ICS65.020.01CCSB05DB2308佳木斯市市場監督管理局發布IDB2308/T198—2024本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由佳木斯市農業農村局提出并歸口。本文件由佳木斯市市場監督管理局批準發布。本文件起草單位：黑龍江省農業科學院佳木斯分院。本文件主要起草人：楊曉賀、姚亮亮、丁俊杰、邱磊、王自杰。本文件為2024年首次發布。DB2308/T198—20241三江平原大豆種質花葉病毒病抗性鑒定及評價技術規程本文件規定了佳木斯市三江平原地區大豆花葉病毒田間鑒定與抗性評價的術語和定義、田間鑒定圃的設置、病毒株系的制備與保存、接種與病情調查、抗性評價、鑒定結果記載等技術規程。本文件適用于黑龍江省佳木斯市大豆花葉病毒病田間鑒定圃的設置、抗性鑒定與評價。2規范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4404.2-2010糧食作物種子第2部分：豆類GB/T8321農藥合理使用準則（所有部分）NY/T1276農藥安全使用規范總則NY/T3428-2019大豆品種大豆花葉病毒病抗性鑒定技術規程NY/T5010-2016無公害農產品種植業產地環境條件DB23/T018-2007大豆生產技術規程3術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1大豆成株抗性植物生長期間所表現的能減輕或克服病原物致病作用的可遺傳性狀。3.2大豆種粒抗性植物體在籽粒上所表現的能減輕或克服病原物致病作用的可遺傳性狀。3.3大豆種粒斑駁大豆因花葉病毒的侵染在籽粒的種皮上形成的由臍部向外擴散的斑紋。3.4侵染型根據大豆接種花葉病毒后對花葉病毒的反應部位和癥狀不同劃分的侵染類型，分花葉型、壞死型、種粒斑駁型。3.5抗性評價根據采用的技術標準判別大豆對大豆花葉病毒病反應程度和抵抗水平的定性描述。4田間鑒定圃的設置2DB2308/T198—20244.1田間鑒定圃的選址田間鑒定圃選擇具備良好自然發病環境和可控灌溉條件、符合NY/T5010標準地塊，與大田隔離要達到200米；或在防蟲溫室、防蚜網室內進行亦可。4.2田間鑒定圃配置鑒定圃采用壟作單播、行長3m，行距65cm～70cm，單行區，重復3次，順序編號，間比法排列，逢20的倍數設置一行對照，鑒定圃四周設保護區，保護區為5m或4行。4.3田間播種4.3.1田間播種時間播種時間5月10日～20日為宜，或適當調整不同材料的播期以使植株接種期和發病期能夠與適宜的氣候條件（濕度與溫度）相遇。4.3.2田間播種方式及播種量采用人工開溝，條播方式播種。每份材料播種1行，每隔19份鑒定材料播種1行感病對照品種，試驗每行均勻播種45粒種子。種子符合GB4404.2標準播種時間5月10日～20日為宜，或適當調整不同材料的播期以使植株接種期和發病期能夠與適宜的氣候條件（濕度與溫度）相遇。4.3.3田間管理按GB/T8321、NY/T1276、DB23/T018技術規程進行田間管理和病蟲草防治。及時灌水、及時防治大豆蚜蟲，以免蚜蟲傳毒造成交叉感染。5病毒株系的制備和保存參見NY/T3428-2019制備病原物接種體并保存。具體方法：采集田間典型大豆花葉病毒病癥狀的植株葉片，人工汁液摩擦接種法在感病大豆上分離純化大豆花葉病毒病分離物，分離物經生物學和血清學鑒定，確認其為大豆花葉病毒，對陽性大豆花葉病毒分離物進行致病性測定，根據不同抗性的鑒別寄主品種引發的癥狀反應劃分SMV株系，具有典型癥狀的病葉保存在-20℃以下冰箱中。6接種與病情調查6.1接種期和接種方法接種期：幼苗第一片真葉期開始接種。接種方法：摩擦接種法。具體方法：充分消毒的普通油畫筆刷子蘸取接種懸浮液，在葉面輕度摩擦造成微傷，每株接種2片真葉。接種兩次，間隔5d～7d。6.2調查方法及項目調查時每份材料隨機抽樣20株掛牌標記，分別調查記載侵染型、發病級別和發病株數，進行病情分級和病情指數的計算。6.3籽粒侵染型記載及標準DB2308/T198—20243籽粒侵染型調查在大豆成熟期進行，每份材料隨機抽樣20株，種粒斑駁按0、1、3、5、7五個級別劃分。6.4病情級別劃分接種病株病情級別及其相應的癥狀描述見表1。表1大豆花葉病毒引起的大豆病毒病病情級別的劃分0123重花葉、葉片皺縮卷曲、畸形葉或多多數壞死斑或壞死葉脈長度在20mm以上。46.5病情記載調查記載每一鑒定植株的病情級別，并計算病情指數。病情指數按公式（1）計算：DI=∑(s×n)/(N×S)×100(1)式中：DI——病情指數；s——各病情級別的代表數值；n——各病情級別的指數數；N——調查總植株數；S——最高病情級別的代表數值。7抗性評價依據鑒定材料3次重復的病情指數平均值確定其成株期抗性水平，劃分見表2。表2大豆對花葉病毒病抗性的成株期評價標準病情指數（DI）DI=0RS籽粒斑駁類型抗性評價標準見表3。DB2308/T