課時規范練56微生物的培養技術及其應用(選擇題每小題3分)必備知識基礎練考點一微生物的基本培養技術1.(2025·湖南長沙開學模擬)下表是一種培養基的配方,關于此培養基,下列敘述錯誤的是()牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水1g2g1g2g200mLA.該培養基是固體培養基B.NaCl既能提供無機鹽,又能調節滲透壓C.該培養基只能提供4類營養物質D.該培養基能夠培養多種微生物2.消毒、滅菌是生物學實驗中常見的操作。下列有關說法正確的是()A.用接種環接種時,取菌種前和接種后都需將接種環進行干熱滅菌處理B.植物組織培養時,外植體分別用酒精和次氯酸鈉溶液處理30min即可C.培養微生物時獲得純微生物培養物的關鍵是防止雜菌污染D.培養乳酸菌時,需在培養基中添加維生素,配制好的培養基需先滅菌后調節pH3.(2025·山東德州開學模擬)中國科學家采集了某海域1146m深海冷泉附近沉積物樣品,經過28℃厭氧培養一段時間后,研究人員成功分離出含有擬桿菌的混合物,并進一步研究其生物學特性。下列說法錯誤的是()A.此環境下生存的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫的特性B.有些微生物可能只有利用深海冷泉附近特有物質才能生存C.平板劃線法和稀釋涂布平板法都能對擬桿菌進行分離和計數D.篩選擬桿菌的氣體條件同樣適合制作傳統泡菜考點二微生物的選擇培養和計數4.(2025·河北邢臺開學模擬)物質M是一種難以降解的含氮有機物,其在培養基中表現為不透明。某研究小組欲從土壤中分離出能降解M的微生物,取土樣并進行一系列稀釋后,取稀釋液滴加到平板A上開始涂布,然后置于恒溫箱中培養24h,發現平板上的部分菌落周圍出現透明圈,部分菌落周圍未出現透明圈。下列有關分析錯誤的是()A.平板A應以物質M為唯一有機氮源,屬于選擇培養基B.平板A上的菌落數過多可能是取樣前未將稀釋液搖勻所致C.平板A上出現了無透明圈的菌落是因為培養基被污染了D.透明圈最大的菌落,其分解M的能力未必最強5.(2025·安徽開學模擬)為保障公共飲用水的安全,工作人員常用如圖所示“濾膜法”對飲用水進行檢測。大腸桿菌作為指示菌之一,國家標準為每升飲用水中大腸桿菌數量不能超過3個。下列相關敘述錯誤的是()A.圖中所示培養基上長出的所有大腸桿菌屬于一個種群B.濾膜法檢測1L飲用水中的大腸桿菌數量要進行多次抽樣檢測C.用濾膜法檢測被動物糞便嚴重污染的水體結果可能比實際值偏小D.濾膜轉移到培養基之后,濾膜上的大腸桿菌數量呈“J”形增長6.(2025·湖南永州一模)野生型大腸桿菌能夠在基本培養基上生長,研究人員經誘變獲得了兩種營養缺陷型的突變體M、N,且單獨培養時均不能在基本培養基上生長。若將兩種突變體在完全培養基(液體)中混合培養一段時間后,再采用稀釋涂布平板法接種在基本培養基平板上,培養后長出了大腸桿菌菌落。下列有關敘述正確的是()A.野生型大腸桿菌誘變時發生了基因突變或染色體變異B.突變體M和N能相互為對方提供所缺的營養物質C.在混合培養期間突變體M和N發生了遺傳物質的交流D.混合培養獲得的大腸桿菌都能在基本培養基中生長關鍵能力提升練7.(2025·安徽開學模擬)合理使用消毒液有助于減少傳染病的傳播。某同學比較了3款消毒液A、B、C殺滅大腸桿菌的效果,結果如圖所示。下列敘述錯誤的是()A.大腸桿菌在伊紅—亞甲藍培養基上生長的菌落呈藍色B.據該實驗結果可知,殺菌效果最好的消毒液是AC.可采用顯微鏡直接計數法或菌落計數法測定樣品的大腸桿菌數量D.實驗中用到的吸管、培養皿和金屬用具可采用干熱滅菌法8.