山西省榮軍醫院檢驗科

免疫實驗室

標準操作規程

（SOP文件）

編寫人王葉葉

審核人薛菁

2020.4

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件文件編號：SXSFJYY—JYK—MYS—001

第7.0版第1次修訂

主題：操作規程目錄

編寫日期:2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

目錄1

1、目錄--------------------------------------------------------------------------------------------[1-2]

2、乙型肝炎病毒表面抗原檢測----------------------------------------------------------------------[3-4]

3、乙型肝炎病毒表面抗體檢測----------------------------------------------------------------------[5-6]

4、乙型肝炎病毒e抗原檢測------------------------------------------------------------------------[7-8]

5、乙型肝炎病毒e抗體檢測-----------------------------------------------------------------------[9-10]

6,乙型肝炎病毒核心抗體檢測--------------------------------------------------------------------[11-12]

7、丙型肝炎病毒抗體檢測------------------------------------------------------------------------[13-14]

8、類風濕因子檢測----------------------------------------------------------------------------------[15]

9、抗鏈球菌溶血素"0"檢測-------------------------------------------------------------------------[16]

10、血清HIV抗體檢測（北京萬泰）--------------------------------------------------------------[17-19]

11、梅毒螺旋抗體檢測---------------------------------------------------------------------------[20-21]

12、梅毒抗體TRUST檢測-----------------------------------------------------------------------------[22]

13、酶標儀及洗板機的校準維護與保養制度及校準方法-------------------------------------------------[23]

14、MK3型酶聯免疫檢測儀的操作說明----------------------------------------------------------------[24]

15、M0DEL1575型自動洗板機操作說明----------------------------------------------------------------[25]

16、任務--------------------------------------------------------------------------------------------[26]

17、實驗室規章制度---------------------------------------------------------------------------------[27]

20、生物安全制度-----------------------------------------------------------------------------------[28]

19、實驗室環境條件、安全制度----------------------------------------------------------------------[29]

20、保密制度---------------------------------------------------------------------------------------[30]

21、疫情上報制度-----------------------------------------------------------------------------------[31]

22、陽性血樣的追蹤和處理--------------------------------------------------------------------------[32]

23、實驗室人員崗位職責-----------------------------------------------------------------------------[33]

24、檢驗儀器和試劑盒的選擇------------------------------------------------------------------------[34]

25、發放報告的管理制度-----------------------------------------------------------------------------[35]

26、記錄的管理制度---------------------------------------------------------------------------------[36]

27、實驗室生物污染物的處理制度--------------------------------------------------------------------[37]

28、室內質量控制制度-------------------------------------------------------------------------------[38]

29、實驗室室間質評制度-----------------------------------------------------------------------------[39]

30、實驗室生物安全事件應急預案-----------------------------------------------------------------[40-47]

31、高致病性病原微生物泄漏應急處理預案-----------------------------------------------------------[48]

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—001

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件

第7.0版第1次修訂

主題：操作規程目錄

編寫日期:2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—001操作規程目錄

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—002乙肝病毒表面抗原檢測乙（酶聯免疫法）

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—003肝病毒表面抗體檢測一一（醐聯免疫法）

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—004乙肝病毒e抗原檢測一一（酶聯免疫法）

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—005乙肝病毒e抗體檢測-乙肝（酶聯免疫法）

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—006病毒核心抗體檢測（酶聯免疫法）

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—007------丙肝病毒抗體檢測（酶聯免疫法）類風濕因

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—00S-子（膠乳凝集法）抗鏈球菌溶血素"0"HIV抗體檢

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—00Q-測（雙抗原夾心酶聯免疫法）-梅毒螺旋抗體檢測（雙

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—010抗原夾心酶聯免疫法）梅毒抗體TRUST檢測前標儀

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—011及洗板機的校準維護與保養制度及校準方法DG5032

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—012型酶聯免疫檢測儀的操作說明-DG3080型啟動洗板

