分子生物實(shí)驗(yàn)試題及答案

單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.提取DNA常用的試劑是（）A.乙醇B.氯仿C.酚D.以上都是2.PCR反應(yīng)中，延伸溫度一般為（）A.55℃B.72℃C.94℃D.4℃3.以下哪種酶用于連接DNA片段（）A.限制性內(nèi)切酶B.Taq酶C.DNA連接酶D.反轉(zhuǎn)錄酶4.核酸電泳中常用的染色劑是（）A.溴酚藍(lán)B.二甲苯青C.溴化乙錠D.考馬斯亮藍(lán)5.構(gòu)建cDNA文庫需要（）A.DNA聚合酶B.反轉(zhuǎn)錄酶C.RNA聚合酶D.內(nèi)切酶6.質(zhì)粒提取中，用于裂解細(xì)菌細(xì)胞壁的是（）A.SDSB.EDTAC.TrisD.葡萄糖7.基因表達(dá)分析常用的技術(shù)是（）A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.雙向電泳8.以下哪種堿基不是RNA所特有的（）A.腺嘌呤B.尿嘧啶C.鳥嘌呤D.胸腺嘧啶9.核酸定量常用的儀器是（）A.分光光度計(jì)B.離心機(jī)C.移液器D.PCR儀10.大腸桿菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中，常用的轉(zhuǎn)化方法是（）A.電轉(zhuǎn)化B.熱激轉(zhuǎn)化C.化學(xué)轉(zhuǎn)化D.以上都不對多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.以下屬于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用儀器的有（）A.離心機(jī)B.電泳儀C.培養(yǎng)箱D.顯微鏡2.影響PCR反應(yīng)的因素有（）A.引物設(shè)計(jì)B.模板質(zhì)量C.反應(yīng)溫度D.酶濃度3.提取RNA時需要注意（）A.防止RNA酶污染B.低溫操作C.用合適的緩沖液D.避免光照4.以下哪些是常用的限制性內(nèi)切酶（）A.EcoRIB.BamHIC.HindIIID.TaqI5.分子克隆實(shí)驗(yàn)中常用的載體有（）A.質(zhì)粒B.噬菌體C.病毒載體D.人工染色體6.核酸電泳緩沖液有（）A.TAEB.TBEC.Tris-HClD.PBS7.基因敲除技術(shù)包括（）A.CRISPR/Cas9B.RNAiC.ZFNsD.TALENs8.蛋白質(zhì)與核酸相互作用研究方法有（）A.EMSAB.ChIPC.Yeasttwo-hybridD.GSTpull-down9.用于核酸測序的技術(shù)有（）A.Sanger測序B.二代測序C.三代測序D.熒光定量測序10.表達(dá)重組蛋白的系統(tǒng)有（）A.大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)B.酵母表達(dá)系統(tǒng)C.昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)D.哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)判斷題（每題2分，共10題）1.所有細(xì)胞都含有相同的DNA。（）2.PCR反應(yīng)中引物濃度越高越好。（）3.酚-氯仿抽提可去除蛋白質(zhì)雜質(zhì)。（）4.反轉(zhuǎn)錄是從RNA合成DNA的過程。（）5.限制性內(nèi)切酶能識別特定的DNA序列并切割。（）6.Southernblot是用于檢測RNA的技術(shù)。（）7.質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外的雙鏈環(huán)狀DNA。（）8.離心時樣品無需平衡。（）9.熒光定量PCR可對核酸進(jìn)行絕對定量。（）10.基因編輯技術(shù)可以隨意改變生物體基因。（）簡答題（每題5分，共4題）1.簡述提取基因組DNA的基本步驟。答：首先破碎細(xì)胞釋放核酸，然后用酚-氯仿抽提去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，接著用乙醇沉淀DNA，最后用合適緩沖液溶解DNA。2.解釋PCR原理。答：PCR是利用DNA聚合酶等在體外對特定DNA片段進(jìn)行快速擴(kuò)增。包括高溫變性使DNA雙鏈解開，低溫退火讓引物與模板結(jié)合，中溫延伸由DNA聚合酶合成新的DNA鏈，經(jīng)多輪循環(huán)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增。3.說明核酸電泳的目的。答：核酸電泳目的是分離不同大小、不同構(gòu)象的核酸分子，可根據(jù)條帶位置和亮度判斷核酸完整性、純度以及含量等，常用于核酸質(zhì)量檢測和分析。4.簡述基因克隆的一般流程。答：先獲取目的基因，再選擇合適載體，將目的基因與載體連接構(gòu)建重組體，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞，最后篩選和鑒定含有重組體的陽性克隆。討論題（每題5分，共4題）1.討論在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中如何保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。答：要規(guī)范操作，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行。確保儀器準(zhǔn)確、試劑有效且無污染。設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)以驗(yàn)證結(jié)果，同時注意實(shí)驗(yàn)環(huán)境穩(wěn)定，減少誤差來源。2.談?wù)劵蚓庉嫾夹g(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用前景和潛在風(fēng)險。答：應(yīng)用前景包括治療遺傳疾病、癌癥等疑難病癥。潛在風(fēng)險有脫靶效應(yīng)導(dǎo)致非預(yù)期基因突變，可能引發(fā)新疾病；還涉及倫理問題，如對人類生殖細(xì)胞編輯帶來的倫理爭議。3.分析不同蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)。答：大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)點(diǎn)是操作簡單、生長快、成本低，但可能無正確折疊和修飾。酵母表達(dá)系統(tǒng)能進(jìn)行一定修飾且培養(yǎng)簡單，產(chǎn)量有限。昆蟲細(xì)胞和哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜修飾，但操作復(fù)雜、成本高、產(chǎn)量低。4.如何選擇合適的核酸提取方法？答：依據(jù)樣本類型、核酸種類及后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求選擇。如動物組織、植物組織提取方法有別；提取DNA和RNA方法不同；若后續(xù)用于PCR等，對純度要求高，需選擇能有效去除雜質(zhì)的方法。答案單項(xiàng)選擇題1.D2.B3.C4.C5.B6.A7.B8.D9.A10.B多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABCD3