準規定了假鷹爪(Desmoschinensis)種子超低溫保存過程中的術語和定義、種子的選擇、GB/T3543.6假鷹爪Desmos為番荔枝科(Annonaceae)假鷹爪屬(DesmosLour.)灌木,在我國南部山丘上常見,花美麗,假鷹爪果實Desmoschinensis內有種子1~7顆。假鷹爪種子Desmoschinensisseedof℃月4(2)法測定假鷹爪種子生活力。待測種子在30℃~35℃溫水中浸種2h,隨后取吸脹種子20粒,整齊地埋于備好的1.5%BTB瓊脂凝膠中,注意要將胚埋入凝膠中。將培養皿置于35℃溫箱中26hBTBAA.1≥50??

×100%?????????????????(1)用尼龍網袋包裹假鷹爪種子,置于盛有變色硅膠的干燥器內,硅膠與種子的體積比為60:1,室溫條件下干燥處理0h~22h,在干燥過程可定期測定種子含水量,將種子含水量由15%~20%降至14%~15%。

??1?

×100%……….900假鷹爪種子超低溫保存的冷凍方式為玻璃化冷凍法,即將裝有種子的5mL(每管45種子)置于裝載液(LS)中并于25℃處理種子20min,再用玻璃化保護溶液(PVS2)冰浴處理種子30min,換上預冷新鮮的PVS2后迅速投入液氮中進行超低溫保存。LSPVS2AA.2A.324h2402min洗滌液(DS)15min3DSAA.4取出1管解凍后的種子,按照5.1活力檢測方法,進行超低溫保存后的初始生活力檢測。當種子生活力≥20%時視為保存成功。將剩下1管解凍后的假鷹爪種子,播種到帶有無菌濾紙的帶蓋發芽盒中,溫度25℃~30℃,濕度70%~85%條件下培養。附錄BTB精密稱取BTB0.1g,溶解于煮沸過的100mL純水中,然后用濾紙去殘渣。濾液若呈黃色,可1.5BTB0.1BTB40mL0.5g加入杯中,加熱并不斷攪拌使之完全溶解。待溶液稍稍冷卻即可趁熱倒入9cm培養皿中,使之成一13.7g11.9mLMSpH5.8100mL,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。23.8mL13.6mL13.6mL13.7gMS中,調pH至5.8后,定容至100mL,高溫高壓滅菌,4℃冷藏。精密稱取蔗糖41.1gMS溶液中,調pH至5.8后,定容至100mL,高溫高壓滅菌,4℃LiPing-tao,MichaelG.Gilbert.Annonaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.2011.19:681-682.中國科學院中國植

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