DB上海市地方標(biāo)準(zhǔn)上海市食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布DB31/2021—2013本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。IDB31/2021—2013食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)味精中硫化鈉的測(cè)定本標(biāo)準(zhǔn)適用于味精中硫化鈉(以S2-計(jì))含量的檢測(cè)。本標(biāo)準(zhǔn)第一法為離子色譜法，第二法為紫外分光光度法。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。第一法離子色譜法3原理試樣經(jīng)氫氧化鈉溶液溶解提取，以氫氧化鈉-乙酸鈉溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離，脈沖安培檢測(cè)器檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。4試劑和材料除另有規(guī)定外,所用試劑均為優(yōu)級(jí)純?cè)噭鶠橹蠓欣鋮s后超聲脫氣的電阻率≥18.2MΩ·cm(25℃)的去離子水。4.1氫氧化鈉（NaOH，40.01）。4.2無水乙酸鈉（C2H3O2Na分子量82.03）。4.3氫氧化鈉溶液(50%,w/w)：于聚丙烯材料的容器中稱量30g氫氧化鈉(4.1)，加入30g水，充分溶解混勻后，置于4℃冰箱中靜置過夜。使用時(shí)復(fù)溫，在保持溶液液面不傾斜或搖晃的情況下取中間層使用。4.4氫氧化鈉溶液(250mmol/L)：稱取10g氫氧化鈉(4.1)，完全溶解并定容至1L。4.5100mmol/L氫氧化鈉-250mmol/L乙酸鈉淋洗液：稱取20.5g無水乙酸鈉(4.2)溶于995mL水中，0.2μm尼龍濾膜過濾后，加入5.25mL50%氫氧化鈉溶液（4.3）。淋洗液配好后立即置于惰性氣體條件下保護(hù)，以防污染。4.6硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（Na2S·9H2O,CAS號(hào)：1313-84-4）：分子量240.17，純度大于等于98%。4.7硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：量取10mL250mmol/L氫氧化鈉溶液（4.4）加入到放在天平上的聚丙烯材中4.15和4.16規(guī)定的方法標(biāo)定其濃度，4℃下避光密封存放。4.8硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別吸取適量的已標(biāo)定好的硫化鈉（以S2-計(jì)）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用水配制成標(biāo)準(zhǔn)工作液，使其中硫離子的濃度分別為0.0ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL、50.0ng/mL。4.9容量瓶：聚丙烯，100mL，1000mL，2000mL。1DB31/2021—20134.10一次性塑料進(jìn)樣器：1.0mL。4.11濾膜：0.2μm，尼龍膜。4.120.2μm尼龍濾器。5儀器和設(shè)備5.1離子色譜儀：配有脈沖安培檢測(cè)器。5.2分析天平：感量為0.01g。5.3渦旋混合器：3000r/m。6試樣制備與保存取完整包裝的待測(cè)樣品，用250mmol/L氫氧化鈉溶液溶解后，定容于適量塑料容量瓶中，密封保存，標(biāo)記為樣品制備液。7測(cè)定步驟7.1試樣溶液制備取相當(dāng)于試樣1.0g的樣品制備液（6），用250mmol/L氫氧化鈉溶液（4.4）定容于100mL塑料容量瓶（4.10）中，混勻，經(jīng)0.2μm尼龍膜（4.13）過濾，待測(cè)。7.2測(cè)定7.2.1參考色譜條件參考色譜柱：AS7型保護(hù)柱(4×50mm，10μm)和AS7型分析柱(4×250mm，10μm),或性能相當(dāng)?shù)碾x子色譜柱；淋洗液：100mmol/L氫氧化鈉-250mmol/L乙酸鈉淋洗液（4.5），等度洗脫，流速為1.0mL/min。檢測(cè)器：脈沖安培檢測(cè)器（配有Ag工作電極、Ag/AgCl參比電極和Ti對(duì)電極）。檢測(cè)器時(shí)間程序：0.00s，-0.1V；0.20s，-0.1V開始積分；0.90s，-0.1V，積分結(jié)束；0.91s，-1.0V；0.93s，-0.3V；1.00s，-0.3V。進(jìn)樣體積：50μL；柱溫：35℃分別吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液和試樣溶液50μL，在相同工作條件下，依次注入離子色譜儀中，記錄色譜圖。以保留時(shí)間定性，峰面積或峰高定量（若試樣溶液濃度過高，應(yīng)稀釋后測(cè)定）。7.2.2空白試驗(yàn)除不加試樣外，均按上述操作步驟進(jìn)行。7.2.3結(jié)果計(jì)算和表述試樣中硫化鈉(以S2-計(jì))含量,數(shù)值以微克每千克(μg/kg）表示：X…………（1）式中：X—試樣中硫化鈉(以S2-計(jì))含量，單位為微克每千克（g/kg）；c—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到的試樣中硫化鈉(以S2-計(jì))溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；2DB31/2021—20130—空白試樣中硫化鈉(以S2-計(jì))溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；V—定容體積，單位為毫升（mL）；m—試樣取樣量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。8精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10％。9其他本方法中硫化鈉(以S2-計(jì))檢出限為10μg/kg。