高級中學名校試題PAGE2025學年高二生物下學期期中模擬卷（江蘇專用）（考試時間：75分鐘試卷滿分：100分）注意事項：1．本試卷分第Ⅰ卷（選擇題）和第Ⅱ卷（非選擇題）兩部分。答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2．回答第Ⅰ卷時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑。如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案標號。寫在本試卷上無效。3．回答第Ⅱ卷時，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。4．測試范圍：選必三全部5．難度系數：0.76．考試結束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求。1．研究者用酸筍開發具有降低膽固醇功能的益生菌。先將酸筍發酵液接種到含有CaCO3的固體培養基上，篩選出乳酸菌，然后將乳酸菌接種到含有膽固醇的培養液中，篩選出能夠降解膽固醇的乳酸菌。下列敘述正確的是（）A．酸筍發酵過程中需要定期排氣以確保發酵罐內壓強穩定B．與酸筍風味形成相關的乳酸菌為厭氧型，所以不會分布在空氣中C．培養基上生長的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標菌落D．膽固醇既可為乳酸菌的生長提供氮源，也可參與動物細胞膜的組成【答案】C〖祥解〗酸筍制作的原理是：乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸?！驹斘觥緼、乳酸菌是厭氧菌，發酵過程中不產生氣體，不需要定期排氣，A錯誤；B、在自然界中，乳酸菌分布廣泛，空氣、土壤、植物體表、人和動物的腸道內都分布有乳酸菌，B錯誤；C、乳酸菌發酵產生的乳酸能與CaCO3發生反應，使CaCO3分解成可溶性物質乳酸鈣和CO2，導致菌落周圍出現溶鈣圈，故溶鈣圈直徑與菌落直徑的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培養基上生長的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標菌落，C正確；D、膽固醇屬于脂質，含有C、H、O元素，主要為微生物的生長提供碳源，膽固醇是構成動物細胞膜的重要成分，D錯誤。故選C。2．亞硝酸細菌為一類可將NH3氧化為HNO2的化能自養細菌，因其常常和其他細菌伴生在一起難以純化。下圖為從某污水廠污泥中分離、篩選和鑒定亞硝酸細菌的示意圖，相關敘述錯誤的是（）A．過程①接種9個平板，目的是在合適的濃度下篩選出相應的單菌落B．過程②挑取單個菌落接種到斜面上保存，并在試管底部做好標記C．過程③進行平板劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面D．與富集培養基相比，篩選亞硝酸細菌的培養基中應不含有機碳源【答案】B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：通過接種環在固體培養基表面連續劃線操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。經過數次劃線后培養，可以分離得到單菌落，這種接種方法稱為平板劃線法。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、過程①接種9個平板，目的是在合適的濃度下篩選出相應的單菌落，同一濃度下接種了3個平板的目的是排除偶然因素的影響，實現平行重復，A正確；B、過程②挑取單個菌落接種到斜面上保存，并在試管壁上做好標記，B錯誤；C、過程③進行平板劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面，進而可以獲得單個菌落，C正確；D、亞硝酸細菌為一類可將NH3氧化為HNO2的化能自養細菌，因此，與富集培養基相比，篩選亞硝酸細菌的培養基中應不含有機碳源，D正確。故選B。3．某釀酒廠以無核黃皮果為輔料研制出黃皮甜米酒，該酒具有消食、潤肺和清熱解毒等功效。制作黃皮甜米酒的工藝流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A．對糯米進行蒸煮可利用高溫殺死雜菌，并有利于細胞破裂釋放糖類用于發酵B．甜酒曲中的根霉能產生糖化酶，將淀粉依次水解為蔗糖、葡萄糖C．酵母菌的繁殖在主發酵階段完成，代謝物的生成在后發酵階段完成D．黃皮甜米酒口感好、酒精度低，適宜長期大量飲用【答案】A〖祥解〗發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發酵階段完成。主發酵結束后，發酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環境下儲存一段時間進行后發酵?！驹斘觥緼、對糯米進行蒸煮的主要目的是使淀粉顆粒吸水膨脹并糊化，便于淀粉酶的作用，同時也可利用高溫能殺死原料中的雜菌，并有利于細胞破裂釋放糖類用于發酵，A正確；B、甜酒曲中的根霉能產生糖化酶，將淀粉依次水解為麥芽糖、葡萄糖，B錯誤；C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發酵階段完成，C錯誤；D、黃皮甜米酒雖然口感好、酒精度低，但不適宜長期大量飲用，D錯誤。故選A。4．南通某學校生物研究小組以蝴蝶蘭為材料開展了植物組織培養試驗，過程如下圖。相關敘述錯誤的是（）A．取帶芽花梗作外植體，是因為芽可產生生長素而更易成活B．花梗插入培養基前要用無水酒精和次氯酸鈉進行消毒處理C．過程c、d和e使用的培養基中所含的物質比例存在差異D．過程f“煉苗”目的在于提高組培苗對外界環境條件的適應性【答案】B〖祥解〗組織培養的過程：（1）建立無菌體系，即外植體及培養基的消毒、接種，獲得愈傷組織或器官。（2）進行增殖，不斷分化產生新的植株，或直接產生不定芽及胚狀體，也可以根據需要反復進行繼代培養，以達到大量繁殖的目的。（3）將植株轉移進行生根培養，可以轉入生根培養基，也可直接進行扦插生根。（4）試管苗過渡，即試管苗出瓶后進行一定時間對外界環境的適應過程。激素比值的變化，對生根還是生芽是不同的。當細胞分裂素大于生長素時，促進芽的分化；當細胞分裂素小于生長素時，促進根的分化?！驹斘觥緼、芽屬于幼嫩部位，能產生生長素，因此取帶芽花梗作外植體更易成活，A正確；B、花梗插入培養基前要用體積分數為70%的酒精和體積分數為5%左右的次氯酸鈉進行消毒處理，B錯誤；C、過程c、d和e屬于脫分化、再分化和幼苗的生長發育，使用的培養基中所含的物質如激素比例存在差異，C正確；D、過程f“煉苗”是由于試管苗長得弱小，光合能力弱，適應性差，因此需要移栽到野外使其逐漸適應室外環境，提高組培苗對外界環境條件的適應性，D正確。故選B。5．為培育“高產耐鹽堿”的水稻植株，某研究小組利用植物體細胞雜交技術設計了如下實驗流程圖。已知耐鹽、高產性狀分別受細胞質基因和細胞核基因控制，相關敘述錯誤的是（）A．①過程可通過觀察原生質體的結構與顏色來判斷其融合情況B．②過程體現了植物細胞全能性，它是植物體細胞雜交的理論基礎C．失活處理后，原生質體A2的細胞質和原生質體B2的細胞核失活D．去壁處理需用到纖維素酶和果膠酶混合酶液，酶液滲透壓可略高于細胞液【答案】C〖祥解〗植物體細胞雜交技術：（1）植物體細胞雜交技術：是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。（2）過程：①誘導融合的方法：物理法；化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑；②細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成；③植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束；④雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質。（3）意義：克服了遠緣雜交不親和的障礙?！驹斘觥緼、由于葉綠體有顏色且有特定結構，①過程的細胞融合中可通過觀察原生質體的結構與顏色來判斷其融合情況，A正確；B、②過程是將雜種細胞經組織培養得到再生植株的過程，植物的組織培養體現了植物細胞全能性，它是植物體細胞雜交的理論基礎之一，B正確；C、由于耐鹽、高產性狀分別受細胞質基因和細胞核基因控制，在促使原生質體融合前，需對原生質體進行失活處理，分別使原生質體A2的細胞核失活和原生質體B2的細胞質失活，C錯誤；D、用纖維素酶和果膠酶混合液酶解細胞壁獲取原生質體時應置于較高滲透壓溶液中（或等滲溶液）進行，可防止原生質體吸水脹破，D正確。