ICS65.020DB13B16河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB13/T2755—2018康氏粉蚧檢疫鑒定方法河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB13/T2755—2018前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.12009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由河北出入境檢驗檢疫局提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心，河北省食品檢驗研究院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：婁巧哲、劉紅冉、王建昌、李靜、孫曉霞、商建成、李海云、胡連霞、崔佳玉、谷青。IDB13/T2755—2018康氏粉蚧檢疫鑒定方法12范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了康氏粉蚧Pseudococcuscomstocki(Kuwana)的檢疫鑒定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物及其產(chǎn)品中康氏粉蚧的檢疫和鑒定。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T28983-2012南洋臀紋粉蚧檢疫鑒定方法3術(shù)語和定義GB/T28983界定的術(shù)語和定義適用于本文件。3.1圓柱狀腺的一種，與管狀腺相似，所不同之處在于管筒的腺口周圍有一圈突出的角質(zhì)狀的、呈半球形的突起，很像蘑菇，因此稱為蕈狀腺。4康氏粉蚧的基本信息學(xué)名：Pseudococcuscomstocki(Kuwana)中文名：康氏粉蚧分類地位：昆蟲綱（Insecta）、半翅目（Hemiptera）、粉蚧科（Pseudococcidae）、粉蚧屬（Pseudococcus）。康氏粉蚧寄生于植物的葉、果、新稍、枝、莖干及根和肉質(zhì)根上刺吸危害。康氏粉蚧主要分布在包括中國（東北、華北、華南、西南、臺灣等地）在內(nèi)的亞洲、大洋洲、美洲和歐洲的多個國家和地區(qū)，是危害蘋果、梨、柑、梓、桑、柚、橙等水果和經(jīng)濟作物的重要害蟲。（參見附錄A）5根據(jù)康氏粉蚧的分布、寄主及危害狀、生物學(xué)特性進行寄主檢查，依據(jù)雌成蟲的形態(tài)特征進行種61DB13/T2755—20186.1器材與用具放大鏡、體視顯微鏡、生物顯微鏡、測微尺、離心管、自封袋、溫箱、電陶爐、小燒杯、小試管、小鑷子、解剖針、解剖刀、小毛筆、吸管、凹面皿、載玻片、蓋玻片、標(biāo)簽、烘箱。6.2試劑乙醇-甘油保存液（70%乙醇和甘油以50：1的體積比配置而成）、75%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、氫氧化鈉或氫氧化鉀、蒸餾水、酸性品紅、乳酸、冰醋酸、無水乙醇、丁香油、加拿大樹脂。7寄主檢查對可能感染康氏粉蚧的植物及其產(chǎn)品進行檢查，重點檢查果實的果柄、果蒂及莖干粗翹皮下、枝條、腋芽、葉鞘等處，寄生部位常伴有白色的蠟粉或蠟絲等分泌物。如發(fā)現(xiàn)疑似蟲體，用小毛筆挑起放入裝有乙醇-甘油保存液的離心管中，或連同寄主植物或部分器官、組織一起置于自封袋中，貼好信息標(biāo)簽，帶回實驗室鏡檢，樣品傳遞過程中，要固定好寄主。8標(biāo)本制作玻片標(biāo)本制作方法參見附錄B。形態(tài)鑒定9首先觀察蚧蟲田間特征，再使用生物顯微鏡觀察玻片標(biāo)本的形態(tài)特征，使用目鏡測微尺或攝像軟粉蚧屬具有以下形態(tài)特征（參見附錄C）：——尾瓣上無硬化棒；——足發(fā)達，爪無細(xì)齒，后足常有透明孔；——腹臍有或無，有前、后背孔；——刺孔群12～17對，大多數(shù)刺孔群有錐刺2根，少數(shù)刺孔群有錐刺3根；尾瓣刺孔群著生在硬化——具三格腺、多格腺、管狀腺和蕈狀腺，蕈狀腺一般在背面，若無，則會在腹面分布。