土壤和沉積物氨基甲酸酯類農(nóng)藥的測定高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法目 次前言 ii適用范圍 1規(guī)范性引用文件 1方法原理 1干擾和消除 1試劑和材料 2儀器和設(shè)備 2樣品 3分析步驟 4結(jié)果計(jì)算與表示 7精密度和準(zhǔn)確度 9質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 10廢物處理 10附錄A（規(guī)范性附錄）方法檢出限和測定下限 11附錄B（資料性附錄）方法精密度和準(zhǔn)確度 12i土壤和沉積物氨基甲酸酯類農(nóng)藥的測定高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜法適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定土壤和沉積物中15-三重四極桿質(zhì)譜法。15種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的測定。101.01.0μl種氨基甲酸酯類農(nóng)1～2μg/kg4～8μg/kgA。規(guī)范性引用文件GB17378.3 3部分：樣品采集、貯存與運(yùn)輸GB17378.5 5部分：沉積物分析HJ494 水質(zhì)采樣技術(shù)指導(dǎo)HJ613 土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法HJ783 土壤和沉積物有機(jī)物的提取加壓流體萃取法HJ/T166 土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范方法原理干擾和消除1試劑和材料甲醇（CH3OH）：液相色譜級。二氯甲烷（CH2Cl2）：液相色譜級。乙酸銨（CH3COONH4）：優(yōu)級純。（NaO。馬弗爐中450℃灼燒4h，稍冷卻后置于干燥器中備用。甲醇-二氯甲烷混合溶劑：1+2。用甲醇（5.1）和二氯甲烷（5.2）按1：2體積比混合。甲醇-二氯甲烷混合溶劑：1+9。用甲醇（5.1）和二氯甲烷（5.2）1：9體積比混合。乙酸銨溶液：c（CH3COONH4）=5mmol/L。取192.5g乙酸銨5.3500ml。甲醇-乙酸銨混合溶液：2+3。用甲醇（5.1）和乙酸銨溶液（5.7）按2：3體積比混合。氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=100mg/L。直接購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)準(zhǔn)溶液證書要求保存。氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ=10mg/L。500μl氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.9）5ml容量瓶中，用甲醇（5.1）定容，混勻，置于-186個月。內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液：ρ=100mg/L。直接購買市售甲萘威-D7和滅多威-D3有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，按標(biāo)準(zhǔn)溶液證書要求保存。內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)使用液：ρ=10mg/L。取500μl內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液（5.11）于5ml容量瓶中，用甲醇（5.1）定容，混勻，置于-18℃冰箱，密封、避光保存，保存期為6個月。固相萃取柱：石墨化炭黑/N-丙基乙二胺復(fù)合填料萃取柱（500mg/6ml）或其它性能相近的固相萃取柱。5.14硅藻土：0.6～0.9mm（30～20目。5.15石英砂：150～830μm（200～100目。馬弗爐中450℃灼燒4h，稍冷卻后置于潔凈干燥器中備用。5.16濾膜：0.22μm聚四氟乙烯或其它等效材質(zhì)。5.17氮?dú)猓杭兌取?9.99%。5.18氬氣：純度≥99.99%。儀器和設(shè)備高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜儀。2質(zhì)譜儀：三重四極桿質(zhì)譜，配有電噴霧離子源，具備多反應(yīng)監(jiān)測功能。色譜儀：具備梯度洗脫功能。1.750mm，2.1mm。也可使用滿足分析要求的其它性能相近的色譜柱。冷凍干燥儀。（50ml以下萃取池濃縮裝置：氮吹濃縮儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或其他性能相當(dāng)?shù)脑O(shè)備。0.01g。一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。