故選C。6．下列有關植物組織培養技術的敘述，錯誤的是（）A．利用植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得有用的突變體B．經脫分化和再分化過程形成的幼芽細胞喪失分裂分化能力C．利用莖尖、花粉進行組織培養可分別獲得脫毒苗和單倍體植株D．培養基中生長素和細胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向【答案】B〖祥解〗植物組織培養過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發育成植株。植物組織培養技術有廣泛的應用：植物繁殖的新途徑（快繁技術、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產。【詳析】A、愈傷組織細胞處于分生狀態，易受外界環境因素影響，因此利用植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得有用的突變體，A正確；B、經脫分化和再分化過程形成的幼芽細胞具有細胞全能性，在一定條件下可培育成植株個體，B錯誤；C、莖尖部位的病毒較少，花粉是植物的雄配子，染色體數目減半，故利用莖尖、花粉進行組織培養可分別獲得脫毒苗和單倍體植株，C正確；D、決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要，如培養基中生長素和細胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向，D正確。故選B。7．我國科學家使用小分子化合物處理小鼠體細胞，成功獲得誘導多能干細胞（iPS細胞），降低了通過導入原癌基因c-Myc等基因制備iPS細胞的潛在成瘤風險。下列敘述錯誤的是（）A．iPS細胞的潛在成瘤風險來自于c-Myc基因抑制了細胞的分裂分化B．單基因遺傳病患者使用iPS細胞治療后，體內仍可能攜帶致病基因C．人工制備的iPS細胞同時具備多方向分化的潛能和自我更新的能力D．使用非親緣iPS細胞不能解決干細胞移植中HLA造成的免疫排斥【答案】A〖祥解〗一、誘導多能干細胞（iPS細胞）能夠通過分裂進行自我更新，也能通過細胞分化形成多種不同類型的細胞。二、原癌基因表達的蛋白質是細胞正常的生長和增殖所必需的，這類基因一旦突變或過量表達而導致相應蛋白質活性過強，就可能引起細胞癌變。相反，抑癌基因表達的蛋白質能抑制細胞的生長和增殖，或者促進細胞凋亡，這類基因一旦突變而導致相應蛋白質活性減弱或失去活性，也可能引起細胞癌變?！驹斘觥緼、原癌基因表達的蛋白質是細胞正常的生長和增殖所必需的，因此原癌基因c-Myc等基因會促進細胞的分裂，A錯誤；B、單基因遺傳病患者使用iPS細胞治療后，只是利用了iPS細胞分化出正常細胞來替代病變細胞，但體內依舊攜帶致病基因，B正確；C、iPS細胞為誘導多能干細胞，能夠通過分裂進行自我更新，也能通過細胞分化形成多種不同類型的細胞，因此同時具備多向分化潛能和自我更新能力，C正確；D、非親緣iPS細胞HLA不同，使用非親緣iPS細胞不能解決干細胞移植中HLA造成的免疫排斥，D正確。故選A。8．科研人員研發出單克隆抗體—肺癌藥物偶聯物，以減少肺癌藥物對正常細胞的傷害，基本流程如圖所示。下列相關敘述正確的是（）A．注射的特定抗原是正常肺細胞和肺癌細胞共有的大分子B．與植物原生質體融合相比，步驟①可用滅活的病毒誘導細胞融合C．步驟③中體外培養雜交瘤細胞時應提供95％O2和5％CO2的氣體環境D．抗體—肺癌藥物偶聯物中的a能特異性結合并殺死腫瘤細胞【答案】B〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳析】A、題意顯示，科研人員研發出單克隆抗體—肺癌藥物偶聯物，以減少肺癌藥物對正常細胞的傷害，據此可推測，該單抗制備過程中需要注射的特定抗原是肺癌細胞特有的大分子，A錯誤；B、步驟①為B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，可用滅活的病毒誘導細胞融，是動物細胞特有的方法，B正確；C.步驟③中體外培養雜交瘤細胞時應提供95％空氣和5％CO2的氣體環境，C錯誤；D、抗體—肺癌藥物偶聯物中b代表肺癌藥物，a代表抗體，所以能殺傷腫瘤細胞的為b，D錯誤。故選B。9．下列關于生物技術操作或應用的敘述錯誤的是（）A．動物細胞培養時常擰松培養瓶瓶蓋，以避免雜菌污染并確保細胞所需的氣體供應B．核移植時常通過顯微操作法去除卵母細胞的核，此操作需刺穿透明帶C．克隆動物和試管動物培育過程中均需獲取卵母細胞和進行胚胎移植D．胚胎分割技術中的胚胎可以來源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率【答案】D〖祥解〗動物細胞核移植技術是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發育成新胚胎，繼而發育成動物個體的技術?！驹斘觥緼、細胞培養時通常采用培養皿或松蓋培養瓶，這與培養箱內的氣體可以進入細胞培養皿或培養瓶中，保證細胞對氣體的需求，同時避免雜菌污染，A正確；B、核移植時常通過顯微操作法去除卵母細胞的核，顯微操作去核法是在刺破透明帶或卵母細胞質膜的情況下，去除卵母細胞核，B正確；C、克隆動物和試管動物培育過程中均需獲取卵母細胞和進行胚胎移植，C正確；D、胚胎分割技術中的胚胎可以來源于核移植，能提高胚胎的利用率，不能提高成活率，D錯誤。故選D。10．下圖為某二倍體哺乳動物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖。下列敘述錯誤的是（）A．哺乳動物卵細胞的發生是在雌性動物的卵巢中開始的B．受精作用促進次級卵母細胞完成減數第二次分裂C．當卵細胞質膜和透明帶之間出現兩個極體、雌雄原核融合，表示受精作用完成D．精子接觸透明帶時，透明帶會發生生理反應從而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗題圖分析：圖中細胞Ⅰ為卵原細胞，細胞Ⅱ為經過復制的初級卵母細胞，細胞Ⅲ可表示次級卵母細胞，細胞Ⅳ是經過受精作用形成的受精卵，受精卵進行的是有絲分裂?！驹斘觥緼、哺乳動物卵細胞的發生是在雌性動物的卵巢中開始的，A正確；B、受精作用促進次級卵母細胞排出第二極體完成減數第二次分裂，進而形成了雌原核，為受精做準備，B正確；C、受精完成的標志是雌雄原核融合，當卵細胞質膜和透明帶之間出現兩個極體、雌雄原核融合，表示受精作用完成，C正確；D、在精子接觸卵細胞膜時，會發生透明帶反應，能防止多個精子入卵，D錯誤。故選D。11．胚胎工程技術的應用為優良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法，如奶?；铙w采卵—體外胚胎生產（OPU-IVP）技術，該技術流程如圖。已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復序列，依據該重復序列設計引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯誤的是（）A．體外受精后，在透明帶和卵細胞膜間觀察到兩個極體說明受精成功B．活體采卵前誘導母牛超數排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C．取滋養層細胞進行SRY-PCR，應選擇結果為陽性的胚胎進行移植D．受體母牛不會發生免疫排斥反應，所以移植前不需要進行免疫檢查【答案】C〖祥解〗體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細胞的采集和培養：①主要方法是用促性腺激素處理，使其超數排卵，然后從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。（2）精子的采集和獲能：①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對精子進行獲能處理：包括培養法和化學誘導法。（3）受精：在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程?！驹斘觥緼、當在卵細胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體或者雌、雄原核時，說明卵子已經完成了受精，A正確；B、活體采卵前誘導母牛超數排卵所注射的激素是促性腺激素只能作用于性腺，所以只能作用于特定細胞，B正確；C、取滋養層細胞進行SRY-PCR，結果為陽性的胚胎說明其含有Y染色體，為雄性，為多獲得可以生產牛奶的奶牛應該選擇結果為陰性的胚胎進行移植，C錯誤；D、受體不會對外來胚胎發生免疫排斥，因此不需要進行免疫檢查，D正確。