2DB13/T2755—2018——蟲體外被白色蠟質(zhì)分泌物覆蓋，體緣具17對白色蠟刺，腹部末端1對幾乎與體長相等；——觸角8節(jié)，也有7節(jié)者，第2、3和頂端節(jié)較長；——足細(xì)長，后足基節(jié)具數(shù)量很多的透明孔，股節(jié)和脛節(jié)上也有少量透明孔；——腹臍1個，較大，橢圓形；——肛環(huán)刺6根；——尾瓣發(fā)達而突出于蟲體末端之外，尾瓣腹面具有不顯著的硬化片，其頂端生有1根尾瓣刺，在尾瓣刺之上方生有幾根刺毛；——體毛數(shù)量很多，分布在蟲體背和腹兩面，沿背中線著生的體毛較長；——刺孔群17對，分別標(biāo)記為C1、C3、C4……C18。刺孔群C1和C3具34根刺，刺孔群C4具24根刺，刺孔群C5和C9具23根刺，刺孔群C6具23根刺，刺孔群C7具25根刺，刺孔群C8和C10具2根刺，刺孔群C11具12根刺，有的個體無刺孔群C11，刺孔群C12C15具2根刺，刺孔群C17具2根刺，很少具3根刺者，刺孔群C18具2根較粗的圓錐形刺，整個C18均著生在較大的硬化片上，每個刺孔群皆生有附助刺毛；——三格腺分布在蟲體背和腹兩面，刺孔群C18所具之三格腺在刺的周圍密集成群；——多格腺在腹部腹板上常集成橫列，除此之外，還在頭胸部腹面稀少分布或成小群分布；——蕈狀腺10對以上，在蟲體背面各節(jié)幾乎均有分布，在腹面主要沿胸部邊緣分布，在第2腹節(jié)邊緣也常有分布；——管狀腺數(shù)量不多，在刺孔群C17和C18之間常成群分布，在背面中部常單個分布。9.3.2雄成蟲體長約2.0mm，翅展約2.0mm。紫褐色，觸角和胸背中央色淡。前翅發(fā)達透明，后翅退化為平衡棒。尾毛長。1齡橢圓形，長0.5mm，淺橙黃色，非常活潑。2齡體長1.0mm，被白蠟粉，體緣出現(xiàn)蠟刺，取食相對固定，2齡末期出現(xiàn)雌雄分化，雄性體扁，雌性體飽滿，3齡雌若蟲體長1.7mm，與雌成蟲相似。雄若蟲則分泌白色蠟絲做繭化蛹。蛹體長1.2mm，初期淡灰色，后期深灰色。繭長橢圓形，長2.0～2.5mm，白色綿絮狀。卵結(jié)果判定玻片右側(cè)粘貼定名標(biāo)簽，注明鑒定結(jié)果（學(xué)名、中文名、鑒定人和鑒定日期），移入標(biāo)本柜中保3DB13/T2755—2018附錄A（資料性附錄）康氏粉蚧的地理分布、寄主和生物學(xué)特性A.1地理分布吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、寧夏、西藏、北京、山東、山西、河北、河南、浙江、福建、湖北、湖南、江西、廣東、廣西、四川、云南、香港、臺灣；日本，朝鮮，韓國，土庫曼斯坦，烏茲別克斯坦，塔吉克斯坦，吉爾吉斯斯坦，哈薩克斯坦，印度，斯里蘭卡，越南，泰國，柬埔寨，印度尼西亞，亞美尼亞，伊朗，格魯吉亞，阿塞拜疆，阿富汗，烏克蘭，葡萄牙，摩爾多瓦，俄羅斯，澳大利亞，密克羅尼西亞聯(lián)邦，圣赫勒拿，美國，加拿大，墨西哥，阿根廷。A.2寄主表A.2寄主科屬或種栒子屬Cotoneastersp.，蘋果屬Malussp.，蘋果Maluspumila，森林蘋果Malussylvestris，Persicavulgaris，李屬Prunussp.，梅Prunusmume，梨屬Pyrussp.，西洋梨Pyruscommunis，沙梨Pyruspyrifolia，Pyrusserotinaculta柑桔屬Citrussp.，酸橙Citrusaurantium，檸檬Citruslimon，柚Citrusmaxima，橙Citrussinensis薔薇科Rosaceae律草屬Humulussp.，律草Humulusscandens，桑屬Morussp.，桑Morusalba，無花果Ficuscarica香瓜Cucumismelovar.makuwa，黃瓜Cucumissativus，南瓜Cucurbitamoschata，西瓜Citrulluslanatus須芒草屬Andropogonsp.，華箬竹屬Sasamorphasp.，玉蜀黍?qū)賈easp.，甘蔗Saccharumofficinarum鷹嘴豆屬Cicersp.，刺桐Erythrinavariegata鐵線蓮屬Clematissp.，鐵線蓮Clematisflorida榅桲Cydoniaoblonga，Cydoniasinensis花葉萬年青Dieffenbachiapicta，龜背竹MonsteradeliciosaForsythiakoreana，Ligustrumibotaangustifolium4DB13/T2755—2018表A.2寄主（續(xù)）科屬或種仙人掌科Cactaceae忍冬科Caprifoliaceae桑寄生科Loranthaceae石松科Lycopodiaceae大戟科Euphorbiaceae紅豆杉科Taxaceae葡萄科Vitaceae霸王花Hylocereusundatus，仙人掌Opuntiadillenii忍冬屬Lonicerasp.