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—013-機操作說明任務實驗室規章制度--生物安全制

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—014度——實驗室環境條件安全制度-保密制度疫情上

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—015報制度-一配性血樣的追蹤和處理一一實驗室人員

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—016崗位職責-檢驗儀器和試劑盒的選擇一發放報告的

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—017管理制度-記錄的管理制度實驗室生物污染物的處

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—020理程序-一室內質量控制制度-實驗室室間質評制

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—019度——實驗室生物安全事件應急預案一高致病性病

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—020原微生物泄漏應急處理預案

文件編號：SXSRJYY_1YK—MYS—021

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—022

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—023

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—024

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—025

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—026

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—027

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—028

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—029

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—030

文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—031-

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—002

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒表面抗原檢測（酶聯免疫法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

乙肝病毒表面抗原檢測

【測定原理】

采用單克隆抗-HBs包被反應板，加入待測標本，同時加入多克隆抗TBs-HRP當標本中存在HBsAg時，該

HBsAg與包被抗-HBs結合并與抗-HBs-HRP結合形成抗-HBs-HBsAg?抗-HBs-HRP復合物，加入TMB底物產生顯

色反應，反之則無顯色反應

【試劑盒組份】

1.預包被反應條12孔*4塊

2.酶結合物3ml*1瓶

3.HBsAg陽性對照0.5m1*1管

4.HBsAg陰性對照0.5m1*1管

5.濃縮洗滌液：用前每瓶30向*1瓶

6.顯色劑A（TMB）3m1*1瓶

7.墨色劑B（TMB）3m1*1瓶

8.終止液3m1*1瓶

9.封口膠紙1片

10.說明書1份

11.自封袋1只

【檢測方法】

1.實驗準備：從冷藏環境中取出的試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將濃縮洗滌液作1：20稀釋

2.加待測標本：加入待測標本每孔0.05亳升，井設HBsAg陽性對照2孔，HBsAg陰性對照2孔，空白對照IfLo

3.加酶結合物家;每孔0.05毫升，空白對照孔不加，充分混勻，置37~C溫育30分鐘。

4,洗板：1）手工洗板：棄去反應板條孔內液體，拍干；用洗滌液注滿每孔，靜置570秒，棄去孔內洗滌液拍

干，如此反復5次，拍干。2）洗板機洗板c選擇洗滌5次的程序洗板，最后拍干

5.加顯色劑；先加顯色劑A,每孔0.05毫升；再加顯色劑B,每孔0.05毫升；充分混勻后，放置37c避光孵育

15分鐘。

6.終止反應；每孔加終止液0.05亳升，混勻。

7.測定：用酶標儀讀數，可選擇單波長450nm,（以空白調零）或雙波長450/630nm讀取各孔0D值。

【結果判定】

Cutoff值計算：8丫二陽性對照平均0D值'2.1

標本?？谥担?0丫為陽性，標本0D值《C0V為陰性

注;陰性對照0D值小于0,05。時，按0.050計算，高于0.050按實際0D值計算。

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—002

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒表面抗原檢測（酶聯免疫法）

編寫日期:2020/4/10修改日期：2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

【注意事項】

1.試劑使用前應搖勻，并棄去1-2滴后芟直滴加，注意均勻用力.

2.從冷藏環境中取出的試劑盒應置室溫平衡30分鐘再進行測試，余者應及時封存，置冰箱內貯藏備用。

3.冷藏的待檢標本需置室溫平衡30分鐘，再可檢測。

4.待檢標本不可用NN3防腐。

5.洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。

6.不同批號試劑請勿通用。

7.結果判斷須在在分鐘內完成。

8.封片不能重復使用。

9.若濃縮洗滌液出現結晶時，請放置37c至溶解“

10.本試劑盒應視為有傳染性物質，清按傳染病實驗室檢查規程操作。

【貯存條件及有效期】

試劑盒應置2-8Y2避光保存，有效期一年。

【試劑廠家】

上海榮盛生物技術有限公司

地址，上海華發路99號

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—003

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒表面抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

乙肝病毒表面抗體檢測

【測定原理】

采用純化HBsAg包被反應板，加入待測標本，同時加入HBsAg-HRP當標本中存在抗-HBs時，該抗-HBs與包被

HBsAg結合并與酶結合物形成HBsAg-tJt-HBs-HBsAg-HRP復合物，加入TMB底物產生顯色反應，反之則無顯色

反應

【試劑盒組份】

1.預包被反應條12孔*4塊

2.醐結合物3mt*l瓶

3.抗-HBs陽性對照0.5m1*1管

4.抗-HBs陰性對照0.5m1*1管

5.濃縮洗滌液：用前每瓶1:20稀釋。30m1*1瓶

6.顯色劑A（TMB）3m1*1瓶

7.顯色劑B（1MB）3m1*1瓶

8.終止液3m1*1瓶

9.封口腔紙1片

10.說明書1份

11.自封袋1只

【檢測方法】

1.實驗準備：從冷藏環境中取出的試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將濃縮洗滌液作1：20稀釋。