樣品樣品采集和保存按照HJ/T166HJ494的相關(guān)要求采集水體沉積GB17378.3的相關(guān)要求采集海洋沉積物樣品。樣品采集后，0～4℃密封、避光保存，7d內(nèi)完成萃取。樣品的制備10g（0.01g）的樣品。5.15.4提取管中。沉積物樣品一份用于測定含水率；另一份用于提取，提取方法參照土壤樣品。水分的測定按照HJ613測定土壤樣品干物質(zhì)含量，按照GB17378.5測定沉積物樣品含水率。試樣的制備提取加壓流體萃取采用甲醇-二氯甲烷混合溶劑（5.5）提取樣品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥，壓力10.34Mpa，80oC5560s，循環(huán)萃取3次。或按照HJ783進(jìn)行萃取條件的設(shè)置和優(yōu)化。索氏提取將濾筒置于索氏提取器回流管中，在圓底溶劑瓶中加入200ml甲醇-二氯甲烷混合溶劑35.，提取12h～6次h注：若經(jīng)過驗(yàn)證也可使用其它等效提取方法。濃縮用濃縮裝置（6.4）將萃取液（7.4.1）濃縮至近1.0ml，待凈化。凈化用5.0l甲醇5.6以2mmin5.15.0ml甲醇-二氯甲烷混合溶劑（5.6）洗脫萃取柱，收集洗脫液于刻度管中。注：使用不同批次萃取柱凈化樣品時，需通過實(shí)驗(yàn)確定洗脫溶劑用量。凈化后濃縮（7.4.3）30oC20μl內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)使用（5.1-（5.定容至1.0ml（5.1，待測。處理好的試樣應(yīng)于-18℃以下冰箱冷凍保存，在30d完成分析。7.5空白試樣的制備用石英砂（5.15）替代實(shí)際樣品，按照與試樣制備（7.4）相同的步驟制備空白試樣。分析步驟參考測量條件色譜條件A甲醇（5.，流動相B571ml/min；進(jìn)樣體積：1.0μl；柱溫：45oC。表1 梯度洗脫程序時間（min）流動相A（%）流動相B（%）040605.09915.59917.04060質(zhì)譜條件電噴霧源，正離子模式，毛細(xì)管電壓：3000V，脫溶劑氣溫度：350oC，源溫：110oC，脫溶劑氣流量：500ml/min，錐孔氣流量：50ml/min。檢測方式為多反應(yīng)監(jiān)測，具體條件見4表2。注：對于不同質(zhì)譜儀器，參數(shù)可能存在差異，測定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳。表2 目標(biāo)物多反應(yīng)監(jiān)測條件編號化合物監(jiān)測離子對（m/z）錐孔電壓（V）碰撞能量（V）1殺線威237.1>71.9*1210237.1>90.112122滅多威163.4>88.4*159163.4>106.015103二氧威224.4>123.4*2515224.4>167.125134涕滅威208.5>116.3*1010208.5>88.91085惡蟲威224.4>167.4*189224.1>109.118106克百威222.4>165.4*2515222.4>123.025147殘殺威210.5>111.3*2013210.5>168.120128甲萘威202.4>145.2*2018202.4>127.120169乙硫苯威226.4>107.2*159226.4>164.1151210抗蚜威239.5>72.4*1819239.5>182.2181811異丙威194.5>95.0*1512194.5>137.2151212仲丁威208.4>95.3*1512208.4>152.0151513甲硫威226.4>169.4*2013226.4>121.0201214猛殺威208.4>109.4*2015208.4>151.2201615棉鈴?fù)?00.5>238.2*128400.5>91.1121016滅多威-D3166.1>88.1*15917甲萘威-D7209.0>152.1*2018注：帶*為定量離子對。質(zhì)譜儀的校正按照儀器說明書進(jìn)行質(zhì)譜儀質(zhì)量數(shù)和分辨率校正，儀器性能正常后進(jìn)行測試。5校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立移取適量的氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液（5.10）5ml100μl內(nèi)標(biāo)標(biāo)5.2-5.85系列，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度分別為0.02μg/ml、0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml0.50μg/ml（此為參考濃度分析，平均相對響應(yīng)因子計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)系列第i點(diǎn)中目標(biāo)物的相對響應(yīng)因子RRFi，按照公式（1）計(jì)算：RRF