，日本珊瑚樹Viburnumawabuki桑寄生屬Loranthussp.，桑寄生Loranthusparasiticus松屬Pinussp.，Pinusthunbergiana蓖麻屬Ricinussp.，蓖麻Ricinuscommunis紅豆杉屬Taxussp.，日本榧樹Torreyanucifera葡萄屬Vitissp.，葡萄Vitisvinifera槭屬Acersp.槭樹科Aceraceae七葉樹科Hippocastanaceae七葉樹屬Aesculussp.楝科Meliaceae米仔蘭Aglaiaodorata日本榿木Alnusjaponica朱頂紅Amaryllisvittata甜菜Betavulgaris樺木科Betulaceae琴鉤蝦科Lysianassidae藜科Chenopodiaceae黃楊科BuxaceaeBuxusmicrophylla殼斗科Fagaceae栗屬Castaneasp.景天科CrassulaceaeCrassulatetragona胡蘿卜Daucuscarotavar.sativa衛(wèi)矛Euonymusalatus日本常山Orixajaponica露兜樹屬Pandanussp.楊屬Populussp.鼠李屬Rhamnussp.康氏粉蚧寄生于植物的葉、果、新稍、枝、莖干及根和肉質(zhì)根上，常嚴(yán)重危害。在河北一生可發(fā)生3代，以卵在各種縫隙及土縫中越冬。寄主萌動發(fā)芽時卵開始孵化分散為害，第1代若蟲盛發(fā)期為5月中下旬，6月上旬至7月上旬陸續(xù)羽化，交配產(chǎn)卵。第2代若蟲6月下旬至7月下旬孵化，盛期為7月中下旬，8月上旬至9月上旬羽化，交配產(chǎn)卵。第3代若蟲8月中旬開始孵化，8月下旬至9月上旬進入盛期，9月下旬開始羽化，交配后產(chǎn)卵越冬。雌雄蟲交配后，雌成蟲爬到枝干粗皮裂縫中或果實萼洼、梗洼等5DB13/T2755—2018處產(chǎn)卵，有的將卵產(chǎn)在土內(nèi)。產(chǎn)卵時，雌蟲分泌大量白色絮狀蠟絲，形成卵囊，卵產(chǎn)于其中，每雌可產(chǎn)卵200～400粒，產(chǎn)卵完畢雌蟲體逐漸干癟死亡。成蟲和若蟲為害葉、果、新稍、枝、莖干等，套袋梨危害較重，若蟲常聚集或單個在柄洼及萼洼處危害，分泌蜜露造成霉菌滋生。梨入冷庫后若蟲不耐低溫，數(shù)十天后即死亡。6DB13/T2755—2018附錄B（資料性附錄）粉蚧玻片標(biāo)本制作方法B.1標(biāo)本固定挑取樣品上的蚧蟲置入75%乙醇中固定2h，以備制作玻片標(biāo)本。如需長期保存，則保存于乙醇-甘油保存液中。B.2脫脂透明選取經(jīng)固定的成熟蟲體，用解剖刀在蟲體背部中央縱向切開1/2體長的口子，若為較干燥的蟲體，加熱回軟后再切開，移入加有10%氫氧化鈉或10%氫氧化鉀溶液的敞口小試管中，小試管放入裝有蒸餾水的小燒杯中，用電陶爐加熱小燒杯至蒸餾水沸騰，沸騰持續(xù)5min～10min，直至體表和蟲體內(nèi)含物分離，內(nèi)含物將近融化，使用吸管將蟲體移入盛有蒸餾水的凹面皿中，用解剖針、小鑷子、小毛筆等輕輕擠壓、清理蟲體，直至徹底清除內(nèi)含物、蟲體變?yōu)榍宄和该鳌＜訜徇€可用水浴、溫箱等方法，脫脂時間以標(biāo)本透明為準(zhǔn)。B.3脫堿把脫脂透明的蟲體移入裝有熱蒸餾水的小試管中再次水浴5min，以清除蟲體表面和內(nèi)部的堿液。將脫堿后的蟲體移入酸性品紅飽和溶液（蒸餾水：甘油：乳酸為1:1:1的酸性品紅飽和溶液）中染色，也可用其他染料使蟲體著色，染色時間視標(biāo)本著色情況而定，一般在1h以上；用75%乙醇洗掉多余染色劑，再依次移入95%、100%乙醇中脫水，視染色程度浸泡1min～3min，洗去浮色，但不能停留過久。在載玻片上加一滴加拿大樹脂，移入蟲體，用解剖針整姿，用蓋玻片封片。玻片置40℃～50℃烘箱干燥2～3d。玻片制成后置生物顯微鏡觀察鑒定，并在蓋玻片左側(cè)粘貼記錄標(biāo)簽，注明標(biāo)本號、寄主植物、采集（截獲）時間、采集地點（原產(chǎn)地）、采集人等信息。7DB13/T2755—2018附錄C（資料性附錄）康氏粉蚧雌成蟲形態(tài)特征圖圖C.1康氏粉蚧Pseudococcuscomstocki(Kuwana)（仿王子清，2001）8DB13/T2755—2018附錄D（資料性附錄）粉蚧屬常見近似種雌成蟲檢索表a）多格腺數(shù)量較少分布限于陰門周圍…擬長尾粉蚧Pseudococcuslongispinus(TargioniTozzetti)多格腺數(shù)量較多分布不限于陰門周圍…………………2b）多格腺只分布在蟲體各腹節(jié)之腹板