故選C。12．為了降低免疫排斥反應，研究者借助CRISPR/Cas9技術對移植的豬心臟進行了基因編輯。CRISPR/Cas9系統主要由向導RNA（sgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，sgRNA可引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割、其機制如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．Cas9蛋白作用于磷酸二酯鍵B．sgRNA通過與目標DNA堿基互補配對引導Cas9蛋白到位C．sgRNA會因錯誤結合而出現“脫靶”現象，一般sgRNA序列越短，脫靶率越低D．經過改造的轉基因豬，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供體【答案】C〖祥解〗基因工程中的操作工具及其作用：①“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶），能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。②“分子縫合針”——DNA連接酶，E·coliDNA連接酶，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合黏性末端和平末端。③“分子運輸車”——載體。移植的器官會被人的免疫系統視作抗原加以攻擊，使用免疫抑制劑可以減輕免疫排斥反應。【詳析】A、由于DNA和RNA之間可進行堿基互補配對，因而sgRNA可以特異性識別目標DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯鍵進而可以將目標基因剪切下來，A正確；B、由于DNA和RNA之間可進行堿基互補配對，因而sgRNA可以特異性識別目標DNA分子，進而引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，B正確；C、sgRNA序列越短，DNA分子上與其互補的特定序列會越多，錯誤結合概率越高，C錯誤；D、經過改造的轉基因豬，可以利用核移植，胚胎分割得到更多的可移植器官供體，D正確。故選C。13．如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）A．導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞B．利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的T－DNA整合到植物受體細胞的染色體DNA上C．擴增目的基因時，利用TaqDNA聚合酶從引物a、b的3＇端進行子鏈合成D．若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列【答案】A〖祥解〗將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法，農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上?；虮磉_載體常包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來?！驹斘觥緼、導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞，而是受精卵或早期胚胎細胞，A錯誤；B、農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據農桿菌的這一特點，將目的基因插入Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細胞中染色體的DNA上，B正確；C、引物的延伸方向為3'端，擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成，C正確；D、啟動子是位于DNA上RNA聚合酶的結合部位，mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，D正確。故選A。14．γ-氨基丁酸在醫藥等領域有重要的應用價值。利用L-谷氨酸脫羧酶（GadB）催化L-谷氨酸脫羧是高效生產γ-氨基丁酸的重要途徑之一。研究人員采用如圖方法將釀酒酵母S的L-谷氨酸脫羧酶基因（gadB）導入生產菌株E．coliA，構建了以L-谷氨酸鈉為底物高效生產γ-氨基丁酸的菌株E．coliB。下列敘述正確的是（）A．上圖表明，可以從釀酒酵母S中分離得到目的基因gadBB．E．coliB發酵生產γ-氨基丁酸時，L-谷氨酸鈉的作用是供能C．E．coliA和E．coliB都能高效降解γ-氨基丁酸D．可以用其他酶替代NcoⅠ和KpnⅠ構建重組質?！敬鸢浮緼〖祥解〗基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，標記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是Ca2+轉化法；（4）目的基因的檢測與鑒定：包括分子水平上的檢測和個體水平上的鑒定?！驹斘觥緼、上圖表明，可以從釀酒酵母S中分離得到目的基因gadB，A正確。B、題意顯示，用L-谷氨酸脫羧酶（GadB）催化L-谷氨酸脫羧是高效生產γ-氨基丁酸的重要途徑之一，E．coliB中能表達L-谷氨酸脫羧酶（GadB），因此可用E．coliB發酵生產γ-氨基丁酸，該過程中L-谷氨酸鈉的作用不是供能，B錯誤；C、E．coliA中沒有L-谷氨酸脫羧酶（GadB），因而不能降解L-谷氨酸，而E．coliB中含有該酶的基因，因而能高效降解L-谷氨酸，高效生產γ-氨基丁酸，C錯誤；D、圖中質粒下方括號內備注含多克隆位點，表明質粒上含有多種限制酶的識別序列，但無法判斷能否用其他酶代替，D錯誤。故選A。15．生殖性克隆和治療性克隆既有相同點，又有本質的區別。下列相關敘述正確的是（）A．前者面臨倫理問題，后者也會面臨倫理問題B．生殖性克隆與試管嬰兒都屬于無性生殖C．通過生殖性克隆，可以解決人體移植器官短缺問題D．中國政府的態度是禁止治療性克隆不反對生殖性克隆【答案】A〖祥解〗一、“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構建形成重組胚胎，體外培養到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療；二、“生殖性克隆”就是以產生新個體為目的克隆。即用生殖技術制造完整的克隆人。目的是產生一個獨立生存的個體。與此相對的是研究性克隆或醫學性克隆，指的是產生研究所用的克隆細胞。不產生可獨立生存的個體?！驹斘觥緼、生殖性克隆和治療性克隆都涉及倫理問題，我國政府不允許進行任何生殖性克隆人實驗，也同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題，A正確；B、生殖性克隆和治療性克隆兩種技術都涉及體細胞核移植技術，屬于無性繁殖；試管嬰兒是體外精卵結合屬于有性生殖，所以它們存在本質上的區別，B錯誤；C、生殖性克隆由于涉及到新個體的產生，面臨諸多倫理問題，不能用于解決人體移植器官短缺問題，C錯誤；D、中國政府的態度是禁止生殖性克隆，支持治療性克隆，D錯誤。故選A。二、選擇題：本題共4小題，每小題3分，共12分。在每小題給出的四個選項中，有一項或多項是符合題目要求的。全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16．活性黑5是一種低毒性、難褪色的含氮染料。為從染料廢水堆積池中的污泥獲得分解活性黑5能力強的假單胞桿菌，具體操作流程如下圖。相關敘述錯誤的是（）A．培養基Ⅰ中，除了活性黑5以外，還含有水、瓊脂、葡萄糖、抗生素B．將細菌從培養基Ⅰ轉移到培養基Ⅱ的目的是進一步分離純化細菌C．高濃度的活性黑5是為了誘導假單胞桿菌發生基因突變D．據圖可知，馴化后的假單胞桿菌增強了BVU5基因的復制【答案】ACD〖祥解〗培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質；分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對特殊營養物質和氧氣的要求?！