微生物試驗室原則操作程序質量手冊

試驗操XXXXXXXX

執行日期：X年X月X日

啟用日期：XX年X月X日

原則操作程序文獻

01試劑貯存和配制區工作制度

02標本處理區工作制度

03細菌自動分析區工作制度

04試劑貯存和配制區原則操作程序

05標本處理區原則操作程序

06細菌自動分析區原則操作程序

07紫外消毒原則操作程序

08消毒液配制使用原則操作程序

09一般冰箱使用原則操作程序

10超低溫冰箱原則操作規程

11潔凈工作臺使用操作規程

12VITEK32型自動分析系統原則操作程序

13移液器使用原則操作程序

14高速離心機操作原則操作程序

15冰箱維護和保養原則操作程序

16電熱恒溫水浴箱操作程序

17潔凈工作臺維護和保養程序

18可移動紫外消毒車使用操作程序

19加樣器校準原則操作程序

20離心機維護保養操作程序

21溫度計校準程序

22試劑的質檢操作程序

23—微生物試驗室崗位職責（暫行）

24臨床標本的保留程序

25臨床檢查及收費程序

26微生物檢杳收收費價格

27一般培養陰性操作程序

28真菌培養陰性操作程序

29苛養菌培養陰性操作程序

30抗酸桿菌培養陰性操作程序

31支原體培養檢查操作程序

標本處理區工作制度

進入本區需穿工作服、工作鞋。

本區只能進行：臨床標本時保留，標本接種、培養、及其菌株檢查前處理、菌懸液制備、染

色標本檢查、非上機鑒定與藥敏試驗操作等危險操作，其他操作不得在此區進行。

在整個本區的試驗操作過程中，操作者必須戴手套、口罩和帽子，嚴格按照操作規程進行。

工作結束后必須立即對工作M進行清潔或消毒。

非本試驗室工作人員未經容許不得進入。

試劑配制和無菌區工作制度

進入該區需穿專用工作服和工作鞋。

本區只能進行貯存試劑的制備、試劑的分裝和平板的制冬。

在整個本區的試驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴格按照操作規程進行。

工作結束后必須立即對工作區進行清潔和消毒。

非本試驗室工作人員未經容許不得進入。

無菌室公能用于分裝培養管或倒制平板培養基操作。

使用前以紫外燈消毒至少30分鐘，定期用乳酸熏蒸，徹底消毒。

無菌室僅限操作者進入，操作時嚴格關門。

室內備有空調設備，以保證不因溫度而影響工作。

儀器自動分析區工作制度

進入本區需穿專用工作服和工作鞋。

本區只能進行：微生物上機鑒定與藥敏分析、血培養儀增菌培養、培養基溶解與保溫、有關

試驗記錄與匯報書寫、打印；其他操作不得在此區進行。

在整個本區的試驗操作過程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴格按照操作規程進行。

工作結束后必須立即對■工作區進行清潔。

非本試驗室工作人員未經容許不得進入。

試劑貯存和配制區原則操作程序

目的：規定在本區進行的工作，保證試劑對的貯存和制冬。

合用范圍：試劑的貯存和制備。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并遵守本室有關SOP。

3.2本SOP曰勺改動，可由任一使用本SOPE向工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

4程序：

4.1試驗人員進入該區須穿本區專用工作服。試驗中須戴手套、工作鞋。

4.2試驗室所購試劑經驗收登記后，按闡明書中的規定貯存。

4.3記錄溫濕度計讀數。

4.4記錄冰箱的溫度計讀數。根據當日的標本驗收登記表，取出當日試驗須配制和使用的試

劑放置于即用冰箱，其他試劑要立即收好放回貯藏冰箱內。

4.5不一樣廠家的試劑勿混用，同廠家的不一樣檢測項C試劑盒中的相似試劑也不適宜混用,

除非廠家有尤其闡明。

4.6做好詳細試驗記錄。

4.7試驗完畢，清潔試驗臺面。

4.8每周一清點庫存試劑，看有無過期或將近到期的試劑，或作報廢處理或排列優先使用,

防止揮霍，然后記錄試劑的詳細保留狀況。

5.引用的文獻及表格：

5.1項目SOP：sop-tb;sop_tc;sop_ng;sop_hbv;sop_hcv

5.2試驗室清潔程序：proc_lab_7

5.3冰箱溫度登記表：Tab-temp_record

5.4溫濕度計登記表：Tab-temp_record

標本處理區原則操作程序

目的：規定在標本制備區內所進行U勺工作及其操作。

合用范圍：所有在本區內進行的工作。

職責:

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。

3.2本SOP曰勺改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

原則操作：

1.1試驗人員進入該區須穿本室專用工作服1.2o試驗中須使用一次性鞋套，

1.3戴手手套，1.4手套需常更換每四小時換一次。

4.2從試劑貯存和準備區取出的試劑放入即用冰箱室試劑寄存專區暫存。

4.3記錄溫濕度計讀數。

4.4記錄恒溫箱的溫度計讀數。

4.5臨床標本的接受、保留，細菌手工鑒定或上機前處理在本區內進行。

4.6標本的接受處理和保留按臨床標本的管理程序進行：Pro-Sam。

4.7不一樣檢測項目的樣本核酸H勺提取和保留按對應檢測項目的SOP進行。

4.8標本接種或涂片在本區的標本處理臺內進行，接種后培養基按規定進行培養。菌落觀測

和處理在生物安全柜內進行。

4.9詳細做好試驗記錄和儀器使用記錄。

4.10保持室內空氣流通，且在試驗完畢后，按試驗室清潔消毒程序進行清潔、消毒工作。

引用的文獻及表格

5.1臨床標本的管理程序進行：proc_smpl_l

1.2項目SOP：sop-tb;sop_tc；sop_ng;sop_hbv;sop_hcv

試驗室清潔程序：

1.3Pro-Cleo

5.4恒溫箱溫度登記表：Tab-temp_record

5.5溫濕度計登記表：Tab-temp_record

細菌自動分析區原則操作程序

目的：規定在本區進行的工作，保證靶核酸擴增的精確性和有效性。

合用范圍：血培養、自動分析和匯報簽發。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。

3.2本SOP日勺改動，可由任一使用本SOP日勺工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

原則操作：

4.1試驗人員進入該區須穿本區工作服。試驗中須戴手套、帽子，手套需常更換。

4.2本試驗室采用VITEK32微生物自動分析技術，因此，微生物自動鑒定和分析和肥達氏試

驗、外菲氏試驗等均在本區內進行。

4.3鑒定板在標本處理區準備后帶入該區，放入充液箱充填，充填菌懸液后加塞，余液連同

試管放入消毒桶中消毒，由工人過后洗滌回收試管。

4.4每月必須進行至少一次所有試卡口勺質控，每新到H勺批號試劑要進行質控，過關方能投入

使用。

4.5根據不一樣檢測項目SOP規定設定微生物檢查工作程序，并記錄立案；未經試驗室負責

人容許，不得隨意更改。

4.6檢測匯報的簽發根據檢測成果匯報程序：Pro-Rep..

4.7做好儀器和試驗記錄。

4.8保持室內空氣流通，且在試驗完畢后，清潔、消毒工作臺面。

引用的文獻:

5.1檢測成果匯報程序：projrepjl

5.2項目SOP：sop-tb;sop_tc；sop_ng;sop_hbv;sop_hcv

5.3試驗室清潔程序：proc_lab_7

紫外消毒原則操作程序

目的：每天試驗后，卜.班后對工作區進行必要的紫外線消毒一小時，保正試驗室的清潔。

合用范圍：合用于本室各工作區中按裝于天化板上歐I紫外線消毒燈。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。

3.2本SOP日勺改動，可由任一使用本SOP日勺工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作程序：

4.1試驗結束后先對試驗室進行必要的清潔工作；

4.2根據需要設定期間，一般為30分鐘，根據需要合適延長時間。

4.3關閉電源開關：

4.4整個紫外線消毒過程中，有關工作人員不能離開試驗室，以防火災發生。

消毒液配制使用原則操作程序

1、目孫

配制消毒液，用消毒液擦拭試驗臺面、用品及浸泡試驗廢棄物。

2、合用范圍：

分子生物試驗室口勺工作人員

3、職責：

3.1試驗室工作人員應及時配制消毒液，熟知并遵守本SOP,嚴防污染發生。

3.2本SOPII勺改動，可由任一使用本SOPI總工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

4、工作程序：

4.1確定要配制消毒液的量。

4.2將36%的次氯酸鈉配制成10%日勺稀溶液。以1000亳升為例，取278亳升歐J36%的次氯

酸鈉母液，加蒸儲水至1000亳升。

4.3消佳凈:20g加水4000ml,作用20-30分鐘。

4.4所配制的消毒液只限在當日內使用，隔夜如使用時應根據本SOP重新配制。

一般冰箱使用原則操作程序

目的：保證冰箱的正常使用。

合用范圍：本SOP合用于本室各類用途使用II勺一般冰箱、冰柜。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP.