iISi

（1）iISi iA式中：ARRFi—標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點(diǎn)目標(biāo)物的相對響應(yīng)因子；Ai—標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點(diǎn)目標(biāo)物的峰面積；AISi—內(nèi)標(biāo)物的峰面積；ISi—/ml；iiμml。目標(biāo)物的平均相對響應(yīng)因子RRF，按照公式（2）計(jì)算：nn RRFi1 （2）n式中：RRF—目標(biāo)物的平均相對響應(yīng)因子；RRFi—標(biāo)準(zhǔn)系列中第i點(diǎn)目標(biāo)物的相對響應(yīng)因子；n—標(biāo)準(zhǔn)系列點(diǎn)數(shù)，5。試樣測定按照與標(biāo)準(zhǔn)曲線建立（8.2.1）相同的步驟進(jìn)行試樣（7.4）的測定。空白試驗(yàn)按照與試樣測定（8.3）相同的步驟進(jìn)行空白試樣（7.5）的測定。6結(jié)果計(jì)算與表示定性分析0.1minS/N（目標(biāo)物在儀器中的信號/儀器噪聲）3。樣品中某組分定性離子的相對豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液中定性離子相對豐度Kstd進(jìn)行比較，偏差符合表3規(guī)定，即可判定為樣品中存在目標(biāo)物。15種氨基甲酸酯類農(nóng)藥及2種內(nèi)標(biāo)物總離子流圖見圖1。樣品中某組分定性離子的相對豐度Ksam按照公式（3）計(jì)算：Ksam

21

100%

（3）式中：Ksam─樣品中某組分定性離子的相對豐度，%；2（或峰高；1（。標(biāo)準(zhǔn)溶液中某組分定性離子的相對豐度Kstd按照公式（4）計(jì)算：Kstd

d21

100%

（4）式中：Kstd─標(biāo)準(zhǔn)溶液中某組分定性離子的相對豐度，%；2─（；1─（。表3 定性確認(rèn)時相對離子豐度的最大允許偏差/%指標(biāo)評價標(biāo)準(zhǔn)KstdKstd>5020<Kstd≤5010<Kstd≤20Kstd≤10Ksam的最大允許偏差±20±25±30±50定量分析用平均相對響應(yīng)因子計(jì)算試樣中目標(biāo)物濃度按照公式（5）進(jìn)行計(jì)算：i xISi

（5）AIS

RRF式中：im/；Ax—目標(biāo)物的峰面積；AIS—內(nèi)標(biāo)物的峰面積；7IS0.2/m；RRF—目標(biāo)物的平均相對響應(yīng)因子。

17

1616

1515

1414

1313

1212

1111

1010

99

88

77

66

55

44

33

22

11

8用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算當(dāng)目標(biāo)物采用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校準(zhǔn)時，試樣中目標(biāo)物濃度i結(jié)果計(jì)算土壤樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度按照公式（6）進(jìn)行計(jì)算：1iwi11i

（6）m1wdmm式中：w1i—土壤樣品中第i種目標(biāo)物濃度，μg/kg；1i—土壤試樣中第i種目標(biāo)物濃度，mg/L；1m；m1—土壤樣品濕重，g；wdm—土壤干物質(zhì)含量，%。沉積物樣品中目標(biāo)物的質(zhì)量濃度按照公式（7）進(jìn)行計(jì)算：2iw2i22i