驹斘觥緼、培養基Ⅰ是選擇培養基，除了以活性黑5為唯一氮源外，還需添加的成分是葡萄糖（碳源）、水、瓊脂（凝固劑），抗生素起殺菌作用，不在該培養基中使用，A錯誤；B、培養基Ⅰ接種的是污泥稀釋液，培養基Ⅱ接種的則是培養基Ⅰ中初步篩選出來的菌株，因而將細菌從培養基Ⅰ轉移到培養基Ⅱ的目的是進一步分離純化細菌，B正確；C、實驗目的是從染料廢水堆積池中的污泥獲得分解活性黑5能力強的假單胞桿菌，使用高濃度的活性黑5的目的是不斷篩選出分解黑5能力強的假單胞桿菌，C錯誤；D、根據圖1分析可知，馴化后的假單胞桿菌BVU5基因表達水平升高，即增強了BVU5基因的轉錄和翻譯，D錯誤。故選ACD。17．駱駝蓬分布在干旱和半干旱地區，能防風固沙。駱駝蓬合成的多種生物堿具有抗腫瘤作用。科研人員利用駱駝蓬下胚軸進行育苗和生物堿提取，過程如下圖。下列說法錯誤的是（）A．下胚軸切段需依次用酒精和次氯酸鈉進行消毒處理B．除培養基中植物激素比例不同外，進行過程①③的其他條件相同C．由無毒下胚軸經組織培養獲得的駱駝蓬無毒幼苗可抵抗病毒的侵染D．在①②③過程中利用PEG處理培養物，可以獲得染色體數加倍的駱駝蓬【答案】BCD〖祥解〗植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖、作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產?！驹斘觥緼、為避免雜菌污染，對外植體進行消毒處理的操作為：將流水充分沖洗后的外植體（幼嫩的莖段）用酒精消毒30s，然后立即用無菌水清洗2～3次，再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無菌水清洗2～3次，A正確；B、進行①和③過程的外界培養條件不同，①過程不需要光照，③過程需要光照，B錯誤；C、由無毒下胚軸經組織培養獲得的駱駝蓬無毒幼苗只是不帶病毒，并不是能抵抗病毒的侵染，C錯誤；D、因植物細胞外面的細胞壁阻礙了細胞間的雜交，所以在①②③過程中利用PEG處理培養物，不能獲得染色體數加倍的駱駝蓬，D錯誤。故選BCD。18．雜交瘤細胞在培養過程中會隨機丟失來自B淋巴細胞的染色體。研究者將經已免疫的B淋巴細胞，用EBV（一種病毒顆粒）感染，使其“染色體核型穩定”。下圖表示制備抗A抗原單克隆抗體制備的部分過程，不考慮基因互作和其他變異。下列敘述正確的是（）注：EBV轉化細胞能夠在選擇培養基X中存活，但對烏本苷敏感，骨髓瘤細胞在選擇培養基X中不能存活，對烏本苷不敏感。①～⑤代表相關過程，a～g代表相關細胞。A．①向小鼠多次注射A抗原后從脾臟中獲得大量a細胞B．③用不含烏本苷的選擇培養基X篩選融合的雜交瘤細胞C．⑤過程中通過離心獲得的培養液中可獲得抗A抗原的單克隆抗體D．若未用EBV感染a細胞，通過研究g中細胞可對抗體基因初步定位【答案】ACD〖祥解〗單克隆抗體的制備：注射特定抗原、從小鼠的脾臟中獲得產生特定抗體的B淋巴細胞、將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞誘導融合、用特定選擇培養基篩選出雜交瘤細胞、再利用克隆化培養和抗體檢測獲得足夠多數量的能分泌所需抗體的細胞、將該細胞在體外培養或者注射到小鼠腹腔內增殖、從細胞培養液或小鼠腹水中獲取大量單克隆抗體?！驹斘觥緼、①向小鼠多次注射A抗原獲得能產生相應抗體的a細胞（相應的B淋巴細胞），A正確；B、分析題意，EBV轉化細胞能夠在選擇培養基X中存活，但對烏本苷敏感，骨髓瘤細胞在選擇培養基X中不能存活，對烏本苷不敏感，故③用含烏本苷的選擇培養基X篩選出雜交瘤細胞，B錯誤；C、抗體屬于分泌蛋白，細胞會分泌到細胞外，故⑤過程中通過離心獲得的培養液中可獲得抗A抗原的單克隆抗體，C正確；D、雜交瘤細胞在傳代培養時，來自B淋巴細胞的染色體往往會隨機丟失，從而導致得到的雜交瘤細胞不能產生抗體，故若未用EBV感染a細胞，通過研究g中的細胞可對抗體基因初步定位，D正確。故選ACD。19．將從蘇云金桿菌中獲取的Bt基因轉入棉花細胞內培育轉基因抗蟲棉的過程中，需借助多種分子工具經歷多個操作步驟。實驗人員使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割質粒。下圖表示常用的限制酶識別序列和切割位點以及質粒上的限制酶切割位點。下列說法正確的是（）A．應選用限制酶MunⅠ和XbaⅠ切割Bt基因才能使之與切割后的質粒相連B．啟動子是RNA聚合酶的識別位點，但不是轉錄成的起始位點序列C．從Bt基因擴增到基因表達載體構建完成共需要5種酶發揮催化作用D．可通過PCR技術檢測棉花的染色體DNA中是否插入了Bt基因【答案】BD〖祥解〗限制酶識別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。為避免目的基因和質粒的自身環化和隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質粒。題中根據不同限制酶的識別序列及切割位點，可對限制酶進行選擇?！驹斘觥緼、據圖，EcoRⅠ切割后的黏性末端和MunⅠ切割后的黏性末端是互補的，NheⅠ切割的黏性末端和SpeⅠ切割的黏性末端是互補的，所以應選擇用EcoRⅠ和NheⅠ去切割質粒，用MunⅠ和SpeⅠ切割目的基因，XbaⅠ會切斷目的基因，不能選擇，A錯誤；B、啟動子是RNA聚合酶識別的部位，能驅動基因轉錄出mRNA。但啟動子是非編碼區的DNA序列，該序列不會作為RNA的轉錄模板，轉錄的起始位點是位于啟動子后面的序列，B正確；C、切割質粒需要的酶是EcoRⅠ、NheⅠ，Bt基因擴增需要DNA聚合酶，切割Bt基因需要的酶是MunⅠ、SpeⅠ，將Bt基因和質粒連接需要DNA連接酶，共需要6種酶，C正確；D、檢測棉花的染色體DNA中是否插入了Bt基因，可提取棉花的染色體DNA，用Bt基因的特異性引物進行PCR擴增，如能擴增出Bt基因說明插入成功，反之則失敗，D正確。故選BD。三、非選擇題：本題共5小題，共58分。20．土壤中的磷大多數以難溶性磷酸鹽（如Ca3（PO4）2）的形式存在，不利于植物吸收?？蒲腥藛T嘗試從土壤中篩選將難溶性磷轉化成可溶性磷的高效解磷菌（可形成溶磷圈），主要流程如圖1所示。請回答下列問題：（1）步驟②需充分震蕩20min，主要目的是，步驟③將土壤懸浮液稀釋了倍。（2）步驟④中的培養基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4·7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、瓊脂粉等。按照培養基成分的不同，該培養基為，其中氮源是。步驟④使用的接種工具為。（3）步驟⑤使用接種環挑取步驟④培養基中的菌落（選填圖中的字母），采用的方法在培養基表面接種，目的是。（4）將得到的高效解磷菌接入已滅菌的含難溶磷的液體培養基中培養，每天取樣測定溶磷量和pH變化情況，結果如圖2所示。①結果表明，高效解磷菌分解難溶磷的能力呈現的趨勢。②根據培養液的pH變化情況，推測高效解磷菌的溶磷原理為。（5）請預期該高效解磷菌在農業生產方面可能的應用是（答出1點即可）?！敬鸢浮浚?）使土壤中的微生物充分釋放到水中1000（2）合成培養基（NH4）2SO4涂布器（3）a平板劃線獲得單菌落（4）先上升后下降溶磷菌可能通過產生酸性代謝物分解難溶磷（5）可將其制成微生物菌肥促進植物對磷元素的吸收〖祥解〗培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質；根據物理性質分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質和氧氣的要求?！驹斘觥浚?）土壤中含有多種微生物和有機質，步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中；由圖觀察可知，步驟③中的稀釋梯度分別為10、100、1000倍，步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍。（2）根據培養基的化學成分可以把培養基分成合成培養基和天然培養基等，題干中培養基成分完全清楚，該培養基為合成培養基，其中氮源是（NH4）2SO4，步驟④用涂布器涂布。（3）透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小，該比值越大，溶磷能力越強，故待菌落長好后挑出溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較大的菌落；題圖可知，應該挑選a菌落；步驟⑤是平板劃線操作，該操作的目的是獲得單個菌落。（4）①據圖可知，1~4d溶磷量隨時間延長而逐漸增多，在4~8d溶磷量隨時間延長而逐漸減少，即目的菌分解難溶磷的能力先升高后降低②由圖可知，加入溶磷菌后培養基的pH迅速降低，溶磷量逐漸增多，之后隨著pH回升，溶磷量逐漸減少，據此推測溶磷菌可能通過產生酸性代謝物分解難溶磷。