3.2本SOP日勺改動，可由任一使用本SOPE向工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作程序：

4.1開、關機：試劑冰箱按闡明書規定放好后，插上電源線，冷藏室溫度開關置于4C,冷

凍室溫度開關置于-20C,2小時后用溫度計確認。系統進入正常運行狀態后即可正常使用。

4.2關機：若冰箱較長時間不用或需要送修時需按如下環節操作：

（1）關閉冰箱電源，并拔下電源插頭。

（2）清空冰箱內的所有貯存物，并妥善放置到其他冰箱內。打開冰箱門，等待冰箱內的霜

化完。

（3）用肥皂水擦洗潔凈冰箱內膽，后用10%次氯酸鈉液擦洗一次。

（4）保持冰箱門打開待其自然干燥。

引用的表格

5.1冰箱溫度登記表：Tab-temp_record

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超低溫冰箱原則操作規程

保證低溫冰箱H勺正常使用。

合用范圍：本SOP合用于企業口勺型超低溫冰箱。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOPII勺改動，可由任一使用本SOPI總工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作程序

4.1接通電源，將冰箱時開關置ON位置，此時溫度顯示屏顯示冰箱的實際溫度，且數字不

停地閃爍。

4.2溫度設定：以調整冰箱溫度為?70℃為例闡明，按SET鍵，溫度指示顯示-85C,且“8”

閃爍，按“t”鍵直至“8”變為“7”；按“一”鍵,此時溫度指示為“?75℃”，“5”閃爍,

按“t”鍵直至“5”變為“0”，按SET鍵，此時溫度指示“?70℃”，且不閃爍。

4.3設定溫度時應注意，一般應以10C遞減方式進行，即每次設定H勺溫度低于冰箱實際溫度

10℃,待冰箱到達設定溫度時再進行調整，直至到達所需溫度。

4.3如超低溫度遇較長時間停電，其溫度顯示會不停閃爍，且報警指示燈（ALARM）也閃爍，

此時應按上述措施調整。

4.4由冰箱管理人或其委托人每工作日志錄冰箱溫度，冰箱溫度登記表貼于冰箱門，每月更

換1次，存檔。

4.5超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應按指定位置寄存。

4.6超低溫冰箱全室共用，若室外人員需寄存試劑或標本，須經管理人同意。

引用的表格：

5.1冰箱溫度登記表：tab_temp_record

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潔凈工作臺使用操作規程

目的：對的）使用潔凈工作臺。

本SOP合用于試驗室使用的所有國產醫用潔凈工作臺。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOPH勺改動，可由任一使用木SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作程序：

4.1新安裝或長期未使用的工作臺，使用前必須用超凈真空吸塵器或不產生纖維的物品認真

進行清潔工作。

4.2接通電源，使用前應提前15~30分鐘同步啟動紫外燈和風機組工作。

4.3當需要調整風機風速時，用工作臺操作面板上時風返調整鈕進行調整。風機、照明均由

指示燈指示其工作狀態，工作時，發光。

4.4工作臺面上嚴禁寄存不必要日勺物品，以保持工作區的潔凈氣流不受干擾。

4.5嚴禁在工作臺面上記錄書寫，工作時應盡量防止作明顯擾動氣流的動作；嚴禁在預過濾

進風口部位放置物品，以免擋住進風口導致進風量減少，減少凈化能力。

4.6使用結束后，用消毒液清理工作臺面后打開紫外燈，15~30分鐘后關閉紫外燈，關閉潔

凈臺電源。

4.7長期不使用的工作臺請撥下電源插頭。

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VITEK32全自動微生物分析系統原則操作程序

（待補充）

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移液器使用原則操作程序

目的J:對的使用移液器，保證移液的精確性。

合用范圍：本試驗室使用的可調式移液。

職責：試驗室_L作人員必須嚴格按照本SOP進行操作。

操作程序：

4.1轉動旋鈕設定移液量，設定的移液量不可超過該移液器規定的范圍。

4.2裝上配套II勺Tip。

4.3前進移液法

4.3.1將按鈕壓至第一停點位置;