第二法紫外分光光度法試樣用鹽酸溶液分解硫化鈉，產(chǎn)生的硫化氫用乙酸鎘緩沖溶液吸收，形成硫化鎘沉淀，在硫酸溶液中，與對(duì)氨基二甲基苯胺溶液和三氯化鐵溶液作用，生成亞甲基藍(lán)，亞甲基藍(lán)吸光度與濃度成線性關(guān)系，用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，定量分析。11試劑和材料注：除另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭┖驼麴s水或去離子水或相當(dāng)純度的水,11.1鹽酸溶液，1＋1（V+V）：把1體積的濃鹽酸(ρ=1.19g/mL）加入1體積水中。11.2吸收液：稱量4.3g硫酸鎘（CdSO4·8H2O）和0.3g氫氧化鈉以及10g聚乙烯醇磷酸銨分別溶于水中。臨用時(shí)，將三種溶液混合，強(qiáng)烈振搖至完全混溶，再用水稀釋至1L。此溶液為白色懸浮液，每次用時(shí)要強(qiáng)烈振搖均勻再量取，貯于冰箱中可保存一周。11.3對(duì)氨基二甲基苯胺溶液。11.4儲(chǔ)備液：量取50mL濃硫酸，緩慢加入30mL水中，放冷后，稱量12g對(duì)氨基二甲基苯胺鹽酸鹽〔(CH3)2NC6H4·2HCl〕溶于硫酸溶液中。貯于冰箱中，可保存一年。11.5使用液：量取2.5mL儲(chǔ)備液，用1＋1硫酸溶液稀釋至100mL。11.6三氯化鐵溶液：稱量100g三氯化鐵（FeCl3·6H2O）溶于水中，稀釋至100mL。若有沉淀，需要過濾后使用。11.7混合顯色液：臨用時(shí)，按1mL對(duì)氨基二甲基苯胺使用液和1滴（0.04mL）三氯化鐵溶液的比例相混合。此混合液要現(xiàn)用現(xiàn)配，若出現(xiàn)有沉淀物生成，應(yīng)棄之不用。11.8磷酸氫二氨溶液：稱量40g磷酸氫二氨〔(NH4)2HPO4〕溶于水中，并稀釋至100mL。11.9硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（Na2S·9H2O,CAS號(hào)：1313-84-4）：分子量240.17，純度大于等于98%。11.10硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液及使用液：見4.6和4.7，儲(chǔ)備液用前按GB/T16489中4.15和4.16規(guī)定的方法標(biāo)定其濃度，4℃下避光密封存放。分別吸取適量的已標(biāo)定好的硫化鈉（以S2-計(jì)）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用氫氧化鈉溶液(250mmol/L)（4.4）配制成標(biāo)準(zhǔn)工作液（1μg/mL）。11.11甘油。11.12磷酸-丙酮溶液：0.02mol/L。3412.4抽提燒瓶(A):容積150mL,有34/35錐形磨口接口。12.6分液漏斗(C):容積100mL,有14/23錐形插口，活塞及14/23瓶塞。12.7吸收管(D):有10mL刻度線。12.8流量計(jì)(E):流量范圍0.2～2L/min,流量穩(wěn)定。使用時(shí)，用皂膜流量計(jì)校準(zhǔn)采樣系列在采樣前和采樣后的流量，流量誤差應(yīng)小于5%。注：所用玻璃儀器均用磷酸-丙酮溶液(11.12)涂漬后，烘干，備用。按圖1組裝。允許使用功能相同的儀器取代上述儀器。所有的磨口接口都要遵從ISO383中的要求，并在組裝前用甘油(11.11)密封。13.1試樣制備：取相當(dāng)于試樣10.0g的樣品制備液(6)于抽提瓶中，加入50mL水。13.2試樣消解：將試樣溶液置于抽提燒瓶(12.4)中，將10mL吸收液加入吸收管(12.7),組裝實(shí)驗(yàn)裝置，將空氣采樣器流速調(diào)節(jié)為1L/min,從分液漏斗(12.6)中向抽提燒瓶(12.4)中緩慢加入鹽酸溶液(11.1)20mL,吹氣保持30～40min,將吸收管(12.7)內(nèi)吸收液轉(zhuǎn)移至具塞比色管(12.2)中。DB31/2021—201313.3試樣分析：將吸收液按照用標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的操作步驟顯色，測(cè)定吸光度。同時(shí)，用10mL未采樣的吸收液（11.2）作試劑空白的測(cè)定。若樣品溶液的吸光度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，可將樣品溶液用吸收液稀釋后測(cè)定吸光度。13.4標(biāo)準(zhǔn)溶液工作曲線的配制：在6個(gè)具塞比色管中分別加入0mL、0.1mL0.8mL硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（11.10用吸收液定容至10mL，立即倒轉(zhuǎn)搖勻，各管立即加入1mL混合顯色液（11.7），加蓋倒轉(zhuǎn)，緩緩混合均勻，放置30min。加1滴磷酸氫二氨溶液（11.8），搖勻，以排除三價(jià)鐵離子的顏色。用3cm比色皿，以空白作參比，在波長(zhǎng)665nm處測(cè)定吸光度。以硫離子含量(μg）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸直線方程。14分析結(jié)果計(jì)算按公式(2)計(jì)算硫化鈉的含量（以S2-計(jì)）X，數(shù)值以微克每千克(μg/kg）表示。Xm1m21000m………………（2）式中：X—試樣中硫化鈉（以S2-計(jì)）的含量，單位為微克每千克(μg/kg）；m1—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試樣溶液中的質(zhì)量，單位為微克(μg）；m2—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得空白溶液中的質(zhì)量，單位為微克(μg）；m—試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。15精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10％。本方法中硫化鈉(以S2-計(jì))檢出限為10μg/kg。5DB31/2021—2013硫化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液離子色譜圖5.05.0Sequence#222[m