（5）土壤中的磷大部分以難被植物吸收利用的無效態存在，而溶磷菌可將難溶態磷分解為可被植物直接利用的可溶性磷，故可將其制成微生物菌肥促進植物對磷元素的吸收。21．不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞染色質的供體細胞，與未經射線照射的受體細胞融合，所得融合細胞含受體全部遺傳物質及供體部分遺傳物質?？蒲腥藛T用大劑量的X射線處理擬南芥（2n=10）的原生質體，然后誘導其與柴胡（2n=12）的原生質體融合，最終獲得不對稱雜種植株。回答下列問題：（1）為獲得擬南芥和柴胡的原生質體，可將流水沖洗后的外植體用消毒，然后立即用無菌水沖洗，一般再用氯化汞溶液處理5min后，立即用無菌水沖洗。消毒后的外植體用小刀切碎，放入含有酶的緩沖液中，以獲得原生質體。（2）可采用二乙酸熒光素（FAD）法測定原生質體活力，已知FAD本身無熒光，當其進入細胞后可被酯酶分解為無毒、具有熒光的物質，該熒光物質不能透過細胞膜，會留在細胞內發出熒光。據此應選擇的原生質體用于融合。（3）獲得的原生質體可使用等化學方法（寫出一種）誘導融合，融合完成的標志是，在雜種細胞形成雜種植株的過程中，需要避光培養的是階段，誘導生根的過程中，細胞分裂素和生長素的比值（“=1”、“>1”、“<1”）（4）科研人員對獲得的部分植株細胞進行染色體觀察、計數和DNA分子標記鑒定，統計結果如下表所示：后代植株類型染色體數目形態DNA分子標記鑒定甲12，與柴胡染色體相似含雙親DNA片段乙12，與柴胡染色體相似無擬南芥DNA片段丙12，與柴胡染色體相似含雙親DNA片段和新的DNA片段由表可知，后代植株中類型一定不是雜種植株?？蒲腥藛T推測雜種植株的染色體主要由柴胡親本來源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細胞中，而是以DNA片段的方式整合進柴胡的基因組，作出以上推測的依據是?！敬鸢浮浚?）酒精/75%酒精/70%酒精纖維素酶和果膠酶（2）發出熒光（3）PEG/高Ca2+-高pH再生出細胞壁脫分化<1（4）乙甲、丙類型植株細胞的染色體與柴胡細胞中的染色體數目相同、形態相似，且含有雙親的DNA片段〖祥解〗植物原生質體培養技術：首先用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞的細胞壁得到原生質體，然后向原生質體中導入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段，轉移至合適的環境中，在高爾基體的作用下再生細胞壁、形成愈傷組織、再分化生根生芽，最終發育成完整的植株。【詳析】（1）外植體先用體積分數為70%的酒精消毒30s，無菌水沖洗后，再用質量分數為5%左右的次氯酸鈉溶液處理30min。消毒后的外植體用小刀切碎，加入含有纖維素酶和果膠酶的酶溶液，水浴加熱一段時間后，過濾、離心即可獲得原生質體。（2）根據題干信息可知，綠色熒光的強度與原生質體的活力呈正相關，因此應選擇發熒光的原生質體用于融合。（3）誘導原生質體融合的化學方法有聚乙二醇融合法和高Ca2+-高pH融合法。原生質體融合完成的標志是融合細胞再生出新的細胞壁。在雜種細胞形成雜種植株的過程中，需要避光培養的是再生出細胞壁脫分化階段，細胞分裂素和生長素的比值<1，誘導生根。（4）根據表格信息可知，植株后代乙無擬南芥DNA片段，說明其不是雜種植株。甲、丙類型植株與柴胡細胞中的染色體數目相同、形態相似，且含有雙親的DNA片段，說明甲、丙植株屬于雜種植株，它們的染色體主要由柴胡親本來源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細胞中，而是以遺傳物質重組的方式整合進柴胡的基因組。22．牛支原體是嚴重危害牛養殖業的一種病原體，它能引起肺炎、關節炎等多種疾病。VspX蛋白是牛支原體表面的一種脂蛋白，在牛支原體感染宿主細胞時起黏附作用。科研人員制備抗VspX單克隆抗體，進行相關研究。請回答下列問題：（1）以VspX蛋白為抗原制備單克隆抗體，需用純化的VspX蛋白對小鼠進行多次免疫，其目的是刺激機體產生更多的，將該細胞與骨髓瘤細胞融合，在HAT培養基上，細胞不能生長，從而篩選獲得雜交瘤細胞。（2）雜交瘤細胞（填“能”或“不能”）產生專一抗體，所產生的抗體（填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。（3）將上述篩選出的雜交瘤細胞培養、稀釋后接種到96孔培養板中，每一個孔中盡量只接種個雜交瘤細胞以實現，然后通過ELISA法（又稱酶聯免疫吸附試驗法）檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體，可與結合的培養孔為陽性孔。將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內增殖，最終從中獲取大量抗VspX抗體。（4）將抗VspX抗體與不同抗原進行雜交，免疫印跡分析如圖所示，實驗結果顯示，表明抗VspX抗體具有?！敬鸢浮浚?）分泌抗VspX抗體的B淋巴細胞同種細胞融合的細胞和未融合的（2）能不一定（3）1克隆化培養VspX蛋白小鼠腹水（4）抗VspX單克隆抗體不能與3、4結合特異性〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內，使其發生免疫，小鼠體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合。單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細胞，B為骨髓瘤細胞），不需要A、B、AA、BB型細胞；第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞。【詳析】（1）依據題干信息，制備以VspX蛋白為抗原制備單克隆抗體，首先需要用純化的VspX蛋白對小鼠進行多次免疫，其目的是為了刺激機體產生更多的分泌抗VspX抗體的B淋巴細胞（漿細胞），然后利用細胞融合技術，將該細胞與骨髓瘤細胞融合，在HAT培養基上，淘汰掉同種細胞融合的細胞和未融合的B細胞和瘤細胞，從而篩選獲得雜交瘤細胞。（2）一種漿細胞只能產生一種抗體，故雜交瘤細胞能產生專一抗體，篩選出來的雜交瘤細胞有多種，不一定能產生抗VspX蛋白的抗體，故雜交瘤細胞所產生的抗體不一定能抗VspX蛋白。（3）將篩選出的雜交瘤細胞培養、稀釋后接種到96孔培養板中，每一個孔中盡量只接種1個雜交瘤細胞以實現克隆化培養，然后通過ELISA法檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體，可與VspX蛋白結合的培養孔為陽性孔。然后將抗原-抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞注射小鼠腹腔內增殖，最終從小鼠的腹水中獲取抗VspX抗體。（4）據圖可知，抗VspX抗體不能與3、4結合，也說明了抗VspX抗體具有特異性。23．近年來，我國科研工作者在國際上首次利用體細胞成功創建克隆獼猴中中、華華和夢夢。體細胞克隆猴的誕生，是人類認識克隆技術，研究細胞功能和治療性克隆的里程碑式研究結果。同時，也是人類干細胞研究方興未艾事業的一個開始?？寺∩鲜霁J猴的操作流程如圖1。與此同時，我國科研人員利用大鼠、小鼠兩個遠親物種創造出世界首例異源二倍體胚胎干細胞（AdESCs），操作流程如圖2。請回答下列問題：（1）利用酶處理一只流產獼猴胎兒的皮膚，獲取分散的成纖維細胞，制備細胞懸液。然后放入氣體條件是的恒溫箱中培養。（2）請你推測圖1中注入的神秘濃度比的藥物的作用是，注入細胞的方法是。（3）通常情況下，卵母細胞要發育到減數第次分裂中期時才適合核移植，早期胚胎要發育到時才適合進行胚胎移植。（4）我們大膽推測，通過體細胞克隆猴的研究，將來會找到讓高度分化的人體細胞逆向生成胚胎干細胞的方法，進而誘導克隆出用于替換人體相應病變的結構。（5）圖2過程涉及的現代生物技術有動物細胞培養、早期胚胎培養和不用大鼠和小鼠直接交配制備異源二倍體胚胎干細胞的原因是二者之間存在。【答案】（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）95%空氣和5%的CO2（2）激活重構胚，使其完成細胞分裂和發育進程顯微注射法（3）二/Ⅱ桑葚胚或囊胚（4）相應器官（5）動物細胞融合生殖隔離〖祥解〗動物細胞培養的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。【詳析】（1）用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理組織可分散成單個細胞，故利用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理一只流產獼猴胎兒的皮膚，獲取分散的成纖維細胞，制備細胞懸液。