4.3.2將移液管管嘴浸入液面F2~3mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入管嘴吸

滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側的所有液滴。

4.3.3輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置，放出液體。約1秒鐘后，繼續將操作按鈕向下壓

至第二停點位置。待管嘴液體放潔凈后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤

出管嘴。

4.3.4松開按鈕使之回到起點位置。需要時，可更換管嘯繼續移液操作。

4.4倒退移液法：合用于高粘度液體及/或易起泡沫液體的移液。

4.4.1將操作按鈕向下壓至第二停點位置。將移液管管噴浸入試劑瓶液面下2~3mm深處，

然后慢慢松開鈕吸入液體，待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴撤出液面，擦掉管嘴外側的所有

液滴。

4.4.3輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置，放出液體。遺留在管嘴時口勺液體或者隨管哪一起

扔掉，或者放回本來的容器中。

4.5反復操作法：反復操作移液法可以迅速、簡便地反復轉移同體積口勺同種液體。將操作按

鈕向下壓至第二停點位置。將移液管管嘴浸入液面下2~3mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入

液體。待移入管嘴吸滿液體后，將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。

4.5.3輕輕壓下操作按鈕至第一停點位置，放出液體。待放完所需體積液體后，把按鈕停在

第一停點位置，不包括在移液量之內的少許液體仍留在管嘴內，管嘴外的液滴則需包括在移

液量之內。將管嘴浸入試劑液面下不遠處，然后慢慢松開按鈕使管嘴重新吸入液體。反復步

序和繼續移液操作，就可反復轉移相似體枳液體。

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離心機操作原則操作程序

目的：使每個工作人員能對的地使用本儀器。

范圍：本SOP僅合用于各類一般離心機。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOP日勺改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作：

4.1開機：接通電源，打開儀器電源開關，離心機自檢。

4.2按“Open”鍵，打開機蓋，旋開轉子蓋，平衡放入離心管，旋緊轉子蓋，關上機蓋，此

時“Open”鍵的指標燈亮。（假如接通電源后，機蓋為開的狀態，則無需此步操作）。

4.3離心條件的設定：通過按“Temp”、“Speed"、“Time”鍵的上下箭頭分別設定離心的溫

度、速度和時間。其中離心速度可分為每分鐘轉速（rpm）和離心力（cfg）兩種，可通過同

步按卜.“Speed”鍵日勺上下鍵頭互相轉換。

4.4運行:離心條件設定好后,按“Start/Stop”鍵，離心機啟動，“Open”鍵H勺指標燈滅。

當到達設定的時間后，離心機自動停止，并發出提醒音，“Open”鍵打勺指標燈亮，按“Open”

鍵，打開機蓋，旋開轉子蓋，取出離心管。

*若進行樣本的短暫離心，只需按“Short”鍵數秒即可。

*若需在離心過程中停止離心，則需再按一次"Start/Stop”鍵。

4.5關機：離心完畢后，應及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水，關閉離心機電源，并記錄

離記機使用狀況。

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冰箱維護和保養原則操作程序

目的：對冰箱進行合適的維護，以保證冰箱的正常使用。

合用冰箱范圍：本試驗室使用的多種品牌、型號的冰箱。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOP日勺改動，可由任一使用本SOPE向工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作措施

4.1冰箱應放置于水平地面并留有一定的散熱空間。

4.2外接電源電壓必須匹配，并規定有良好的接地線。

4.3冰箱內嚴禁寄存與本試驗室無關H勺物品。

4.4放入冰箱內H勺所有試劑、樣品、質控品等必須密封保留。

4.5保持冰箱出水口暢通；非自動除霜冰箱應定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時切斷電源，