(不定項)(2024·黑吉遼卷)某些香蕉植株組織中存在的內生菌可防治香蕉枯萎病,其篩選流程及抗性檢測如下圖所示。下列操作正確的是()A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內,從感病植株上采集樣品B.將采集的樣品充分消毒后,用蒸餾水沖洗,收集沖洗液進行無菌檢測C.將無菌檢測合格的樣品研磨,經稀釋涂布平板法分離得到內生菌的單菌落D.判斷內生菌的抗性效果需比較有無接種內生菌的平板上的病原菌菌斑大小9.(9分)(2025·八省聯考云南卷)普洱茶的主要活性成分——茶褐素,具有降脂減肥、抗氧化和提高免疫力等功能,在功能食品領域具有廣闊的應用前景。研究人員在制作普洱熟茶的固體發酵過程中分離得到優勢菌塔賓曲霉,其可在綠茶浸提液(富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白質和咖啡堿等)中生長繁殖,之后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度如圖。回答下列問題。(1)綠茶浸提液中的氨基酸和蛋白質可為塔賓曲霉生長提供的營養物質為。

(2)塔賓曲霉為好氧微生物,用綠茶浸提液進行液體培養時應采用(填“靜置”或“搖床”)培養。培養過程中茶褐素在發酵前兩天均無顯著增加的原因是。

(3)為檢測發酵1d時塔賓曲霉的數量,將發酵液稀釋1×103倍后,分別取0.1mL稀釋液均勻涂布于3個培養基平板上,培養后菌落數量分別為48個、45個和42個,則每毫升發酵液中活菌數量為個。

(4)從實際生產角度出發,由圖可知,在第天結束發酵即可獲得較高濃度的茶褐素。為探索生產茶褐素的最適溫度,需設計下一步實驗,請寫出實驗思路:。

參考答案課時規范練56微生物的培養技術及其應用必備知識基礎練1.C解析培養基中含有瓊脂,為固體培養基,A項正確;NaCl為無機鹽,也能參與調節培養基的滲透壓,B項正確;培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等營養物質,該培養基中牛肉膏提供的主要營養物質有碳源、磷酸鹽和維生素等特殊營養物質,蛋白胨提供的主要營養物質有氮源和維生素等,NaCl為無機鹽,因此該培養基提供的主要營養物質有水、無機鹽、氮源、碳源和維生素5類特殊營養物質,C項錯誤;該培養基含有水、碳源、氮源和無機鹽四種基本營養物質,能夠培養多種微生物,D項正確。2.C解析每次使用接種環前、后都要進行灼燒滅菌處理,并要注意待接種環冷卻后才能使用,A項錯誤;植物組織培養時需將流水充分沖洗后的外植體用酒精消毒30s,后立即用無菌水清洗2~3次,再用次氯酸鈉溶液處理30min后,立即用無菌水清洗2~3次,B項錯誤;培養微生物時獲得純微生物培養物的關鍵是防止雜菌污染,C項正確;培養乳酸菌時,需要在培養基中添加維生素,配制好的培養基需先調節pH后滅菌,D項錯誤。3.C解析選取的樣品是取自某海域1146m深海冷泉附近沉積物樣品,故此環境下生存的擬桿菌所分泌的酶可能具有耐低溫的特性,A項正確;這些微生物取自深海冷泉附近,故有些微生物可能只有利用深海冷泉附近特有物質才能生存,B項正確;平板劃線法不能對擬桿菌進行計數,C項錯誤;泡菜的制作利用的是厭氧微生物,和擬桿菌的氣體條件相同,D項正確。4.C解析欲從土壤中分離出能降解M的微生物,平板A應以物質M為唯一有機氮源,屬于選擇培養基,A項正確;根據題干信息可知,實驗采用稀釋涂布平板法進行接種,平板A上的菌落數過多可能是取樣前未將稀釋液搖勻所致,B項正確;平板A上出現了無透明圈的菌落不是因為培養基被污染了,而是細菌分解M的能力弱,C項錯誤;透明圈與菌落的直徑大小能反映該細菌對物質M的分解能力,透明圈最大的菌落,其分解M的能力未必最強,D項正確。