動物細胞培養過程中，培養箱的氣體條件是95%空氣和5%的CO2。（2）結合圖可知，注入的神秘濃度比的藥物的作用是激活重構胚，使其完成細胞分裂和發育進程。圖1中的重組細胞是動物細胞，將神秘濃度比的藥物注入細胞的方法是顯微注射法。（3）卵母細胞培養到減數第二次分裂中期時，細胞已經成熟，具備受精能力，故卵母細胞要發育到減數第二次分裂中期時才適合核移植，早期胚胎要發育到桑葚胚或囊胚時才適合進行胚胎移植。（4）通過體細胞克隆猴的研究，我們將來會找到方法，讓高度分化的人體細胞逆向生成胚胎干細胞，并定向誘導胚胎干細胞克隆出相應器官用于替換人體相應病變結構。（5）圖2過程涉及的現代生物技術有動物細胞培養、早期胚胎培養和動物細胞融合（孤雌單倍體胚胎干細胞和孤雄單倍體胚胎干細胞融合）。由題干可知，大鼠和小鼠是兩個遠親物種，二者之間存在生殖隔離，自然狀態下無法完成受精作用，或者即便能完成也不能發育，因此不用大鼠和小鼠直接交配制備異源二倍體胚胎干細胞。24．A蛋白是某種激素合成的關鍵酶。為鑒定該激素合成的部位及生理作用，科研團隊利用無縫克隆技術將A蛋白結合蛋白基因（P基因）與葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）融合，構建A蛋白檢測探針，通過農桿菌轉化法導入擬南芥進行實驗。相關原理、過程及質粒的結構如下圖所示。請分析回答：（1）無縫克隆原理圖中，過程①中T5核酸外切酶沿的方向水解DNA，其目的是形成。過程③所需的酶有。（2）與傳統的酶切再連法相比，無縫克隆技術可實現多個片段的連接，且操作時間短、成功率高。NEB官方的無縫克隆線上設計軟件強制輸入片段的長度必須大于75bp，并提示最好不低于110bp。請推測無縫克隆技術不適合連接小于50bp小片段的原因：（3）圖中利用無縫克隆技術構建GUS-P融合基因的關鍵是引物F1與互補。（4）圖中利用雙酶切法將融合基因插入Ti質粒，應選用的限制酶為。擴增GUS-P融合基因所需的引物R1序列（5'→3'）的設計依據為（填序號：①同源序列②限制酶的識別序列③P基因的部分序列④GUS基因的部分序列）。據圖分析，引物R1和F2應分別為下列引物。①5'-TAAGTTGTCT……-3'②5'-CTTGGATGAT……-3'③5'-TCTGTTGAAT……-3'④5'-ATTCAACAGA……-3'（5）利用農桿菌轉化法將目的基因導入擬南芥細胞后，進行植物組培。用對組培苗進行篩選。已知葡萄糖苷酸酶可以水解X-Gluc呈藍色，將轉基因擬南芥置于不同培養液中培養一段時間，然后分離不同部位的組織分別加入X-Gluc進行鑒定，結果如下表所示：部位根莖葉完全培養液藍色淺藍淺藍缺磷培養液深藍藍色淺藍根據上表實驗結果分析，該激素最主要的合成部位是，該激素的生理作用是?！敬鸢浮浚?）5'→3'黏性末端DNA聚合酶和DNA連接酶（2）小片段的DNA黏性末端之間容易隨機結合，導致連接效率低且錯誤率高（3）R2引物5'端序列（4）BclI和SmaI②③②③（5）兩根促進植物對磷元素的吸收〖祥解〗基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達?！驹斘觥浚?）由圖可知，無縫克隆時，過程①中T5核酸外切酶沿5'→3'的方向水解DNA，以形成黏性末端。過程③缺口處DNA鏈的補齊，可以看作DNA分子的復制過程，所需的酶有DNA聚合酶（DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到子鏈3′-OH末端）和DNA連接酶（將兩個DNA片段進行連接）。（2）無縫克隆技術不適合連接小于50bp的小片段，原因可能是小片段的DNA黏性末端之間容易隨機結合，導致連接效率低且錯誤率高。此外，小片段的DNA在操作過程中也更容易丟失或損壞，進一步降低了連接的成功率。因此，NEB官方的無縫克隆線上設計軟件會強制輸入片段的長度必須大于75bp，并提示最好不低于110bp，以確保連接的效率和準確性。（3）DNA的兩條鏈是反向平行的，用無縫克隆技術構建GUS-P融合基因的關鍵是引物F13'端序列與R2引物5'端序列互補。（4）利用雙酶切法將GUS-P融合基因插入Ti質粒的T-DNA區，如果使用BamHI，會破壞抗性基因Tet'和抗性基因Amp，故選擇BclI和SmaI。擴增GUS?P融合基因所需的引物R1序列的設計需要依據P基因的部分序列和限制酶的識別序列，故選②③。根據融合基因的放大圖可知，擴增時以DNA的兩條鏈分別作模板，擴增融合基因所需的引物R1和F2應選用下列引物組合為3'端序列可以與③5'-…TCTGTTGAAT-3'配對，5'端序列的互補鏈可以與②5'-…CTTGGATGAT-3'配對，因此選用的引物組合為②③。（5）利用農桿菌轉化法將融合基因導入農桿菌、擬南芥細胞的過程中，需要篩選兩次，這兩次篩選分別是先篩選出能在含四環素培養基上生長而不能在含氨芐青霉素培養基上生長的農桿菌，再用含草甘膦的培養基篩選出導入融合基因的擬南芥細胞。葡萄糖苷酸酶可以水解X-Gluc呈藍色，根據表格可知，在完全培養液中，只有根呈現藍色，說明該激素最主要的合成部位是根，與完全培養液相比，在缺磷培養液中，根的顏色變為深藍，而在含磷的完全培養液中出現藍色，說明該激素的生理作用是促進植物對磷元素的吸收，促進葡萄糖苷酸酶合成，水解X-Gluc呈藍色。2024-2025學年高二生物下學期期中模擬卷（江蘇專用）（考試時間：75分鐘試卷滿分：100分）注意事項：1．本試卷分第Ⅰ卷（選擇題）和第Ⅱ卷（非選擇題）兩部分。答卷前，考生務必將自己的姓名、準考證號填寫在答題卡上。2．回答第Ⅰ卷時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑。如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案標號。寫在本試卷上無效。3．回答第Ⅱ卷時，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。4．測試范圍：選必三全部5．難度系數：0.76．考試結束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個選項中，只有一項符合題目要求。1．研究者用酸筍開發具有降低膽固醇功能的益生菌。先將酸筍發酵液接種到含有CaCO3的固體培養基上，篩選出乳酸菌，然后將乳酸菌接種到含有膽固醇的培養液中，篩選出能夠降解膽固醇的乳酸菌。下列敘述正確的是（）A．酸筍發酵過程中需要定期排氣以確保發酵罐內壓強穩定B．與酸筍風味形成相關的乳酸菌為厭氧型，所以不會分布在空氣中C．培養基上生長的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標菌落D．膽固醇既可為乳酸菌的生長提供氮源，也可參與動物細胞膜的組成【答案】C〖祥解〗酸筍制作的原理是：乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸?！驹斘觥緼、乳酸菌是厭氧菌，發酵過程中不產生氣體，不需要定期排氣，A錯誤；B、在自然界中，乳酸菌分布廣泛，空氣、土壤、植物體表、人和動物的腸道內都分布有乳酸菌，B錯誤；C、乳酸菌發酵產生的乳酸能與CaCO3發生反應，使CaCO3分解成可溶性物質乳酸鈣和CO2，導致菌落周圍出現溶鈣圈，故溶鈣圈直徑與菌落直徑的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培養基上生長的菌落直徑與溶鈣圈直徑比值小的菌落即為目標菌落，C正確；D、膽固醇屬于脂質，含有C、H、O元素，主要為微生物的生長提供碳源，膽固醇是構成動物細胞膜的重要成分，D錯誤。故選C。2．亞硝酸細菌為一類可將NH3氧化為HNO2的化能自養細菌，因其常常和其他細菌伴生在一起難以純化。下圖為從某污水廠污泥中分離、篩選和鑒定亞硝酸細菌的示意圖，相關敘述錯誤的是（）A．過程①接種9個平板，目的是在合適的濃度下篩選出相應的單菌落B．過程②挑取單個菌落接種到斜面上保存，并在試管底部做好標記C．過程③進行平板劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面D．與富集培養基相比，篩選亞硝酸細菌的培養基中應不含有機碳源【答案】B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：通過接種環在固體培養基表面連續劃線操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基的表面。經過數次劃線后培養，可以分離得到單菌落，這種接種方法稱為平板劃線法。