用軟布蘸水擦拭冰箱內外，必要時可用中性洗滌劑。

4.6每H由專人負責觀測冰箱內溫度并記錄于表中，登記表貼于門上，每月一-張，一年裝訂

成冊存檔。

4.7若溫度超過規定范圍，調整溫控使其回到正常范闈，并進行記錄。

4.8若溫控調整無效，報請設備科維修，修理后須驗收合格并簽字后方能正常使用。

引用的表格

5.1冰箱溫度登記表：tab_temp_record

電熱恒溫水浴箱操作程序

1目的：保證水浴箱工作溫度恒定。

2該SOP變動程序：本原則操作程序U勺改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報

經下述人員同意簽字：室技術負責人。

3合用水浴箱范圍：電熱恒溫水浴箱

4原則操作：

4.1水浴箱應置于結實H勺水平臺上，電源電壓須匹配。

4.2在水浴箱內注入清潔溫水至總高度1/2?1/3處。

4.3打開電源開關，把溫度控制器的溫度調整旋鈕至設定溫度。

4.4當水槽內測定溫度到達設定溫度時，加熱中斷、指示燈熄滅，溫度保持穩定。

4.5在每次水浴箱使用前，放入原則溫度計同步監測實際水溫，以校正溫度。

4.6水浴箱工作溫度波動范圍是：預設+2℃范圍。

4.7每天應使用水銀溫度計水浴箱應記錄每天溫度；如溫度超過正常范圍，該溫度

應劃上紅圈，并把修正操作記錄下來。

4.8水浴箱內外應保持清治，外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。

4.9儀器不用時，需套好防塵罩，以免溫度控制器受潮影響使用。

5.0引用日勺表格：tab_temp_bath

潔凈工作臺維護和保養程序

目的：對潔凈工作臺進行合適維護，以保證凈化能力。

合用范圍：本SOP合用「試驗室使用的醫用潔凈工作臺（BC1300型）。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOPH勺改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

程序：

4.1根據環境潔凈程度，定期將預過濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時間為3~6個月。

4.2每次使用潔凈臺后，均需對潔凈臺進行清潔。

4.3定期（一般每六個月1次）計測工作區風速，如發現不符合技術參數規定，則可調大風

機供電電壓。當風機組電壓調到最大時，工作區風速仍達不到0.3m/s,則必須更換高效空

氣過濾器。（由廠家或院儀器維修人員進行）

4.4做好維護記錄。

引用的表格：

5.1儀器設備維護保養登記表：sop_cl_l

可移動紫外消毒車使用操作程序

1目R勺：對H勺使用紫外消毒車進行消毒。

2合用范圍：合用于本室使用口勺ZXC型紫外線消毒車（上海躍進醫用光學器械廠生廠）。

3職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作程序：

4.1打開保護門；

4.2用手托住燈臂往上抬至需要位置；

4.3插上電源，打開帶燈開關；

4.4根據需要設定期間；

4.5使用完畢將按鈕據究竟，同步另一手托住燈臂慢慢將燈管放進燈箱內關上保護門。

4.6不一樣試驗區的紫外線消毒車勿混用。

5消毒登記表：tabclrecord

加樣器校準原則操作程序

目的：保證加樣器加樣的精確性。

加樣器范圍：多種品牌、型號的固定、可調和多通道加祥器。

職責：本SOP由室負責人執行貫徹。

校準程序

4.1校準環境和用品規定：

4.1.1室溫：20?25C,測定中波動范圍不不小于±0.5℃。電子天平：放置于無塵和震動影

響的臺面上，房間盡量有空調。稱量時為保證天平內H勺濕度（相對濕度60?90%）,天平內

應放置一裝有10ml蒸儲水的小燒杯。

4.1.3小燒杯：5?10ml體積。

4.1.4測定液體：溫度為20?25℃的去氣雙蒸水。

4.1.5選擇校準體積：⑴以校準體積；⑵加樣器標定體積的中間體積：⑶最小可調體積（不

不不小于擬校準體枳的1%）。（4）如為固定體積加樣器，則只有一種校準體枳。

4.2校準環節：

4.2.1將加樣器調至擬校準體積，選擇合適的吸頭；

4.2.2調整好天平；

4.2.3來回吸吹蒸儲水3次，以使吸頭濕潤，用紗布拭干吸頭；

4.2.4垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面2?3mm處，緩慢（1?3秒）一致的吸取蒸鐳水;