2.加待測標本：加入待測標本每孔0.1亳升，并設抗-HBs陽性對照2孔，抗-HBs陰性對照2孔，空白對照1

孔。充分混勻，置37c溫育30分鐘。

3.加酶結合物本：每孔0.1亳升，空白對照孔不加，充分混勻，置37c溫育30分鐘。

4.洗板：1）手工洗板：棄去反應板條孔內液體，拍干；用洗滌液注滿每孔，靜置570秒，棄去孔內洗滌液拍

干，如此反復5次，拍干。2）洗板機洗板；選擇洗滌5次的程序洗板，最后拍干

5.加顯色劑：先加顯色劑A,每孔0.05亳升；再加顯色劑B,每孔0.05亳升；充分混勻后，放置37c避光孵育

30分鐘。

6.終止反應：每孔加終止液0.05亳升，混勻。

7.測定：用酶標儀讀數，可選擇單波長450nm,（以空白調零）或雙波長450/630nm，讀取各孔0D值。

【結果判定】

Cutoff值計算；C0V二Pn性對照平均0D值*2.1

標本0。值~>00丫為陽性，標本0D值+C0V為陰性

注；陰性對照0D值小于0.050時按0.050計算,高于0.050按實際0D值計算

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件件編號：SXSFJYY—JYK—MYS—003

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒表面抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期:2020/4/10修改日期：2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

【注意事項】

1.試劑使用前應搖勻，并棄去1-2滴后亙直滴加，注意均勻用力。

2.從冷藏環境中取出的試劑盒應置室溫平衡30分鐘再進行測試，余者應及時封存，置冰箱內貯藏備用。

3.冷藏的待檢標本需置室溫平衡30分鐘，再可檢測。

4.待檢標本不可用NaN3防腐。

5.洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。

6.不同批號試劑請勿通用。

7.結果判斷須在10分鐘內完成。

8.封片不能重復使用。

9.若濃堀洗滌液出現結晶時，請放置37c至溶解。

10.本試劑盒應視為有傳染性物質，清按傳染病實驗室檢查規程操作。

【貯存條件及有效期】

試劑盒應置2-8C避光保存，有效期一年。

【試劑廠家】

上海榮盛生物技術有限公司

地址：上海華發路99號

有效期一年

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—004

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒e抗原檢測（酶聯免疫法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

乙肝病毒e抗原檢測

【測定原理】

采用單克隆抗-HBe包被反應板，加入待測標本，同時加入多克隆抗-HBe-HRP,當待測標本中含有HBeAg時

就與包被抗-HBe,抗-HBe-HRP結合形成抗-HBe-HBeAg?抗-HBe-HRP復合物，加入TMB底物產生顯色反應，反之

則無顯色反應

【試劑盒組份】

1.預包被反應條12孔?4塊

2.醐結合物3m1*1瓶

3.HBeAg陽性對照0.5m1*1管

4.HBeAg陰性對照0.5m1*1管

5.濃縮洗滌液：用前每瓶1:20稀釋30nU*l瓶

6,顯色劑A（TMB）3m1*1瓶

7.顯色劑D（TMD）3ml*l瓶

8.終止液3m1*1瓶

9.封口膠紙1片

10.說明書1份

11.自封袋1片

【檢測方法】

1.實驗準備：從冷藏環境中取出的試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將濃縮洗滌液作1：20稀釋。