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、過程①接種9個平板，目的是在合適的濃度下篩選出相應的單菌落，同一濃度下接種了3個平板的目的是排除偶然因素的影響，實現平行重復，A正確；B、過程②挑取單個菌落接種到斜面上保存，并在試管壁上做好標記，B錯誤；C、過程③進行平板劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面，進而可以獲得單個菌落，C正確；D、亞硝酸細菌為一類可將NH3氧化為HNO2的化能自養細菌，因此，與富集培養基相比，篩選亞硝酸細菌的培養基中應不含有機碳源，D正確。故選B。3．某釀酒廠以無核黃皮果為輔料研制出黃皮甜米酒，該酒具有消食、潤肺和清熱解毒等功效。制作黃皮甜米酒的工藝流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A．對糯米進行蒸煮可利用高溫殺死雜菌，并有利于細胞破裂釋放糖類用于發酵B．甜酒曲中的根霉能產生糖化酶，將淀粉依次水解為蔗糖、葡萄糖C．酵母菌的繁殖在主發酵階段完成，代謝物的生成在后發酵階段完成D．黃皮甜米酒口感好、酒精度低，適宜長期大量飲用【答案】A〖祥解〗發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發酵階段完成。主發酵結束后，發酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環境下儲存一段時間進行后發酵。【詳析】A、對糯米進行蒸煮的主要目的是使淀粉顆粒吸水膨脹并糊化，便于淀粉酶的作用，同時也可利用高溫能殺死原料中的雜菌，并有利于細胞破裂釋放糖類用于發酵，A正確；B、甜酒曲中的根霉能產生糖化酶，將淀粉依次水解為麥芽糖、葡萄糖，B錯誤；C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發酵階段完成，C錯誤；D、黃皮甜米酒雖然口感好、酒精度低，但不適宜長期大量飲用，D錯誤。故選A。4．南通某學校生物研究小組以蝴蝶蘭為材料開展了植物組織培養試驗，過程如下圖。相關敘述錯誤的是（）A．取帶芽花梗作外植體，是因為芽可產生生長素而更易成活B．花梗插入培養基前要用無水酒精和次氯酸鈉進行消毒處理C．過程c、d和e使用的培養基中所含的物質比例存在差異D．過程f“煉苗”目的在于提高組培苗對外界環境條件的適應性【答案】B〖祥解〗組織培養的過程：（1）建立無菌體系，即外植體及培養基的消毒、接種，獲得愈傷組織或器官。（2）進行增殖，不斷分化產生新的植株，或直接產生不定芽及胚狀體，也可以根據需要反復進行繼代培養，以達到大量繁殖的目的。（3）將植株轉移進行生根培養，可以轉入生根培養基，也可直接進行扦插生根。（4）試管苗過渡，即試管苗出瓶后進行一定時間對外界環境的適應過程。激素比值的變化，對生根還是生芽是不同的。當細胞分裂素大于生長素時，促進芽的分化；當細胞分裂素小于生長素時，促進根的分化?！驹斘觥緼、芽屬于幼嫩部位，能產生生長素，因此取帶芽花梗作外植體更易成活，A正確；B、花梗插入培養基前要用體積分數為70%的酒精和體積分數為5%左右的次氯酸鈉進行消毒處理，B錯誤；C、過程c、d和e屬于脫分化、再分化和幼苗的生長發育，使用的培養基中所含的物質如激素比例存在差異，C正確；D、過程f“煉苗”是由于試管苗長得弱小，光合能力弱，適應性差，因此需要移栽到野外使其逐漸適應室外環境，提高組培苗對外界環境條件的適應性，D正確。故選B。5．為培育“高產耐鹽堿”的水稻植株，某研究小組利用植物體細胞雜交技術設計了如下實驗流程圖。已知耐鹽、高產性狀分別受細胞質基因和細胞核基因控制，相關敘述錯誤的是（）A．①過程可通過觀察原生質體的結構與顏色來判斷其融合情況B．②過程體現了植物細胞全能性，它是植物體細胞雜交的理論基礎C．失活處理后，原生質體A2的細胞質和原生質體B2的細胞核失活D．去壁處理需用到纖維素酶和果膠酶混合酶液，酶液滲透壓可略高于細胞液【答案】C〖祥解〗植物體細胞雜交技術：（1）植物體細胞雜交技術：是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。（2）過程：①誘導融合的方法：物理法；化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑；②細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成；③植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束；④雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質。（3）意義：克服了遠緣雜交不親和的障礙?！驹斘觥緼、由于葉綠體有顏色且有特定結構，①過程的細胞融合中可通過觀察原生質體的結構與顏色來判斷其融合情況，A正確；B、②過程是將雜種細胞經組織培養得到再生植株的過程，植物的組織培養體現了植物細胞全能性，它是植物體細胞雜交的理論基礎之一，B正確；C、由于耐鹽、高產性狀分別受細胞質基因和細胞核基因控制，在促使原生質體融合前，需對原生質體進行失活處理，分別使原生質體A2的細胞核失活和原生質體B2的細胞質失活，C錯誤；D、用纖維素酶和果膠酶混合液酶解細胞壁獲取原生質體時應置于較高滲透壓溶液中（或等滲溶液）進行，可防止原生質體吸水脹破，D正確。故選C。6．下列有關植物組織培養技術的敘述，錯誤的是（）A．利用植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得有用的突變體B．經脫分化和再分化過程形成的幼芽細胞喪失分裂分化能力C．利用莖尖、花粉進行組織培養可分別獲得脫毒苗和單倍體植株D．培養基中生長素和細胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向【答案】B〖祥解〗植物組織培養過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發育成植株。植物組織培養技術有廣泛的應用：植物繁殖的新途徑（快繁技術、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產?！驹斘觥緼、愈傷組織細胞處于分生狀態，易受外界環境因素影響，因此利用植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得有用的突變體，A正確；B、經脫分化和再分化過程形成的幼芽細胞具有細胞全能性，在一定條件下可培育成植株個體，B錯誤；C、莖尖部位的病毒較少，花粉是植物的雄配子，染色體數目減半，故利用莖尖、花粉進行組織培養可分別獲得脫毒苗和單倍體植株，C正確；D、決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要，如培養基中生長素和細胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向，D正確。故選B。7．我國科學家使用小分子化合物處理小鼠體細胞，成功獲得誘導多能干細胞（iPS細胞），降低了通過導入原癌基因c-Myc等基因制備iPS細胞的潛在成瘤風險。下列敘述錯誤的是（）A．iPS細胞的潛在成瘤風險來自于c-Myc基因抑制了細胞的分裂分化B．單基因遺傳病患者使用iPS細胞治療后，體內仍可能攜帶致病基因C．人工制備的iPS細胞同時具備多方向分化的潛能和自我更新的能力D．使用非親緣iPS細胞不能解決干細胞移植中HLA造成的免疫排斥【答案】A〖祥解〗一、誘導多能干細胞（iPS細胞）能夠通過分裂進行自我更新，也能通過細胞分化形成多種不同類型的細胞。二、原癌基因表達的蛋白質是細胞正常的生長和增殖所必需的，這類基因一旦突變或過量表達而導致相應蛋白質活性過強，就可能引起細胞癌變。相反，抑癌基因表達的蛋白質能抑制細胞的生長和增殖，或者促進細胞凋亡，這類基因一旦突變而導致相應蛋白質活性減弱或失去活性，也可能引起細胞癌變?！驹斘觥緼、原癌基因表達的蛋白質是細胞正常的生長和增殖所必需的，因此原癌基因c-Myc等基因會促進細胞的分裂，A錯誤；B、單基因遺傳病患者使用iPS細胞治療后，只是利用了iPS細胞分化出正常細胞來替代病變細胞，但體內依舊攜帶致病基因，B正確；C、iPS細胞為誘導多能干細胞，能夠通過分裂進行自我更新，也能通過細胞分化形成多種不同類型的細胞，因此同時具備多向分化潛能和自我更新能力，C正確；D、非親緣iPS細胞HLA不同，使用非親緣iPS細胞不能解決干細胞移植中HLA造成的免疫排斥，D正確。故選A。8．科研人員研發出單克隆抗體—肺癌藥物偶聯物，以減少肺癌藥物對正常細胞的傷害，基本流程如圖所示。下列相關敘述正確的是（）A．注射的特定抗原是正常肺細胞和肺癌細胞共有的大分子B．與植物原生質體融合相比，步驟①可用滅活的病毒誘導細胞融合C．