（7）2m2O)2m—i種目標(biāo)物濃度，μg/kg；2i—沉積物試樣中第i種目標(biāo)物濃度，mg/L；V2—沉積物試樣定容體積，ml；m2—沉積物樣品濕重，g；HOwHO2—沉積物水分含量，%。結(jié)果表示測定結(jié)果小數(shù)點(diǎn)位數(shù)與方法檢出限保持一致，最多保留3位有效數(shù)字。精密度和準(zhǔn)確度精密度40μg/kg、2μg/kg的統(tǒng)一沉積物樣品62.4%～17%，2.3%～21%；實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為：9.8%～22%，6.7%～21%；重復(fù)性限分別為：8μg/kg～11μg/kg，1μg/kg；再現(xiàn)性限分別為：13μg/kg～22μg/kg，1μg/kg。精密度結(jié)果參見附錄B。9準(zhǔn)確度六家實(shí)驗(yàn)室對氨基甲酸酯類農(nóng)藥濃度均小于檢出限的沉積物統(tǒng)一樣品進(jìn)行加標(biāo)分析測40μg/kg2加標(biāo)回收率最終值分別為：（85.4±36）%～（113±34）%，（92.6±17）%～（110±46）%。準(zhǔn)確度結(jié)果參見附錄B。質(zhì)量保證和質(zhì)量控制空白試驗(yàn)20個樣品或每批次（20個樣品/批）1個實(shí)驗(yàn)室空白，空白測試結(jié)果應(yīng)低于方法檢出限。校準(zhǔn)r≥0.995，標(biāo)準(zhǔn)系列目標(biāo)物相對響應(yīng)因子的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤20%。20（20個樣品/批）進(jìn)行1次連續(xù)校準(zhǔn)，測定結(jié)果相對偏差應(yīng)≤20%，否則需重新建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。平行樣每20個樣品或每批次（少于20個樣品/批）至少分析1個平行樣，平行樣相對偏差≤30%。基體加標(biāo)20個樣品或每批次（20個樣品/批）1個基體加標(biāo)樣，加標(biāo)回收率應(yīng)45%～160%之間。廢物處理實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的廢液和廢物應(yīng)集中收集，并做好相應(yīng)標(biāo)識，委托有資質(zhì)的單位進(jìn)行處理。10附錄A（規(guī)范性附錄）方法檢出限和測定下限101.01.0μl種氨基甲酸酯類農(nóng)A.1。表A.1方法檢出限和測定下限序號化合物英文名稱CASNo.檢出限（μg/kg）測定下限（μg/kg）1殺線威Oxamyl23135-22-0282滅多威Methomyl16752-77-5283二氧威Dioxacarb6988-21-2144涕滅威Aldicarb116-06-3145惡蟲威Bendiocarb22781-23-3146克百威Carbofuran1563-66-2147殘殺威Propoxur114-26-1148甲萘威Carbaryl63-25-2149乙硫苯威Ethiofencarb29973-13-51410抗蚜威Pirimicarb23103-98-21411異丙威Isoprocarb2631-40-52812仲丁威Fenobucarb3766-81-21413甲硫威Mercaptodimethur2032-65-71414猛殺威Promecarb2631-37-01415棉鈴?fù)嗀lanycarb83130-01-21411附錄B（資料性附錄）B.1給出B.2給出方法準(zhǔn)確度指標(biāo)。表B.1方法的精密度序號化合物平均值（μg/kg）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對實(shí)驗(yàn)室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差重復(fù)性限r(nóng)（μg/kg）再現(xiàn)性限R（μg/kg）加標(biāo)濃度：40μg/kg1殺線威382.6～171810222滅多威454.6～121311193二氧威403.7～11158184涕滅威412.5～13129165惡蟲威372.4～14149176克百威453.1～11159217殘殺威424.0～10169218甲萘威402.9～151110169乙硫苯威344.5～112292210抗蚜威414.5～9.51581911異丙威412.7～1111101512仲丁威413.5～101481713甲硫威393.8～8.69.881314猛殺威433.4～151291715棉鈴?fù)?06.0～14111116加標(biāo)濃度：2μg/kg1殺線威27.2～2119112滅多威24.4～1610113二氧威24.1～1716114涕滅威24.9～9.513115惡蟲威25.4～138.6116克百威23.1～1421117殘殺威24.1～9.411118甲萘威23.5～7.015119乙硫苯威24.8～11151110抗蚜威22.9～8.0111111異丙威23.8～16121112仲丁威22.3～12111113甲硫威23.8～8.89.31114猛殺威23.4～5.66.71115棉鈴?fù)?5.7～15111112表B.2方法的準(zhǔn)確度化合物樣品濃度（μg/kg）加標(biāo)回收率范圍P（%）P(%)SP(%)加標(biāo)回收率最終值p2S（%）P加標(biāo)濃度：40μg/kg1殺線威<276.6～12395.61895.6±362滅多威<291.1303二氧威<179.2～11510115101±304涕滅威<189.0～11810312103±2