2.加待測標本：加入待測標本每孔0.05毫升，并設HBeAg陽性對照2孔，HBeAg陰性對照2孔，空白對照1

孔。

3.加酶結合物本：每孔0.05亳升,空白對照孔不加，充分混勻，置37c溫育30分鐘。

4.洗板：1）手工洗板：棄去反應板條孔內液體，拍干；用洗滌液注滿每孔，靜置570秒，棄去孔內洗滌液拍

干，如此反復5次，始干。2）洗板機洗板；選擇洗滌5次的程序洗板，最后拍干

5.加顯色劑：先加顯色劑A,每孔0.05亳升；再加顯色劑B,每孔0.05亳升；充分混勻后，放置37c避光孵育

15分鐘。

6.終止反應：每孔加終止液0.05亳升，混勻。

7.測定：用酶標儀讀數，可選擇單波長450nm,（以空白調零）或雙波長450/630nm，讀取各孔0D值。

【結果判定】

Cut。任值計算：C0V二陰性對照平均0D值*2.1

標本0D值2cOV為陽性，標本0D值《C0V為陰性

注：陰性對照0D值小于0.050時按0.050計算，高于0.050按實際0D值計算。

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—004

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒e抗原檢測（酶聯免疫法）

編寫日期:2020/4/10修改日期：2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

【注意事項】

1.試劑使用前應搖勻，并棄去1-2滴后垂直滴加，注意均勻用力。

2.從冷藏環境中取出的試劑盒應置室溫平衡30分鐘再進行測試，余者應及時封存，置冰箱內貯藏備用。

3.冷藏的待檢標本需置室溫平衡30分鐘，再可檢測。

4.待檢標本不可用NaN3防腐。

5.洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。

6.不同批號試劑請勿通用。

7.結果判斷須在10分鐘內完成。

8.封片不能重復使用。

9.若濃縮洗滌液出現結晶時，請放置37c至溶解。

10.本試劑盒應視為有傳染性物質，清按傳染病實驗室檢查規程操作。

【貯存條件及有效期】

試劑盒應置2-8C避光保存，有效期一年。

【試劑廠家】

上海榮盛生物技術有限公司

地址：上海華發路99號

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—005

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒e抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

乙肝病毒e抗體檢測

【測定原理】

采用單克隆抗-HBc包被反應板，加入待測標本，同時加入基因工程重組HBeAg和多克隆抗-HBe—HRP,形成競爭

結合，如待測標本中抗-HBe含量高，則抗-HBe-HRP與HBeAg結合后形成游離物被洗滌掉，加入TMB底物時顯

色淡，反之則顯色深。

【試劑盒組份】

1.預包被反應條12孔*4塊

2.酶結合物3m1*1瓶

3.抗-HBc陽性對照0.5ml*l管

4.抗-HBe陰性對照0.5ml*l管

5.濃縮洗滌液：用前每瓶1:20稀釋30m1*1瓶

6.顯色劑A（TMB）3m1*1瓶

7.顯色劑B（TMB）3m1*1瓶

8.終止液3m1*1瓶

9.中和試劑3m1*1瓶

10.封匚膠紙1片

11.說明書1份

12.自封袋1片

【檢測方法】

1.實驗準備：從冷藏環境中取出的試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將濃縮洗滌液作L

2.加待測標本:加入待測標本每孔0.05毫升并設抗-HBe陽性對照2孔，抗-HBe陰性對照2孔，空白對照1

孔。

3.加中和試劑：每孔0.05亳升，空白對照孔不加：

4.加酶結合物本：每孔0.05亳升，空白對照孔不加，充分混勻，置37'C溫育30分鐘。

5.洗板：1）手工洗板：棄去反應板條孔內液體，拍干：用洗滌液注滿每孔，靜置5T0秒，棄去孔內洗滌液拍

干，如此反復5次，拍干。2）洗板機洗板：選擇洗滌5次的程序洗板，最后拍干

6.加顯色劑：先加顯色劑A,每孔0.05亳升；再加顯色劑B,每孔0.05亳升；充分混勻后，放置37c避光孵

育15分鐘。

7.終止反應：每孔加終止液0.05亳升，混勻。

8.測定：用酶標儀讀數，可選擇單波長450nm，各孔0D值。

【結果判定】

（以空白調零）或雙波長450/630nm.