步驟③中體外培養雜交瘤細胞時應提供95％O2和5％CO2的氣體環境D．抗體—肺癌藥物偶聯物中的a能特異性結合并殺死腫瘤細胞【答案】B〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳析】A、題意顯示，科研人員研發出單克隆抗體—肺癌藥物偶聯物，以減少肺癌藥物對正常細胞的傷害，據此可推測，該單抗制備過程中需要注射的特定抗原是肺癌細胞特有的大分子，A錯誤；B、步驟①為B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，可用滅活的病毒誘導細胞融，是動物細胞特有的方法，B正確；C.步驟③中體外培養雜交瘤細胞時應提供95％空氣和5％CO2的氣體環境，C錯誤；D、抗體—肺癌藥物偶聯物中b代表肺癌藥物，a代表抗體，所以能殺傷腫瘤細胞的為b，D錯誤。故選B。9．下列關于生物技術操作或應用的敘述錯誤的是（）A．動物細胞培養時常擰松培養瓶瓶蓋，以避免雜菌污染并確保細胞所需的氣體供應B．核移植時常通過顯微操作法去除卵母細胞的核，此操作需刺穿透明帶C．克隆動物和試管動物培育過程中均需獲取卵母細胞和進行胚胎移植D．胚胎分割技術中的胚胎可以來源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率【答案】D〖祥解〗動物細胞核移植技術是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發育成新胚胎，繼而發育成動物個體的技術。【詳析】A、細胞培養時通常采用培養皿或松蓋培養瓶，這與培養箱內的氣體可以進入細胞培養皿或培養瓶中，保證細胞對氣體的需求，同時避免雜菌污染，A正確；B、核移植時常通過顯微操作法去除卵母細胞的核，顯微操作去核法是在刺破透明帶或卵母細胞質膜的情況下，去除卵母細胞核，B正確；C、克隆動物和試管動物培育過程中均需獲取卵母細胞和進行胚胎移植，C正確；D、胚胎分割技術中的胚胎可以來源于核移植，能提高胚胎的利用率，不能提高成活率，D錯誤。故選D。10．下圖為某二倍體哺乳動物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖。下列敘述錯誤的是（）A．哺乳動物卵細胞的發生是在雌性動物的卵巢中開始的B．受精作用促進次級卵母細胞完成減數第二次分裂C．當卵細胞質膜和透明帶之間出現兩個極體、雌雄原核融合，表示受精作用完成D．精子接觸透明帶時，透明帶會發生生理反應從而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗題圖分析：圖中細胞Ⅰ為卵原細胞，細胞Ⅱ為經過復制的初級卵母細胞，細胞Ⅲ可表示次級卵母細胞，細胞Ⅳ是經過受精作用形成的受精卵，受精卵進行的是有絲分裂?！驹斘觥緼、哺乳動物卵細胞的發生是在雌性動物的卵巢中開始的，A正確；B、受精作用促進次級卵母細胞排出第二極體完成減數第二次分裂，進而形成了雌原核，為受精做準備，B正確；C、受精完成的標志是雌雄原核融合，當卵細胞質膜和透明帶之間出現兩個極體、雌雄原核融合，表示受精作用完成，C正確；D、在精子接觸卵細胞膜時，會發生透明帶反應，能防止多個精子入卵，D錯誤。故選D。11．胚胎工程技術的應用為優良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法，如奶牛活體采卵—體外胚胎生產（OPU-IVP）技術，該技術流程如圖。已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復序列，依據該重復序列設計引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯誤的是（）A．體外受精后，在透明帶和卵細胞膜間觀察到兩個極體說明受精成功B．活體采卵前誘導母牛超數排卵所注射的激素只能作用于特定細胞C．取滋養層細胞進行SRY-PCR，應選擇結果為陽性的胚胎進行移植D．受體母牛不會發生免疫排斥反應，所以移植前不需要進行免疫檢查【答案】C〖祥解〗體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細胞的采集和培養：①主要方法是用促性腺激素處理，使其超數排卵，然后從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。（2）精子的采集和獲能：①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對精子進行獲能處理：包括培養法和化學誘導法。（3）受精：在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。【詳析】A、當在卵細胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體或者雌、雄原核時，說明卵子已經完成了受精，A正確；B、活體采卵前誘導母牛超數排卵所注射的激素是促性腺激素只能作用于性腺，所以只能作用于特定細胞，B正確；C、取滋養層細胞進行SRY-PCR，結果為陽性的胚胎說明其含有Y染色體，為雄性，為多獲得可以生產牛奶的奶牛應該選擇結果為陰性的胚胎進行移植，C錯誤；D、受體不會對外來胚胎發生免疫排斥，因此不需要進行免疫檢查，D正確。故選C。12．為了降低免疫排斥反應，研究者借助CRISPR/Cas9技術對移植的豬心臟進行了基因編輯。CRISPR/Cas9系統主要由向導RNA（sgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，sgRNA可引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割、其機制如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．Cas9蛋白作用于磷酸二酯鍵B．sgRNA通過與目標DNA堿基互補配對引導Cas9蛋白到位C．sgRNA會因錯誤結合而出現“脫靶”現象，一般sgRNA序列越短，脫靶率越低D．經過改造的轉基因豬，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供體【答案】C〖祥解〗基因工程中的操作工具及其作用：①“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶），能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。②“分子縫合針”——DNA連接酶，E·coliDNA連接酶，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合黏性末端和平末端。③“分子運輸車”——載體。移植的器官會被人的免疫系統視作抗原加以攻擊，使用免疫抑制劑可以減輕免疫排斥反應?！驹斘觥緼、由于DNA和RNA之間可進行堿基互補配對，因而sgRNA可以特異性識別目標DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯鍵進而可以將目標基因剪切下來，A正確；B、由于DNA和RNA之間可進行堿基互補配對，因而sgRNA可以特異性識別目標DNA分子，進而引導Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，B正確；C、sgRNA序列越短，DNA分子上與其互補的特定序列會越多，錯誤結合概率越高，C錯誤；D、經過改造的轉基因豬，可以利用核移植，胚胎分割得到更多的可移植器官供體，D正確。故選C。13．如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）A．導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞B．利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的T－DNA整合到植物受體細胞的染色體DNA上C．擴增目的基因時，利用TaqDNA聚合酶從引物a、b的3＇端進行子鏈合成D．若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列【答案】A〖祥解〗將目的基因導入植物細胞常用農桿菌轉化法，農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上。基因表達載體常包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來?！驹斘觥緼、導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是