4.2.5將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體；

4.2.6將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一檔，等待1?3秒，

再壓致第二檔，使吸頭里的液體完全排出；

4.2.7記錄稱量值；

4.2.8擦干吸頭外面；

429按上述環節稱量10次；取10次稱量值H勺均值作為最終加樣器吸取的蒸儲水重量，按

附表I所列蒸儲水Z因子計算體積：體積=重量/Z因子按校準成果調整加樣器

4.3新購的合格的移液器出廠前通過廠家校準，使用前無需校準。

4.4每年移液器進行校準一次，自校或由廠家有關部門校準。

4.5做好校準記錄。

引用的表格

儀器設備校準登記表：tab_pipt_cal

離心機維護保養操作程序

目的：對離心機進行對的的維護，以保證儀器正常運轉。

合用范圍：本SOP僅合用于本室使用的離心機。

職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP,室負責人監督貫徹。

3.2本SOP的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

操作程序：

4.1離心室的清潔：為了防止樣本等殘留物的污染，應常常對離心機外殼和離心室進行清潔

處理。對離心室清潔，應先打開離心機蓋，撥掉電源線，用專用設備將離心機轉子旋下，再

用中性去污劑（70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內的橡膠密封

圈經去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤滑。

4.2轉子的清潔：轉子會被樣本殘留物污染，也也許會被某些化學試劑腐蝕，因此應對轉子

每月進行清潔維護。每月,用中性的清潔劑清潔轉子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄,

以延長轉子II勺壽命。

4.3離心完畢后，應及時用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅合用于冷凍離心機）

4.4離心結束后，使離心機蓋打開，然后關機。

溫度計校準程序

目的：保證溫度計的精確性。

合用范圍：合用于本試驗室所使用的溫度計。

職責：本SOP由室負責人貫徹。

程序

4.1由設備科人員送質檢局對溫度計進行校準。

4.2每年進行1次。

4.3經校準過H勺溫度計可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。

引用表格：

5.1儀器設備校準記錄：tabinstcal

臨床非培養標本H勺采集及處理操作程序

目的：規范臨床待檢標本的對R勺采集、送檢和處理。

合用范圍：微生物檢查試驗室的所有臨床檢測標本。

職責：

3.1所有采集標本的人員均需按本SOP操作，試驗室工作人員有責任向臨床醫生、護士或病

人宣傳教育。

3.2本原則操作程序的改動，可由任一使用本SOP曰勺工俏人員提出，并報經卜述人員同意簽

字：室負責人、科主任。

操作程序

4.1本試驗室檢測標本為：血清或血漿、痰、生殖道拭子標本、尿液及腦脊液和胸腹水。

4.2做好標本簽收，查對檢查單與標本標簽與否清晰無誤，送檢標本與否對的、合格，給所