Cutoff值計算：C0V二陽性對照平均0D值*0.3

標本0D值〉C0V為陰性，標本0D值VC0V為陽性

注：非原倍血清樣品（稀釋血清、質控血清）COV二Pn性對照平均0D值*05

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSFJYY—JYK—MYS—005

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒e抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期:2020/4/10修改日期：2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

【注意事項】

1.試劑使用前應搖勻，井棄去1-2滴后垂直滴加，注意均勻用力。

2.從冷藏環境中取出的試劑盒應置室溫平衡30分鐘再進行測試，余者應及時封存，置冰箱內貯藏備用。

3.冷藏的待檢標本需置室溫平衡30分鐘，再可檢測。

4.待檢標本不可用NaN3防腐。

5.洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。

6.不同批號試劑請勿通用。

7.結果判斷須在10分鐘內完成。

8.封片不能重復使用。

9.若濃縮洗滌液出現結晶時，請放置37c至溶解。

10.本試劑盒應視為有傳染性物質，請按傳染病實驗室檢查規程操作。

【貯存條件及有效期】

試劑盒應置2-8C避光保存，有效期一年。

【試劑廠家】

上海榮盛生物技術有限公司

地址：上海華發路99號

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—006

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒核心抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

乙肝病毒核心抗體檢測

【測定原理】

采用基應工程重組HBcAg包被反應板，加入待測標本，同時加入抗-HBc-HRP.與抗原形成競爭結合，如待測標本

中抗-HBc-HRP與HBcAg結合少，加入TMB底物時顯色淡，反之則顯色深

【試劑盒組份】

1.預包被反應條12孔*4塊

2.酶結合物3m1*1瓶

3.抗-HBc陽性對照3m1*1管

4.抗-HBc陰性對照3m1*1管

5.濃縮洗滌液：用前每瓶1:20稀釋30m1*1瓶

6.顯色劑A（TMB）3ml*l瓶

7.顯色劑B（TMB）3m1*1瓶

8.終止液3m1*1瓶

9.封口膠紙1片

10.說明書1板

11.自封袋1片

【檢測方法】

1.實驗準備：從冷藏環境中取出的試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時將濃縮洗滌液作1

2.加待測標本：加入待測標本每孔0.05亳升，并設.抗~HBc陽性對照2孔，.抗-HBc陰性對照2孔，空白

對照1孔。

3.加酶結合物本；每孔0.05亳升，空白對照孔不加，充分混勻，置37?C溫育30分鐘。

4.洗板：1）手工洗板：棄去反應板條孔內液體，拍干；用洗滌液注滿每孔，靜置570秒，棄去孔內洗滌液拍

干，如此反復5次，拍干。2）洗板機洗板：選擇洗滌5次的程序洗板，最后拍干

5.加顯色劑：先加顯色劑A,每孔0.05亳升；再加顯色劑B,每孔0.05亳升：充分混勻后，放置37工避光

孵育15分鐘。

6.終止反應：每孔加終止液0.05亳升，混勻。

7.測定：用前標儀讀數，可選擇單波長450nm,（以空白調零）或雙波長450/6301nm,讀取各孔0D值。

【結果判定】

Cutoff值計算：C0V=|“|性對照平均0D值*0.3

1：30稀釋學清C0V二陰性對照平均0D值*0.5

標本0D值2cOV為陰性，標本0D值VC0V為陽性

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSFJYY—JYK—MYS—006

第7.0版第1次修訂

主題：乙肝病毒核心抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期:2020/4/10修改日期：2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

【注意事項】

1.試劑使用前應搖勻，并棄去1-2滴后亙直滴加，注意均勻用力。

2.從冷藏環境中取出的試劑盒應置室溫平衡30分鐘再進行測試，余者應及時封存，置冰箱內貯藏備用。

3.冷藏的待檢標本需置室溫平衡30分鐘，再可檢測。

4.待檢標本不可用NaN3防腐。

5.洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。

6.不同批號試劑請勿通用。

7.結果判斷須在10分鐘內完成。

8.封片不能重復使用。

9.若濃縮洗滌液出現結晶時，請放置37c至溶解。

10.本試劑盒應視為有傳染性物質，清按傳染病實驗室檢查規程操作。

【貯存條件及有效期】

試劑盒應置2-8C避光保存，有效期一年。

【試劑廠家】

上海榮盛生物技術有限公司

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—007

第7.0版第1次修訂

主題：丙肝病毒抗體檢測（酶聯免疫法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共2頁

丙肝病毒抗體檢測

【測定原理】-

采用ELA間接滴定法，在預包被有丙肝抗原的反應孔內加入待測標本，若標本中有抗HCV,則可在微孔板表

面形成抗原一抗體復合體，再與酶標抗人IsG結合，形成抗原一抗體一鯽復合物，經顯色系統顯色后，根據0D

值判定有無HCV抗體的存在.