5.D解析在一定的自然區域內,同種生物的所有個體是一個種群,圖中所示培養基上長出的所有大腸桿菌屬于一個種群,A項正確;濾膜法檢測1L飲用水中的大腸桿菌數量要進行多次抽樣檢測,求平均值,B項正確;用濾膜法檢測被動物糞便嚴重污染的水體,由于大腸桿菌的數量過多,從而使一個或多個細菌長到一起,進而導致大腸桿菌數量可能比實際值偏小,C項正確;受空間、營養物質等的限制,濾膜轉移到培養基之后,濾膜上的大腸桿菌數量呈“S”形增長,D項錯誤。6.B解析野生型大腸桿菌是原核生物,其遺傳物質主要位于擬核的DNA上,沒有染色體結構,因此,野生型大腸桿菌在誘變時不可能發生染色體變異,只能發生基因突變,A項錯誤;根據題干可知,突變體M和N都是營養缺陷型,且單獨培養時均不能在基本培養基上生長,然而,當它們在完全培養基中混合培養一段時間后,再接種到基本培養基上卻長出了大腸桿菌菌落,這說明在混合培養期間,突變體M和N能夠相互為對方提供所缺失的營養物質,從而使得雙方都能在基本培養基上生長,B項正確;根據題干可知,突變體M和N都是營養缺陷型,且單獨培養時均不能在基本培養基上生長,所以在混合培養期間,突變體M和N能夠相互為對方提供所缺失的營養物質,不一定是發生了遺傳物質的交流,C項錯誤;雖然突變體M和N混合培養后接種到基本培養基上長出了大腸桿菌菌落,但這并不意味著混合培養獲得的所有大腸桿菌都能在基本培養基中生長,只有那些通過相互提供缺失營養物質而恢復了生長能力的突變體或重組體才能在基本培養基上生長,D項錯誤。關鍵能力提升練7.A解析大腸桿菌在伊紅—亞甲藍培養基上生長的菌落呈深紫色,并有金屬光澤,A項錯誤;A消毒液活菌數減少量最多,且殺菌效率最高,故A消毒液殺菌效果最好,B項正確;微生物計數的方法多種多樣,包括顯微鏡直接計數法和平板菌落計數法等,C項正確;干熱滅菌是一種利用高溫進行滅菌的方法,適用于不便在壓力蒸汽滅菌器中進行滅菌,且不易被高溫損壞的物品,這種方法主要適用于需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培養皿)和金屬用具等,D項正確。8.CD解析需要篩選出能防治香蕉枯萎病的內生菌,因此應在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內,從正常植株上篩選樣品,A項錯誤;消毒后,為了防止雜菌污染應用無菌水沖洗,而不是用蒸餾水,B項錯誤;無菌檢測合格指的是植物細胞外沒有微生物,研磨后經稀釋涂布平板法分離得到的就是目標菌落,C項正確;由題圖可知,判斷內生菌的抗性效果需設置對照組和實驗組,對照組不接種內生菌,實驗組接種內生菌,通過比較病原菌菌斑大小,來判斷抗性效果,病原菌的菌斑越小,抗性效果越好,D項正確。9.答案(1)碳源和氮源(2)搖床塔賓曲霉先進行生長繁殖,然后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素(3)4.5×105(4)6在30~42℃之間設置一系列溫度梯度,用同樣的方式培養塔賓曲霉,并檢測不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度,生成茶褐素濃度最高的溫度即為生產茶褐素的最適溫度解析(1)氨基酸和蛋白質可以為塔賓曲霉生長提供碳源和氮源。(2)塔賓曲霉為好氧微生物,用綠茶浸提液進行液體培養時應采用搖床培養,可以增加培養液中的溶氧量,有利于塔賓曲霉的繁殖。培養過程中前兩天塔賓曲霉進行生長繁殖,然后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。(3)培養后菌落數量分別為48個、45個和42個,平均值為(48+