有標本按次序編號，按如下操作規程操作。

4.3查找抗酸菌操作:將標本置于水浴蒸箱加溫殺菌30分鐘，取標本殘留物或沉淀物加溫涂

布玻片，液性標本以3000轉/分鐘離心5分鐘，取標本殘留物或沉淀物加溫涂布玻片并標注

編號后固定，行抗酸染色，先滴加抗酸染色第一液加溫i用酒精燈在破片下來回加溫置染色

液冒熱氣，但無氣泡產生為宜）染色10分鐘，自來水沖洗凈染液，以硫酸美蘭復染2分鐘,

水洗涼干。

鏡檢與匯報：油鏡下查找分枝、不規則紅色桿菌，按如下原則進行成果匯報。

1）、鏡檢100500個視野（時間不少于4分鐘）未發現抗酸菌，繼續觀測至300個視野仍未

發現抗酸菌者匯報抗酸菌（一）；

2）、鏡檢100個視野找到抗酸菌1-2條者，匯報抗酸菌可疑（土），或重涂片或重送標本檢

查；

3）、鏡檢100個視野找到抗酸菌3-9條者，匯報抗酸桿菌陽性（+）；

4）、鏡檢10個視野找到抗酸菌1-9條者，匯報抗酸桿菌陽性（2+）；

5）、鏡檢每個視野找到抗酸菌1-9條者，匯報抗酸桿菌陽性（3+）；

6）、鏡檢每個視野找到抗酸菌多于9條者，匯報抗酸桿菌陽性（4+）。

4.4查找一般細菌操作：液性標本取離心沉淀物涂片，拭子或膿性標本直接涂布玻片并標注

編號后固定。同步取大腸原則株（ATCC25922）和金黃色葡萄球菌原則株（ATCC25922）涂片，

一起行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1分鐘，水洗，加第二液媒染1分鐘，水洗潔凈；以

95%酒精脫色30秒鐘后立即水洗，再加第四液復染30秒鐘，水洗后涼干。油鏡下查找菌體

并觀測球桿比例；觀測質控菌與否合格。

4.5墨汁染色查找隱球菌：液性標本離心取沉淀物涂片，膿性或拭子標本直接涂片并寫號,

以無菌接種環粘取少許印度墨汁與玻片上標本混勻，壓蓋玻片，先低倍鏡下找到視野再轉離

倍鏡觀測。若找到透亮，圓形強折光，有厚莢膜的菌體匯報墨汁染色陽性：否則匯報陰性。

4.6白帶常規檢查：鹽水管直接將棉簽點至破片后以高倍鏡檢有無滴蟲：涂片標注編號后固

定，行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1分鐘，水洗，加第二液媒染1分鐘，水洗潔凈；以

95%酒精脫色30秒鐘后立即水洗，再加第四液復染30秒鐘，水洗涼干后鏡檢杳找革蘭氏陰

性雙球菌、霉菌或陽性球菌、線索細胞等。陰道清潔度II勺按如卜.判斷原則匯報：

I度：陰道桿菌為主，并可見大量上皮細胞。

II度：有部份陰道桿菌，但亦有部份膿細胞和雜菌，上皮細胞少見。

HI度：僅見少許陰道桿菌和上皮細胞，有大量膿細胞和雜菌。

IV度：鏡下無陰道桿菌，除少許上皮細胞外，重要R勺幾乎全是膿細胞和大量雜菌。

4.7肥達試驗：標本標明編號，以3000轉/分鐘離心5分鐘；取試管架，按每標本排5排試

管，每排5支；各標本用加樣器取100Ml血清置于一支稀釋用試管（注明檢查號）中，加入

1.9ml0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20倍稀釋血清各0.2ml,成1：40倍；后糅釋管

再加入1.0ml0.9%生理鹽水，成1：40倍稀釋，加入第二排試管各0.2ml。同樣措施對倍稀

釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml0.9%生理鹽水作陰性對照。從冰箱中拿出肥達反應試