【試劑盒組份】

1.HCV抗原包被板48孔*1塊

2.醐結合物5m1*1瓶

3.陽性對照0.5ml*1管

4.陰性對照0.5ml*1管

5.濃縮洗滌液：用前每瓶1：20稀釋30m1*1瓶

6.顯色劑A3m1*1瓶

7,顯色劑B3m1*1瓶

8.終止液3m1*1瓶

9.樣品稀釋液5m1*1瓶

10.封匚紙2片

11.說明書1份

【檢測方法】

1.每次試驗設陰性，陽性對照各兩孔，分別加入陰，陽性對照血清100gl,再設一孔空白對照，加樣品稀釋液

IOOUL其余孔加入100U1樣品稀釋液，再加待測血清10川。充分混勻后，置37c溫育30分鐘。棄去孑L內

樣品，扣干。

2.用洗滌液注滿每孔（至少300U1洗滌液廳L）,勿溢出，靜置5秒鐘后扣干，重復5次。

3.每孔加酶結合物100yl（空白對照孔除外），置37（溫育20分鐘，同上法洗反應板5次。

4.每孔加顯色劑A液、B液各50ul,輕輕振蕩后，37℃避光靜置10分鐘。

5.每孔加終止液50L11終止反應,以空白凋零,在酶標儀中讀取各孔0D450【結果判定】

1.陽性對照平均值大于1.20,實驗結果有效。

2.實驗沒計要求陽性、陰性對照0D值之差應大于1.20,否則本次實驗無效

3.若陰性對照讀數小于0.050時,按0.050計算。

4.臨界道（Cutoffvalue）二陰性對照平均值十0.1。

5.測試標本的計算值小于Cutoffvalue則為HCV抗體陰性。

6.測試標本的計算值等于或大于Cutoffvalue則為HCV抗體陽性。

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室SOP文件文件編號：SXSRJYY—JYKTYS—007

褊毒篇麗7酶聯免薪5第7.0版第1次修訂

編寫日期:2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第2頁共2頁

【注意事項】

1.試劑使用前應搖勻，并棄去1-2滴后亙直滴加，注意均勻用力。

2.從冷藏環境中取出的試劑盒應置室溫平衡20分鐘再進行測試，余者應及時封存，置冰箱內貯藏備用。

3.冷藏的待檢標本需置室溫平衡30分鐘，再可檢測。

4.待檢標本不可用NaN3防腐。

5.洗板時所用的吸水紙請勿反復使用。

6.不同批號試劑請勿通用。

7.結果刊斷須在10分鐘內完成。

8.封片不能重復使用。

9.若洗滌液不夠可自行配制。PH7.20.1MPBS-0.5%Tween20o用前10倍稀釋成0.01MPBS-0.5%Tween20.

10.本試劑盒中的樣品稀釋液采用變色技術，在加原始血清或標本后由黃綠色變為藍綠色。非原始血清或血漿

（如稀釋標本等）顏色變化不明顯或變為其他顏色，為正?，F象。

11.若濃縮洗滌液出現結晶時，請放置37c至溶解。

12.本試劑盒應視為有傳染性物質，請按傳染病實瞼室檢查規程操作。

【貯存條件及有效期】

試劑盒應置2-8C避光保存，有效期一年。

【試劑廠家】

上海榮盛生物技術有限公司

山西省榮軍醫院檢驗科免疫室S0P文件文件編號：SXSRJYY—JYK—MYS—008

第7.0版第1次修訂

主題：類風濕因子（膠乳凝集法）

編寫日期：2020/4/10修改日期:2020/4/10

編制人：王葉葉審核人：薛菁第1頁共1頁

類風濕因子

【原理】：

類風濕因子VRF＞是一種抗“自身IgG”的抗體〈亦稱抗球蛋白抗體》，它具有與人變性免疫球蛋白結合

的能力，利用人IgG致敏的膠乳與病人血清反應，根據產生凝集與否，可以測定RF及其滴度。

【特點】：

本實驗具有操