驗稀釋菌懸液，第一列各加入H診斷菌液0.2ml,第二列各加入。診斷菌液0.2ml,第三列

各加入甲型診斷菌液0.2川,第四列各加入乙型診斷菌液0.2ml,第五列各加入丙型診斷菌液

0.2ml,混勻，置37c水浴箱18-24小時。

成果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點為陰性管，出現散右顆粒狀凝集為陽性管。以最高稀釋

管出現散在顆粒狀凝集為匯報滴度。若陰性對照出現凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做

試驗。

4.8外菲氏試驗：標本標明編號，以3000轉/分鐘離心5分鐘：取試管架，按每標本排3排

試管，每排5支；各標本用加樣器取100Hl血清置于一支稀釋用試管（注明檢查號）中，加入

1.9ml0.9%生理鹽水混勻，第一排加入1：20倍稀釋血清各0.2ml,成1：40倍：稀釋管留

1.0ml再加入1.0ml0.9%生理鹽水，成1：40倍稀釋，加入第二排試管各0.2mL同樣措施

對倍稀釋至第四排試管，第五排各加入0.2ml0.9%生理鹽水作陰性對照。從冰箱中拿出外菲

氏反應試驗稀釋菌懸液，第一列各加入0X19診斷菌液0.2ml,第二列各加入0X2診斷菌液

0.2ml,第三列各加入OXK診斷菌液0.2ml,混勻，置37c水浴箱18-24小時。

成果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點為陰性管，出現散右顆粒狀凝集為陽性管。以最高稀釋

管出現散在顆粒狀凝集為匯報滴度。若陰性對照出現凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做

試驗。

5.2拒收標本登記表：tab,ejec

臨床標本的保留程序

目的：臨床標本正保證存，以便必要是復查。

合用范圍：微生物檢查試驗室的I所有臨床檢測標本。

職責：

3.1試驗室工作人員必須熟知并遵守本SOP,室負責人監督管理。

3.2本SOP日勺改動，可由任一使用本SOP日勺工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

程序：

4.1未檢測H勺標本經預處理后及時置-20C保留。

4.2標本當日檢測可置4℃保留，如當日不檢測應置-20℃保留。匯報發出后丟棄。

4.3原始樣本在匯報發出前均需置4℃保留，不得丟棄。匯報發出后保留2天，以備查。保

留2天后標本由室負責人酌情處理。

試驗室崗位職責運行程序］暫行）

1.目的J：保證平常工作的順利進行。

2.合用范圍：本試驗室工作人員。

3.職責：

3.1試驗室工作人員均應熟知并嚴格遵守本SOP。

3.2本SOPH勺改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員同意簽字：室負

責人、科主任。

4為更好的使平常工作有序進行，盡量以負責的態度，持續地完畢每一種檢查的發報，保證

成果的可靠性，每R盡量安排兩個工作人員上班，分為兩個崗位，各自的工作崗位職責如下。

1崗位班、2崗位班采用輪轉制。如遇有當班同事休息或值班，第3人就頂上其所上的班。

4.1崗位1班（負責樣本接受、查對、接種以及上口進行的鑒定和藥敏成果進行分析、發報等

工作）。

4.1.1上班后檢查細菌自動分析儀、血液自動培養儀工作與否正常，并做好記錄。

4.1.2從冰箱內取出當日所需的多種平板：5%綿羊血平皿、中國藍培養皿、淋病奈瑟菌培養

皿、麥康凱平皿等。

4.1.3負責對上日進行的鑒定和藥敏成果進行分析。

4.1.4負責匯報單口勺打印、查對、登記與錄入等工作，簽發已查對H勺所有匯報。做好菌種的

保留，對某些難得的菌株、原則菌株等要注意保留，并做好記錄。接受樣本：查對各樣本與

化驗單名與否一致，核查各送檢樣本與否符合規定，否則立即與病房聯絡以便作出對應的處

理，如退單或重送樣本等，并做好聯絡狀況的記錄。

4.1.7樣本編號：對合格的樣本作出編號。

4.1.8一般培養樣本口勺接種選擇：

①痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿；

②尿液接種：取100M接種血平皿、麥康凱平皿；

③泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板；

④大便：SS或中國蘭、血平板；

⑤多種無菌體液、腦脊液、膿液等標本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌；

⑥衣原體、支原體培養+藥敏，按闡明書接種支原體專用培養基；

⑦真菌培養，多種標本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養基；

⑧所有標本在接種的同步應進行涂片或對其沉渣進行革蘭或抗酸染色，并做對應的記錄。

⑨規定：臨床申請單未明確注明培養目H勺時，一律按一般培養進行處理。標本送到試驗室

后特殊培養標本需在1小時內接種，一般培養標本不得超過2小時。

4.1.9培養：一般標本接種后，平板應置于350c培養箱培養，接種過腦脊液標本、泌尿生

殖道標本的血平板還應置于5%-10%82環境中；結核培養置于37OC培養箱培養，每星期

檢查兩次有否可疑菌落生長。收到的一般血培養瓶（如AER）應進行瓶內氣壓平衡處理，厭氧

培養瓶直接放入培養箱中，

4.1.10對新到崗的實習或進修人員應認真交代本崗位的一切事宜并比認真作好帶教工作。

4.1.11厭氧培養應接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養，同步接種BMP進行一般培養。

4.1.12標本培養處理后協助2班將需要的多種標本搜集并滅菌處理。

4.1.13負責配制培養基，并做好記錄。

5.1崗位2班（負責菌株鑒定與藥敏口勺分析、涂片檢杳標本日勺匯報、室內質控等）。上班后

首先核查各個培養箱、冰箱口勺工作溫度與否在設定日勺范圍內，并做好記錄；檢查多種培養基

及試劑的庫存量，做好需配制的培養基或需領出的試劑的記錄工作，對需購置口勺試劑、平板、

培養基、染色液等應及時記錄并告訴室組長，以便及時計劃報主任同意。

5.1.2做好室內常用試驗試劑如觸酶、凝固酶、氧化酶或蛋白陳水的質量控制，并做好記錄。

5.1.3負責處理上日接種標本的菌種鑒定與藥敏試驗，觀測血液增菌培養瓶，如發既有細菌

生長，應按三級匯報制度處理。觀測培養平板，分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色，能上機

的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白陳水等對應U勺檢查后上機，還不能上機或